ВИРУСЫ КАК ЭТИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКТОР ДИАБЕТА 1

ÎÃËßÄÈ
ÓÄÊ 577.12:616.379-008.64
ÂÈÐÓÑÛ ÊÀÊ ÝÒÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÉ ÔÀÊÒÎÐ ÄÈÀÁÅÒÀ
1-ãî ÒÈÏÀ. ÌÎÄÅËÈÐÎÂÀÍÈÅ ÍÀ ÆÈÂÎÒÍÛÕ
Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß1, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ2, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ1
1
Èíñòèòóò áèîõèìèè èì. À.Â. Ïàëëàäèíà ÍÀÍ Óêðàèíû, Êèåâ;
2
Íàöèîíàëüíûé óíèâåðñèòåò ïèùåâûõ òåõíîëîãèé, Êèåâ;
e-mail: [email protected]
Öóêðîâèé ä³àáåò 1-ãî òèïó âèíèêຠâíàñë³äîê ðóéíóâàííÿ β-êë³òèí ï³äøëóíêîâî¿ çàëîçè. Íåçâàæàþ÷è íà òå, ùî îñíîâíîþ ïðè÷èíîþ éîãî ðîçâèòêó º ãåíåòè÷íà ñõèëüí³ñòü, çíà÷íó ðîëü â åò³îëî㳿
çàõâîðþâàííÿ â³ä³ãðàþòü íåãåíåòè÷í³ ôàêòîðè, ñåðåä ÿêèõ ñóòòºâèìè º â³ðóñè. Ðîçãëÿíóòî ïàòîãåíåòè÷í³ ìåõàí³çìè â³ðóñ³íäóêîâàíîãî ä³àáåòó 1-ãî òèïó. Äî ïàòîãåíåçó â³ðóñè ìîæóòü çàëó÷àòèñÿ, ÿê
ì³í³ìóì, äâîìà øëÿõàìè: ïî-ïåðøå, çàïóñêàþ÷è ñïåöèô³÷íó àâòî³ìóíí³ñòü β-êë³òèí ï³äøëóíêîâî¿ çàëîçè
ó ðàç³ ïðÿìî¿ àáî íåïðÿìî¿ ³íôåêö³¿ â îðãàí³çì³ ³, ïî-äðóãå, áåçïîñåðåäíüî ³íô³êóþ÷è òà ðóéíóþ÷è β-êë³òèíè.
Á³ëüøå òîãî, â³ðóñè çäàòí³ ÿê ñïðè÷èíþâàòè ä³àáåò, òàê ³ çàïîá³ãàòè éîìó ó òâàðèí ÷óòëèâèõ äî öüîãî
çàõâîðþâàííÿ. Äëÿ ç’ÿñóâàííÿ ïàòîãåíåòè÷íèõ ìåõàí³çì³â â³ðóñ³íäóêîâàíîãî ä³àáåòó 1-ãî òèïó ó ëþäèíè
íåîáõ³äíî ïðîâîäèòè ïîäàëüø³ äîñë³äæåííÿ â öüîìó àñïåêò³.
Ê ë þ ÷ î â ³ ñ ë î â à: ä³àáåò 1-ãî òèïó, â³ðóñè, β-êë³òèíè ï³äøëóíêîâî¿ çàëîçè, ïàòîãåíåç.
ðåäè ýíäîêðèííûõ çàáîëåâàíèé îäíèì èç
íàèáîëåå òÿæåëûõ ÿâëÿåòñÿ ñàõàðíûé äèàáåò (ÑÄ). Â ïîñëåäíèå äåñÿòèëåòèÿ âî
ìíîãèõ ñòðàíàõ ìèðà çàáîëåâàåìîñòü ÑÄ, à òàêæå
ïðîÿâëåíèå åãî îñëîæíåíèé ðåçêî âîçðîñëè. Ïðè÷èíû âîçíèêíîâåíèÿ ýòîé áîëåçíè, ïðèâîäÿùèå
ê íàðóøåíèþ ýíäîêðèííîé, èììóííîé è íåðâíîé
ñèñòåì, âåñüìà ðàçíîîáðàçíû.
Ïðîãðåññèðóþùàÿ äåñòðóêöèÿ èíñóëèíïðîäóöèðóþùèõ β-êëåòîê ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû âûçûâàåò ãèïîèíñóëèíåìèþ è ãèïåðãëèêåìèþ, ÷òî
ïðèâîäèò ê ðàçâèòèþ ÑÄ 1-ãî òèïà [1–5]. Çíà÷èòåëüíàÿ ðîëü â åãî ýòèîëîãèè ïðèíàäëåæèò ãåíåòè÷åñêèì ôàêòîðàì. Ïîêàçàíî, ÷òî ñóùåñòâóåò
òåñíàÿ ñâÿçü ìåæäó ïðåäðàñïîëîæåííîñòüþ ê çàáîëåâàíèþ è ñïåöèôè÷åñêèìè àëëåëÿìè ãåíîâ
ãëàâíîãî êîìïëåêñà ãèñòîñîâìåñòèìîñòè êëàññà II
(ÌÍÑ ²² – major histocompatibility complex) [6,
7]. Îäíàêî íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî ãåíåòè÷åñêàÿ îáóñëîâëåííîñòü çàáîëåâàíèÿ ïðåäñòàâëÿåòñÿ âåñüìà
ïðàâäîïîäîáíîé, èçó÷åíèå ôàêòîðîâ ðèñêà ðàçâèòèÿ ÑÄ 1-ãî òèïà íà áëèçíåöàõ ïîêàçàëî, ÷òî
èõ ñîâïàäåíèå áûëî íà óðîâíå òîëüêî 40% [8].
Ñåé÷àñ óñòàíîâëåíî, ÷òî çà ðàçâèòèå äàííîãî çàáîëåâàíèÿ ìîãóò áûòü îòâåòñòâåííû òàêæå ýòèîëîãè÷åñêèå ôàêòîðû, â ÷àñòíîñòè ñòðåññû, áåëêè
ïèùè, òîêñèíû è âèðóñû [5, 9]. Èìåþùèåñÿ â
íàñòîÿùåå âðåìÿ ýêñïåðèìåíòàëüíûå äàííûå ïîçâîëÿþò óòâåðæäàòü, ÷òî âèðóñíûå èíôåêöèè
ìîãóò áûòü íå òîëüêî ïðè÷èíîé âîçíèêíîâåíèÿ
ÑÄ, íî è ÿâëÿòüñÿ åãî ñóùåñòâåííûì ïàòîãåíåòè÷åñêèì ôàêòîðîì.
Íàñòîÿùàÿ ðàáîòà ñôîêóñèðîâàíà íà àíàëè-
Ñ
çå âèðóñíîé ýòèîëîãèè ÑÄ. Èçâåñòíû äàííûå,
ñîãëàñíî êîòîðûì âèðóñû ðàññìàòðèâàþòñÿ êàê
ôàêòîðû îêðóæàþùåé ñðåäû, âûçûâàþùèå ÑÄ
1-ãî òèïà. Òàê, ïî÷òè 70 ëåò òîìó íàçàä áûëà
îáíàðóæåíà ñåçîííîñòü îáîñòðåíèÿ ýòîãî çàáîëåâàíèÿ, ïèê êîòîðîãî ïðèõîäèëñÿ íà îñåíü. Ïîñêîëüêó ñåçîííîñòü çàáîëåâàíèé, êàê ïðàâèëî,
ñâÿçûâàþò ñ âèðóñíûìè èíôåêöèÿìè, ïîÿâèëîñü
ìíîãî îøèáî÷íûõ ñîîáùåíèé î âèðóñíûõ èíôåêöèÿõ, âûçûâàþùèõ ðàçâèòèå ÑÄ 1-ãî òèïà, à
òàêæå î âûäåëåíèè âèðóñîâ èç ïîäæåëóäî÷íîé
æåëåçû ïàöèåíòîâ â îñòðîé ñòàäèè çàáîëåâàíèÿ
è îá èíäóêöèè åãî ó æèâîòíûõ, ÷óâñòâèòåëüíûõ
ê èíôèöèðîâàíèþ èçîëèðîâàííûìè âèðóñàìè [10,
11]. Èññëåäîâàíèÿ ïàöèåíòîâ íà ðàííèõ ñòàäèÿõ
áîëåçíè íà ïðèñóòñòâèå ó íèõ âèðóññïåöèôè÷íûõ àíòèòåë IgM ñâèäåòåëüñòâóþò î ñóùåñòâåííîé ðîëè âèðóñîâ â ýòèîëîãèè äàííîãî çàáîëåâàíèÿ [12]. Ñåé÷àñ ñ íèì ñâÿçûâàþò âèðóñ êîêñàêè  [13], âèðóñ êðàñíóõè [14], âèðóñ èíôåêöèîííîãî ïàðîòèòà (ñâèíêè) [15, 16], öèòîìåãàëîâèðóñ [17], âèðóñ Ýïñòàéíà–Áàððà [18] è âèðóñ
âåòðÿíîé îñïû – îïîÿñûâàþùåãî ëèøàÿ (Varicella
zostår) [19]. Ó æèâîòíûõ, â ÷àñòíîñòè ó ìûøåé,
êðûñ, õîìÿêîâ, êîç, ñâèíåé è ïðèìàòîâ, ñâÿçü ñ
ðàçâèòèåì ÑÄ 1-ãî òèïà ïðîñëåæåíà äëÿ äåâÿòè
âèðóñîâ. Òàê, ïîêàçàíî, ÷òî âèðóñû ýíöåôàëîìèîêàðäèòà (ÝÌÊ) [20, 21] è Ìåíãî [22], ðåîâèðóñ [23] è ðåòðîâèðóñ [24, 25] àññîöèèðîâàíû ñ
ðàçâèòèåì ýòîé áîëåçíè ó ìûøåé; âèðóñ êîêñàêè Â è îñîáåííî Â4 – ó ìûøåé [26, 27] è ïðèìàòîâ [28]; âèðóñ ÿùóðà – ó ñâèíåé è îâåö [29];
âèðóñ êðàñíóõè – ó õîìÿêîâ è êðîëèêîâ [30];
32
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ
âèðóñ áû÷üåé âèðóñíîé äèàðåè-ñëèçèñòîé – ó
îâåö [31] è âèðóñ Êèëõàìà ó êðûñ (KRV) [32].
1. Êîíöåïöèÿ âèðóñíîé ýòèîëîãèè
ýíäîêðèííûõ çàáîëåâàíèé
 ïàòîãåíåç àóòîèììóííûõ çàáîëåâàíèé âèðóñíûå èíôåêöèè âîâëåêàþòñÿ ïîñðåäñòâîì íåñêîëüêèõ ìåõàíèçìîâ [33–37]. Íåêîòîðûå èç íèõ
ñâÿçàíû ñ òåì, ÷òî ïîòåíöèàëüíî àóòîðåàêòèâíûå, îäíàêî ïîêîÿùèåñÿ ëèìôîöèòû, êîòîðûå íå
ïîäâåðãëèñü òèìóñíîé íåãàòèâíîé ñåëåêöèè, ïðèñóòñòâóþò â ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè áîëüøèíñòâà
èíäèâèäóóìîâ [38–40]. Ñóùåñòâóþò ìíîæåñòâåííûå “âñòðîåííûå” ïðåäîõðàíèòåëüíûå ìåõàíèçìû äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ àêòèâàöèè ýòèõ êëåòîê
â íîðìàëüíûõ óñëîâèÿõ. Îäíàêî âèðóñíûå èíôåêöèè, ïðèâîäÿùèå ê èììóííîé àêòèâàöèè,
ìîãóò íàðóøèòü óñòàíîâèâøååñÿ ðàâíîâåñèå ñàìîòîëåðàíòíîñòè [41]. Òåì íå ìåíåå ïðÿìûõ äîêàçàòåëüñòâ òîãî, ÷òî âèðóñíàÿ èíôåêöèÿ âûçûâàåò àóòîèììóííûå çàáîëåâàíèÿ ó ÷åëîâåêà, ïîëó÷èòü òðóäíî.  òå÷åíèå æèçíè ÷åëîâåê ïîäâåðæåí ìíîæåñòâó èíôåêöèé è ïîýòîìó ïðÿìóþ
ïðè÷èííóþ ñâÿçü ìåæäó îòäåëüíûì âèðóñîì è
áîëåçíüþ óñòàíîâèòü äîñòàòî÷íî ñëîæíî. Ê òîìó
æå âèðóñû ñïîñîáíû ÷àñòî ìóòèðîâàòü: îäèí âèðóñíûé øòàìì ìîæåò ñîäåðæàòü ìíîæåñòâî ðàçëè÷íûõ êâàçèñïåöèôè÷íûõ ïîñëåäîâàòåëüíîñòåé,
ðàçëè÷àþùèõñÿ ïî äèàáåòîãåííîñòè.
Äëÿ ñîçäàíèÿ óñëîâèé, ïðè êîòîðûõ âèðóñû
èíäóöèðóþò èëè îñëàáëÿþò àóòîèììóííîñòü, à
òàêæå äëÿ àíàëèçà ïðèíöèïîâ, ñîãëàñíî êîòîðûì
ýòè ïðîöåññû ìîãóò îñóùåñòâëÿòüñÿ ïðè ÑÄ
1-ãî òèïà, áûëà ðàçðàáîòàíà è èçó÷åíà âèðóñèíäóöèðîâàííàÿ ìîäåëü ñ èñïîëüçîâàíèåì òðàíñãåííûõ ìûøåé [42, 43]. Ýòî äàëî âîçìîæíîñòü â
äàëüíåéøåì ðàçâèòü êîíöåïöèþ î òîì, êàê àíòèâèðóñíûé îòâåò âëèÿåò íà àóòîèììóííîñòü, è
÷òî àêòèâàöèÿ àóòîðåàêòèâíûõ ëèìôîöèòîâ íå
âñåãäà óñèëèâàåò çàáîëåâàíèå, à èíîãäà èìååò è
îáðàòíûé ýôôåêò.
Ýêñïåðèìåíòû ñ äàííîé ìîäåëüþ ïîçâîëèëè ñäåëàòü ïðåäïîëîæåíèå, ÷òî èììóííûé îòâåò
ïðîòèâ äåòåðìèíàíò, îáùèõ äëÿ âèðóñà è äëÿ
êëåòêè-õîçÿèíà, ìîæåò èíäóöèðîâàòü ðàçðóøåíèå êëåòîê è òêàíåé. Âîçìîæíûì ìåõàíèçìîì,
ðåàëèçóþùèìñÿ â ñëó÷àå òàêîãî îòâåòà, ÿâëÿåòñÿ
ãåíåðàöèÿ ðåàãèðóþùèõ ïåðåêðåñòíî ýôôåêòîðíûõ ëèìôîöèòîâ èëè àíòèòåë, ðàñïîçíàþùèõ ñïåöèôè÷åñêèå äåòåðìèíàíòû íà êëåòêàõ-ìèøåíÿõ
[44].
Ñëåäóåò òàêæå îòìåòèòü, ÷òî íåêîòîðûå âèðóñíûå èíôåêöèè íàðóøàþò àóòîèììóííûé ïðîöåññ è îáåñïå÷èâàþò, ïî êðàéíåé ìåðå â ýêñïåðèìåíòàëüíûõ ìîäåëÿõ, èçëå÷åíèå îò áîëåçíè.
Òàê, âèðóñ ëåéêîöèòàðíîãî õîðèîìåíèíãèòà, âåISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
ðîÿòíî, ïðåäîòâðàùàåò ðàçâèòèå àóòîèììóííîãî
ÑÄ 1-ãî òèïà ó BioBreeding (BB)-êðûñ – îäíîé
èç ìîäåëåé ýòîãî ñïîíòàííîãî çàáîëåâàíèÿ ó
æèâîòíûõ [45], à âèðóñ ìûøèíîãî ãåïàòèòà – ó
íåòó÷íûõ äèàáåòè÷åñêèõ (NOD) ìûøåé [46]. Ýòî,
â ñâîþ î÷åðåäü, ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî ïðè
åñòåñòâåííîì è ýêñïåðèìåíòàëüíîì èíôèöèðîâàíèè æèâîòíûõ âèðóñû ñïîñîáíû âîâëåêàòüñÿ
â ïàòîãåíåç ÑÄ 1-ãî òèïà. Ýòî ìîæåò ïðîèñõîäèòü, êàê ìèíèìóì, äâóìÿ ðàçëè÷íûìè ïóòÿìè.
Ñ îäíîé ñòîðîíû, âèðóñû íåïîñðåäñòâåííî èíôèöèðóþò è ðàçðóøàþò β-êëåòêè ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû, à ñ äðóãîé, ëèáî îïðåäåëåííûì îáðàçîì çàïóñêàþò àóòîèììóííîå ðàçðóøåíèå β-êëåòîê, ëèáî åìó ñïîñîáñòâóþò.
Äîêàçàòåëüñòâà òîãî, ÷òî âèðóñû èíäóöèðóþò ó æèâîòíûõ ÑÄ 1-ãî òèïà, ïîëó÷åíû ïðè
èçó÷åíèè âèðóñîâ ÝÌÊ ó ìûøåé [21, 47] è KRV
ó êðûñ [32, 48, 49]. Ïîêàçàíî, ÷òî âûñîêî äèàáåòîãåííûé âèðóñ ÝÌÊ D ÿâëÿåòñÿ ïåðâè÷íûì
àãåíòîì, êîòîðûé ñåëåêòèâíî ïîâðåæäàåò β-êëåòêè ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû, â òî âðåìÿ êàê KRV
ðàññìàòðèâàåòñÿ â êà÷åñòâå àãåíòà, âêëþ÷àþùåãî
ñïåöèôè÷åñêóþ ê β-êëåòêàì àóòîèììóííîñòü áåç
èõ èíôèöèðîâàíèÿ.
2. Äèàáåò, èíäóöèðóåìûé
âèðóñîì ÝÌÊ ó ìûøåé
Âèðóñ ÝÌÊ ïðèíàäëåæèò ê ñåìåéñòâó ïèêîðíàâèðóñîâ (Picornaviridae) è ÿâëÿåòñÿ ìåëêèì
âèðóñîì, ñîäåðæàùèì îäíîöåïî÷å÷íóþ ÐÍÊ. Åãî
äèàáåòîãåííûé âàðèàíò ñåëåêòèâíî èíôèöèðóåò,
à çàòåì ðåïëèöèðóåòñÿ âíóòðè β-êëåòîê ãåíåòè÷åñêè ÷óâñòâèòåëüíûõ ëèíèé ìûøåé. Ðåïëèêàöèÿ ÝÌÊ â β-êëåòêàõ îñóùåñòâëÿåòñÿ â ìàêðîôàãàõ ïàíêðåàòè÷åñêèõ îñòðîâêîâ. Ñåêðåöèÿ
öèòîêèíîâ, òàêèõ êàê èíòåðëåéêèí IL-1 è ôàêòîð íåêðîçà îïóõîëè TNF-α, à òàêæå îêñèäà àçîòà (NO) àêòèâèðîâàííûìè ìàêðîôàãàìè ïðèâîäèò ê äàëüíåéøåé äåñòðóêöèè îñòàâøèõñÿ β-êëåòîê, âûçûâàÿ äèàáåò ó ìûøåé.
Âàðèàíò Ì âèðóñà ÝÌÊ èíäóöèðóåò ñèíäðîì ïîäîáíûé ÑÄ, êîòîðûé õàðàêòåðèçóåòñÿ ãèïîèíñóëèíåìèåé, ãèïåðãëèêåìèåé, ãëþêîçóðèåé,
ïîëèäèñïåïñèåé è ïîëèôàãèåé ó ãåíåòè÷åñêè ÷óâñòâèòåëüíûõ âèäîâ ìûøåé [50, 20]. Î÷èñòêà âèðóñà ÝÌÊ-Ì ïîçâîëèëà èçîëèðîâàòü äâà åãî ñòàáèëüíûõ âàðèàíòà: îäèí, âûñîêîäèàáåòîãåííûé
(ÝÌÊ-D), âûçûâàþùèé ÑÄ ïðàêòè÷åñêè ó 90%
èíôèöèðîâàííûõ æèâîòíûõ, è äðóãîé – íåäèàáåòîãåííûé (ÝÌÊ-Â) [21]. Îäíàêî ýòè äâà âàðèàíòà íå ðàçëè÷àþòñÿ àíòèãåíàìè. Ðàçëè÷èå
ìåæäó íèìè ïî 14 íóêëåîòèäàì áûëî îáíàðóæåíî ïðè èññëåäîâàíèè ïîëíîé íóêëåîòèäíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ãåíîìîâ ýòèõ âàðèàíòîâ [50]. Ïðè
ýòîì òîëüêî îäíà àìèíîêèñëîòà – àëàíèí 776 –
33
ÎÃËßÄÈ
ÿâëÿåòñÿ êðèòè÷åñêîé äëÿ äèàáåòîãåííîñòè âèðóñà ÝMÊ [51]. À îñíîâàíèå “G” â ïîëîæåíèè
3155 íóêëåîòèäà – Ala(GCC)776 â ïîëèïðîòåèíå – èìååòñÿ ó âñåõ äèàáåòîãåííûõ âàðèàíòîâ, â
òî âðåìÿ êàê îñíîâàíèå “À” â òîì æå ïîëîæåíèè – Thr(ACC)776 – íàõîäèòñÿ âî âñåõ íåäèàáåòîãåííûõ âàðèàíòàõ.
Äëÿ îöåíêè âëèÿíèÿ Ala776 íà Thr776 èëè Thr776
íà Ala776 áûëà ðàçðàáîòàíà ñïåöèàëüíàÿ ìåòîäèêà,
âêëþ÷àþùàÿ ñîçäàíèå õèìåðíîé ÐÍÊ ïóòåì
ïðèñîåäèíåíèÿ ó÷àñòêà ïîëè(C) âèðóñíîé ÐÍÊ ê
5′-óñå÷åííîìó ÐÍÊ òðàíñêðèïòó êÄÍÊ âèðóñà
ÝMÊ [52]. Ýòî ïîçâîëèëî ïðîâåñòè ñàéòñïåöèôè÷åñêèé ìóòàãåíåç â ïîëîæåíèè íóêëåîòèäîâ
3155 ãåíîìà âèðóñà ÝMÊ, ïîñëå ÷åãî ìûøåé SJL/J
èíôèöèðîâàëè îáðàçîâàâøèìèñÿ õèìåðíûìè
ÝMÊ-âèðóñàìè. Îêàçàëîñü, ÷òî âñå Ala776-ñîäåðæàùèå ðåêîìáèíàíòíûå ÝMÊ-âèðóñû èíäóöèðîâàëè ÑÄ, â òî âðåìÿ êàê íè îäèí èç Thr776ñîäåðæàùèõ ðåêîìáèíàíòíûõ âàðèàíòîâ âèðóñîâ
ÝMÊ íå âûçûâàë çàáîëåâàíèå ó ãåíåòè÷åñêè
÷óâñòâèòåëüíûõ ìûøåé [53]. Òàêèì îáðàçîì,
áûëî äîêàçàíî, ÷òî åäèíñòâåííûé àìèíîêèñëîòíûé îñòàòîê â ïîëîæåíèè 776 ïîëèïðîòåèíà âèðóñà ÝMÊ îïðåäåëÿåò åãî äèàáåòîãåííîñòü. Çàìåíà àìèíîêèñëîòû (Ala→Thr) â ïîëîæåíèè 776
ïîëèïðîòåèíà ó âèðóñà ÝMÊ ïðèâîäèëà ê ïîòåðå äèàáåòîãåííîñòè. Â òî æå âðåìÿ ïðè çàìåíå
àìèíîêèñëîòû Thr íà Ala â òîì æå ïîëîæåíèè
íåäèàáåòîãåííûé âèðóñ ÝMÊ ïðèîáðåòàåò äèàáåòîãåííîñòü. Â ñâÿçè ñ ýòèì âîçíèêàåò âîïðîñ,
ïî÷åìó èìåííî 776-é àìèíîêèñëîòíûé îñòàòîê
Ala ÿâëÿåòñÿ êðèòè÷åñêèì äëÿ ÝÌÊ-èíäóöèðóåìîãî äèàáåòà ó ìûøåé.
Ïîêàçàíî, ÷òî àëàíèí ðàñïîëîæåí â âûñîêîêîíñåðâàòèâíîì è î÷åíü ãèäðîôîáíîì ó÷àñòêå
îñíîâíîãî êàïñèäíîãî âèðóñíîãî áåëêà VP1, ñîäåðæàùåãî òðè ïðîêñèìàëüíûõ îñòàòêà ïðîëèíà
(Pro-Thr-Gly-Thr-Pro-Ala776-Lys-Pro). Ýòîò ó÷àñòîê áûë èäåíòèôèöèðîâàí êàê ñàéò, ó÷àñòâóþùèé â ïðèñîåäèíåíèè âèðóñà ê β-êëåòêàì. Çàìåíà Thr (ÝMÊ-Â) íà Ala (ÝMÊ-D) â äàííîì ïîëîæåíèè óìåíüøàåò ãèäðîôîáíîñòü áåëêà íà 37%.
Ïîýòîìó î÷åâèäíî, ÷òî òàêîå èçìåíåíèå â äèàáåòîãåííîì âàðèàíòå âèðóñà ÝÌÊ îòâå÷àåò çà åãî
äèàáåòîãåííîñòü, ïðè ýòîì óâåëè÷èâàåòñÿ ýôôåêòèâíîñòü ïðèñîåäèíåíèÿ âèðóñà ê β-êëåòêàì [54].
Ïðèâåäåííàÿ ãèïîòåçà ïîäòâåðæäàåòñÿ íàáëþäåíèåì, ÷òî ó ñàìöîâ ìûøåé ëèíèè JCR Swiss âèðóñ ÝMÊ-D ïðèñîåäèíÿåòñÿ ê ïåðâè÷íûì β-êëåòêàì â øåñòü ðàç ýôôåêòèâíåå, ÷åì ÝMÊ- [55].
Ýòó ãèïîòåçó ïðîâåðÿëè, îöåíèâàÿ ñâÿçûâàþùóþ ñïîñîáíîñòü êàæäîãî èç ðåêîìáèíàíòíûõ õèìåðíûõ âèðóñîâ ÝMÊ ñ β-êëåòêàìè. Âèðóñû, ñîäåðæàùèå Thr, Ser, Pro, Asp è Val â ïîëîæåíèè 152 îñíîâíîãî êàïñèäíîãî áåëêà VP1
(ïîëîæåíèå 776 ïîëèïðîòåèíà), ñëàáî ñâÿçûâàëèñü ñ β-êëåòêàìè.  îòëè÷èå îò íèõ, ðåêîìáèíàíòíûå õèìåðíûå âèðóñû ÝMÊ, ñîäåðæàùèå â
ïîëîæåíèè 152 áåëêà VP1 Ala, ýôôåêòèâíî àññîöèèðîâàëèñü è èíôèöèðîâàëè β-êëåòêè, âûçûâàÿ ðàçâèòèå ÑÄ. Ñ ïîìîùüþ òðåõìåðíîãî ìîëåêóëÿðíîãî ìîäåëèðîâàíèÿ áûëî ïîêàçàëî, ÷òî âàíäåð-âààëüñîâîå âçàèìîäåéñòâèå ÿâëÿåòñÿ îïðåäåëÿþùèì â ñòàáèëüíîñòè áåëêà VP1, è ÷òî îñòàòêè, îêðóæàþùèå áåëîê â ïîëîæåíèè 152, áîëåå
òåñíî óïàêîâàíû ó ðåêîìáèíàíòíûõ âèðóñîâ, ñîäåðæàùèõ Thr, Ser, Pro, Asp è Val â ïîëîæåíèè
152, ÷åì ó ðåêîìáèíàíòíûõ âèðóñîâ, ñîäåðæàùèõ â ýòîì ïîëîæåíèè Ala. Òàêèì îáðàçîì, ïîâåðõíîñòü ïðîñòðàíñòâà, îêðóæàþùåãî Ala â ïîëîæåíèè 152 áåëêà VP1, áîëåå äîñòóïíà, âñëåäñòâèå ÷åãî ïðèãîäíîñòü ñàéòîâ äëÿ ïðèñîåäèíåíèÿ ê ðåöåïòîðàì β-êëåòîê óâåëè÷èâàåòñÿ, ÷òî âûðàæàåòñÿ â âèðóñíîé èíôåêöèè è ðàçâèòèè ÑÄ [56].
×òî æå êàñàåòñÿ ãåíåòè÷åñêîãî êîíòðîëÿ âèðóñèíäóöèðîâàííîãî ÑÄ, òî ïðè èíôèöèðîâàíèè âèðóñîì ÝÌÊ-Ì òîëüêî ó íåñêîëüêèõ èíáðåäíûõ ëèíèé ìûøåé (SJL, SWR, DBA/1, DBA/2),
â îòëè÷èå îò ëèíèé (C57BL/6, CBA, AKR, BALB/C),
ðàçâèâàåòñÿ çàáîëåâàíèå [57]. Ïðåäïîëàãàåòñÿ, ÷òî
÷óâñòâèòåëüíîñòü ê âèðóñèíäóöèðóåìîìó ÑÄ ÿâëÿåòñÿ íàñëåäñòâåííîé, êàê àóòîñîìíàÿ ðåöåññèâíàÿ ÷åðòà. Ýòî òàêæå ñîãëàñóþòñÿ ñ èäååé î òîì,
÷òî èíäóöèðîâàíèå ÝÌÊ-âèðóñîì ÑÄ àññîöèèðîâàíî ñ çàêîíîì íàñëåäîâàíèÿ ïî Ìåíäåëþ, è
÷òî ÷óâñòâèòåëüíîñòü ê íåìó êîíòðîëèðóåòñÿ îäèíî÷íûì ëîêóñîì [57]. Ñ÷èòàåòñÿ, ÷òî ÷óâñòâèòåëüíîñòü ê ÑÄ, èíäóöèðîâàííàÿ âèðóñîì ÝÌÊ-D,
êîíòðîëèðóåòñÿ ó ìûøåé îäèíî÷íûì ãåíîì è ìîæåò áûòü óïðàâëÿåìà ïóòåì ìîäóëèðîâàíèÿ ýêñïðåññèè âèðóñíûõ ðåöåïòîðîâ íà β-êëåòêàõ [58].
34
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
3. Ìåõàíèçì ïàòîãåííîñòè ÝÌÊ-D
âèðóñèíäóöèðóåìîãî äèàáåòà ó ìûøåé
Ðàíåå áûëî ïîêàçàíî, ÷òî èíôèöèðîâàíèå
ãåíåòè÷åñêè ÷óâñòâèòåëüíîé ëèíèè ìûøåé SJL/J
âèðóñîì ÝMÊ-D óæå ÷åðåç òðè äíÿ ïðèâîäèò ê
ðàçâèòèþ ÑÄ ïóòåì áûñòðîãî ðàçðóøåíèÿ β-êëåòîê [21]. Ýòî ïðîèñõîäèò âñëåäñòâèå ðåïëèêàöèè
âèðóñà â êëåòêàõ â ïåðèîä äî èíäóêöèè ñîîòâåòñòâóþùèõ íåéòðàëèçóþùèõ àíòèòåë ïðîòèâ âèðóñà ÝMÊ-D.
Äëÿ âûÿñíåíèÿ òîãî, áóäåò ëè ïîäàâëåíèå
Ò-êëåòîê âëèÿòü íà ÑÄ, èíäóöèðóåìûé âèðóñîì
ÝMÊ-D, ìûøåé SJL/J îáðàáàòûâàëè àíòèòåëàìè ê Ò-êëåòêàì êàê ïåðåä, òàê è ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ âèðóñîì. Ïðè ýòîì ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûõ ðàçëè÷èé â ðàçâèòèè ÑÄ ó æèâîòíûõ,
îáðàáîòàííûõ è íåîáðàáîòàííûõ òàêèìè àíòèòåëàìè, íå îáíàðóæåíî [59, 60]. Ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ ðîëè ìàêðîôàãîâ â ðàçðóøåíèè β-êëåòîê ó
Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ
ÝMÊ-D âèðóñèíôèöèðîâàííûõ æèâîòíûõ, ìûøåé SJL/J îáðàáàòûâàëè àíòèìàêðîôàãàëüíûìè
àíòèòåëàìè äî è ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ ýòèì âèðóñîì. Îêàçàëîñü, ÷òî âèðóñèíäóöèðîâàííûé ÑÄ
ó ìûøåé, îáðàáîòàííûõ àíòèìàêðîôàãàëüíûìè
àíòèòåëàìè, ðàçâèâàåòñÿ ìåíåå èíòåíñèâíî, ÷åì
ó íåîáðàáîòàííûõ, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î âàæíîé
ðîëè ìàêðîôàãîâ â ïðîöåññå ðàçðóøåíèÿ β-êëåòîê
ó SJL/J-ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D
[60].
Ñëåäóåò, îäíàêî, îòìåòèòü, ÷òî âèðóñíûå
èíôåêöèè ó æèâîòíûõ è ÷åëîâåêà âîçíèêàþò ïðè
îòíîñèòåëüíî íèçêîì êîëè÷åñòâå â êëåòêàõ âèðóñà. Èíôèöèðîâàíèå òêàíè âèðóñàìè ñ âûñîêèìè
òèòðàìè, èñïîëüçóåìûìè â ýêñïåðèìåíòàõ, â ïðèðîäå íå ïðîèñõîäèò. Ïîýòîìó äëÿ èçó÷åíèÿ èììóííûõ ìåõàíèçìîâ, ó÷àñòâóþùèõ â ðàçðóøåíèè β-êëåòîê, áûëà ðàçðàáîòàíà äðóãàÿ âèðóñíàÿ
ìîäåëü, â êîòîðîé ìûøè èíôèöèðîâàëèñü âèðóñîì ÝMÊ-D â íèçêèõ äîçàõ. Áûëî ïîêàçàíî, ÷òî
ó òàêèõ ìûøåé öåíòðàëüíóþ ðîëü â äåñòðóêöèè
β-êëåòîê èãðàþò ìàêðîôàãè [61]. Â äàëüíåéøåì
óñòàíîâèëè, ÷òî ñåëåêòèâíàÿ ÝMÊ-D-âèðóñíàÿ èíôåêöèÿ β-êëåòîê ñïîñîáñòâóåò âîâëå÷åíèþ ìàêðîôàãîâ â ïàíêðåàòè÷åñêèå îñòðîâêè ïóòåì èíôèëüòðàöèè äðóãèõ èììóíîöèòîâ, âêëþ÷àÿ
Ò-êëåòêè: êëåòêè-íàòóðàëüíûå êèëëåðû (ÍÊ) è
Â-êëåòêè [60]. Òåì íå ìåíåå ðîëü ìàêðîôàãîâ â
ðàçðóøåíèè β-êëåòîê ïîëíîñòüþ íå óñòàíîâëåíà.
Äàëüíåéøèå èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî âèðóñ
ÝMÊ-D èíôèöèðóåò è àêòèâèðóåò ìàêðîôàãè,
îäíàêî ñàì âíóòðè èõ íå ðåïëèöèðóåòñÿ [62].
Ïîñêîëüêó ìàêðîôàãè, êàê èçâåñòíî, ïðîäóöèðóþò ðàñòâîðèìûå ìåäèàòîðû – IL-1β, TNF-α
è NO, òî âîçíèê èíòåðåñ ê èññëåäîâàíèþ âîâëå÷åíèÿ ýòèõ ñîåäèíåíèé â äåñòðóêöèþ β-êëåòîê ó
ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D â
íèçêèõ äîçàõ. Äåéñòâèòåëüíî, â ïàíêðåàòè÷åñêèõ
îñòðîâêàõ, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D â
íèçêèõ äîçàõ, îïðåäåëÿåòñÿ ñåëåêòèâíàÿ ýêñïðåññèÿ IL-1β, TNF-α è èíäóöèáåëüíîé NO-ñèíòàçû
(iNOS). Ê òîìó æå îáðàáîòêà âèðóñèíôèöèðîâàííûõ ìûøåé àíòèòåëàìè ïðîòèâ IL-1β èëè
TNF-α, à òàêæå èíãèáèòîðîì iNOS, àìèíîãóàíèäèíîì, ïðèâîäèò ê çíà÷èòåëüíîìó ñíèæåíèþ ðàçâèòèÿ ÑÄ [63]. Ýòî äîêàçûâàåò, ÷òî ïðîèçâîäèìûå ìàêðîôàãàìè ìåäèàòîðû èãðàþò êðèòè÷åñêóþ ðîëü â äåñòðóêöèè β-êëåòîê, âûçûâàÿ ðàçâèòèå çàáîëåâàíèÿ ó ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D â íèçêèõ äîçàõ.
Îäíàêî ìîëåêóëÿðíûé ìåõàíèçì äåéñòâèÿ
ýòèõ ìåäèàòîðîâ íåèçâåñòåí. Ïîêàçàíî, ÷òî IL-1β
èíäóöèðóåò àïîïòîç ïóòåì èíäóêöèè ýêñïðåññèè
iNOS è ïðîäóêöèè NO â îñòðîâêîâûõ êëåòêàõ
êðûñû [64–66]. Ïðè ýòîì IL-1β è TNF-α óâåëè÷èâàþò ýêñïðåññèþ àíòèãåíà Fas, êîòîðûé ïðè-
íèìàåò ó÷àñòèå â àïîïòîçå [67]. Ïîýòîìó âîçìîæíî, ÷òî îãðàíè÷åííàÿ ðåïëèêàöèÿ âèðóñà
ÝMÊ-D â β-êëåòêàõ îáóñëîâëåíà âîâëå÷åíèåì
ìàêðîôàãîâ, àêòèâèðîâàííûõ âèðóñàìè, à òàêæå
IL-1β è TNF-α, ïðîäóöèðîâàííûõ àêòèâèðîâàííûìè ìàêðîôàãàìè â ïàíêðåàòè÷åñêèõ îñòðîâêàõ,
â ïðîöåññ èíäóêöèè ýêñïðåññèè Fas â β-êëåòêàõ
è(èëè) ýêñïðåññèè iNOS è ïðîäóêöèè NO, âûçûâàþùèõ ãèáåëü β-êëåòîê ïóòåì àïîïòîçà.
Áûëè ïðîâåäåíû èññëåäîâàíèÿ ïî âûÿñíåíèþ âîïðîñà, ìîæåò ëè òèðîçèíêèíàçíûé ïóòü
èìåòü îòíîøåíèå ê èíäóöèðóåìîé âèðóñîì
ÝMÊ-D àêòèâàöèè ìàêðîôàãîâ in vitro, è, åñëè
ýòî ïðîèñõîäèò, òî áóäåò ëè îáðàáîòêà èíãèáèòîðîì òèðîçèíêèíàçû in vivo ïðåäîòâðàùàòü ðàçâèòèå âèðóñèíäóöèðîâàííîãî ÑÄ.  äàííûõ îïûòàõ iNOS â ìàêðîôàãàõ, àêòèâèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D, ýêñïðåññèðîâàëàñü íà áîëåå âûñîêîì óðîâíå, ÷åì IL-1β è TNF-α.  ýòèõ êëåòêàõ
òàêæå íàáëþäàåòñÿ èíòåíñèâíàÿ ïðîäóêöèÿ NO,
îäíàêî ñëåäóþùåå ïîêîëåíèå âèðóñîâ íå ïðîäóöèðóåòñÿ [62]. Ïðèâåäåííûå ðåçóëüòàòû ïîêàçûâàþò, ÷òî èíôèöèðîâàíèå ìàêðîôàãîâ âèðóñàìè
ÝMÊ-D íå ñïîñîáñòâóåò ïîñëåäóþùåé ðåïëèêàöèè âèðóñà, îäíàêî ìîæåò âûçûâàòü èõ àêòèâàöèþ. Äëÿ äàëüíåéøåãî èçó÷åíèÿ ñèãíàëüíîãî ìåõàíèçìà òàêîãî ïðîöåññà ñ ïîìîùüþ âèðóñà
ÝMÊ-D â ïåðèòîíåàëüíûõ ìàêðîôàãàõ DBA/2
ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì, èññëåäîâàëè
ýêñïðåññèþ è àêòèâàöèþ ïåðåäàþùèõ ñèãíàë
ìîëåêóë, â ÷àñòíîñòè òèðîçèí-êèíàçû ñåìåéñòâà
Srñ. Îäíà èç êèíàç òåñòèðóåìîãî ñåìåéñòâà, hck,
õàðàêòåðèçóåòñÿ çíà÷èòåëüíûì óâåëè÷åíèåì àóòîôîñôîðèëèðîâàíèÿ è ôîñôîðèëèðîâàíèÿ Sam 68
(ñóáñòðàò äëÿ Src êèíàçû). Ýòî ñâèäåòåëüñòâóåò,
÷òî êèíàçà hck âîâëå÷åíà â àêòèâàöèþ ìàêðîôàãîâ ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D.
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
35
4. KRV-èíäóöèðîâàííûé àóòîèììóííûé
äèàáåò ó êðûñ
KRV ïðèíàäëåæèò ê ñåìåéñòâó ïàðâîâèðóñîâ. Âèðèîí ïàðâîâèðóñîâ (äèàìåòð 18–26 íì)
èìååò îòíîñèòåëüíî ïðîñòóþ ñòðóêòóðó, ñîñòîÿùóþ èç òðåõ áåëêîâ è ëèíåéíîé ìîëåêóëû îäíîöåïî÷å÷íîé ÄÍÊ.
Ïàðâîâèðóñ ðåïëèöèðóåòñÿ â ÿäðå äåëÿùèõñÿ êëåòîê (îòñþäà ñêëîííîñòü åãî ê êîñòíîìó
ìîçãó, ëèìôîèäíûì îðãàíàì, êèøêàì è ðàçâèâàþùèìñÿ çàðîäûøàì) è èìååò ãåíîì, ñïîñîáíûé èíòåãðèðîâàòüñÿ ñ ãåíîìîì èíôèöèðîâàííîé êëåòêè. KRV îáû÷íî èçîëèðóþò èç êðûñèíîé ñàðêîìû è îáíàðóæèâàþò â ñëó÷àå ñìåðòåëüíîé íåîíàòàëüíîé áîëåçíè, ôèçè÷åñêîé äåôîðìàöèè è óìñòâåííîé çàäåðæêè ó íîâîðîæäåííûõ
êðûñ. Ïîêàçàíî, ÷òî îí âûçûâàåò àóòîèììóííûé
ÑÄ â óñòîé÷èâûõ ê íåìó êðûñ BioBreeding (DR-
ÎÃËßÄÈ
BB) áåç çàìåòíîãî èíôèöèðîâàíèÿ β-êëåòîê [32].
Äèàáåòè÷åñêèé ñèíäðîì, ñõîäíûé ñ ÑÄ 1-ãî òèïà
ó ÷åëîâåêà, ñïîíòàííî ðàçâèâàåòñÿ ó ñêëîííûõ ê
ÑÄ DP-BB-êðûñ è NOD-ìûøåé [68]. Ó DP-BBêðûñ ðàçâèâàåòñÿ ëèìôîïåíèÿ, ïðè ýòîì 70–80%
æèâîòíûõ ïðèîáðåòàþò ÑÄ ÷åðåç 120 äíåé ïîñëå
ðîæäåíèÿ.  ñëó÷àå èíôèöèðîâàíèÿ KRV 21–
25-äíåâíûõ DR-BB-êðûñ, ïî÷òè ó 30% æèâîòíûõ ÷åðåç 2–4 íåäåëè ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ ðàçâèâàåòñÿ àóòîèììóííûé ÑÄ [32]. Ê òîìó æå ó
31% êðûñ âîçíèêàþò ëèìôîöèòàðíûå èíñóëèòû
áåç ÑÄ.
Èíôèöèðîâàíèå β-êëåòîê ìûøåé ÿâëÿåòñÿ
àáñîëþòíî íåîáõîäèìûì óñëîâèåì äëÿ ðàçâèòèÿ
ÑÄ, èíäóöèðîâàííîãî âèðóñîì ÝMÊ-D.  îòëè÷èå îò ýòîãî âèðóñ KRV ìîæåò âûçûâàòü àóòîèììóííûé ÑÄ ó DR-BB-êðûñ, èíôèöèðóÿ òàêèå
ëèìôîèäíûå îðãàíû, êàê ñåëåçåíêó, òèìóñ èëè
êîñòíûé ìîçã, íå çàòðàãèâàÿ ïðè ýòîì β-êëåòêè.
ÂÂ-êðûñû, óñòîé÷èâûå ê çàáîëåâàíèþ, ñîäåðæàò
àóòîðåàêòèâíûå Ò-êëåòêè, êîòîðûå îáû÷íî ïðåáûâàþò â “çàãëóøåííîì” ñîñòîÿíèè âñëåäñòâèå
èììóíîðåãóëÿòîðíîãî êîíòðîëÿ [69, 70]. Ïîêàçàíî, ÷òî KRV-èíôåêöèÿ ó DR-BB-êðûñ àêòèâèðóåò òàêèå àóòîðåàêòèâíûå Ò-êëåòêè [71]. Ïîýòîìó ïðè àêòèâàöèè ïîñëåäíèå, âåðîÿòíî, ÿâëÿþòñÿ ñïåöèôè÷íûìè äëÿ β-êëåòîê. Òåì íå ìåíåå
òî÷íûé ìåõàíèçì, ñ ïîìîùüþ êîòîðîãî KRV èíäóöèðóåò àóòîèììóííûé ÑÄ 1-ãî òèïà áåç èíôèöèðîâàíèÿ β-êëåòîê, èçó÷åí íåäîñòàòî÷íî.
Âûÿñíÿëàñü òàêæå ðîëü ìàêðîôàãîâ è ïðîäóöèðóåìûõ èìè öèòîêèíîâ â ðàçâèòèè KRVèíäóöèðîâàííîãî ÑÄ ó êðûñ DR-BB [48]. Èíàêòèâàöèÿ ìàêðîôàãîâ ëèïîñîìíûì äèõëîðìåòèëåíäèôîñôîíàòîì, êîòîðûé ñåëåêòèâíî òîêñè÷åí äëÿ
ìàêðîôàãîâ, ïî÷òè ïîëíîñòüþ ïðåäîòâðàùàåò
èíñóëèòû è ÑÄ ó òàêèõ æèâîòíûõ. Èçìåðåíèå
êîíöåíòðàöèè öèòîêèíîâ IL-12, TNF-α è IL-1β,
ïðîäóöèðóåìûõ ìàêðîôàãàìè, ñâèäåòåëüñòâóåò î
ñåëåêòèâíîì óâåëè÷åíèè èõ ýêñïðåññèè (ïîñëå
èíôèöèðîâàíèÿ KRV ìàêðîôàãîâ) â ñåëåçåíî÷íûõ ëèìôîöèòàõ è èíôèëüòðàòàõ ïàíêðåàòè÷åñêèõ îñòðîâêîâ. Ïîêàçàíî òàêæå, ÷òî ãåííàÿ ýêñïðåññèÿ IL-2 è IFN-γ, ïðîäóöèðóåìûõ Ò-êëåòêàìè CD4+, òåñíî êîððåëèðóåò ñ óâåëè÷åíèåì ãåííîé ýêñïðåññèè IL-12, â òî âðåìÿ êàê ãåííàÿ ýêñïðåññèÿ IL-4 è IL-10 íå èçìåíÿåòñÿ. Èíûìè
ñëîâàìè, íåñáàëàíñèðîâàííîñòü ìåæäó ïîäâèäàìè êëåòîê CD4+ Th1-òèïà è CD4+ Th2-òèïà, âåðîÿòíî, èãðàåò âàæíóþ ðîëü â ðàçâèòèè àóòîèììóííûõ ñâîéñòâ β-êëåòîê. Ýêñïðåññèÿ öèòîêèíîâ Th1-òèïà – IL-2 è IFN-γ – êîððåëèðóåò ñî
ñòåïåíüþ ðàçâèòèÿ àóòîèììóííîãî ÑÄ, â òî âðåìÿ êàê ýêñïðåññèÿ öèòîêèíîâ Th2-òèïà, â ÷àñòíîñòè IL-4, ñîãëàñóåòñÿ ñ ïðåäîòâðàùåíèåì áîëåçíè. Ïîâûøåíèå ýêñïðåññèè öèòîêèíîâ
Th1-òèïà, íî íå Th2-òèïà, íàáëþäàåìîå ó
KRV-èíôèöèðîâàííûõ DR-BB-êðûñ, ìîæåò áûòü
ðåçóëüòàòîì ñåëåêòèâíîãî óâåëè÷åíèÿ ýêñïðåññèè
IL-12, ïðîäóöèðóåìîãî àêòèâèðîâàííûìè ìàêðîôàãàìè.
Íåäîñòàòî÷íî ÿñíî, êàê KRV âûçûâàåò äåñòðóêöèþ β-êëåòîê áåç èõ èíôèöèðîâàíèÿ.  ñâÿçè ñ ýòèì áûëà ïðåäëîæåíà ãèïîòåçà ìîëåêóëÿðíîé ìèìèêðèè, à èìåííî: ñóùåñòâîâàíèå îáùèõ
ýïèòîïîâ ìåæäó KRV-ñïåöèôè÷íûì ïåïòèäîì è
àóòîàíòèãåíîì β-êëåòîê êàê îñíîâàíèÿ äëÿ èíèöèàöèè ñïåöèôè÷íîãî àóòîèììóííîãî ÑÄ [32,
48]. Ïðåäïîëàãàåòñÿ, ÷òî ïðè âîâëå÷åíèè ìîëåêóëÿðíîé ìèìèêðèè â èíèöèàöèþ ñïåöèôè÷íîé
àóòîèììóííîñòè β-êëåòîê àíòèãåíñïåöèôè÷íûå
ê ýòîìó âèðóñó Ò-êëåòêè áóäóò ïåðåêðåñòíî âçàèìîäåéñòâîâàòü ñ β-êëåòêàìè è àòàêîâàòü èõ, ÷òî
ïðèâåäåò ê ðàçâèòèþ èíñóëèòîâ è, ñîîòâåòñòâåííî, ê ÑÄ.
Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ýòîé ãèïîòåçû áûë èñïîëüçîâàí ðåêîìáèíàíòíûé âèðóñ âàêöèíû (rVV),
ýêñïðåññèðóþùèé áåëêè KRV. Äèêèé øòàìì ýòîãî âèðóñà íå èíäóöèðóåò èíñóëèòû èëè ÑÄ ó
DR-BB-êðûñ [32], à rVV èñïîëüçîâàëè â äàííîì
ñëó÷àå êàê òðàíñïîðòíîå ñðåäñòâî äëÿ ýêñïðåññèè
÷óæåðîäíûõ áåëêîâ, êîòîðûå èíäóöèðóþò ãóìîðàëüíûå è êëåòî÷íûå èììóííûå îòâåòû [72–74].
Áûë ñêîíñòðóèðîâàí rVV, ýêñïðåññèðîâàâøèé
KRV-ïåïòèäû – VP1 è VP2 – è íåñòðóêòóðíûé
âèðóñíûé áåëîê. Ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ òàêèì
âèðóñîì ó êðûñ DR-BB ýêñïðåññèðóþòñÿ âñå âèðóñíûå ïåïòèäû, îáðàçóþòñÿ Ò-êëåòêè, ñïåöèôè÷íûå ê òàêèì ïåïòèäàì, è èíäóöèðóþòñÿ ñîîòâåòñòâóþùèå àíòèòåëà. Îäíàêî íè ó îäíîé èç
òàêèõ êðûñ íå ðàçâèâàþòñÿ èíñóëèòû è ÑÄ [75].
Ýòè èññëåäîâàíèÿ ïîçâîëèëè óáåäèòüñÿ â òîì,
÷òî ìîëåêóëÿðíàÿ ìèìèêðèÿ ìåæäó ïåïòèäàìè
KRV è ñïåöèôè÷íûìè ê β-êëåòêàì àóòîàíòèãåíàìè ó DR-BB-êðûñ íå ÿâëÿåòñÿ òåì ìåõàíèçìîì, ñ ïîìîùüþ êîòîðîãî KRV èíäóöèðóåò àóòîèììóííûé ÑÄ, ñïåöèôè÷íûé ê β-êëåòêàì.
Àëüòåðíàòèâíîé ãèïîòåçîé ÿâëÿåòñÿ ïðåäïîëîæåíèå, ÷òî èíôèöèðîâàíèå KRV êðûñ DR-BB
íàðóøàåò òîíêî íàñòðîåííûé èììóííûé áàëàíñ
è àêòèâèðóåò àóòîðåàêòèâíûå Ò-êëåòêè, öèòîòîêñè÷íûå ê β-êëåòêàì, ïðèâîäÿ ê âûçûâàåìîìó
Ò-êëåòêàìè àóòîèììóííîìó ÑÄ, ñõîäíîìó ñ íàáëþäàåìûì ó DÐ-BB-êðûñ. Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ
ýòîé ãèïîòåçû Ò-êëåòî÷íûå ïîïóëÿöèè CD4+ è
CD8+ èññëåäîâàëè â ñïëåíîöèòàõ DR-BB-êðûñ
ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ èõ KRV. Îêàçàëîñü, ÷òî
êîëè÷åñòâî Ò-êëåòîê CD8+ çíà÷èòåëüíî óâåëè÷èâàåòñÿ, â òî âðåìÿ êàê Ò-êëåòîê CD4+ – ñíèæàåòñÿ, íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî êîëè÷åñòâî ýòèõ êëåòîê âîçðàñòàåò íà ïðîòÿæåíèè KRV-èíôåêöèè.
Ê òîìó æå ó KRV-èíôèöèðîâàííûõ DR-BB-êðûñ
36
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ
Вирусы
Инфекция β-клеток
Прямые
цитолитические
эффекты
Системная инфекция
Непрямые иммунные эффекты:
♦Экспрессия вирусных антигенов
♦Изменение антигенов β-клеток
♦Экспрессия цитокинов или
HLA-антигенов
-
♦Активация иммунного ответа
♦Нарушение иммунной толерантности
♦Иммунный ответ перекрестно
взаимодействует с аутоантигенами
β-клеток (молекулярная мимикрия)
Аутоиммунное β-разрушение
β-клеток
Некроз
β-клеток
Диабет
1-го типа
Ñõåìà ìåõàíèçìà âîâëå÷åíèÿ âèðóñîâ â ïàòîãåíåç äèàáåòà 1-ãî òèïà.
Ò-êëåòêè CD8+, â îòëè÷èå îò Ò-êëåòîê CD4+,
ïðåèìóùåñòâåííî ïðîëèôåðèðîâàëè. Ïðè îáðàáîòêå èíôèöèðîâàííûõ KRV êðûñ DR-BB ìîíîêëîíàëüíûìè àíòèòåëàìè ÎÕ-8 ó íèõ çíà÷èòåëüíî ñíèæàåòñÿ ðàçâèòèå ÑÄ, ÷òî óêàçûâàåò íà
òî, ÷òî Ò-êëåòêè CD8+ âîâëå÷åíû â äåñòðóêöèþ
β-êëåòîê. Áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî îáðàáîòêà DÐBB-êðûñ àíòè-NK-êëåòî÷íûìè àíòèòåëàìè íå
ïðåäîòâðàùàåò ðàçâèòèå ÑÄ, â òî âðåìÿ êàê ìîíîêëîíàëüíûìè àíòèòåëàìè ÎÕ-8 ïðåäîòâðàùàåò åãî [76]. Ïîýòîìó áîëåå âåðîÿòíî, ÷òî Ò-êëåòêè CD8+ èãðàþò îñíîâíóþ ðîëü â KRV-èíäóöèðîâàííîì ÑÄ. Îäíàêî âîçìîæíîñòü ó÷àñòèÿ â
ýòèõ ïðîöåññàõ êëåòîê-êèëëåðîâ íåëüçÿ ïîëíîñòüþ èñêëþ÷èòü, ïîñêîëüêó ìîíîêëîíàëüíûå àíòèòåëà ÎÕ-8 òàêæå ñâÿçûâàþò è êëåòêè-êèëëåðû.
Ò-êëåòêè êðûñ CD4+ ìîæíî ðàçäåëèòü íà
Th1-ïîäîáíûå T-êëåòêè CD45RC+CD4+ (ýêñïðåññèðóþò IL-1 è IFN-γ è èãðàþò âàæíóþ ðîëü â
ïðîâîäèìîì êëåòêîé èììóííîì îòâåòå) è Th2ïîäîáíûå T-êëåòêè CD45RC-CD4+ (ýêñïðåññèðóþò IL-4 è IL-10 è âàæíû äëÿ ãóìîðàëüíîãî
èììóííîãî îòâåòà) [21]. Ïîêàçàíî, ÷òî äëÿ ïîääåðæàíèÿ ïåðèôåðè÷åñêîãî ãîìåîñòàçà íåîáõîäèì
îïðåäåëåííûé èììóííûé áàëàíñ ìåæäó êëåòêàìè Th1- è Th2-òèïà. Ïðåîáëàäàíèå Th1-êëåòîê
íàä Th2-êëåòêàìè ñâÿçàíî ñ ðàçâèòèåì àóòîèììóííîãî ÑÄ 1-ãî òèïà, â òî âðåìÿ êàê ïðåîáëàäàíèå Th2-êëåòîê íàä Th1-êëåòêàìè ñâÿçàíî ñ
åãî ïðåäîòâðàùåíèåì. [77–79]. KRV-èíôåêöèÿ
DR-BB-êðûñ óâåëè÷èâàåò ýêñïðåññèþ öèòîêèíîâ
Th1-òèïà â ñïëåíîöèòàõ è ïàíêðåàòè÷åñêèõ èíôèëüòðàòàõ [48]. Ïîýòîìó âîçìîæíî, ÷òî ïðè
KRV-èíôåêöèè ó DR-BB-êðûñ ñîîòíîøåíèå ìåæäó Th1- è Th2-êëåòêàìè èçìåíÿåòñÿ.
Âåðîÿòíî, èíôèöèðîâàíèå DR-BB-êðûñ KRV
ïðèâîäèò ê ñåëåêòèâíîé àêòèâàöèè Th1-ïîäîáíûõ
T-êëåòîê CD45RC+CD4+ è CD8+. Â ñâÿçè ñ ýòèì
áûëè ïðîâåäåíû èññëåäîâàíèÿ ñ öåëüþ âûÿñíåíèÿ, áóäóò ëè ýòè ñåëåêòèâíî àêòèâèðîâàííûå
T-êëåòêè ñòèìóëèðîâàòü èíäóêöèþ àóòîèììóííîãî ÑÄ ó DÐ-BB-æèâîòíûõ. Ó 88% ðåöèïèåíòîâ T-êëåòîê CD45RC+CD4+ è CD8+ ðàçâèâàåòñÿ
àóòîèììóííûé ÑÄ. Ýòî ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì,
÷òî îíè ÿâëÿþòñÿ îñíîâíûìè ýôôåêòîðíûìè
Ò-êëåòêàìè, ñïîñîáíûìè èíäóöèðîâàòü àóòîèììóííûé ÑÄ. Ïðîâåäåííûå èññëåäîâàíèÿ ïîçâîëÿþò ñäåëàòü âûâîä, ÷òî èíôèöèðîâàíèå DR-BBêðûñ KRV âûðàæàåòñÿ â ïðåèìóùåñòâåííîé àêòèâàöèè ýôôåêòîðíûõ Th1-ïîäîáíûõ T-êëåòîê
CD45RC+CD4+ è CD8+, à òàêæå â ïîíèæåííîé
ðåãóëÿöèè Th2-ïîäîáíûõ T-êëåòîê CD45RCCD4+. Ïðè ýòîì àêòèâèðîâàííûå ýôôåêòîðíûå
Ò-êëåòêè ðàçðóøàþò β-êëåòêè. Ïîýòîìó èíôèöèðîâàíèå KRV íàðóøàåò òîíêî íàñòðîåííûé
èììóííûé áàëàíñ. Äëÿ óòî÷íåíèÿ ðîëè ýôôåêòîðíûõ Ò-êëåòîê â äåñòðóêöèè è ðàçâèòèè β-êëåòîê â îðãàíèçìå KRV-èíôèöèðîâàííûõ DR-BB-
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
37
ÎÃËßÄÈ
êðûñ íåîáõîäèìû äàëüíåéøèå èññëåäîâàíèÿ.
Íà îñíîâàíèè âûøåèçëîæåííîãî ñòàíîâèòñÿ î÷åâèäíûì, ÷òî, íåñìîòðÿ íà ãåíåòè÷åñêóþ
ïðåäðàñïîëîæåííîñòü ê ðàçâèòèþ ñàõàðíîãî äèàáåòà 1-ãî òèïà, íåãåíåòè÷åñêèå ôàêòîðû èãðàþò
ñóùåñòâåííóþ ðîëü â ýêñïðåññèè ýòîãî çàáîëåâàíèÿ. Âèðóñû, êàê îäèí èç ôàêòîðîâ îêðóæàþùåé ñðåäû, ìîãóò áûòü âîâëå÷åíû â ïàòîãåíåç
äèàáåòà 1-ãî òèïà íå ìåíåå ÷åì äâóìÿ ðàçëè÷íûìè ïóòÿìè (ñõåìà):
Âî-ïåðâûõ, îíè ìîãóò íåïîñðåäñòâåííî èíôèöèðîâàòü è ðàçðóøàòü β-êëåòêè, à âî-âòîðûõ, –
óïðàâëÿòü àóòîèììóííîñòüþ, ðåãóëèðóÿ èõ äåñòðóêöèþ. Òàê, âèðóñ ÝMÊ-D ÿâëÿåòñÿ ïåðâè÷íûì àãåíòîì, ñåëåêòèâíî ïîâðåæäàþùèì β-êëåòêè, à KRV – ôàêòîðîì, óïðàâëÿþùèì àóòîèììóííîñòüþ, ñïåöèôè÷íîé ê β-êëåòêàì, êîòîðàÿ
âûçûâàåò ðàçâèòèå ÑÄ 1-ãî òèïà áåç ïðÿìîãî
èíôèöèðîâàíèÿ β-êëåòîê.
 ýòîì îáçîðå ìû ïîïûòàëèñü íà îñíîâàíèè äàííûõ ëèòåðàòóðû ñóììèðîâàòü ðîëü âèðóñîâ â ïàòîãåíåçå ÑÄ 1-ãî òèïà. Âñå ðàññìîòðåííûå âèðóñû àññîöèèðóþòñÿ ñ ðàçâèòèåì àóòîèììóííîãî äèàáåòà, íî ìåõàíèçìû èõ äåéñòâèÿ ìîãóò áûòü ðàçëè÷íûìè. Âèðóñû ñïîñîáíû íå òîëüêî
âûçûâàòü äèàáåò, íî è ïðåäîòâðàùàòü åãî ó æèâîòíûõ, ñêëîííûõ ê àóòîèììóííîìó äèàáåòó.
Íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî âèðóñû, áåçóñëîâíî,
ñïîñîáíû âûçûâàòü äèàáåò ó æèâîòíûõ (ÝÌÊ-D-âèðóñèíäóöèðîâàííûé äèàáåò ó ìûøåé, KRV-âèðóñèíäóöèðîâàííûé äèàáåò ó DR-BB-êðûñ è äð.),
íåò ïðÿìûõ äîêàçàòåëüñòâ, ÷òî îíè ÿâëÿþòñÿ
íåïîñðåäñòâåííîé ïðè÷èíîé çàáîëåâàíèÿ ó ÷åëîâåêà.
Îäíàêî íå èñêëþ÷åíî, ÷òî â áóäóùåì áóäóò
îòêðûòû íîâûå ìåõàíèçìû ðàçâèòèÿ âèðóñèíäóöèðîâàííîãî äèàáåòà 1-ãî òèïà ó ÷åëîâåêà. Èññëåäîâàíèÿ ïàöèåíòîâ â ïðåääèàáåòè÷åñêîì ñîñòîÿíèè, à òàêæå ñ ãåíåòè÷åñêîé ïðåäðàñïîëîæåííîñòüþ ê ðàçâèòèþ âèðóñèíäóöèðîâàííîãî
äèàáåòà 1-ãî òèïà äàñò âîçìîæíîñòü ëó÷øå ïîíÿòü åãî ýòèîëîãèþ ó ÷åëîâåêà.
disposition, being the major component for the development of this type of diabetes, nongenetic factors
also play an important role in the disease development. Among these factors viruses are implicated in
the pathogenesis of TID. Basing on the literature
data we have attempted to elucidate possible role of
viruses in TID pathogenesis. Viruses may be involved in the TID pathogenesis in at least two distinct mechanisms. Firstly, viruses may trigger β-cellspecific autoimmunity with or without direct infection of β-cells. Secondly, viruses may directly infect
and destroy β-cells resulting in TID. Moreover viruses not only cause diabetes, but also may prevent
from the disease in animals susceptible to diabetes.
Further studies are necessary to understand the
mechanisms of the pathogenesis of human virusinduced TID.
K e y w o r d s: type I diabetes, viruses, pancreatic β-cells, pathogenesis.
Type 1 diabetes (TID) results from the destruction of pancreatic β-cells. In spite of genetic pre-
1. Atkinson M. A., McLaren N. K. // N. Engl. J.
Med. 1994. 331. Ð. 1428–1436.
2. Bach J. F. // J. Autoimmun. 1995. 8. Ð. 439–463.
3. Rossini A. A., Greiner D. L., Friedman H. P.,
Mordes J. P. // Diabetes Rev. 1993. 1. Ð. 43–75.
4. Tisch R., McDevitt H. // Cell. 1996. 85. Ð. 291–
297.
5. Yoon J. W. Textbook of Diabetes / Eds. J. Pickup,
G. Williams. Blackwell Scientific Publications.
London. 1997. Ð. 14.1–14.14.
6. Platz P., Jacobsen B. K., Morling M. //
Diabetologia. 1981. 21. Ð. 108–115.
7. Horn G., Bugawa T., Long C., Erlich H. //
Proc. Natl Acad. Sci USA. 1988. 85. Ð. 6012–
6016.
8. Barnett A. H., Eff C., Leslie R. D., Pyke D. A. //
Diabetologia. 1981. 20. Ð. 87–93.
9. Yoon J. W., Kim A. M., Jun H. S. Diabetes in
the new millenium. Endocrinology and diabetes
/ Ed. J. R. Turtle. Research Foundation of the
University of Sydney, Sydney. Australia. 1999.
P. 105–117.
10. Notkins A. L., Yoon J. W., Onodera T., Jenson A. B.
// Perspectives Virol. 1981. 11. Ð. 141–162.
11. Champsaur H. F., Bottazzo G. F., Bertrams J. et
al. // J. Pediatrics. 1982. 100. Ð. 15–20.
12. Szopa T. M., Titchener P. A., Portwood N. D.,
Taylor K. W. // Diabetologia. 1993. 36. Ð. 687–
695.
13. Gladisch R., Hoffmann W., Waldherr R. // Z.
kardiol. 1976. 65. Ð. 837–849.
14. Ginsberg-Fellner F., Witt M. E., Yagihaski S. //
Diabetologia. 1984. 27. Ð. 87–89.
15. Gamble D. R. // B. M. J. 1980. 2. Ð. 99–101.
16. Helmke K., Otten A., Willems W. // Lancet.
1980. Ð. 211–212.
38
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
VIRUSES AS ETIOLOGICAL FACTOR
OF TYPE 1 DIABETES. MODELLING
ON THE ANIMALS
T. M. Kuchmerovska1, A. V. Karpov2,
G. V. Donchenko1
1
Institute of Biochemistry, National Academy
of Sciences of Ukraine, Kyiv;
2
National University of Food Technologies, Kyiv;
e-mail: [email protected]
Summary
Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ
17. Yasumoto N., Hara M., Kitamoto Y. U. et al. //
Intern. Med. 1992. 31. Ð. 426–430.
18. Surcel H. M., Ilonen J., Kaar M. L. et al. //
Acta Pediatr. Scand. 1988. 77. Ð. 471–474.
19. Jali M. V., Shankar P. S. // J. Assoc. Physicians
India. 1990. 38. Ð. 663–664.
20. Staighead J. E., McLane M. F. // Science. 1968.
162. Ð. 913–915.
21. Yoon J. W., McClintock P. R., Onodera T.,
Notkins A. L. // J. Exp. Med. 1980. 152. Ð. 878–
892.
22. Yoon J. W., Morishima T., McClintock P. R. et
al. // J. Virol. 1984. 50. P. 684–690.
23. Onodera T., Jenson A. B., Yoon J. W., Notkins A. L.
// Science. 1978. 301. P. 529–531.
24. Suenaga K., Yoon J. W. // Diabetes. 1988. 37.
P. 1722–1726.
25. Gaskins H., Prochazka M., Hamguchi K. et al.
// Clin. Invest. 1992. 90. P. 2220–2227.
26. Yoon J. W., Onodera T., Notkins A. L. // J.
Exp. Med. 1978. 148. P. 1068–1080.
27. Hou J., Sheikh S., Martin D. L., Chatterjee N. K.
// J. Autoimmun. 1993. 6. P. 529–542.
28. Yoon J. W., London W. T., Curfman B. L. et al.
// Diabetes. 1986. 35. P. 712–716.
29. Barboni E., Manocchio I., Asdrubali G. // Arch.
Vet. Ital. 1966. 17. Ð. 362–368.
30. Menser M. A., Forrest J. M., Bransby R. D. //
Lancet. 1978. Ð. 57–60.
31. Tajima M., Yazawa T., Hagiwara K. et al. //
Zentralbl. Veterinarmed. 1992. 39. Ð. 616–620.
32. Guberski D. L., Thomas V. A., Shek W. R. et al.
// Science. 1991. 254. Ð. 1010–1013.
33. Bach J. F. // Endocr. Rev. 1994. 15. Ð. 516–542.
34. Baum H. // Biochim. Biophys. Acta. 1995. 1271.
Ð. 111–121.
35. Barnett L. A., Fujinami R. S. // FASEB J. 1992.
6. Ð. 840–844.
36. Gianani R., Servetnick N. // Proc. Natl. Acad.
Sci. USA. 1996. 93. Ð. 2257–2259.
37. Oldstone M. B. A. // Cell. 1987. 50. Ð. 819–
820.
38. Miller J. F. A. P. // Immunologist. 1993. 1.
Ð. 9–13.
39. Sprent J., Webb S. // Curr. Opin. Immunol.
1995. 7. P. 196–205.
40. Lobse A. W., Dinkelmann M., Kimmig M. et al.
// J. Autoimmun. 1996. 9. P. 667–675.
41. Wacherpfennig K. W., Strominger J. L. // Cell.
1995. 80. P. 695–705.
42. Oldstone M. B. A., Nerenberg M., Southem P.,
Lewicki H. // Ibid. 1991. 65. P. 319–331.
43. Ohashi P., Oehen S., Buerki K. et al. // Ibid.
1991. 65. P. 305–317.
44. Oldstone M. B. // FASEB J. 1998. 12. P. 1255–
1265.
45. Dyrberg T., Schwimmbeck P. L., Oldstone M. B. A.
// J. Clin. Invest. 1988. 81. P. 928–931.
46. Wilberz S., Partke H. J., Dagnaes-Hansen F.,
Herberg L. // Diabetologia. 1991. 34. P. 2–5.
47. Yoon J. W., Rodrigues M. M., Currier C.,
Notkins A. // Nature. 1982. 296. P. 566–569.
48. Chung Y. H., Jun H. C., Hirasawa K. et al. // J.
Immunol. 1997. 159. P. 466–471.
49. Chung Y. H., Jun H. C., Son M. et al. // Ibid.
2000. 165. P. 2866–2876.
50. Ross M. E., Onodera T., Brown K. S.,
Notkins A. L. // Diabetes. 1976. 25. P. 190–197.
51. Bae Y. S., Eun H. M., Yoon J. W. // Virology.
1989. 170. P. 282–287.
52. Bae Y. S., Yoon J. W. // Diabetes. 1993. 42.
P. 435–443.
53. Jun H. C., Kang Y., Notkins A. L., Yoon J. W.
// J. Virol. 1997. 71. P. 9782–9785.
54. Eun H. M., Bae Y. S., Yoon J. W. // Virology.
1988. 163. P. 369–373.
55. Kaptur P. E., Thomas D. C., Giron D. J. //
Diabetes. 1989. 38. P. 1103–1108.
56. Yun H. S., Kang H. S., Kim K. H. et al. // Ibid.
1998. 47. P. 576–582.
57. Onodera T., Yoon J. W., Brown K. S., Notkins A. L.
// Nature. 1978. 274. P. 693–696.
58. Kang Y., Yoon J. W. // J. Gen. Virol. 1993. 74.
P. 1207–1213.
59. Yoon J. W., McClintock P. R., Bachurski C. J.
et al. // Diabetes. 1985. 34. P. 922–925.
60. Baek H. S., Yoon J. W. // J. Virol. 1990. 64.
P. 5708–5715.
61. Baek H. S., Yoon J. W. // Diabetes. 1991. 40.
P. 1586–1597.
62. Hirasawa K., Jun H. S., Han H. S. et al. // J.
Virol. 1999. 73. P. 8541–8548.
63. Hirasawa K., Jun H. S., Maeda K. et al. // Ibid.
1997. 71. P. 4024–4031.
64. Febsel K., Jalowy A., Sun Q. et al. // Diabetes.
1993. 42. P. 496–500.
65. Rabinovitch A. // Ibid. 1994. 43. P. 613–621.
66. Kaneto H., Fujii J., Seo H. G. et al. // Ibid.
1995. 44. P. 733–738.
67. Firestein G. S., Yeo M., Zvaifler N. J. // J. Clin.
Invest. 1995. 96. P. 1631–1638.
68. Marliss E. B. // Metab. Clin. Exp. 1983. 32
(Suppl. 1). P. 1–166.
69. Doukas J., Mordes J. P., Swymmer C. et al. //
Amer. J. Pathol. 1994. 145. P. 1517–1525.
70. Greiner D. L., Mordes J. P., Handler E. S. et al.
// J. Exp. Med. 1987. 166. P. 461–475.
71. Ellerman K. E., Richards C. A., Guberski D. L.
et al. // Diabetes. 1996. 45. P. 557–562.
72. Hany M., Oehen S., Schulz M. et al. // Eur. J.
Immunol. 1989. 19. P. 417–424.
73. Sutter G., Wyatt L. S., Foley P. L. et al. //
Vaccine. 1994. 12. P. 1032–1040.
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1
39
ÎÃËßÄÈ
74. Moss B. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996.
93. P. 11341–11348.
75. Ellerman K. E., Wrobleski M., Rabinovitch A.,
Like A. // Diabetologia. 1993. 36. P. 596–601.
76. Fowell D., McKnight A. J., Powrie F. et al. //
Immunol. Rev. 1991. 123. P. 37–64.
77. Rabinovitch A., Suarez-Pinzon W. L., Shi Y.,
Morgan A. R. et al. // Diabetologia. 1994. 37.
P. 733–738.
78. Liblau R. S., Singer S. M., McDevitt H. O. //
Immunol. Today. 1995. 16. P. 34–38.
79. Delovitch T., Singh B. // Immunity. 1997. 7.
P. 727–738.
Ïîëó÷åíî 04.02.2004
40
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1