ХИМИЯ ПРИРОДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ СИНТЕЗ И СВОЙСТВА

352
ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 1998. Ò. 39. ¹ 5
ÕÈÌÈß ÏÐÈÐÎÄÍÛÕ ÑÎÅÄÈÍÅÍÈÉ
ÓÄÊ 615.332.038
CÈÍÒÅÇ È ÑÂÎÉÑÒÂÀ ÍÅÊÎÒÎÐÛÕ N-ÀÖÈËÜÍÛÕ
ÏÐÎÈÇÂÎÄÍÛÕ ÀÍÒÈÁÈÎÒÈÊÀ-ÃËÈÊÎÏÅÏÒÈÄÀ
ÐÈÑÒÎÌÈÖÈÍÀ À
È.Â. Äåíèñîâà, È.Ã. Ñìèðíîâà, Ò.Ô. Áåðäíèêîâà* , Ã.Ñ. Êàòðóõà*
(êàôåäðà õèìèè ïðèðîäíûõ ñîåäèíåíèé)
Ïðîâåäåíà ñïåöèôè÷åñêàÿ õèìè÷åñêàÿ ìîäèôèêàöèÿ ñâîáîäíûõ àìèíîãðóïï ìîëåêóëû àíòèáèîòèêà – ãëèêîïåïòèäà ðèñòîìèöèíà À îñòàòêàìè æèðíûõ êèñëîò:
ýíàíòîâîé (Ñ7Í14Î2), ìèðèñòèíîâîé (Ñ14Í28Î2), ïàëüìèòèíîâîé (Ñ16Í32Î2). Ïîëó÷åíû ñîîòâåòñòâóþùèå ìîíî- è äè-N-àöèëüíûå ïðîèçâîäíûå àíòèáèîòèêà. Èçó÷åíû èõ ôèçèêî-õèìè÷åñêèå è áèîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà.
Íàñòîÿùàÿ ðàáîòà ÿâëÿåòñÿ ïðîäîëæåíèåì èññëåäîâàíèé ïî íàïðàâëåííîé õèìè÷åñêîé ìîäèôèêàöèè
êëèíè÷åñêîãî àíòèáèîòèêà ðèñòîìèöèíà À (ðèñòîöåòèíà À) [1–4] . Ðèñòîìèöèí À ïîëó÷åí â ÍÈÈ ïî èçûñêàíèþ íîâûõ àíòèáèîòèêîâ ÐÀÌÍ [5, 6], îòíîñèòñÿ ê
àíòèáèîòèêàì ãðóïïû äàëáàãåïòèäîâ [7, 8] è ïðèìåíÿåòñÿ â ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå ïðè ëå÷åíèè îñòðûõ áàêòåðèàëüíûõ èíôåêöèé, âûçâàííûõ ãðàìïîëîæèòåëüíûìè áàêòåðèÿìè – ñòàôèëîêîêêàìè, ñòðåïòîêîêêàìè è
ýíòåðîêîêêàìè, â òîì ÷èñëå è îáëàäàþùèìè óñòîé÷èâîñòüþ ê β-ëàêòàìíûì àíòèáèîòèêàì, òåòðàöèêëèíàì è
ìàêðîëèäàì. Àíòèáèîòèêè-äàëáàãåïòèäû îáëàäàþò óíèêàëüíîé ñïîñîáíîñòüþ âîçäåéñòâîâàòü íà áàêòåðèè, êîòîðàÿ çàêëþ÷àåòñÿ â èíãèáèðîâàíèè áèîñèíòåçà êëåòî÷íîé ñòåíêè áàêòåðèé ïóòåì ñâÿçûâàíèÿ ñ D-Ala-DAla-OH – ôðàãìåíòîì ðàñòóùåãî ïåïòèäîãëèêàíà [9,
10]. Â ïîñëåäíåå âðåìÿ îáíàðóæåíû ðåçèñòåíòíûå ê
äàëáàãåïòèäàì øòàììû áàêòåðèé, â ïåïòèäîãëèêàíàõ
*ÍÈÈ ïî èçûñêàíèþ íîâûõ àíòèáèîòèêîâ ÐÀÌÍ (Ìîñêâà) .
êëåòî÷íîé ñòåíêè êîòîðûõ âìåñòî ôðàãìåíòà D-Ala-DAla-OH ïðèñóòñòâóåò ôðàãìåíò D-Ala-D-Lactat [11],
êîòîðûé ïðàêòè÷åñêè íå ñâÿçûâàåòñÿ ñ àíòèáèîòèêàìè
ðàññìàòðèâàåìîé ãðóïïû, è áàêòåðèÿ ïðîäîëæàåò ñâîé
æèçíåííûé öèêë. Îïàñíîñòü øèðîêîãî ðàñïðîñòðàíåíèÿ ðåçèñòåíòíûõ êî ìíîãèì àíòèáèîòèêàì øòàììîâ
áîëåçíåòâîðíûõ áàêòåðèé òðåáóåò ðàçâèòèÿ èññëåäîâàíèé ïî âûÿñíåíèþ ìåõàíèçìà ðåçèñòåíòíîñòè è ïîèñêà
ñîåäèíåíèé, ïðåîäîëåâàþùèõ ðåçèñòåíòíîñòü. Îäíèì
èç ïîäõîäîâ ê ðåøåíèþ äàííîé çàäà÷è ÿâëÿåòñÿ íàïðàâëåííàÿ õèìè÷åñêàÿ ìîäèôèêàöèÿ àíòèáèîòèêî⠖
äàëáàãåïòèäîâ âàíêîìèöèíîâîé è ðèñòîìèöèíîâîé
ãðóïï [12].
Èçâåñòíî, ÷òî ââåäåíèå â ìîëåêóëó ãëèêîïåïòèäîâ
ãèäðîôîáíûõ ðàäèêàëîâ îïðåäåëåííîãî ðàçìåðà âûçûâàåò íå òîëüêî ïðåîäîëåíèå ðåçèñòåíòíîñòè, íî è ðàñøèðåíèå ñïåêòðà äåéñòâèÿ àíòèáèîòèêà [13–15]. Ïîýòîìó â äàííîé ðàáîòå èçó÷åíà âîçìîæíîñòü ïîëó÷å-
ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 1998. Ò. 39. ¹ 5
íèÿ àöèëüíûõ ïðîèçâîäíûõ ïî ñâîáîäíûì àìèíîãðóïïàì ðèñòîìèöèíà À ñ èñïîëüçîâàíèåì àêòèâèðîâàííûõ ïåíòàôòîðôåíèëîâûõ ýôèðîâ æèðíûõ êèñëîò ñ
ðàçëè÷íûì ÷èñëîì óãëåðîäíûõ àòîìîâ.
 ðàáîòå èñïîëüçîâàëè ýíàíòîâóþ (Ñ6Í13ÑÎÎÍ),
ìèðèñòèíîâóþ (Ñ 13 Í 27 ÑÎÎÍ) è ïàëüìèòèíîâóþ
(Ñ15Í31ÑÎÎÍ) êèñëîòû. Äëÿ àêòèâàöèè êàðáîêñèëüíîé ãðóïïû ïîëó÷àëè ïåíòàôòîðôåíèëîâûå ýôèðû
æèðíûõ êèñëîò ïî ìîäèôèöèðîâàííîé ìåòîäèêå [16]
ñ ïðèìåíåíèåì äèöèêëîãåêñèëêàðáîäèèìèäà (ÊÄÈ).
Àêòèâèðîâàííûå ýôèðû æèðíûõ êèñëîò ââîäèëè â ðåàêöèþ ñ àíòèáèîòèêîì ðèñòîìèöèíîì â ïðèñóòñòâèè
N-ìåòèëìîðôîëèíà â ñìåñè ÄÌÔÀ – Í2Î ïðè 37 ° Ñ.
