СВЕРХМАЛЫЕ ДОЗЫ АНТИТЕЛ К ГИСТАМИНУ: ВЛИЯНИЕ НА

Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2003, приложение № 1
58
ÑÂÅÐÕÌÀËÛÅ ÄÎÇÛ ÀÍÒÈÒÅË Ê ÃÈÑÒÀÌÈÍÓ: ÂËÈßÍÈÅ
ÍÀ ÏÐÎÄÓÊÖÈÞ ÀËËÅÐÃÅÍÑÏÅÖÈÔÈ×ÅÑÊÈÕ ÀÍÒÈÒÅË
Â.È.Àãàôîíîâ, Í.Â.Áåëüñêàÿ, Ì.Ã.Äàíèëåö, Þ.Ï.Áåëüñêèé,
Å.Ñ.Òðîôèìîâà, Þ.Ë.Äóãèíà*, Î.È.Ýïøòåéí*
ÍÈÈ ôàðìàêîëîãèè ÒÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ; *Íàó÷íî-ïðîèçâîäñòâåííàÿ ôèðìà “Ìàòåðèà Ìåäèêà Õîëäèíã”, Ìîñêâà
Èññëåäîâàëè âëèÿíèå àíòèòåë ê ãèñòàìèíó â ñâåðõìàëûõ äîçàõ, ïîëó÷åííûõ ïî òåõíîëîãèè ïîòåíöèðîâàíèÿ, íà ïðîäóêöèþ IgE- è IgG1-àíòèòåë â îòâåò íà 1-, 2- è 3-êðàòíóþ èììóíèçàöèþ îâàëüáóìèíîì â äîçàõ 0.5, 10 è 100 ìêã/ìûøü. Êóðñîâîå ââåäåíèå
àíòèòåë ê ãèñòàìèíó äâóêðàòíî èììóíèçèðîâàííûì ìûøàì ïðèâåëî ê ñíèæåíèþ ïðîäóêöèè àëëåðãåíñïåöèôè÷åñêèõ IgE è IgG1 ïðè èñïîëüçîâàíèè äîç îâàëüáóìèíà 100
è 0.5 ìêã/ìûøü ñîîòâåòñòâåííî. Ó 3-êðàòíî èììóíèçèðîâàííûõ æèâîòíûõ ïîä äåéñòâèåì ïðåïàðàòà ïðîäóêöèÿ èììóíîãëîáóëèíîâ îáîèõ êëàññîâ ñíèæàëàñü ïðè èñïîëüçîâàíèè âñåõ äîç îâàëüáóìèíà.
Êëþ÷åâûå ñëîâà
ñëîâà: èììóíîãëîáóëèíû, àíòèòåëà ê ãèñòàìèíó, ñâåðõìàëûå äîçû
Ðàíåå íàìè ïîêàçàíî, ÷òî ââåäåíèå ñâåðõìàëûõ
äîç àôôèííî î÷èùåííûõ (ïîòåíöèðîâàííûõ)
àíòèòåë ê ãèñòàìèíó (ÏÀÒ-Ã) îñëàáëÿåò ðàçâèòèå
àíàôèëàêòè÷åñêîãî øîêà [1]. Èçâåñòíî, ÷òî ãèñòàìèí ÿâëÿåòñÿ íå òîëüêî ìåäèàòîðîì âîñïàëåíèÿ, íî è èììóíîìîäóëÿòîðîì [2-4]. Òàê, ïîêàçàíî, ÷òî íà ýòàïå èíèöèàöèè èììóííîãî îòâåòà ãèñòàìèí ñïîñîáñòâóåò ðàçâèòèþ àëëåðãè÷åñêîãî òèïà îòâåòà íà àíòèãåí [5-8].  ÷àñòíîñòè,
ñòèìóëèðóÿ ñèíòåç èíòåðëåéêèíà-4 [7], ãèñòàìèí
ìîæåò óâåëè÷èâàòü ñåêðåöèþ IgE è IgG1.  ñâÿçè
ñ ýòèì ìû èññëåäîâàëè âëèÿíèå ÏÀÒ-à íà ïðîäóêöèþ àëëåðãåíñïåöèôè÷åñêèõ IgE è IgG1-àíòèòåë ïðè ðàçëè÷íûõ ðåæèìàõ èììóíèçàöèè.
ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Èñïîëüçîâàëè ïîòåíöèðîâàííûé ïðåïàðàò, ñîäåðæàùèé ñìåñü ãîìåîïàòè÷åñêèõ ðàçâåäåíèé
(ýêâèâàëåíòíàÿ êîíöåíòðàöèÿ 10—24 ìàññîâûõ äîëåé) ÏÀÒ-à è äèñòèëëèðîâàííóþ âîäó (ÄÂ). Ýêñïåðèìåíòû ïðîâåäåíû íà 135 ìûøàõ CBF1 I êàòåãîðèè â âîçðàñòå 2-4 ìåñ (ìàññîé 18-20 ã). Ñîäåðæàíèå IgG1 è IgE îïðåäåëÿëè ìåòîäîì ïàññèâíîé êîæíîé àíàôèëàêñèè, äëÿ ÷åãî èñïîëüçîâàëè 10 íåëèíåéíûõ áåëûõ ìûøåé ìàññîé 1820 ã è 10 íåëèíåéíûõ êðûñ ìàññîé 180-250 ã.
Âñå æèâîòíûå ïîëó÷åíû èç ÍÈÈ ôàðìàêîëîãèè
ÒÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ.
Ïðîäóêöèþ IgE è IgG1 âûçûâàëè âíóòðèáðþøèííûì ââåäåíèåì îâàëüáóìèíà (OVA) ñ
àäúþâàíòîì — Al(OH)3 (îáà — “ICN”). Äëÿ èììóíèçàöèè èñïîëüçîâàëè 3 äîçèðîâêè àíòèãåíà
è àäúþâàíòà: 0.5 ìêã+0.5 ìã, 10 ìêã+5 ìã, 100
ìêã+5 ìã íà 1 ìûøü ñîîòâåòñòâåííî.
Èììóíèçàöèþ ïðîâîäèëè 1-, 2- è 3-êðàòíûìè èíúåêöèÿìè ñîîòâåòñòâóþùèõ äîç àíòèãåíà
è àäúþâàíòà ñ èíòåðâàëîì 3 íåä.
ÏÀÒ-Ã è ÄÂ ââîäèëè per os 1 ðàç â ñóòêè
ïî 0.2 ìë â òå÷åíèå 10 äíåé. Ïðè ýòîì â ñëó÷àå
îäíîêðàòíîé èììóíèçàöèè ÏÀÒ-à è Ä íà÷èíàëè ââîäèòü çà 5 äíåé äî ñàìîé èììóíèçàöèè
è ïðîäîëæàëè åùå 5 äíåé ïîñëå íåå. Ïðè 2- è
3-êðàòíîé èììóíèçàöèÿõ ââåäåíèå ÏÀÒ-Ã è ÄÂ
íà÷èíàëè îäíîâðåìåííî ñ èììóíèçàöèåé è ïðîäîëæàëè â òå÷åíèå 10 äíåé.
Ñûâîðîòêó êðîâè äëÿ îïðåäåëåíèÿ èììóíîãëîáóëèíîâ áðàëè íà 5-å ñóòêè ïîñëå 1-îé èììóíèçàöèè è íà 3-è ñóòêè ïîñëå 2 è 3-é èììóíèçàöèè.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ IgG1 ñûâîðîòêó êðîâè èììóíèçèðîâàííûõ ìûøåé â ðàçâåäåíèÿõ 1:4, 1:8 è 1:16 ââîäèëè ìûøàì â îáëàñòü
ñïèíû ïî 30 ìêë âíóòðèêîæíî, ðàçðåøàþùóþ
äîçó OVA (0.5 ìã â 0.2 ìë 0.5% ñèíåãî Ýâàíñà) —
â ðåòðîîðáèòàëüíûé ñèíóñ ÷åðåç 2 ÷ ïîñëå ââåäåíèÿ ñûâîðîòêè. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ IgE ñûâîðîòêó êðîâè èììóíèçèðîâàííûõ ìûøåé â ðàçâåäå-
59
Ðèñ. 1. Âëèÿíèå ïîòåíöèðîâàííûõ àíòèòåë ê ãèñòàìèíó (ÏÀÒÃ) íà ïðîäóêöèþ IgE, âûçâàííóþ èììóíèçàöèåé îâàëüáóìèíîì
â äîçå 0.5 (à), 10 (á) è 100 (â) ìêã/ìûøü.
Çäåñü è íà ðèñ. 2: 1 — äèñòèëèðîâàííàÿ âîäà (êîíòðîëü), 2 —
ÏÀÒ-Ã.
Ðèñ. 2. Âëèÿíèå ÏÀÒ-Ã íà ïðîäóêöèþ IgG1, âûçâàííóþ èììóíèçàöèåé îâàëüáóìèíîì â äîçå 0.5 (à), 10 (á) è 100 (â) ìêã/ìûøü.
60
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2003, приложение № 1
íèÿõ 1:4, 1:8 è 1:16 ââîäèëè êðûñàì âíóòðèêîæíî â îáëàñòü æèâîòà ïî 30 ìêë, ðàçðåøàþùóþ
äîçó OVA (100 ìêã/100 ã â 1 ìë 0.5% ñèíåãî
Ýâàíñà) — â õâîñòîâóþ âåíó ÷åðåç 24 ÷ ïîñëå
ïàññèâíîé èììóíèçàöèè. Èíòåíñèâíîñòü ðåàêöèè îöåíèâàëè ÷åðåç 30 ìèí ïî ïðîêðàøèâàíèþ
ó÷àñòêîâ êîæè, äëÿ ÷åãî æèâîòíûõ çàáèâàëè,
êîæó îòñåïàðîâûâàëè è îïðåäåëÿëè íàèáîëüøåå
ðàçâåäåíèå ñûâîðîòêè, âûçâàâøåå ïðîêðàøèâàíèå íà âíóòðåííåé ïîâåðõíîñòè êîæè.
ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
ÏÀÒ-Ã ñíèæàëè ïðîäóêöèþ IgE ïîñëå 3 èììóíèçàöèé ïðè âñåõ èñïîëüçóåìûõ äîçàõ àíòèãåíà
(ðèñ. 1). Ïðè èììóíèçàöèè ñàìîé âûñîêîé äîçîé (100 ìêã/ìûøü) äåéñòâèå ÏÀÒ-Ã âûÿâëÿëîñü
óæå ïîñëå 2 èììóíèçàöèé (ðèñ. 1, â).
Ïðîäóêöèÿ OVA-ñïåöèôè÷åñêèõ IgG1 ïðè
êóðñîâîì ââåäåíèè ÏÀÒ-Ã òàêæå ñíèæàëàñü ïîñëå 3 èììóíèçàöèé ïðè âñåõ èñïîëüçóåìûõ äîçàõ
àíòèãåíà (ðèñ. 2). Ïðè èñïîëüçîâàíèè íàèìåíüøåé äîçû àíòèãåíà ÏÀÒ-Ã ñíèæàëè ïðîäóêöèþ
IgG1 óæå ïîñëå 2 èììóíèçàöèé (ðèñ. 2, à).
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñâèäåòåëüñòâóþò î
òîì, ÷òî ââåäåíèå ÏÀÒ-Ã ýêñïåðèìåíòàëüíûì
æèâîòíûì ïðèâîäèò ê óìåíüøåíèþ ïðîäóêöèè
OVA-ñïåöèôè÷åñêèõ IgG1 è IgE. Ìîæíî çàêëþ÷èòü, ÷òî â îñíîâå àíòèàíàôèëàêòè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ÏÀÒ-à ëåæèò èõ ñïîñîáíîñòü ñíèæàòü âûðàáîòêó àëëåðãåíñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Àãàôîíîâ Â.È., Áåëüñêàÿ Í.Â., Äàíèëåö Ì.Ã. è äð. //
Áþë. ýêñïåð. áèîë. 2001. Ïðèë. 3. C. 46-48.
2. Burastero S.E., Crimi E., Balbo A. et al. // J. Immunol.
1995. Vol. 155, N 12. P. 5836-5846.
3. Garovoy M.R., Reddish M.A., Rocklin R.E. // Ibid. 1983.
Vol. 130, N 1. P. 357-361.
4. Leiva L.E., Lammie P.J. // Ibid. 1989. Vol. 142, N 4.
P. 1304-1309.
5. Osna N., Elliott K., Khan M.M. // Int. Immunopharmacol.
2001. Vol. 1, N 1. P. 85-96.
6. Osna N., Elliott K., Khan M.M. // Ibid. P. 135-145.
7. Redrup A.C., Howard B.P., MacGlashan D.W. et al. //
J. Immunol. 1998. Vol. 160, N 4. P. 1957-1964.
8. Sirois J., Menard G., Moses A.S., Bissonnette E.Y. // Ibid.
2000. Vol. 164. P. 2964-2970.