ÑÅËÜÑÊÎÕÎÇßÉÑÒÂÅÍÍÀß ÁÈÎËÎÃÈß, 2013, ¹ 4, ñ. 105-109 Ôóíêöèè êðîâè è îíòîãåíåç ÓÄÊ 636.2:599.11 ÃÅÌÎÑÒÀÒÈ×ÅÑÊÀß ÀÊÒÈÂÍÎÑÒÜ ÒÐÎÌÁÎÖÈÒÎÂ Ó ÒÅËßÒ Â ÔÀÇÓ ÌÎËÎ×ÍÎÃÎ ÏÈÒÀÍÈß Ñ.Þ. ÇÀÂÀËÈØÈÍÀ Ôîðìèðîâàíèå àäàïòèâíûõ âîçìîæíîñòåé îðãàíèçìà âî ìíîãîì îáåñïå÷èâàåòñÿ íà íà÷àëüíîì ýòàïå èíäèâèäóàëüíîãî ðàçâèòèÿ. Ôóíêöèîíàëüíûå ñïîñîáíîñòè êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê ñïîñîáñòâóþò íàèëó÷øåé òåêó÷åñòè êðîâè è ïðèòîêó åå äîñòàòî÷íîãî îáúåìà ê òêàíÿì. Ìû èññëåäîâàëè âîçðàñòíóþ äèíàìèêó ãåìîñòàòè÷åñêîé àêòèâíîñòè òðîìáîöèòîâ ó çäîðîâûõ òåëÿò ÷åðíî-ïåñòðîé ïîðîäû â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ (íà 11-å, 15-å, 20-å, 25-å è 30-å ñóò æèçíè). Ó òåëÿò îòìå÷åíà ñòàáèëüíàÿ èíòåíñèâíîñòü ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ, óñòîé÷èâîå ôóíêöèîíèðîâàíèå àêòèíî-ìèîçèíîâîãî ìåõàíèçìà è àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòû òðîìáîöèòîâ, ñòàáèëüíîå ñîäåðæàíèå àäåíîçèíôîñôàòîâ è èõ âûðàæåííàÿ ñåêðåöèÿ â ïðîöåññå àêòèâàöèè è àãðåãàöèè. Íåâûñîêóþ ôóíêöèîíàëüíóþ àêòèâíîñòü òðîìáîöèòîâ ðåãèñòðèðîâàëè in vitro è in vivo. Î÷åâèäíî, ýòî ñâÿçàíî ñ ïîñòîÿííîé àêòèâíîñòüþ ðåöåïòîðíûõ è ïîñòðåöåïòîðíûõ ìåõàíèçìîâ, îïðåäåëÿþùèõ ôóíêöèîíàëüíóþ ãîòîâíîñòü òðîìáîöèòîâ â óñëîâèÿõ ðàñòóùåãî âëèÿíèÿ îêðóæàþùåé ñðåäû íà îðãàíèçì æèâîòíîãî. Êëþ÷åâûå ñëîâà: òðîìáîöèòû, àãðåãàöèÿ, ñåêðåöèÿ, àêòèí, ìèîçèí, ïåðåêèñíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ, òåëÿòà, ôàçà ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ.  ïðîöåññå îíòîãåíåçà è ñòàíîâëåíèÿ ôèçèîëîãè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé ó ïðîäóêòèâíûõ æèâîòíûõ âàæíîå çíà÷åíèå èìååò àêòèâíîñòü ñèñòåìû òðîìáîöèòàðíîãî ãåìîñòàçà (1) è îïðåäåëÿþùèõ åãî ìåõàíèçìîâ (2). Íîðìàëüíîå ôîðìèðîâàíèå àäàïòèâíûõ âîçìîæíîñòåé îðãàíèçìà âî ìíîãîì îáåñïå÷èâàåòñÿ íà íà÷àëüíîì ýòàïå èíäèâèäóàëüíîãî ðàçâèòèÿ (3). Îïòèìàëüíûå ôóíêöèîíàëüíûå ñïîñîáíîñòè êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê ñïîñîáñòâóþò íàèëó÷øåé òåêó÷åñòè êðîâè è ïðèòîêó åå äîñòàòî÷íîãî îáúåìà ê òêàíÿì, ÷òî ñîçäàåò óñëîâèÿ äëÿ ïðàâèëüíîãî ðàçâåðòûâàíèÿ ãåíåòè÷åñêîé ïðîãðàììû æèâîòíîãî è ìàêñèìàëüíî âîçìîæíîãî åå ïðîÿâëåíèÿ â ôåíîòèïå (4). Îáñëåäîâàíèå íîâîðîæäåííûõ òåëÿò ïîêàçàëî, ÷òî èõ òðîìáîöèòû âûñîêî÷óâñòâèòåëüíû è ñïîñîáíû ïîâûøàòü àêòèâíîñòü ïðè íåáëàãîïðèÿòíûõ óñëîâèÿõ (5, 6).  ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ ïðîäîëæàåòñÿ àäàïòàöèÿ òåëåíêà ê âíåóòðîáíîìó ñóùåñòâîâàíèþ è èäåò ïîäãîòîâêà ê íà÷àëó ïèòàíèÿ ðàñòèòåëüíûìè êîðìàìè. Íåñìîòðÿ íà çíà÷èìîñòü ýòîé ôàçû â ðàçâèòèè æèâîòíûõ, àãðåãàöèîííûå ñïîñîáíîñòè òðîìáîöèòîâ ó òåëÿò-ìîëî÷íèêîâ îñòàþòñÿ íåäîñòàòî÷íî èññëåäîâàííûìè. Òàê, íå ïðîâîäèëàñü îöåíêà âíóòðèñîñóäèñòîé àêòèâíîñòè òðîìáîöèòîâ (ÂÀÒ), âî ìíîãîì îïðåäåëÿþùåé îáùóþ ðåîëîãèþ êðîâè, íå èçó÷àëàñü èíòåíñèâíîñòü ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ (ÏÎË) â òðîìáîöèòàõ è ôóíêöèîíàëüíàÿ ñïîñîáíîñòü èõ àíòèîêèñëèòåëüíûõ ôåðìåíòîâ — ðåãóëÿòîðîâ ÂÀÒ. Öåëüþ íàñòîÿùåãî èññëåäîâàíèÿ áûëà îöåíêà âîçðàñòíîé äèíàìèêè ãåìîñòàòè÷åñêîé àêòèâíîñòè òðîìáîöèòîâ ó çäîðîâûõ òåëÿò â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ. Ìåòîäèêà. Îïûòû ïðîâîäèëè â çèìíå-âåñåííèé ïåðèîä â òåëÿòíèêå Êàëóæñêîãî ôèëèàëà ÏÑÕ «Ùåëêàíîâî» íà 32 òåëÿòàõ ÷åðíî-ïåñòðîé ïîðîäû â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ. Êðîâü ó æèâîòíûõ áðàëè èç ÿðåìíîé âåíû â óòðåííèå ÷àñû íà 11-å, 15-å, 20-å, 25-å è 30-å ñóò æèçíè.  îòìûòûõ è ðåñóñïåíäèðîâàííûõ òðîìáîöèòàõ (7) îïðåäåëÿëè êîëè÷åñòâî ìàëîíîâîãî äèàëüäåãèäà (ÌÄÀ) â ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ òèîáàðáèòóðîâîé êèñëîòîé (8) è ñîäåðæàíèå àöèëãèäðîïåðåêèñåé (ÀÃÏ) (9). Àêòèâíîñòü âíóòðèòðîìáîöèòàðíûõ àíòèîêñèäàíòíûõ ôåðìåíòîâ óñòàíàâëèâàëè äëÿ 105 êàòàëàçû è ñóïåðîêñèääèñìóòàçû (ÑÎÄ) (10).  òðîìáîöèòàõ ðåãèñòðèðîâàëè ñîäåðæàíèå àäåíîçèíòðèôîñôàòà (ÀÒÔ) è àäåíîçèíäèôîñôàòà (ÀÄÔ) è èõ ñåêðåöèþ ïîä âëèÿíèåì êîëëàãåíà. Îöåíèâàëè áåëêîâûé ñîñòàâ öèòîñêåëåòà êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê (àêòèí è ìèîçèí) â óñëîâèÿõ àêòèâàöèè è àãðåãàöèè òðîìáîöèòîâ ñ ÀÄÔ è òðîìáèíîì (11). ×èñëî òðîìáîöèòîâ â êðîâè ïîäñ÷èòûâàëè â êàìåðå Ãîðÿåâà. Îïðåäåëÿëè ñîäåðæàíèå ïðîäóêòîâ ëàáèëèçàöèè ôîñôîëèïèäîâ â òðîìáîöèòàðíûõ ìåìáðàíàõ (Ô3-òðîìáîöèòîâ) ñ âû÷èñëåíèåì èíäåêñà òðîìáîöèòàðíîé àêòèâíîñòè (ÈÒÀ) (12). Àãðåãàöèþ òðîìáîöèòîâ (ÀÒ) íàáëþäàëè âèçóàëüíî (13) â ìèêðîòåñòå ñ ïðèìåíåíèåì èíäóêòîðîâ: ÀÄÔ (0,5½10-4 Ì), êîëëàãåíà (ðàçâåäåíèå îñíîâíîé ñóñïåíçèè — 1:2), òðîìáèíà (0,125 åä/ìë), ðèñòîìèöèíà (0,8 ìã/ìë) (ÍÏÎ «Ðåíàì», Ðîññèÿ), àäðåíàëèíà (5½10-6 Ì, «Gedeon Richter Ltd.», Âåíãðèÿ) è èõ ñî÷åòàíèé (ÀÄÔ è àäðåíàëèí, ÀÄÔ è êîëëàãåí, àäðåíàëèí è êîëëàãåí). Ñîñòîÿíèå ÂÀÒ îöåíèâàëè âèçóàëüíî ñ ïðèìåíåíèåì ôàçîâî-êîíòðàñòíîãî ìèêðîñêîïà (14). Òåëÿòà íàõîäèëèñü ïîä ïîñòîÿííûì íàáëþäåíèåì. Íà ïðîòÿæåíèè âñåé ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ ïåðåä êàæäûì îòáîðîì áèîëîãè÷åñêîãî ìàòåðèàëà äëÿ èññëåäîâàíèÿ ãåìîñòàòè÷åñêîé àêòèâíîñòè òðîìáîöèòîâ ó íèõ ðåãèñòðèðîâàëè îñíîâíûå ôèçèîëîãè÷åñêèå ïîêàçàòåëè è ïðîâîäèëè ìîðôîëîãè÷åñêèé è áèîõèìè÷åñêèé àíàëèç êðîâè. Ñòàòèñòè÷åñêóþ îáðàáîòêó ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ îñóùåñòâëÿëè ñ èñïîëüçîâàíèåì t-êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà. Ðåçóëüòàòû. Ìîðôîëîãè÷åñêèå è áèîõèìè÷åñêèå ïîêàçàòåëè êðîâè ó òåëÿò â òå÷åíèå ýêñïåðèìåíòà îñòàâàëèñü â ïðåäåëàõ ôèçèîëîãè÷åñêîé íîðìû. Ñîäåðæàíèå ÀÃÏ â êðîâÿíûõ ïëàñòèíêàõ ó æèâîòíûõ 11-ñóòî÷íîãî âîçðàñòà äîñòèãëî 2,87±0,10 D233/109 òðîìáîöèòîâ, äîñòîâåðíî íå èçìåíÿÿñü íà ïðîòÿæåíèè âñåé ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ, è íà 30-å ñóò æèçíè ðàâíÿëîñü 2,78±0,12 D233/109 òðîìáîöèòîâ. Êîëè÷åñòâî ÌÄÀ (êîíå÷íûé ïðîäóêò ÏÎË) â òðîìáîöèòàõ íà 11-å ñóò ñîñòàâèëî 0,90±0,06 íìîëü/109 òðîìáîöèòîâ, íà 30-å ñóò — 0,84±0,15 íìîëü/109 òðîìáîöèòîâ. Àêòèâíîñòü êàòàëàçû è ÑÎÄ õàðàêòåðèçîâàëàñü âåëè÷èíîé ñîîòâåòñòâåííî 9742,50±9,21 è 1693,30±2,46 ÌÅ/109 òðîìáîöèòîâ (â ñðåäíåì çà ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ). Ñîäåðæàíèå ÀÒÔ è ÀÄÔ â òðîìáîöèòàõ ó çäîðîâûõ òåëÿò áûëî íåâûñîêèì â òå÷åíèå âñåãî ïåðèîäà íàáëþäåíèÿ — ñîîòâåòñòâåííî 5,55±0,09 è 3,42±0,06 ìêìîëü/109 òðîìáîöèòîâ. Ñåêðåöèÿ ÀÒÔ è ÀÄÔ èç òðîìáîöèòîâ ñ 11-õ ïî 30-å ñóò æèçíè òàêæå îñòàâàëàñü ñòàáèëüíîé — â ñðåäíåì 32,30±0,07 è 43,40±0,08 %. Êîëè÷åñòâî àêòèíà â èíòàêòíûõ òðîìáîöèòàõ ó çäîðîâûõ 11-ñóòî÷íûõ òåëÿò ñîñòàâëÿëî 30,20±0,12 % îò îáùåãî ñîäåðæàíèÿ áåëêà â êëåòêå è äîñòîâåðíî íå ìåíÿëîñü äî 30-õ ñóò æèçíè (32,20±0,19 %). Èíòåíñèâíîñòü äîïîëíèòåëüíîãî îáðàçîâàíèÿ àêòèíà íà ôîíå àêòèâàöèè ñèëüíûì èëè ñëàáûì èíäóêòîðîì è â ïðîöåññå ïîñëåäóþùåé àãðåãàöèè íå ìåíÿëàñü â òå÷åíèå âñåãî ñðîêà íàáëþäåíèÿ. Àíàëîãè÷íóþ äèíàìèêó ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè â òðîìáîöèòàõ ó çäîðîâûõ òåëÿò îòìå÷àëè è äëÿ ìèîçèíîâîãî ìåõàíèçìà.  èíòàêòíûõ êðîâÿíûõ ïëàñòèíêàõ æèâîòíûõ íà 11-å ñóò æèçíè äîëÿ ìèîçèíà ñîñòàâèëà 13,60±0,10 % îò îáùåãî ñîäåðæàíèÿ áåëêà â òðîìáîöèòå è íåäîñòîâåðíî êîëåáàëàñü â òå÷åíèå ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ (íà 30-å ñóò — 14,60±0,10 %). Ïðè àêòèâàöèè òðîìáîöèòîâ ñèëüíûì èëè ñëàáûì èíäóêòîðàìè è ïîñëåäóþùåé àãðåãàöèè â íèõ ñîõðàíÿëàñü íåâûñîêàÿ èíòåíñèâíîñòü îáðàçîâàíèÿ ìèîçèíà â òå÷åíèå âñåé ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ (òàáë. 1). 