ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗА (ЛДГ-П) ЭРБА, Системный Реагент

ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗА (ЛДГ-П)
ЭРБА, Системный Реагент
Применение
Реагент предназначен для in vitro диагностики ЛДГ в сыворотке.
Клиническое значение
ЛДГ присутствует в сердечной и скелетных мышцах, печени, почках и других тканях человека.
Повышение
Активность ЛДГ увеличивается при различных патологических состояниях: инфаркт миокарда, заболевания
почек, болезни печени, анемии, злокачественные опухоли, заболевания скелетных мышц, повреждения
клеток, сопровождающиеся увеличением проницаемости мембран.
Метод
Оптимизированный кинетический метод в соответствии с рекомендациями DGKC (Германское общество
Клинической Химии)
Принцип реакции
ЛДГ
Пируват + НАДН
Лактат + НАД+
ЛДГ : Лактатдегидрогеназа.
Изменение поглощения при 340 нм пропорционально активности ЛДГ в образце.
Состав реагентов
Фосфатный буфер (pH - 7.5)
Пируват
НАДН
100 ммоль/л
2.0 ммоль/л
1.66 ммоль/л
Меры предосторожности
Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально обученным лаборантом.
Реагенты набора не классифицируются как опасные.
Реагент 2 содержит 0,1% Нитрит натрия, который классифицируется как опасное и токсичное вещество для
окружающей среды.
Первая помощь
При приеме внутрь следует прополоскать рот водой, выпить 0,5 л воды и вызвать рвоту. При попадании в
глаза быстро промыть их проточной водой. При попадании на кожу необходимо промыть теплой водой с
мылом. Во всех серьезных случаях обратиться к врачу.
Приготовление рабочих реагентов
Реагенты (R1 и R2) готовы к использованию.
Для ручного метода исследования:
Смешать 4 части раствора реагента 1 (R1) с 1 частью раствора реагента 2 (R2), тщательно перемешать.
Хранение и стабильность
Не вскрытые реагенты (R1 и R2) стабильны до достижения указанного срока годности , если хранятся при
2-8°C.
Рабочий реагент (4R1 : 1R2) стабилен 30 дней при 2-8°C, при хранении в защищенном от света месте,
избегая контаминации.
Перед работой рекомендуется проверить реагенты на пригодность.
Определение не пригодности реагента
- Замутнение
- Проверить попадание значений контролей в допустимый интервал
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
- Поглощение рабочего реагента < 0.8 при 340 нм
Образцы
Не гемолизированная сыворотка. Плазма не рекомендуется. Не используйте гемолизированную кровь, так
как активность ЛДГ в эритроцитах в 150 раз выше, чем в сыворотке, это может приводить к
ложнозавышенным результатам. В качестве антикоагулянта можно использовать гепарин ( литиевую или
аммониевую соль). Стабильность ЛДГ в образце 4 часа при комнатной температуре, 1 -2 дня при 2 - 8°C. Не
замораживать, влияет на активность печеночных изоферментов. Рекомендуется работать со
свежеприготовленными образцами.
Дополнительные материалы необходимые для работы
- Анализатор с контролем температуры 37 ± 0.5°C
- Контрольный материал
- Калибратор
- Принадлежности к анализатору
Параметры для проведения анализа на полуавтоматическом анализаторе
Метод
Длина волны1 (нм)
Объем образца (мкл)
Объем реагента (мкл)
Задержка ( Сек.)
Интервал измерения ( Сек. )
Кол-во замеров
Фактор
Температура реакции(°C )
Направление реакции
Нижний предел нормы (Е/л)
Верхний предел нормы (Е/л)
Нижний предел линейности (Е/л)
Верхний предел линейности (Е/л)
Мин. Начальное поглощение
Бланк
Единицы
Кинетика
340
10/20
500/1000
60
60
1
8095
37
Уменьшение
225
450
0
1000
0.8
Реагент
IU/L(Е/л)
Проведение анализа
Пипетирование
Тест
Рабочий реагент
1000мкл
Образец
20мкл
Тщательно смешать, аспирировать
Расчеты
ЛДГ Активность(Е/л) = A/мин X Factor (8095) (37°C)
Протоколы для работы на автоматических биохимических анализаторах серии XL
«Эрба Лахема с.р.о.», Чешская Республика могут быть получены по запросу.
Калибровка
Мы рекомендуем для калибровки автоматического анализатора использовать XL МультиКалибратор и
Лионорм Калибратор, Кат.№ 10003200.
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
Контроль качества
Для проведения контроля качества рекомендуются контрольные сыворотки: Лионорм ГУМ Н,
Кат.№10003204, Лионорм ГУМ П, Кат.№10003206
Коэффициент пересчета
Е/л х 0,017 = мккат/л
Специфичность / Влияющие вещества
Гемоглобин до 5 г/л, билирубин до 20 мг/дл и триглицериды до 500 мг/дл не влияют на результаты анализа.
Нормальные величины
Сыворотка при 37°C
225 – 450 Е/л (3,83 - 7,65 (мккат/л)
Приведенные диапазоны величин следует рассматривать как ориентировочные. Каждой лаборатории
необходимо определять свои диапазоны.
Воспроизводимость 37°C
Внутрисерийная
N
Среднеарифметическое
значение
(Е/л)
Уровень – 1
Уровень– 2
20
20
Межсерийная
N
Уровень– 1
Уровень – 2
20
20
76.74
76.02
SD
Е/л
3.6
7.8
CV
%
0.49
0.99
Среднеарифметическое
значение
(Е/л)
562.8
312.0
SD
Е/л
13.8
5.4
CV
%
2.43
1.88
Сравнение методов
Сравнение было проведено на 40 образцах с использованием ЭРБА реагентов ЛДГ (у) и имеющихся в
продаже реагентов с коммерчески доступной методикой (х).
Результаты: y = 1.982x + 0.001 мккат/л
r = 0.996 (r – коэффициент корреляции)
Линейность
Реакция линейна до 1200 Е/л (20,4 мккат/л)
Чувствительность
Нижний предел определения – 43,8 Е/л (0,746 мккат/л)
Утилизация использованных материалов
В соответствии с существующими в каждой стране правилами для данного вида материала
Фасовка
Кат.№
XSYS013
ЛДГ
Реагент -1
2 x 44 мл
ЛДГ
Реагент - 2
2 x 11 мл
Литература
1. Searcy, R.L., Diagnostic Biochemistry, McGraw-Hill, New York, NY, 1969.
2. Tietz, N.W., (Ed) Fundamentals of Clinical Chemistry, W.B. Saunders Co., Philadelphia, PA, 1976.
3. Henry, R.J., Chiamori N., Golub O.J., and Berkman S., Am.J. Clin. Path. 34(341), 1960.
4. Lum, G., Gambino, S.R., Am.J. Clin. Pathol. 61(108), 1974.
5. Bergmeyer, H. W., Methods of Enzymatic Analymatic Analysis, Ed.2, Verlog Chemie, 1965.
6. Young DS, Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. Third Edition. 1990; 3 : 221-4.
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru