гамкергическая система в реализации анксиолитического

37
ÃÀÌÊÅÐÃÈ×ÅÑÊÀß ÑÈÑÒÅÌÀ  ÐÅÀËÈÇÀÖÈÈ ÀÍÊÑÈÎËÈÒÈ×ÅÑÊÎÃÎ
ÄÅÉÑÒÂÈß “ÏÐÎÏÐÎÒÅÍÀ”: ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÎÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÅ
Ò.À.Âîðîíèíà, Ã.Ì.Ìîëîäàâêèí, Ñ.À.Ñåðãååâà, Î.È.Ýïøòåéí
Íàó÷íî-ïðîèçâîäñòâåííàÿ ôèðìà “Ìàòåðèà Ìåäèêà Õîëäèíã”, Ìîñêâà
“Ïðîïðîòåí” — ëåêàðñòâåííûé ïðåïàðàò, ñîäåðæàùèé ñâåðõìàëûå äîçû àíòèòåë ê áåëêó
S100, êîòîðûé ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç âàæíåéøèõ ðåãóëÿòîðîâ èíòåãðàòèâíîé äåÿòåëüíîñòè ìîçãà è ñèíàïòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ. Ó áåñïîðîäíûõ êðûñ-ñàìöîâ â óñëîâèÿõ êîíôëèêòíîé ñèòóàöèè ïðîïðîòåí (2.5 ìë/êã), äèàçåïàì (2 ìã/êã) è ìåêñèäîë (100 ìã/êã)
ïðè âíóòðèæåëóäî÷íîì ââåäåíèè îêàçûâàþò âûðàæåííîå àíêñèîëèòè÷åñêîå äåéñòâèå,
÷òî âûðàæàåòñÿ â äîñòîâåðíîì óâåëè÷åíèè ÷èñëà íàêàçóåìûõ âçÿòèé âîäû. Àíòàãîíèñòû
ÃÀÌÊåðãè÷åñêîé ïåðåäà÷è áèêóêóëëèí (áëîêàòîð ÃÀÌÊÀ-ðåöåïòîðà) è ïèêðîòîêñèí
(áëîêàòîð õëîðíîãî êàíàëà) âûçûâàëè ïðîêîíôëèêòíûé, àíêñèîãåííûé ýôôåêò, ñîïðîâîæäàþùèéñÿ ñíèæåíèåì ÷èñëà íàêàçóåìûõ âçÿòèé âîäû ó êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ. Ââåäåíèå ïðîïðîòåíà íà ôîíå áëîêàäû ÃÀÌÊÀ-ðåöåïòîðà èëè õëîðíûõ êàíàëîâ
ïðèâîäèëî ê äîñòîâåðíîìó ñíèæåíèþ àíòèêîíôëèêòíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà. Àíàëîãè÷íîå äåéñòâèå áèêóêóëëèí è ïèêðîòîêñèí îêàçûâàëè íà àíêñèîëèòè÷åñêèé ýôôåêò
äèàçåïàìà è ìåêñèäîëà. Ïîëó÷åííûå äàííûå ïðåäïîëàãàþò ó÷àñòèå ÃÀÌÊåðãè÷åñêîé
ñèñòåìû â ðåàëèçàöèè àíêñèîëèòè÷åñêîãî äåéñòâèÿ êàê äèàçåïàìà è ìåêñèäîëà, òàê è
ïðîïðîòåíà.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: ïðîïðîòåí, áåëîê S100, ñâåðõìàëûå äîçû, àíòèòåëà ê áåëêó S100,
àíêñèîëèòèê, òðàíêâèëèçàòîð, äèàçåïàì, ìåêñèäîë, ÃÀÌÊåðãè÷åñêàÿ ïåðåäà÷à
Îñíîâíîé òîðìîçíûé ìåäèàòîð â ÖÍÑ — ÃÀÌÊ
èãðàåò âåäóùóþ ðîëü â ïàòîãåíåçå òðåâîãè, ñóäîðîã è äðóãèõ íåâðîòè÷åñêèõ è íåâðîëîãè÷åñêèõ ñîñòîÿíèé. Ñ óñèëåíèåì ÃÀÌÊåðãè÷åñêîãî
òîðìîæåíèÿ ñâÿçûâàþò ìåõàíèçì äåéñòâèÿ áîëüøèíñòâà ïðèìåíÿåìûõ â íàñòîÿùåå âðåìÿ àíêñèîëèòè÷åñêèõ ïðåïàðàòîâ [1].
Îòå÷åñòâåííûé ïðåïàðàò “Ïðîïðîòåí” [6,7]
ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ïîòåíöèðîâàííûå ïî ãîìåîïàòè÷åñêîé òåõíîëîãèè ñâåðõìàëûå äîçû àíòèòåë
ê áåëêó S100 (ÏÀÒ-S100; ÍÏÔ “Ìàòåðèà Ìåäèêà Õîëäèíã”), êîòîðûé ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç âàæíåéøèõ ðåãóëÿòîðîâ èíòåãðàòèâíîé äåÿòåëüíîñòè
ìîçãà è, êàê äðóãèå Ñà2+-ñâÿçûâàþùèå áåëêè,
ó÷àñòâóåò â ñèíàïòè÷åñêèõ ïðîöåññàõ [5,12]. Ïðîïðîòåí îáëàäàåò øèðîêèì ñïåêòðîì ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ ýôôåêòîâ, â òîì ÷èñëå îêàçûâàåò âûðàæåííîå àíêñèîëèòè÷åñêîå, àíòèñòðåññîðíîå äåéñòâèå [11], ñíèæàåò ÷àñòîòó ðåàêöèè ñàìîñòèìóëÿöèè ëàòåðàëüíîãî ãèïîòàëàìóñà, òîðìîçèò íåéðîíàëüíóþ àêòèâíîñòü â ëèìáè÷åñêîé ñèñòåìå [9].
Öåëüþ íàñòîÿùåãî èññëåäîâàíèÿ ÿâèëîñü èçó÷åíèå âîçìîæíîãî ó÷àñòèÿ ÃÀÌÊåðãè÷åñêîé ñèñ-
òåìû â ðåàëèçàöèè àíêñèîëèòè÷åñêîãî ýôôåêòà
ïðîïðîòåíà ïî ñðàâíåíèþ ñ áåíçîäèàçåïèíîâûì
òðàíêâèëèçàòîðîì äèàçåïàìîì è äíåâíûì òðàíêâèëèçàòîðîì ìåêñèäîëîì.
ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Èññëåäîâàíèå ïðîâîäèëè íà ïîëîâîçðåëûõ áåëûõ
áåñïîðîäíûõ êðûñàõ-ñàìöàõ ìàññîé 230-250 ã (12
ãðóïï ïî 10 æèâîòíûõ). Àíêñèîëèòè÷åñêîå äåéñòâèå ïðîïðîòåíà, äèàçåïàìà è ìåêñèäîëà èññëåäîâàëè ñ ïîìîùüþ ìåòîäà êîíôëèêòíîé ñèòóàöèè
ïî Vogel, îñíîâàííîé íà ñòîëêíîâåíèè ïèòüåâîé è îáîðîíèòåëüíîé ìîòèâàöèé, êîãäà êàæäàÿ
ïîïûòêà âçÿòèÿ æèâîòíûì âîäû íàêàçûâàëàñü
ýëåêòðîáîëåâûì ðàçäðàæåíèåì [2,3]. Ñíà÷àëà ó
êðûñû âûðàáàòûâàëè ñèëüíîå ÷óâñòâî æàæäû è
íàâûê ïîëó÷åíèÿ âîäû èç ñïåöèàëüíîé ïîèëêè.
Çàòåì íà 3-è ñóòêè ÷åðåç 10 ñ ïîñëå ïåðâîãî âçÿòèÿ âîäû èç ïîèëîê íà ýëåêòðîäíûé ïîë êàìåðû ïîäàâàëè ïîñòîÿííûé òîê ñèëîé 0.2 ìÀ, òàê
÷òî êàæäîå âçÿòèå âîäû ñòàíîâèëîñü íàêàçóåìûì
è äëÿ óäîâëåòâîðåíèÿ æàæäû êðûñàì íàäî áûëî
38
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2003, приложение № 1
ïðåîäîëåòü ñòðàõ, ðàçâèâøèéñÿ â ðåçóëüòàòå íàêàçàíèÿ. Ðåãèñòðèðîâàëè ÷èñëî íàêàçóåìûõ âçÿòèé âîäû çà 10 ìèí.
Ïðîïðîòåí ââîäèëè ïî 2.5 ìë/êã (0.25 ìë/
100 ã ìàññû òåëà). Äëÿ ñðàâíåíèÿ èñïîëüçîâàëè
äèàçåïàì ïî 2 ìã/êã è ìåêñèäîë â äîçå 100 ìã/êã
(êîíòðîëü — äèñòèëëèðîâàííàÿ âîäà, 2.5 ìë/êã).
Âåùåñòâà ââîäèëè èíòðàãàñòðàëüíî îäíîêðàòíî
çà 30 ìèí äî ýêñïåðèìåíòà.
Ñ öåëüþ áëîêàäû ÃÀÌÊÀ-ðåöåïòîðà èñïîëüçîâàëcÿ åãî àíòàãîíèñò áèêóêóëëèí (“ICN
Biomedicals Inc.”) â äîçå 1 ìã/êã âíóòðèáðþøèííî, à äëÿ áëîêàäû õëîðíîãî êàíàëà ÃÀÌÊ-áåíçîäèàçåïèíîâîãî ðåöåïòîðíîãî êîìïëåêñà — ïèêðîòîêñèí (“ICN Biomedicals Inc”.) â äîçå 1 ìã/êã.
Áèêóêóëëèí èëè ïèêðîòîêñèí ââîäèëè âíóòðèáðþøèííî îäíîâðåìåííî ñ ââåäåíèåì ïðîïðîòåíà, äèàçåïàìà, ìåêñèäîëà èëè âîäû (â ñîîòâåòñòâóþùèõ ãðóïïàõ)
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû îáðàáàòûâàëè ñòàòèñòè÷åñêè ñ èñïîëüçîâàíèåì U êðèòåðèÿ Ìàííà—
Óèòíè è t êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà [2].
ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Ïðîïðîòåí (2.5 ìë/êã), äèàçåïàì (2 ìã/êã) è ìåêñèäîë (100 ìã/êã) îêàçûâàëè îò÷åòëèâîå àíêñèîëèòè÷åñêîå äåéñòâèå â óñëîâèÿõ êîíôëèêòíîé
ñèòóàöèè, êîãäà êàæäîå âçÿòèå æèâîòíûì âîäû
íàêàçûâàëîñü áîëåâûì ðàçäðàæåíèåì. Âñå ïðåïàðàòû äîñòîâåðíî óâåëè÷èâàëè ÷èñëî íàêàçóåìûõ
âçÿòèé âîäû ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì: ïðîïðîòåí â 1.6 ðàçà, äèàçåïàì â 1.5 ðàçà è ìåêñèäîë â
1.47 ðàçà (òàáëèöà). Òàêèì îáðàçîì, â èñïîëüçóåìûõ äîçàõ ïðåïàðàòû îêàçûâàëè ñõîäíûé ïî
âûðàæåííîñòè ýôôåêò.
Ââåäåíèå æèâîòíûì áèêóêóëëèíà — áëîêàòîðà ÃÀÌÊ-À-ðåöåïòîðà èëè ïèêðîòîêñèíà —
áëîêàòîðà õëîðíîãî êàíàëà âûçûâàëî ïðîêîíôëèêòíûé, àíêñèîãåííûé ýôôåêò, ÷òî âûðàæàëîñü
â ñíèæåíèè ÷èñëà íàêàçóåìûõ âçÿòèé âîäû, ñîîòâåòñòâåííî, â 1.6 è 1.8 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ
ïîêàçàòåëÿìè êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ (òàáëèöà).
Ïðè ñîâìåñòíîì ââåäåíèè ïðîïðîòåíà è áèêóêóëëèíà íàáëþäàëè îñëàáëåíèå àíòèêîíôëèêòíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà: ÷èñëî íàêàçóåìûõ âçÿòèé âîäû ñíèæàëîñü â 1.76 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ
îäíèì ïðîïðîòåíîì. Àíàëîãè÷íîå äåéñòâèå áèêóêóëëèí îêàçûâàë íà àíêñèîëèòè÷åñêèå ñâîéñòâà äèàçåïàìà è ìåêñèäîëà, çíà÷èòåëüíî óìåíüøàÿ (â 2 è 1.9 ðàçà ñîîòâåòñòâåííî) ÷èñëî íàêàçóåìûõ âçÿòèé âîäû â êîíôëèêòíîé ñèòóàöèè
(òàáëèöà).
Òàêèì îáðàçîì, íà ôîíå áëîêàäû ÃÀÌÊÀðåöåïòîðà, âûçûâàåìîé áèêóêóëëèíîì, îòìå÷à-
åòñÿ äîñòîâåðíîå ñíèæåíèå àíòèêîíôëèêòíîãî
äåéñòâèÿ ïðîïðîòåíà, òàêæå êàê è äåéñòâèÿ äèàçåïàìà è ìåêñèäîëà.
Áëîêàòîð õëîðíûõ êàíàëîâ ïèêðîòîêñèí, òàêæå êàê è áèêóêóëëèí, îêàçûâàë àíêñèîãåííîå
äåéñòâèå â óñëîâèÿõ êîíôëèêòíîé ñèòóàöèè. Êîìáèíèðîâàííîå ïðèìåíåíèå ïèêðîòîêñèíà ñ ïðîïðîòåíîì óìåíüøàëî â 1.67 ðàçà òðàíêâèëèçèðóþùèé ýôôåêò ïîñëåäíåãî. Êîìáèíàöèÿ ïèêðîòîêñèíà ñ äèàçåïàìîì è ìåêñèäîëîì òàêæå
ïðèâîäèëà ê ñóùåñòâåííîìó ñíèæåíèþ ïîêàçàòåëÿ íàêàçóåìûõ âçÿòèé âîäû â êîíôëèêòíîé
ñèòóàöèè, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò îá îñëàáëåíèè
àíêñèîëèòè÷åñêèõ ýôôåêòîâ ïðåïàðàòîâ.
Òàêèì îáðàçîì, ïðè áëîêàäå ÃÀÌÊÀ-ðåöåïòîðà, âûçûâàåìîé áèêóêóëëèíîì, è õëîðíîãî
êàíàëà ïðè ââåäåíèè ïèêðîòîêñèíà îòìå÷àåòñÿ
äîñòîâåðíîå ñíèæåíèå àíòèêîíôëèêòíîãî äåéñòâèÿ äèàçåïàìà, ìåêñèäîëà è ïðîïðîòåíà, ÷òî ïîçâîëÿåò ïðåäïîëàãàòü âîâëå÷åíèå ýòèõ ñóáúåäèíèö ÃÀÌÊ-áåíçîäèàçåïèíîâîãî õëîðèîíîôîðíîãî ðåöåïòîðíîãî êîìïëåêñà â ðåàëèçàöèþ àíêñèîëèòè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ýòèõ ïðåïàðàòîâ. Îäíàêî ïóòè âîçäåéñòâèÿ ýòèõ àíêñèîëèòèêîâ íà
ñèñòåìó ÃÀÌÊ ðàçëè÷íû.
Ìåõàíèçì äåéñòâèÿ áåíçîäèàçåïèíîâûõ òðàíêâèëèçàòîðîâ, â òîì ÷èñëå è äèàçåïàìà, îïðåäåëÿåòñÿ èõ ñïîñîáíîñòüþ íåïîñðåäñòâåííî ñâÿçûâàòüñÿ ñ áåíçîäèàçåïèíîâûì ðåöåïòîðîì, èçìåíÿòü êîíôîðìàöèþ àëëîñòåðè÷åñêè ñâÿçàííîãî
ñ íèì ÃÀÌÊÀ-ðåöåïòîðà è â ðåçóëüòàòå óñèÂëèÿíèå àíòàãîíèñòîâ ÃÀÌÊ-áåíçîäèàçåïèíîâîãî
ðåöåïòîðíîãî êîìïëåêñà íà àíêñèîëèòè÷åñêèé ýôôåêò ïðîïðîòåíà, äèàçåïàìà è ìåêñèäîëà (M±m,
n=10)
Âåùåñòâî
Контроль
×èñëî íàêàçóåìûõ
âçÿòèé âîäû
528.1±73.4
Пропротен
740.0±108.4*
Диазепам
721.0±84.3*
Мексидол
Бикукуллин
Пикротоксин
748.2±101.4*
+вода
327.3±115.4*
+пропротен
419.6±107.4+
+диазепам
353.6±74.1+
+мексидол
389.5±68.4+
+вода
296.9±125.1*
+пропротен
469.3±85.5+
+диазепам
304.8±95.4+
+мексидол
358.3±87.8+
Примечание. p<0.05 по сравнению: *с контролем, +с эффектом пропротена, диазепама или мексидола без введения
антагониста. n — количество животных в каждой группе.
39
ëèâàòü ÷àñòîòó è ïðîäîëæèòåëüíîñòü îòêðûòèÿ
õëîðíûõ êàíàëîâ, ÷òî ïðèâîäèò ê ñíèæåíèþ
íåéðîíàëüíîé âîçáóäèìîñòè è èçìåíåíèþ ñèíàïòè÷åñêîé ïåðåäà÷è [1,4].
Ìåêñèäîë, â îòëè÷èå îò äèàçåïàìà, íå ÿâëÿåòñÿ ïðÿìûì àãîíèñòîì áåíçîäèàçåïèíîâîãî ðåöåïòîðà, íî ýòî ìåìáðàííûé ìîäóëÿòîð ÃÀÌÊÀáåíçîäèàçåïèíîâîãî ðåöåïòîðíîãî êîìïëåêñà,
îñóùåñòâëÿþùèé åãî íàïðàâëåííóþ ðåãóëÿöèþ
÷åðåç ìåìáðàííî-ðåöåïòîðíîå âçàèìîäåéñòâèå è
óñèëèâàþùèé ñâÿçü ïðÿìûõ àãîíèñòîâ ñ ðåöåïòîðàìè [3].
Ìîçãîñïåöèôè÷åñêèé áåëîê S100 ïðèíèìàåò
ó÷àñòèå â ïðîöåññàõ ãåíåðàöèè è ïðîâåäåíèÿ
íåðâíîãî èìïóëüñà, îáåñïå÷èâàåò äëèòåëüíóþ
ïîñòñèíàïòè÷åñêóþ ïîòåíöèàöèþ, èìåþùóþ ðåøàþùåå çíà÷åíèå äëÿ ñèíàïòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ
[5,6,8]. Óñòàíîâëåíî, ÷òî íàòèâíàÿ àíòèñûâîðîòêà ê áåëêó S100 ïîäàâëÿåò èíäóêöèþ äëèòåëüíîé
ïîñòñèíàïòè÷åñêîé ïîòåíöèàöèè â ñðåçàõ ãèïïîêàìïà, à ïðîïðîòåí ìîäèôèöèðóåò ýòîò ýôôåêò [6,8,13]. Êðîìå òîãî, â èññëåäîâàíèÿõ íà
ãèãàíòñêèõ íåéðîíàõ âèíîãðàäíîé óëèòêè ïîêàçàíî, ÷òî ïðîïðîòåí îáëàäàåò ïðÿìûì ìåìáðàíîòðîïíûì äåéñòâèåì è âûçûâàåò ñíèæåíèå àìïëèòóäû ïîòåíöèàëà äåéñòâèÿ è ìàêñèìàëüíîé
ïðîâîäèìîñòè [10].
Òàêèì îáðàçîì, ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî
ìåõàíèçì àíêñèîëèòè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ïðîïðîòåíà ñâÿçàí ñ åãî ñïîñîáíîñòüþ ìîäèôèöèðîâàòü
ôóíêöèîíàëüíóþ àêòèâíîñòü ìîçãîñïåöèôè÷åñêîãî áåëêà S100 è ñ èçìåíåíèåì ñèíàïòè÷åñêîé
ïåðåäà÷è â ëèìáè÷åñêèõ ñòðóêòóðàõ ìîçãà, â òîì
÷èñëå ïîñðåäñòâîì ìîäóëÿöèè ìåìáðàííî-ðåöåïòîðíîãî âçàèìîäåéñòâèÿ íà óðîâíå ÃÀÌÊ-À õëîðèîíîôîðíîãî ðåöåïòîðíîãî êîìïëåêñà.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Àëåêñàíäðîâñêèé Þ.À. Ïîãðàíè÷íûå ïñèõè÷åñêèå
ðàññòðîéñòâà. Ì., 2000.
2. Âîðîíèíà Ò.À., Ñåðåäåíèí Ñ.Á. Ðóêîâîäñòâî ïî ýêñïåðèìåíòàëüíîìó (äîêëèíè÷åñêîìó) èçó÷åíèþ íîâûõ
ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ. Ì., 2000. Ñ. 126-130.
3. Âîðîíèíà Ò.À. // Ïñèõîôàðìàêîë. è áèîë. íàðêîë.
2001. ¹ 1. Ñ. 2-12.
4. Ñåðãååâ Ï.Â., Øèìàíîâñêèé Í.Ë., Ïåòðîâ Â.È. Ðåöåïòîðû ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ. Âîëãîãðàä, 1999.
5. Øòàðê Ì.Á. Ìîçãîñïåöèôè÷åñêèå áåëêè (àíòèãåíû) è ôóíêöèè íåéðîíà. Íîâîñèáèðñê, 1985.
6. Øòàðê Ì.Á., Áåðåãîâîé Í.À., Ñòàðîñòèíà Ì.Â. è äð.
// Ìàòåðèàëû XIII ñúåçäà ïñèõèàòðîâ Ðîññèè, îêòÿáðü 2000. Ì., 2000. Ñ. 374.
7. Ýïøòåéí Î.È. // Áþë. ÑÎ ÐÀÌÍ. 1999. ¹ 1.
Ñ. 132-149.
8. Ýïøòåéí Î.È., Áåðåãîâîé Í.À., Ñîðîêèíà Í.Ñ. è äð.
// Áþë. ýêñïåð. áèîë. 1999. Ò. 127, ¹ 3. Ñ. 317-320.
9. Ýïøòåéí Î.È., Âîðîáüåâà Ò.Â., Áåð÷åíêî Î.Ã. è äð.
// Òàì æå. ¹ 5. Ñ. 547-549.
10. Ýïøòåéí Î.È., Ãàéíóòäèíîâ Õ.Ë., Øòàðê Ì.Á. //
Òàì æå. ¹ 4. Ñ. 466-477.
11. Ýïøòåéí Î.È., Âîðîíèíà Ò.À., Ìîëîäàâêèí Ã.Ì.,
Ñåðãååâà Ñ.À. // Òðóäû I Ìåæäóíàðîäíîãî ñèìïîçèóìà “Ñòðåññ è ýêñòðåìàëüíûå ñîñòîÿíèÿ”. Êàðà-Äàã,
Ôåîäîñèÿ, 2002. Ñ. 90-91.
12. Heizmann C., Fritz G., Schafer B.W. // Frontiers in
Biosci. 2002. Vol. 7. P. 1356-1368.
13. Lewis D., Teyler T.J. // Brain Res. 1986. Vol. 383,
N 1-2. P. 159-164.