Êîíòðîëü çà õîäîì ðåàêöèè îñóùåñòâëÿëè ñ ïîìîùüþ
ýëåêòðîôîðåçà íà áóìàãå â ýëåêòðîëèòå (ðÍ 1.1). Èçâåñòíî, ÷òî ðèñòîìèöèí ñîäåðæèò äâå ñâîáîäíûå àìèíîãðóïïû: àìèíîãðóïïó N-êîíöåâîé ðèñòîìèöèíîâîé
êèñëîòû è àìèíîñàõàðà ðèñòîçàìèíà, ñâÿçàííîãî ñ àãëèêîíîì ÷åðåç β-îêñèãðóïïó òðåõÿäåðíîé äèäåõëîðâàíêîìèöèíîâîé êèñëîòû [6].
 çàâèñèìîñòè îò êîëè÷åñòâà ââîäèìîãî â ðåàêöèþ àêòèâèðîâàííîãî ýôèðà íàáëþäàëîñü îáðàçîâàíèå
ëèáî äè-N,N '-àöèëüíîãî ïðîèçâîäíîãî ðèñòîìèöèíà À,
ëèáî ñìåñè ìîíî-N-, äè-N,N '-àöèëüíûõ ïðîèçâîäíûõ
è ñâîáîäíîãî ðèñòîìèöèíà À. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ èíäèâèäóàëüíûõ êîìïîíåíòîâ ðåàêöèîííóþ ñìåñü ðàçäåëÿëè
ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ÒÑÕ íà ñèëèêàãåëå â ñèñòåìå I –
í.-áóòàíîë – ÍÑÎÎÍ –Í2Î (4:1:1).
Îäíîðîäíîñòü ïîëó÷åííûõ N-àöèëüíûõ ïðîèçâîäíûõ ðèñòîìèöèíà À ïðîâåðÿëè ìåòîäîì ÒÑÕ íà ñèëèêàãåëå â ñèñòåìå II – ýòèëàöåòàò – èçî-ïðîïàíîë –
25%-é àììèàê (15:15:20), à àíòèáàêòåðèàëüíóþ àêòèâíîñòü in vitro – ìåòîäîì áèîàâòîãðàôèè ñ èñïîëüçîâàíèåì â êà÷åñòâå òåñò-îðãàíèçìà Bacillus subtilis
ATCC 6633.
Áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ïîëó÷åííûå ìîíî-N-àöèëüíûå ïðîèçâîäíûå ðèñòîìèöèíà À îáëàäàþò àíòèáàêòåðèàëüíîé àêòèâíîñòüþ â îòíîøåíèè âûáðàííîãî òåñòîðãàíèçìà. Ïðè÷åì íàèáîëüøóþ àêòèâíîñòü èìååò ðèñòîìèöèí À , àöèëèðîâàííûé ýíàíòîâîé êèñëîòîé.
Äè-N,N'-àöèëüíûå ïðîèçâîäíûå ðèñòîìèöèíà À ïðàêòè÷åñêè íåàêòèâíû, âîçìîæíî, âñëåäñòâèå èõ ïëîõîé
ðàñòâîðèìîñòè â èñïûòàííûõ âîäíî-îðãàíè÷åñêèõ
ñðåäàõ.
 äàëüíåéøåì ïðåäïîëàãàåòñÿ ïðîäîëæèòü ðàáîòó
ïî ïîëó÷åíèþ íîâûõ N-àöèëüíûõ ïðîèçâîäíûõ ðèñòîìèöèíà À , à òàêæå èçó÷åíèþ èõ áèîëîãè÷åñêèõ
ñâîéñòâ â îïûòàõ in vitro è in vivo è êîìïëåêñîîáðàçîâàíèÿ ñ Ñ-êîíöåâûì ôðàãìåíòîì ðàñòóùåãî ïåïòèäîãëèêàíà áàêòåðèàëüíîé ñòåíêè N-Ac-D-Ala-D-Ala-OH.
353
Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ ÷àñòü
 ðàáîòå èñïîëüçîâàëè îáðàçöû ðèñòîìèöèíà À
ñóëüôàòà, ïîëó÷åííîãî íà îïûòíîé óñòàíîâêå ÍÈÈ ïî
èçûñêàíèþ íîâûõ àíòèáèîòèêîâ ÐÀÌÍ (λ max 280 íì,
1%
Å = 40, [a] 20D = –131° (ñ1, âîäà); àëèôàòè÷åñêèå êèñëîòû, ïåíòàôòîðôåíîë, äèöèêëîãåêñèëêàðáîäèèìèä è
ïëàñòèíêè ñ ñèëèêàãåëåì ôèðìû «Merck» (Ãåðìàíèÿ)).
ÒÑÕ ïðîâîäèëè â ñèñòåìàõ: í-áóòàíîë – ÍÑÎÎÍ
– âîäà (4:1:1) (I), ýòèëàöåòàò – èçî-ïðîïàíîë – 25%-é
àììèàê (15:15:20) (II), áåíçîë – ãåêñàí (1:1) (III).
Ýëåêòðîôîðåç ïðîâîäèëè íà ïðèáîðå, ðàáîòàþùåì ïî ïðèíöèïó âëàæíîé êàìåðû Äóððîìà (áóìàãà
Filtrak FN-14 (Ãåðìàíèÿ), ýëåêòðîëèò ÍÑÎÎÍ –
ÑÍ3ÑÎÎÍ – Í2Î (28:20:52), 300 Â, 3 ÷).
Ýëåêòðîôîðåòè÷åñêóþ ïîäâèæíîñòü âåùåñòâ (U)
îïðåäåëÿëè ïî ôîðìóëå
2
–1
–1
U = d . l / V. t ( ñì . . ÷ ) ,
ãäå d – ðàññòîÿíèå, ïðîéäåííîå âåùåñòâîì îò òî÷êè
íàíåñåíèÿ (ñì) , l – äëèíà ïîëîñêè áóìàãè (ñì), V –
íàïðÿæåíèå (Â), t – âðåìÿ ýëåêòðîôîðåçà (÷).
Àêòèâèðîâàííûå ýôèðû îáíàðóæèâàëè íà ïëàñòèíêàõ ïî ïîãëîùåíèþ â ÓÔ-ñâåòå è ñ ïîìîùüþ êà÷åñòâåííûõ ðåàêöèé (ãèäðîêñàìîâîé è ñ èíäèêàòîðîì
áðîìòèìîëîâûì-ñèíèì). Ðèñòîìèöèí è åãî ïðîèçâîäíûå îáíàðóæèâàëè ïî ïîãëîùåíèþ â ÓÔ-ñâåòå, à òàêæå ñ ïîìîùüþ äèàçîðåàêöèè Ïàóëè è íèíãèäðèíîâîãî
ðåàêòèâà [17].
Ñèíòåç àêòèâèðîâàííûõ ýôèðîâ
æèðíûõ êèñëîò
Ïåíòàôòîðôåíèëîâûé ýôèð ïàëüìèòèíîâîé
êèñëîòû. Ê ðàñòâîðó 1.282 ã ïàëüìèòèíîâîé êèñëîòû â ñìåñè äèîêñàí (25 ìë) è ÑH2Cl2 (15 ìë) ïðèáàâèëè 0.924 ã ïåíòàôòîðôåíîëà è ðàñòâîð 1.03 ã ÊÄÈ
â 10 ìë äèîêñàíà. Ñìåñü ïåðåìåøèâàëè â òå÷åíèå20 ÷
ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå, îòôèëüòðîâûâàëè îñàäîê
äèöèêëîãåêñèëìî÷åâèíû, ðàñòâîð óïàðèâàëè è îñòàòîê
ðàñòâîðÿëè â ýòèëàöåòàòå. Ýòèëàöåòàòíûé ðàñòâîð ïðîìûâàëè íåñêîëüêî ðàç 3%-ì âîäíûì ðàñòâîðîì áèêàðáîíàòà íàòðèÿ, âûñóøèâàëè áåçâîäíûì Na2SO4 è óïàðèâàëè â âàêóóìå. Âûõîä 60 %. Ñ22Í31Î2F5. Ì = 422,
Òïë= 39–40°Ñ, Rf = 0.92 (I), 0.56 (II) è 0.60 (III).
Ïåíòàôòîðôåíèëîâûé ýôèð ìèðèñòèíîâîé
êèñëîòû ïîëó÷åí ïî àíàëîãè÷íîé ìåòîäèêå. Âûõîä
60 %. C 20H 27O 2F5 . M = 394. Òïë = 37–40 °Ñ, Rf = 0.94
(I), 0.50 (II) è 0.55 (III).
354
ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 1998. Ò. 39. ¹ 5
Ïåíòàôòîðôåíèëîâûé ýôèð ýíàíòîâîé êèñëîòû ïîëó÷åí ïî îïèñàííîé âûøå ìåòîäèêå. Âûõîä
18 %. C 13H 13O 2 F 5. M= 296. Ò ïë= 25–28 ° Ñ, Rf = 0.97
(I), 0.48 (II) è 0.54 (III).
Ñèíòåç N-àöèëüíûõ ïðîèçâîäíûõ
ðèñòîìèöèíà À
Ê ðàñòâîðó 83 ììîëü ðèñòîìèöèíà À ñóëüôàòà â
0.5 ìë âîäû ïðèáàâèëè ïî êàïëÿì N-ìåòèëìîðôîëèí
äî ðÍ 9.0, à çàòåì ðàñòâîð 46 ììîëü àêòèâèðîâàííîãî
ýôèðà â 1.0 ìë ÄÌÔÀ. Ðåàêöèîííóþ ñìåñü ïåðåìåøèâàëè â òå÷åíèå 18–20 ÷ ïðè 37°Ñ, ïðîäóêò ðåàêöèè
îñàæäàëè àöåòîíîì, îñàäîê ïðîìûâàëè àöåòîíîì, ðàñòâîðÿëè â ñèñòåìå I è õðîìàòîãðàôèðîâàëè íà ïëàñòèíêàõ 20×20 ñì ñ êèçåëüãåëåì «Merck-60-F254» (Ãåðìàíèÿ) â òîé æå ñèñòåìå. Ìåñòîïîëîæåíèå ïðîèçâîäíûõ íà ïëàñòèíêå îïðåäåëÿëè ïî ïîãëîùåíèþ â
ÓÔ-ñâåòå, ñèëèêàãåëü, ñîäåðæàùèé ïðîèçâîäíîå àíòèáèîòèêà, ñîáèðàëè íà ôèëüòð è âåùåñòâî ýëþèðîâàëè
80%-ì ñïèðòîì. Ýëþàò óïàðèâàëè â âàêóóìå è ïðîâîäèëè àíàëèç ïîëó÷åííîãî N-àöèëüíîãî ïðîèçâîäíîãî
ðèñòîìèöèíà À . Ïîëó÷åíû ñëåäóþùèå N-àöèëüíûå
ïðîèçâîäíûå ðèñòîìèöèíà À:
ÑÏÈÑÎÊ ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ
1. Êàòðóõà Ã.Ñ., Òðèôîíîâà Æ.Ï., Ñìèðíîâà È.Ã., Åãàíÿí Å.Ð.,
Ñìåÿíîâà Ã.È. Òåç. äîêë. Âñåñîþç. ñèìïîç. «Ïåðñïåêòèâû
áèîîðãàíè÷åñêîé õèìèè â ñîçäàíèè íîâûõ ëåêàðñòâåííûõ
ïðåïàðàòîâ». ã.Ðèãà, 1982. Ñ. 46.
2. Ñìèðíîâà È.Ã., Òðèôîíîâà Æ.Ï., Ñìåÿíîâà Ã.È., Ôåäîðîâà
Ã.Á., Êàòðóõà Ã.Ñ. Àíòèáèîòèêè è ìåäèöèíñêàÿ áèîòåõíîëîãèÿ. 1986. 31. Ñ. 588.
3. Òðèôîíîâà Æ.Ï., Ñòóðìàí Í.Â., Êàòðóõà Ã.Ñ.,Ôåäîðîâà Ã.Á.//
Àíòèáèîòèêè è õèìèîòåðàïèÿ. 1988. 33. Ñ. 814.
4. Kobrin M.B., Katrukha G.S., Fedorova G.B. // J. Antibiotics.
1989. 42. C. 1441.
5. Ëîìàêèíà Í.Í. Äèñ. ... äîêò. õèì. íàóê. Ì., 1969.
6. Ëîìàêèíà Í.Í., Êàòðóõà Ã.Ñ., Áðàæíèêîâà Ì.Ã., Ñèëàåâ À.Á.,
Òðèôîíîâà Æ.Ï., Äèàððà Á. // Àíòèáèîòèêè. 1982. 27. Ñ. 8.
Ìîíî-N-ýíàíòîèë-ðèñòîìèöèí À
C 102 H 121 N 8 O 45 . M = 2178, R f = 0.09 (I), 0.84 (II),
U = 0.49.
7. Katrukha G.S., Silaev A.B. / Chemistry of Peptides and
Proteins. Vol. 3. 1986. Ð. 289.
8. Cavalleri B., Parenti F. Glycopeptides (dalbaheptides).
Encyclopedia of Chem. Technology. 4/e. Vol. 2. 1992. P. 995.
Äè-N,N '-ýíàíòîèë-ðèñòîìèöèí À
Ñ 109 H 133 N 8 O 46 . M = 2290, R f = 0.20 (I), 0.86 (II),
U = 0.
Ìîíî-N-ìèðèñòèíîèë-ðèñòîìèöèí À
C 109 H 135 N 8 O 45 . M = 2276, R f = 0.17 (I), 0.84 (II),
U = 0.48.
Äè-N,N '-ìèðèñòèíîèë-ðèñòîìèöèí
Òàêèì îáðàçîì, â ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííîé ðàáîòû
ïîëó÷åíû àêòèâèðîâàííûå ïåíòàôòîðôåíèëîâûå ýôèðû
ýíàíòîâîé, ìèðèñòèíîâîé è ïàëüìèòèíîâîé êèñëîò.
Ñ ïîìîùüþ àêòèâèðîâàííûõ ýôèðîâ ýíàíòîâîé,
ìèðèñòèíîâîé è ïàëüìèòèíîâîé êèñëîò âïåðâûå ïîëó÷åíû ñîîòâåòñòâóþùèå ìîíî- è äè-N-àöèëüíûå ïðîèçâîäíûå àíòèáèîòèêà-ãëèêîïåïòèäà ðèñòîìèöèíà À è
ïîêàçàíî, ÷òî ìîíî-N-àöèëüíûå ïðîèçâîäíûå îáëàäàþò
àíòèáàêòåðèàëüíîé àêòèâíîñòüþ.
À
C 123 H 161 N 8 O 46 . M = 2486, R f = 0.33 (I), 0.84 (II),
U = 0.
Ìîíî-N-ïàëüìèòèíîèë-ðèñòîìèöèí À
C 111 H 139 N 8 O 45 . M= 2304. R f = 0.18 (I) è 0.85 (II),
U = 0.45.
Äè-N,N '-ïàëüìèòèíîèë-ðèñòîìèöèí À
C 127H 169N 8 O 46. M = 2542, Rf = 0.29 (I), 0.89 (II),
U = 0.
9. Barna J.C.J, Williams D.H. // Ann. Rev. Microbial. 1984. 38.
P. 339.
10. Reynolds P.E. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1989. 8.
P. 943.
11. Òðåíèí À.Ñ. Àíòèáèîòèêè è õèìèîòåðàïèÿ. 1996. 41. C. 49.
12. Òðåíèí À.Ñ., Îëñóôüåâà Å.Í. // Áèîîðãàíè÷åñêàÿ õèìèÿ.
1997. 23. C. 851.
13. Allen N.E., LeTourneau D.L., Hobbs J.N., Jr. // J. Antibiotics.
1997. 50. C. 677.
14. Nicas T.I., Mullen D.L., Flokovitch J.E. et al. // Antimicrob.
Agents Chemoter. 1996. 40. P. 2194.
15. Schwalbe R.S., McIntosh A.C., Oaiyumi S. et al. // Antimicrob.
Agents Chemoter. 1996. 40. P. 2416.
16. Ãåðøêîâè÷ À.À., Êèáèðåâ Â.Ê. Õèìè÷åñêèé ñèíòåç ïåïòèäîâ. Êèåâ, 1992. C. 73.
17. Õðîìàòîãðàôèÿ â òîíêèõ ñëîÿõ / Ïîä ðåä. Ý. Øòàëÿ. Ì.,
1965. C. 476.
Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 31.03.98