АЛТ / ГПТ ЭРБА Cистемный Реагент IFCC метод, без

АЛТ / ГПТ
ЭРБА Cистемный Реагент
IFCC метод, без пиридоксаль-5-фосфата
Применение
Реагент предназначен для in vitro диагностики АЛТ в сыворотке.
Клиническое значение
АЛТ присутствует в высокой концентрации в печени, в низкой концентрации в почках, сердечной и
скелетной ткани мышц, поджелудочной железе, селезенке и легких.
Повышение уровня АЛТ является результатом первичных болезней печени, таких как цирроз печени,
карцинома, вирусный или токсический гепатит, обструкционная желтуха.
Снижение уровня АЛТ наблюдается у пациентов, повергающихся почечному диализу и у пациентов с
недостатком витамина В6.
Метод
В соответствии с рекомендациями (IFCC) Международной Федерации Клинической Химии, без
пиридоксаль-5-фосфата
Принцип реакции
АЛТ/SGPT
L-Аланин + 2-Оксоглутарат
Пируват + L-Глутамат
ЛДГ
Пируват + НАДН
L-Лактат + НАД+
АЛТ : Аланинаминотрансфераза
ЛДГ : Лактатдегидрогеназа
Активность АЛТ в пробе пропорциональна изменению поглощения при 340нм.
Состав реагентов
R1
Трис буфер (pH 7.5)
100 ммоль/л
L - Аланин
440 ммоль/л
ЛДГ
≥ 4000 Е/л
2-Оксоглутарат
13.21 ммоль/л
R2
НАДН
1,66 ммоль/л
Меры предосторожности
Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально обученным лаборантом.
Первая помощь
При приеме внутрь следует прополоскать рот водой, выпить 0,5 л воды и вызвать рвоту. При попадании в
глаза быстро промыть их проточной водой. При попадании на кожу необходимо промыть теплой водой с
мылом. Во всех серьезных случаях обратиться к врачу.
Приготовление рабочих реагентов
Реагенты (R1 и R2) готовы к использованию.
Для ручного метода исследования:
Смешать 4 части раствора реагента 1 (R1) с 1 частью раствора реагента 2 (R2), тщательно перемешать.
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
Хранение и стабильность
Не вскрытые реагенты (R1 и R2) стабильны до достижения указанного срока годности, если хранятся при
2-8°C. Рабочий реагент (4R1 : 1R2) стабилен 30 дней при 2-8°C, при хранении в защищенном от света месте,
избегая контаминации.
Перед работой рекомендуется проверить реагенты на пригодность.
Определение не пригодности реагента
- Замутнение
- Проверить попадание значений контролей в допустимый интервал
- Поглощение рабочего реагента < 0.8 при 340 нм
Образцы
Не гемолизированная сыворотка или гепаринизированная плазма. В качестве антикоагулянта можно
использовать гепарин и ЭДТА. Стабильность АЛТ в образце 3 дня при 2-8°C. Рекомендуется работать со
свежеприготовленными образцами.
Дополнительные материалы необходимые для работы
-
Анализатор с контролем температуры 37 ± 0.5°C
Контрольный материал
Калибратор
Принадлежности
Параметры для проведения анализа на полуавтоматическом анализаторе
Метод
Кинетика
Длина волны1 (нм)
340
Объем образца (мкл)
50/100
Объем реагента (мкл)
500/1000
Задержка ( Сек.)
60
Интервал измерения ( Сек. )
60
Кол-во замеров
1
Фактор
1746
Температура реации(°C )
37
Направление реакции
Уменьшение
Нижний предел нормы (Е/л)
0
Верхний предел нормы (Е/л)
37
Нижний предел линейности (Е/л)
0
Верхний предел линейности (Е/л)
240
Мин. Начальное поглощение
0.8
Бланк
Вода
Единицы
IU/L(Е/л)
Протоколы для использования на автоматических анализаторах могут быть получены по запросу.