106 1. Ñîäåðæàíèå àêòèíà è ìèîçèíà â òðîìáîöèòàõ ó òåëÿò ÷åðíî-ïåñòðîé ïîðîäû â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ (M±m, n = 32, Êàëóæñêèé ôèëèàë ÏÑÕ «Ùåëêàíîâî», çèìíå-âåñåííèé ïåðèîä) Ñîñòîÿíèå òðîìáîöèòîâ 11 15 Âîçðàñò, ñóò 20 25 30 À ê ò è í, % ê î á ù å ì ó ñ î ä å ð æ à í è þ á å ë ê à Èíòàêòíûå 30,20±0,12 30,50±0,09 30,90±0,04 31,50±0,05 32,20±0,19 Íà ôîíå ÀÄÔ-àêòèâàöèè 32,80±0,07 33,40±0,08 33,70±0,04 33,90±0,08 34,40±0,10 Íà ôîíå ÀÄÔ-àãðåãàöèè 39,80±0,12 40,00±0,14 40,30±0,12 40,50±0,07 40,90±0,12 Íà ôîíå òðîìáèí-àêòèâàöèè 35,30±0,13 35,50±0,05 35,70±0,06 35,90±0,15 36,30±0,12 Íà ôîíå òðîìáèí-àãðåãàöèè 38,80±0,16 38,90±0,12 39,20±0,07 39,40±0,04 39,70±0,09 Ì è î ç è í, % ê î á ù å ì ó ñ î ä å ð æ à í è þ á å ë ê à Èíòàêòíûå 13,60±0,10 13,80±0,14 13,90±0,12 14,20±0,11 14,60±0,10 Íà ôîíå ÀÄÔ-àêòèâàöèè 20,60±0,08 21,00±0,12 21,20±0,14 21,40±0,08 21,80±0,12 Íà ôîíå ÀÄÔ-àãðåãàöèè 28,90±0,10 29,10±0,09 29,40±0,08 29,60±0,12 29,90±0,09 Íà ôîíå òðîìáèí-àêòèâàöèè 33,60±0,06 33,80±0,15 34,10±0,07 34,30±0,03 34,50±0,16 Íà ôîíå òðîìáèí-àãðåãàöèè 42,40±0,11 42,60±0,10 42,70±0,09 42,80±0,12 42,90±0,07 Ï ð è ì å ÷ à í è å. Äîñòîâåðíûõ ðàçëè÷èé ìåæäó ïîêàçàòåëÿìè â èññëåäîâàííûå âîçðàñòíûå ïåðèîäû íå îáíàðóæåíî. Âåëè÷èíà ÈÒÀ â íà÷àëå ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ ðàâíÿëàñü 25,90±0,06 %, íà 30-å ñóò æèçíè — 26,60±0,07 %, ÷òî óêàçûâàåò íà ïîñòîÿííóþ ëàáèëèçàöèþ òðîìáîöèòàðíûõ ôîñôîëèïèäîâ, êîòîðûå ñëóæàò ñòèìóëÿòîðàìè ñâåðòûâàíèÿ êðîâè. 2. Àãðåãàöèîííàÿ ñïîñîáíîñòü òðîìáîöèòîâ ó òåëÿò ÷åðíî-ïåñòðîé ïîðîäû â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ in vitro è in vivo (M±m, n = 32, Êàëóæñêèé ôèëèàë ÏÑÕ «Ùåëêàíîâî», çèìíå-âåñåííèé ïåðèîä) Ïîêàçàòåëü 11 15 Âîçðàñò, ñóò 20 25 30 Àãðåãàöèÿ in vitro Âðåìÿ ÀÒ â ïðèñóòñòâèè èíäóêòîðîâ, ñ: ÀÄÔ êîëëàãåí òðîìáèí ðèñòîìèöèí Í2Î2 àäðåíàëèí ÀÄÔ + àäðåíàëèí ÀÄÔ + êîëëàãåí àäðåíàëèí + êîëëàãåí 39,70±0,12 39,50±0,09 39,30±0,03 39,00±0,04 38,70±0,07 30,30±0,10 29,90±0,06 29,70±0,02 29,20±0,05 28,60±0,03 54,00±0,12 53,70±0,08 53,50±0,05 53,00±0,06 52,60±0,04 47,80±0,09 47,50±0,16 47,20±0,13 46,90±0,08 46,50±0,05 41,30±0,05 41,00±0,08 40,70±0,03 40,40±0,06 39,70±0,02 97,80±0,05 97,60±0,11 97,20±0,08 96,50±0,06 96,10±0,04 37,00±0,03 36,80±0,07 36,40±0,10 36,10±0,02 35,80±0,05 27,50±0,06 27,20±0,02 26,90±0,04 26,60±0,06 26,30±0,09 30,70±0,04 30,40±0,03 30,10±0,11 29,80±0,10 29,60±0,08 Àãðåãàöèÿ in vivo Äèñêîöèòû, % 79,00±0,06 78,60±0,03 78,20±0,08 77,70±0,03 77,40±0,10 Äèñêîýõèíîöèòû, % 12,70±0,07 12,80±0,02 12,60±0,04 13,10±0,04 13,40±0,05 Ñôåðîöèòû, % 4,30±0,02 4,30±0,01 4,40±0,05 4,50±0,03 4,50±0,06 Ñôåðîýõèíîöèòû, % 3,20±0,03 3,10±0,08 3,30±0,06 3,30±0,04 3,40±0,02 Áèïîëÿðíûå ôîðìû, % 0,80±0,02 1,20±0,03 1,50±0,01 1,40±0,03 1,30±0,02 Ñóììà àêòèâíûõ ôîðì, % 21,00±0,06 21,40±0,10 21,80±0,07 22,30±0,12 22,60±0,08 Äîëÿ òðîìáîöèòîâ â àãðåãàòàõ, % 5,30±0,08 5,40±0,04 5,50±0,02 5,50±0,07 5,60±0,08 ×èñëî ìàëûõ àãðåãàòîâ (ïî 2-3 òðîìáîöèòà 3,80±0,02 3,80±0,03 4,00±0,06 4,10±0,02 4,10±0,05 íà 100 ñâîáîäíî ëåæàùèõ) ×èñëî ñðåäíèõ è áîëüøèõ àãðåãàòîâ (ïî 4 òðîìáîöèòà è áîëåå íà 100 ñâîáîäíî ëåæàùèõ) 0,13±0,02 0,14±0,03 0,15±0,06 0,15±0,02 0,16±0,03 Ï ð è ì å ÷ à í è å. ÀÒ — àãðåãàöèÿ òðîìáîöèòîâ. Äîñòîâåðíûõ ðàçëè÷èé ìåæäó ïîêàçàòåëÿìè â èññëåäîâàííûå âîçðàñòíûå ïåðèîäû íå îáíàðóæåíî. Ó 11-ñóòî÷íûõ æèâîòíûõ âðåìÿ ðàçâèòèÿ ÀÒ ñî âñåìè èñïûòàííûìè èíäóêòîðàìè óäëèíÿëîñü (òàáë. 2). Òàê, ïîä âëèÿíèåì êîëëàãåíà ïîêàçàòåëü ÀÒ ñîñòàâëÿë 30,30±0,10 ñ è îñòàâàëñÿ äîñòàòî÷íî íèçêèì â òå÷åíèå ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ. Ïîä äåéñòâèåì ÀÄÔ è ðèñòîìèöèíà äîñòîâåðíàÿ äèíàìèêà ÀÒ îòñóòñòâîâàëà. Ïðîÿâëåíèå òðîìáèíîâîé è àäðåíàëèíîâîé ÀÒ áûëî çàìåäëåíî, à åå äëèòåëüíîñòü äîñòîâåðíî íå èçìåíÿëàñü. Ïðè ïðèìåíåíèè äâóõ èíäóêòîðîâ (ÀÄÔ + àäðåíàëèí, ÀÄÔ + êîëëàãåí, àäðåíàëèí + êîëëàãåí) íàáëþäàëàñü àíàëîãè÷íàÿ ñèòóàöèÿ. Êîëè÷åñòâî äèñêîöèòîâ â êðîâè ó òåëÿò íà 11-å ñóò æèçíè ñîñòàâëÿëî 79,00±0,06, íà 30-å — 77,40±0,10 %. Ñîäåðæàíèå âñåõ àêòèâíûõ ôîðì 107 òðîìáîöèòîâ: äèñêîýõèíîöèòîâ, ñôåðîöèòîâ, ñôåðîýõèíîöèòîâ è áèïîëÿðíûõ ðàçíîâèäíîñòåé òðîìáîöèòîâ èìåëî ñëàáóþ òåíäåíöèþ ê ïîâûøåíèþ íà ïðîòÿæåíèè ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ. Ñóììàðíàÿ âåëè÷èíà âñåõ àêòèâíûõ ôîðì òðîìáîöèòîâ òàêæå íå ïðåòåðïåâàëà äîñòîâåðíûõ èçìåíåíèé. ×èñëî ñâîáîäíî öèðêóëèðóþùèõ ìàëûõ è áîëüøèõ àãðåãàòîâ òðîìáîöèòîâ â íà÷àëå íàáëþäåíèÿ ñîñòàâëÿëî 3,80±0,02 è 0,13±0,02, ê åãî çàâåðøåíèþ — 4,10±0,05 è 0,16±0,03 (íà 100 ñâîáîäíî ëåæàùèõ). Ñòåïåíü âîâëå÷åííîñòè òðîìáîöèòîâ â àãðåãàòû ê íà÷àëó ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ ðàâíÿëàñü 5,30±0,08, ê êîíöó — 5,60±0,08 %. Îïòèìàëüíîå ñîñòîÿíèå îðãàíèçìà âî ìíîãîì îïðåäåëÿåòñÿ íåîáõîäèìûì ïðèòîêîì ïèòàòåëüíûõ âåùåñòâ è êèñëîðîäà ê òêàíÿì, êîòîðûé, â ñâîþ î÷åðåäü, çàâèñèò îò ðåîëîãè÷åñêèõ ñâîéñòâ êëåòîê êðîâè, èçìåíÿþùèõñÿ â ïðîöåññå îíòîãåíåçà. Âàæíóþ ðîëü â òåêó÷åñòè êðîâè èãðàåò àêòèâíîñòü òðîìáîöèòîâ (1). Ìû âûÿñíèëè, ÷òî äëÿ çäîðîâûõ òåëÿò â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ õàðàêòåðíà âûñîêàÿ àíòèîêñèäàíòíàÿ àêòèâíîñòü òðîìáîöèòîâ, ýôôåêòèâíî ñäåðæèâàþùàÿ ÏÎË. Íåâûðàæåííàÿ èíòåíñèâíîñòü ñâîáîäíîðàäèêàëüíûõ ïðîöåññîâ ó òåëÿò-ìîëî÷íèêîâ âî ìíîãîì îáåñïå÷èâàëà ñòàáèëüíîñòü ïðî÷èõ ôóíêöèîíàëüíûõ ïîêàçàòåëåé êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê ñ 11-õ ïî 30-å ñóò æèçíè, â òîì ÷èñëå ñîñòîÿíèå ñàìîñáîðêè àêòèíî-ìèîçèíîâîãî êîìïëåêñà, ñîäåðæàíèå è ñåêðåöèþ ÀÄÔ è ÀÒÔ. Äëÿ òåëÿò â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ áûëà ñâîéñòâåííà íåâûñîêàÿ ÀÒ, êîòîðàÿ äîñòîâåðíî íå èçìåíÿëàñü ñ âîçðàñòîì æèâîòíûõ. Âåðîÿòíî, ýòî ñâÿçàíî ñî çíà÷èòåëüíîé óñòîé÷èâîñòüþ òðîìáîöèòîâ ê ýêçîãåííûì âëèÿíèÿì ïðè ñòàáèëüíîé êîíöåíòðàöèè â êðîâè ôàêòîðà Âèëëåáðàíäà (ÔÂ) — êîôàêòîðà àäãåçèè òðîìáîöèòîâ è íåèçìåííîì êîëè÷åñòâå ðåöåïòîðîâ ê íåìó (GPIâ) íà ïîâåðõíîñòè êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê ó òåëÿò â âîçðàñòå 1130 ñóò. Íèçêàÿ àêòèâíîñòü ðåöåïòîðîâ, ïî-âèäèìîìó, âî ìíîãîì îáóñëîâëåíà ñëîæíûìè ïðèñïîñîáèòåëüíûìè ðåàêöèÿìè â îðãàíèçìå æèâîòíûõ è àíòèîêñèäàíòíîé çàùèòîé ìåìáðàí êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê. Íàáëþäàåìîå â òå÷åíèå ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ ïîñòîÿíñòâî ïîêàçàòåëåé ÀÒ ïðè äåéñòâèè ñèëüíûõ èíäóêòîðîâ àãðåãàöèè — êîëëàãåíà è òðîìáèíà îïðåäåëÿëîñü íåâûñîêîé àêòèâíîñòüþ ôîñôîëèïàçû Ñ, îáåñïå÷èâàþùåé ôîñôîèíîçèòîëüíûé ïóòü ñòèìóëÿöèè òðîìáîöèòîâ ÷åðåç äèàöèëãëèöåðîë è ïðîòåèíêèíàçó Ñ ñ íåâûðàæåííîé ñàìîñáîðêîé â êðîâÿíûõ ïëàñòèíêàõ àêòèíà è ìèîçèíà. Ñëàáûå èíäóêòîðû àãðåãàöèè — ÀÄÔ è àäðåíàëèí òàêæå âûçûâàëè ñòàáèëüíóþ ÀÒ, ÷òî óêàçûâàëî íà íåâûñîêóþ äîñòóïíîñòü ðåöåïòîðîâ èëè íåáîëüøîå èõ ÷èñëî íà ìåìáðàíàõ êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê ïðè íåàêòèâíîé ýêñïðåññèè ôèáðèíîãåíîâûõ ðåöåïòîðîâ (GPIIâ-IIIà) è íåâûðàæåííîé àêòèâàöèè ôîñôîëèïàçû À2, ðåãóëèðóþùåé âûùåïëåíèå àðàõèäîíîâîé êèñëîòû èç ìåìáðàí äëÿ îáðàçîâàíèÿ òðîìáîêñàíà À2. Îäíîâðåìåííîå èñïîëüçîâàíèå äâóõ èíäóêòîðîâ îêàçûâàëî âçàèìîóñèëèâàþùåå âëèÿíèå íà òðîìáîöèòû ïðè íåèçìåííîé äëèòåëüíîñòè ÀÒ. Ïî-âèäèìîìó, â îñíîâå ðåãèñòðèðóåìîé àêòèâíîñòè ÀÒ ñ ðàçëè÷íûìè èíäóêòîðàìè è èõ ñî÷åòàíèÿìè ëåæàë îïðåäåëåííûé óðîâåíü àêòèâíîñòè ôåðìåíòíûõ ñèñòåì òðîìáîöèòîâ, îáóñëîâëèâàþùèõ îïòèìàëüíóþ ðåàêöèþ êðîâÿíûõ ïëàñòèíîê íà âîçäåéñòâèå èçâíå. Ñòàáèëüíî íåâûñîêàÿ ÂÀÒ â òå÷åíèå ôàçû ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ ñâèäåòåëüñòâîâàëà î íèçêîé ýêñïðåññèè íà ìåìáðàíàõ òðîìáîöèòîâ ðåöåïòîðîâ, âçàèìîäåéñòâóþùèõ ñ ïîñòîÿííî ïðèñóòñòâóþùèìè â êðîâîòîêå èíäóêòîðàìè àãðåãàöèè (òðîìáèí, ÀÄÔ, àäðåíàëèí), è íåâûñîêîé àêòèâíîñòè âíóòðèòðîìáîöèòàðíûõ ìåõàíèçìîâ, ðåàëèçóþùèõ èõ âîçäåéñòâèå íà êðîâÿíûå ïëàñòèíêè. Òàêèì îáðàçîì, äëÿ òåëÿò â ôàçó ìîëî÷íîãî ïèòàíèÿ õàðàêòåðíà ñòàáèëüíî âûñîêàÿ àíòèîêñèäàíòíàÿ àêòèâíîñòü òðîìáîöèòîâ, ýôôåêòèâíî 108 ñäåðæèâàþùàÿ â íèõ ïåðåêèñíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ. Íåâûñîêàÿ àêòèâíîñòü òðîìáîöèòîâ ïðè ôèçèîëîãè÷åñêîì ñîäåðæàíèè â êðîâîòîêå èõ àêòèâèðîâàííûõ ðàçíîâèäíîñòåé è àãðåãàòîâ âñåõ ðàçìåðîâ èìååò âàæíîå àäàïòèâíîå çíà÷åíèå â óñëîâèÿõ ðàñòóùåãî âëèÿíèÿ îêðóæàþùåé ñðåäû íà îðãàíèçì æèâîòíîãî. Êóðñêèé èíñòèòóò ñîöèàëüíîãî îáðàçîâàíèÿ (ôèëèàë) ÔÃÁÎÓ ÂÏÎ Ðîññèéñêîãî ãîñóäàðñòâåííîãî ñîöèàëüíîãî óíèâåðñèòåòà, Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 21 èþíÿ 2012 ãîäà 305029 Ðîññèÿ, ã. Êóðñê, óë. Ê. Ìàðêñà, 51, e-mail: [email protected] HEMOSTATIC ACTIVITY OF THROMBOCYTES IN CALVES DURING THE PHASE OF MILK FEEDING S.Yu. Zavalishina Kursk Institute of Social Education (Branch of the Russian State Social University), 51, ul. K. Marksa, Kursk, 305029 Russia, e-mail [email protected] Received June 21, 2012 Abstract The adaptability of adult animals greatly depends on the early ontogenesis. Thrombocytes promote the best blood flow and an adequate blood supply in tissues and organs. The age dynamics of hemostatic activity of blood platelets was investigated in healthy Black-and-White calves at the phase of milk feeding. In the 11, 15, 20, 25 and 30 days old animals, the author detected the stable intensity of lipid peroxidation, the stable functioning of actin-myosin mechanism and antioxidant protection of thrombocytes, the stable content of adenosine phosphates and their pronounced secretion during activation and aggregation. The low functional activity of thrombocytes was registered both in vitro and in vivo. Apparently it depends on a constant activity of receptor and postreceptor mechanisms, determining a functional activity of thrombocytes under the growing influence of the environment in early animal ontogenesis. Keywords: platelet, aggregation, secretion, actin, myosin, lipid peroxidation, calf, phase of dairy food. REFERENCES 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. Medvedev I.N. Zootekhniya, 2008, 9: 27-28. Shevchenko T.S., Konopleva I.V. Sel’skokhozyaistvennaya Biologiya [Agricultural Biology], 2011, 2: 63-67. Galochkina V.P., Galochkin V.A. Sel’skokhozyaistvennaya Biologiya [Agricultural Biology], 2010, 6: 9-15. Zavalishina S.Yu. Veterinariya, 2011, 6: 42-45. Medvedev I.N., Zavalishina S.Yu. Doklady RASKHN, 2011, 5: 32-34. Zavalishina S.Yu. Veterinariya, 2012, 2: 51-52. Yastrebov G.N. Laboratornoe delo, 1985, 2: 93-95. Kubatiev A.A., Andreev S.V. Byulleten' eksperimental'noi biologii i meditsiny, 1979, 5: 414-417. Gavrilov V.B., Mishkorudnaya M.I. Laboratornoe delo, 1983, 3: 33-36. Chevari S., Andyal T., Shtrenger Ya. Laboratornoe delo, 1991, 10: 9-13. Ermolaeva T.A., Golovina O.G., Morozova T.V. Programma kliniko-laboratornogo obsledovaniya bol'nykh trombotsitopatiyami [Program for clinical and laboratory survey of patients with thrombocytopahty]. St. Petersburg, 1992. Barkagan Z.S., Eremin G.F., Davydov A.V. Materialy VII plenuma Vserossiiskogo naucnogo meditsinskogo obshchestva terapevtov i Vserossiiskogo nauchnogo meditsinskogo obshchestva vracheilaborantov «Laboratornye metody issledovaniya v sovremennoi klinike vnutrennikh boleznei» [Proc. VII Plenum of Physician Society «Lab tests in modern clinics of internal diseases»]. Moscow, 1974: 36-38. Shitikova A.S. Gemostaz. Fiziologicheskie mekhanizmy, printsipy diagnostiki osnovnykh form gemorragicheskikh zabolevanii /Pod redaktsiei N.N. Petrishcheva, L.P. Papayan [Homeostasis. Physiological mechanisms, diagnostics of hemorrhagic diseases. N.N. Petrishchev, L.P. Papayan (eds.)]. St. Petersburg, 1999: 49-53. Shitikova A.S., Tarkovskaya L.R., Kargin V.D. Klinicheskaya i laboratornaya diagnostika, 1997, 2: 23-35. 109