АСТ/ ГОТ ЭРБА, Cистемный реагент IFCC метод, без пиридоксаль-5-фосфата

АСТ/ ГОТ
ЭРБА, Cистемный реагент
IFCC метод, без пиридоксаль-5-фосфата
Применение
Реагент предназначен для in vitro диагностики АСТ в сыворотке.
Клиническое значение
AСТ присутствует во всех человеческих тканях, уровень выше в паренхиме печени, почечной ткани, в
сердечной и скелетной ткани мышц.
Повышенный уровень АСТ связан с болезнями печени или с повреждением сердечной мышцы (инфаркт
миокарда), скелетных мышц (мышечная дистрофия) и холециститах.
Снижение уровня АСТ наблюдается у пациентов, подвергающихся почечному диализу и у пациентов с
недостатком витамина B6
Измерение изменения уровня АСТ важно для оценки тяжести инфаркта миокарда и для слежения за
хроническим заболеванием печени и гепатитом.
Метод
В соответствии с рекомендациями (IFCC) Международной Федерации Клинической Химии, без
пиридоксаль-5-фосфата
Принцип реакции
АСТ
2-оксоглутарат + L-аспартат  L-глутамат + оксалоацетат
МДГ
+
Оксалоацетат + НАДH + H  L-малат + НАД+
ЛДГ
Образец пируват + НАДH  L-Лактат + НАД+
АСТ : Аспартатаминотрансфераза
ЛДГ : Лактатдегидрогеназа
МДГ : Малатдегидрогеназа
Активность АСТ в пробе пропорциональна изменению поглощения при 340нм.
Состав реагентов
R1
Трис буфер (pH 7.5)
20 ммоль/л
L – Аспартат
230 ммоль/л
ЛДГ
≥ 2000 Е/л
МДГ
≥ 200 Е/л
2-Оксоглутарат
13.21 ммоль/л
R2
НАДН
151 ммоль/л
Меры предосторожности
Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально обученным лаборантом.
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
Первая помощь
При приеме внутрь следует прополоскать рот водой, выпить 0,5 л воды и вызвать рвоту. При попадании в
глаза быстро промыть их проточной водой. При попадании на кожу необходимо промыть теплой водой с
мылом. Во всех серьезных случаях обратиться к врачу.
Приготовление рабочих реагентов
Реагенты (R1 и R2) готовы к использованию.
Для ручного метода исследования:
Смешать 4 части раствора реагента 1 (R1) с 1 частью раствора реагента 2 (R2), тщательно перемешать.
Хранение и стабильность
Не вскрытые реагенты (R1 и R2) стабильны до достижения указанного срока годности, если хранятся при
2-8°C.
Стабильность рабочего реагента
Рабочий реагент (4R1 : 1R2) стабилен 30 дней при 2-8°C, при хранении в защищенном от света месте,
избегая контаминации.
Перед работой рекомендуется проверить реагенты на пригодность.
Определение не пригодности реагента
- Замутнение
- Поглощение рабочего реагента < 0.8 при 340 нм
- Проверить попадание значений контролей в допустимый интервал
Образцы
Не гемолизированная сыворотка или гепаринизированная плазма. В качестве антикоагулянта можно
использовать гепарин и ЭДТА. Стабильность АСТ в образце 4 дня при 2-8°C. Рекомендуется работать со
свеже- приготовленными образцами
Дополнительные материалы необходимые для работы
-
Анализатор с контролем температуры 37 ± 0.5°C
Контрольный материал
Калибратор
Принадлежности
Параметры для проведения анализа на полуавтоматическом анализаторе
Метод
Длина волны1 (нм)
Объем образца (мкл)
Объем реагента (мкл)
Задержка ( Сек.)
Интервал измерения ( Сек. )
Кол-во замеров
Фактор
Температура реации(°C )
Направление реакции
Нижний предел нормы (Е/л)
Верхний предел нормы (Е/л)
Нижний предел линейности (Е/л)
Верхний предел линейности (Е/л)
Мин. Начальное поглощение
Бланк
Единицы
Кинетика
340
50/100
500/1000
60
60
1
1746
37
Уменьшение
0
37
0
240
0.8
Реагент
IU/L(Е/л)
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
Проведение анализа
Пипетирование
Тест
Рабочий реагент
1000мкл
Образец
100мкл
Тщательно смешать, аспирировать
Расчеты
АСТ/ ГОТ Активность(Е/л) = A/мин X Фактор (1746) (37°C)
Протоколы для работы на автоматических биохимических анализаторах серии XL
«Эрба Лахема с.р.о.», Чешская Республика могут быть получены по запросу.
Коэффициент пересчета
Е/л х 0,017 = мккат/л
Калибровка
Мы рекомендуем для калибровки автоматического анализатора использовать XL МультиКалибратор и
Лионорм Калибратор, Кат.№ 10003200.
Контроль качества
Для проведения контроля качества рекомендуются контрольные сыворотки: Лионорм ГУМ Н,
Кат.№10003204, Лионорм ГУМ П, Кат.№10003206
Специфичность / Влияющие вещества
Гемоглобин до 70 мг/дл, аскорбиновая кислота до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл и триглицериды до 1000
мг/дл не влияют на результаты анализа.
Нормальные величины
Сыворотка / Плазма 37°C
Женщины
Мужчины
до 31 Е/л (0,53 мккат/л)
до 37 Е/л (0,63 мккат/л)
Приведенные диапазоны величин следует рассматривать как ориентировочные. Каждой лаборатории
необходимо определять свои диапазоны.
Воспроизводимость
Внутрисерийная
N
Среднеарифметическое
значение
(Е/л)
Уровень – 1
Уровень– 2
20
20
93.84
282.60
Межсерийная
N
Среднеарифметическо
е значение
(Е/л)
Уровень– 1
Уровень – 2
20
20
63.24
138.90
SD
Е/л
0.78
1.50
CV
(%)
0.82
0.52
SD
Е/л
1.32
2.28
CV
(%)
2.075
1.66
Сравнение методов
Сравнение было проведено на 40 образцах с использованием ЭРБА реагентов АСТ (у) и имеющихся в
продаже реагентов с коммерчески доступной методикой (х).
Результаты: y = 1.034 x – 0.004 мккат/л
r = 0.999 (r – коэффициент корреляции)
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru
Линейность
Реакция линейна до 300 Е/л (5,1 мккат/л)
Нижний предел определения
7,2 Е/л (0,12 мккат/л)
Утилизация использованных материалов
В соответствии с существующими в каждой стране правилами для данного вида материала
Фасовка
Кат.№
XSYS016
АСТ/SGОT
Реагент -1
6 x 44 мл
АСТ/SGОT
Реагент - 2
3 x 22 мл
Литература
1. Zilva, J.F. Pannall, P.R. “Plasma Enzymes in Diagnosis” in Clinical Chemistry in Diagnosis and Treatment.
Lloyd-Luke London. 1979; Chap 15 : 383-9.
2. Karmen, A. J. Clin. Investigation 1955; 43 : 131.
3. Henry, R.J. et al. Am. J. Clin. Path. 1960; 34 : 381.
4. IFCC Method for L-Aspartate aminotransferase. J.Clin. Chem. Clin. Biochem. 1986; 24 : 497-510.
5. Murray RL. “Aspartate aminotransferase” in Clinical Chemistry. Theory, analysis and correlation. Kaplan LA.
Pesce, A.J. (Ed), CV Mosby Company 1984; 1105-8.
6. Tietz,Text book of Clinical Chemistry. Burtis CA and Ashwood ER (Eds). Second Edition, WB Saunders
Company, 1994.
7. Young, D.S. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. Third Edition. 1990 : 3 : 45-52.
8. Wachtel, M. et al, Creation and Verification of Reference Intervals. Laboratory Medicine 1995; 26 : 593-7.
9. National Committee for Clinical Laboratory Standards. User evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices. NCCLS; 1984, NCCLS Publication EP5-T.
Представительство Erba Lachema в Российской Федерации
109029 г.Москва, ул.Нижегородская 32, корп.15, офис503
тел. +7 (495) 961 45 22, e-mail: [email protected], www.lachema.ru