Проведение анализа
Пипетирование
Тест
Рабочий реагент
1000мкл
Образец
100мкл
Тщательно смешать, аспирировать
Расчеты
АЛТ/ ГПТ Активность(Е/л) = A/мин х Фактор(1746) (37°C)
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
Протоколы для работы на автоматических биохимических анализаторах серии XL
«Эрба Лахема с.р.о.», Чешская Республика могут быть получены по запросу.
Калибровка
Мы рекомендуем для калибровки автоматического анализатора использовать XL МультиКалибратор и
Лионорм Калибратор, Кат.№ 10003200.
Коэффициент пересчета
Е/л х 0,017 = мккат/л
Контроль качества
Для проведения контроля качества рекомендуются контрольные сыворотки: Лионорм ГУМ Н,
Кат.№10003204, Лионорм ГУМ П, Кат.№10003206
Специфичность / Влияющие вещества
Гемоглобин до 150 мг/дл, аскорбиновая кислота до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл и триглицериды до
1000 мг/дл не влияют на результаты анализа.
Нормальные величины
Сыворотка / Плазма
Женщины
Мужчины
до 32 Е/л (0,54 мккат/л)
до 42 Е/л (0,71 мккат/л)
Приведенные диапазоны величин следует рассматривать как ориентировочные. Каждой лаборатории
необходимо определять свои диапазоны.
Воспроизводимость
Внутрисерийная
N
Среднеарифметическ
ое значение
(Е/л)
Уровень – 1
Уровень– 2
20
20
61.32
118.80
Межсерийная
N
Среднеарифметическ
ое значение
(Е/л)
Уровень– 1
Уровень – 2
20
20
45.0
145.2
SD
Е/л
0.84
0.90
CV
(%)
1.37
0.76
SD
Е/л
1.02
3.42
CV
(%)
2.23
2.361
Сравнение методов
Сравнение было проведено на 40 образцах с использованием ЭРБА реагентов АЛТ (у) и имеющихся в
продаже реагентов с коммерчески доступной методикой (х).
Результаты:
y = 0.997x – 0.081 Е/л
r = 0.997 (r – коэффициент корреляции)
Линейность
Реакция линейна до 300 Е/л (5,1 мккат/л)
Нижний предел определения
8,4 Е/л (0,143 мккат/л)
Утилизация использованных материалов
В соответствии с существующими в каждой стране правилами для данного вида материала
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
Фасовка
Кат.№
XSYS017
АЛТ/SGРT
Реагент -1
6 x 44 мл
АЛТ/SGРT
Реагент - 2
3 x 22 мл
Литература
1. Zilva, J.F. Pannall, P.R. “Plasma Enzymes in Diagnosis” in Clinical Chemistry in Diagnosis and Treatment.
Lloyd-Luke London. 1979; Chap 17 : 338.
2. Wroblewski, F. LaDue, J.S. Proc. Sec. Exp. Biol. and Med. 1956; 34 : 381.
3. Henry, R.J. et al. Am. Jnl. Clin. Path. 1960; 34 : 381.
4. Bergmeyer, H.U. et al. Clin. Chem. 1978; 24 : 58-73.
5. IFCC Expert Panel on enzymes Part 3. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1986; 24 : 481-95.
6. Murray RL. “Alanine aminotransferase” in Clinical Chemistry. Theory, analysis and correlation. Kaplan LA.
Pesce, A.J. (Eds), CV Mosby St Louis 1984; 1090.
7. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. Burtis CA and Ashwood ER (Eds). Second Edition, WB Saunders
Company, 1994.
8. Young, D.S. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests.Third Edition. 1990 : 3 : 6-12.
9. Wachtel, M. et al, Creation and Verification of Reference Intervals. Laboratory Medicine 1995; 26 : 593-7.
10. National Committee for Clinical Laboratory Standards. User evaluation of Precision Performance of Clinical
Chemistry Devices. NCCLS Publication EP5-T.
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru