сверхмалые дозы лекарственных препаратов в химиотерапии

ФАРМАКОЛОГИЯ СВЕРХМАЛЫХ ДОЗ
49
ÑÂÅÐÕÌÀËÛÅ ÄÎÇÛ ËÅÊÀÐÑÒÂÅÍÍÛÕ ÏÐÅÏÀÐÀÒÎÂ
 ÕÈÌÈÎÒÅÐÀÏÈÈ ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÛÕ ÎÏÓÕÎËÅÉ
Í.Ï.Êîíîâàëîâà
Èíñòèòóò ïðîáëåì õèìè÷åñêîé ôèçèêè ÐÀÍ, ×åðíîãîëîâêà Ìîñêîâñêîé îáë.
 ýêñïåðèìåíòàõ íà æèâîòíûõ ñ òðàíñïëàíòèðóåìûìè îïóõîëÿìè èçó÷àëè ïðîòèâîîïóõîëåâóþ àêòèâíîñòü öèòîñòàòèêà ëîíèäàìèíà â ñâåðõìàëûõ äîçàõ, à òàêæå âëèÿíèå ñâåðõìàëûõ äîç ïðåïàðàòîâ ðàçëè÷íîãî áèîëîãè÷åñêîãî äåéñòâèÿ (õåìîñåíñèáèëèçàòîð, èììóíîìîäóëÿòîð, àíòèîêñèäàíò) íà ýôôåêòèâíîñòü àäðèàìèöèíà è öèñïëàòèíà. Ïîêàçàíà ýôôåêòèâíîñòü òàêîãî ñïîñîáà òåðàïèè. Óñòàíîâëåíî ïîâûøåíèå ÷óâñòâèòåëüíîñòè ê ìèòîìèöèíó Ñ ïîäøòàììà ëåéêåìèè Ð388/pí ñ ôåíîòèïîì ìíîæåñòâåííîé ëåêàðñòâåííîé óñòîé÷èâîñòè ïðè êîìáèíèðîâàííîé òåðàïèè ñ õåìîñåíñèáèëèçàòîðîì èç ãðóïïû íèòðîòðèàçîëîâ â ñâåðõìàëûõ äîçàõ.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: ýêñïåðèìåíòàëüíûå îïóõîëè, õèìèîòåðàïèÿ, öèòîñòàòèêè, ñâåðõìàëûå
äîçû
Ñîâðåìåííàÿ êîíöåïöèÿ ïðîòèâîîïóõîëåâîé õèìèîòåðàïèè áàçèðóåòñÿ íà èñïîëüçîâàíèè ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ â äîçàõ, áëèçêèõ ê
ÌÏÄ, ÷òî ïðè íèçêîé ñåëåêòèâíîñòè äåéñòâèÿ
öèòîñòàòèêîâ âåäåò ê ïîÿâëåíèþ ñåðüåçíûõ ïîáî÷íûõ ýôôåêòîâ, óõóäøàþùèõ êà÷åñòâî æèçíè ïàöèåíòîâ.  ñâÿçè ñ ýòèì ïîèñê ïóòåé è ìåòîäîâ èñïîëüçîâàíèÿ íèçêèõ è ñâåðõíèçêèõ äîç
ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ ïðè ñîõðàíåíèè
ñïåöèôè÷åñêîãî ýôôåêòà ÿâëÿåòñÿ âåñüìà àêòóàëüíûì.
 ïîñëåäíåå âðåìÿ ïîÿâëÿþòñÿ ïóáëèêàöèè,
â êîòîðûõ íà êëèíè÷åñêîì ìàòåðèàëå ïîêàçàíî,
÷òî ýôôåêòèâíîñòü íèçêèõ äîç íåêîòîðûõ öèòîñòàòèêîâ, íàïðèìåð, öèñïëàòèíà, ñðàâíèìà ñ åãî
ýôôåêòèâíîñòüþ â âûñîêèõ äîçàõ, áëèçêèõ ê
ÌÏÄ [14]. Ýôôåêò ñâåðõíèçêèõ äîç è êîíöåíòðàöèé ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñîåäèíåíèé
áûë îáíàðóæåí â ðàçëè÷íûõ áèîëîãè÷åñêèõ ñèñòåìàõ è íà ðàçëè÷íûõ óðîâíÿõ [1,2]. Èìåþòñÿ
òàêæå íàáëþäåíèÿ, ñâèäåòåëüñòâóþùèå îá àêòèâíîñòè íåêîòîðûõ ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ
â ñâåðõìàëûõ äîçàõ [5,8].
Öåëüþ íàñòîÿùåé ðàáîòû ÿâèëîñü èçó÷åíèå
âëèÿíèÿ ïðîòèâîîïóõîëåâûõ öèòîñòàòèêîâ â ñâåðõìàëûõ äîçàõ íà ðîñò ýêñïåðèìåíòàëüíûõ îïóõîëåé ó æèâîòíûõ, à òàêæå ýôôåêòà ñîâìåñòíîãî
ââåäåíèÿ öèòîñòàòèêîâ â ñóáòåðàïåâòè÷åñêèõ äîçàõ ñ ðàçëè÷íûìè ìîäèôèêàòîðàìè áèîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèé â ñâåðõìàëûõ äîçàõ.
ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
 ðàáîòå èñïîëüçîâàíû ñëåäóþùèå ýêñïåðèìåíòàëüíûå ìîäåëè îïóõîëåé: ëåéêåìèè L1210 è
Ð388, ëåéêåìèÿ Ð388/ðí — ïîäøòàìì ñ ôåíîòèïîì è ãåíîòèïîì ìíîæåñòâåííîé ëåêàðñòâåííîé
óñòîé÷èâîñòè [4], êàðöèíîìà ëåãêèõ Ëüþèñ, ìåëàíîìà Â-16.
Îïóõîëè ïåðåâèâàëè ïî ñòàíäàðòíîé ìåòîäèêå [7]. Â îïûòàõ èñïîëüçîâàëè ìûøåé BDF1 ìàññîé 20-22 ã.
Îöåíèâàëè ñòåïåíü óâåëè÷åíèÿ ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè ëå÷åíûõ æèâîòíûõ ïî
ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì, ÷èñëî èçëå÷åííûõ (âûæèâøèõ) æèâîòíûõ, èíäåêñ èíãèáèðîâàíèÿ ìåòàñòàçîâ (ÈÈÌ). Ïîñëåäíèé ðàññ÷èòûâàëè ïî
ôîðìóëå:
ÈÈÌ=
(ÀʽÂÊ)-(ÀνÂÎ)
ÀʽÂÊ
½100%,
ãäå ÀÊ è ÀÎ — ÷àñòîòà ìåòàñòàçèðîâàíèÿ, ÂÊ è
ÂÎ — ñðåäíåå ÷èñëî ìåòàñòàçîâ â êîíòðîëüíîé
è îïûòíîé ãðóïïàõ ñîîòâåòñòâåííî.
 êàæäîé ãðóïïå áûëî 6-10 æèâîòíûõ, îïûòû
ïîâòîðÿëè äâàæäû. Â ðàáîòå èñïîëüçîâàëè öèñïëàòèí (“Ebewe”), ìèòîìèöèí C (“Kyova”), àäðèàìèöèí (“PharmItalia”), ëîíèäàìèí, ïðåäîñòàâëåííûé Ðèìñêèì Óíèâåðñèòåòîì “La Sapienza”,
ñàíàçîë (ÀÊ-2123, ïðåäîñòàâëåí Óíèâåðñèòåòîì
50
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2002, Приложение № 4
Êèîòî), ïðåïàðàò Ñ16 (àíòèîêñèäàíò, ñèíòåçèðîâàííûé â ÈÏÕÔ ÐÀÍ). Âñå ïðåïàðàòû ââîäèëè
âíóòðèáðþøèííî â âèäå âîäíûõ ðàñòâîðîâ.
ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Ïåðâè÷íîé ìèøåíüþ äåéñòâèÿ ëîíèäàìèíà ÿâëÿþòñÿ ìèòîõîíäðèè. Ïðåïàðàò ñåëåêòèâíî èçìåíÿåò ýíåðãåòè÷åñêèé ìåòàáîëèçì îïóõîëåâûõ
êëåòîê, èíãèáèðóåò ðåïàðàöèþ ÄÍÊ [13]. Â íàøèõ îïûòàõ ëîíèäàìèí â äîçàõ 10—15-10—19 ìã/êã
ñëàáî, íî ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìî èíãèáèðîâàë
ïðîöåññ ìåòàñòàçèðîâàíèÿ (24-56%). Ýôôåêò ïîâûøàëñÿ ñ óâåëè÷åíèåì äîçû ïðåïàðàòà îò 10—6
äî 50 ìã/êã (69-95% èíãèáèðîâàíèÿ, ðèñ. 1).
 öåëîì ìåëàíîìà Â-16 ìåíåå ÷óâñòâèòåëüíà ê ëîíèäàìèíó. Îäíàêî ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî
ïðåïàðàò â äîçå 10—15 ìã/êã èíãèáèðóåò ìåòàñòàòè÷åñêèé ïðîöåññ íà 77%.
Òàêèì îáðàçîì, ëîíèäàìèí ïðîÿâëÿåò îïðåäåëåííóþ àíòèìåòàñòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü, ïðè÷åì íå òîëüêî â òåðàïåâòè÷åñêèõ, íî è â íèçêèõ è ñâåðõìàëûõ äîçàõ.
Ïðåïàðàò ñàíàçîë (3-íèòðîòðèàçîë) èñïîëüçóåòñÿ â êëèíèêå êàê ãèïîêñè÷åñêèé ðàäèîñåíñèáèëèçàòîð [12]. Ðàíåå íàìè ïîêàçàíî, ÷òî ñàíàçîë îáëàäàåò çíà÷èòåëüíîé àíòèìåòàñòè÷åñêîé
àêòèâíîñòüþ [10], ÿâëÿåòñÿ ìîùíûì õåìîñåíñèáèëèçàòîðîì [11] è ïðîÿâëÿåò èììóíîìîäóëèðóþùèå ñâîéñòâà [6].  íàñòîÿùåì èññëåäîâàíèè ñòåïåíü ïîäàâëåíèÿ ìåòàñòàòè÷åñêîãî ïðîöåññà ïðè ââåäåíèè ñàíàçîëà â äîçàõ 10—12 è 50
ìã/êã áûëà àíàëîãè÷íîé: ÈÈÌ ñîñòàâèë 93%
(ðèñ. 2).
Ýêñïåðèìåíòû ñ èñïîëüçîâàíèåì ñàíàçîëà â
äîçå 10—10 ìã/êã â êà÷åñòâå õåìîñåíñèáèëèçàòîðà ïðè òåðàïèè ëåéêåìèè Ð388 öèñïëàòèíîì
òàêæå ïðîäåìîíñòðèðîâàëè åãî ýôôåêòèâíîñòü:
êîìáèíèðîâàííàÿ òåðàïèÿ öèñïëàòèíîì è ñàíàçîëîì ïðèâîäèëà ê áîëåå çíà÷èìîìó óâåëè÷åíèþ
ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè (äî 240%) è
äîëè âûæèâøèõ æèâîòíûõ (äî 78%) ïî ñðàâíåíèþ ñ òåðàïèåé îäíèì öèñïëàòèíîì (76 è 62%
ñîîòâåòñòâåííî).
Õåìîñåíñèáèëèçèðóþùèé ýôôåêò îòìå÷åí
ïðè èñïîëüçîâàíèè ñâåðõíèçêèõ äîç ïðåïàðàòà
èç êëàññà àíòèîêñèäàíòîâ. Íå îáëàäàÿ ñîîòâåòñòâåííîé ïðîòèâîîïóõîëåâîé àêòèâíîñòüþ â äîçå
10—10 ìã/êã, ïðåïàðàò C16 â òîé æå äîçå ïðè ñîâìåñòíîì ââåäåíèè ñ àäðèàìèöèíîì (4 ìã/êã)
îáåñïå÷èâàë óâåëè÷åíèå ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè ìûøåé ñ ëåéêåìèåé L1210 íà 150%
è äîëè âûæèâøèõ æèâîòíûõ äî 60% ïðîòèâ 110
è 18% ñîîòâåòñòâåííî ïðè èçîëèðîâàííîì ïðèìåíåíèè àäðèàìèöèíà.
Ðèñ. 1. Çàâèñèìîñòü êîëè÷åñòâà ìåòàñòàçîâ êàðöèíîìû ëåãêèõ Ëüþèñ (1) è ìåëàíîìû B-16 (2) îò äîçû
ëîíèäàìèíà.
Ïóíêòèðíûå ëèíèè 1 è 2 — ãðàíèöû ñîîòâåòñòâóþùèõ
êîíòðîëüíûõ çíà÷åíèé.
Âåñüìà èíòåðåñíûìè è âàæíûìè ïðåäñòàâëÿþòñÿ ðåçóëüòàòû, ïîëó÷åííûå â ýêñïåðèìåíòàõ ñ ëåêàðñòâåííî-óñòîé÷èâîé îïóõîëüþ.
Èçâåñòíî, ÷òî ìíîæåñòâåííàÿ ëåêàðñòâåííàÿ
óñòîé÷èâîñòü ñåðüåçíî îãðàíè÷èâàåò âîçìîæíîñòè õèìèîòåðàïèè îïóõîëåé. Ëåéêåìèÿ Ð388/ðí
ïðàêòè÷åñêè íå ÷óâñòâèòåëüíà ê ìèòîìèöèíó
Ñ — óâåëè÷åíèå ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè
æèçíè æèâîòíûõ ñîñòàâëÿåò 50-55%, à ïðè äîáàâëåíèè ñàíàçîëà â ñâåðõìàëûõ äîçàõ ýòîò ïîêàçàòåëü âîçðàñòàåò äî 175% (ðèñ. 3).
Ðèñ. 2. Çàâèñèìîñòü àíòèìåòàñòàòè÷åñêîãî ýôôåêòà ñàíàçîëà â îòíîøåíèè ìåëàíîìû Â-16 îò äîçû
ïðåïàðàòà.
ÈÈÌ — èíäåêñ èíãèáèðîâàíèÿ ìåòàñòàçîâ.
ФАРМАКОЛОГИЯ СВЕРХМАЛЫХ ДОЗ
51
ìîëåêóë. Âîçìîæíî, ÷òî ìåòàáîëè÷åñêàÿ êîîïåðàöèÿ ìåæäó êëåòêàìè ÿâëÿåòñÿ îáùåáèîëîãè÷åñêèì ÿâëåíèåì è ýôôåêò óëüòðàíèçêèõ äîç
ìîæåò áûòü îáúÿñíåí ñ ýòèõ ïîçèöèé. Ïðåäëàãàåòñÿ êîíöåïöèÿ, áàçèðóþùàÿñÿ íà ïðåäñòàâëåíèè î ñëîæíîé èåðàðõè÷åñêîé ñòðóêòóðå êëåòî÷íîé ðåãóëÿöèè, ïðè êîòîðîé îòâåò íà ñèëüíûå
è ñëàáûå âîçäåéñòâèÿ ðåàëèçóåòñÿ ðàçíûìè ìåõàíèçìàìè [3].
Íåîáõîäèìî äàëüíåéøåå èññëåäîâàíèå ýôôåêòà ñâåðõíèçêèõ äîç ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñîåäèíåíèé ñ ïåðñïåêòèâîé èõ ïðàêòè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ â õèìèîòåðàïèè îïóõîëåé.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
Ðèñ. 3. Âëèÿíèå ñàíàçîëà íà ÷óâñòâèòåëüíîñòü ëåéêåìèè P388/ðí ñ ôåíîòèïîì ìíîæåñòâåííîé ëåêàðñòâåííîé óñòîé÷èâîñòè ê ìèòîìèöèíó C â äîçå 1.5 ìã/êã.
ÓÑÏÆ — óâåëè÷åíèå ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè
æèçíè.
Ïóíêòèðíàÿ ëèíèÿ — ìèòîìèöèí C, êðèâàÿ — ìèòîìèöèí C+ñàíàçîë.
Òàêèì îáðàçîì, ïðåäñòàâëåííûå äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î íàëè÷èè àíòèìåòàñòàòè÷åñêîãî è
õåìîñåíñèáèëèçèðóþùåãî ýôôåêòà ðàçëè÷íûõ
ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ â ñâåðõíèçêèõ äîçàõ.
Ìåõàíèçìû äåéñòâèÿ óëüòðàíèçêèõ äîç ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñîåäèíåíèé â íàñòîÿùåå
âðåìÿ àêòèâíî èçó÷àþòñÿ. Ïîñêîëüêó ïðîöåññ
ìåòàñòàçèðîâàíèÿ ÿâëÿåòñÿ èììóíîçàâèñèìûì,
ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî àíòèìåòàñòàòè÷åñêèé
ýôôåêò ñàíàçîëà è ëîíèäàìèíà îïîñðåäóåòñÿ âîçäåéñòâèåì íà èììóíîçàâèñèìûå ñòàäèè ìåòàñòàçèðîâàíèÿ. Èçâåñòíî, ÷òî çíà÷èòåëüíûé èììóííûé îòâåò ìîæåò íàáëþäàòüñÿ ïîñëå ìèíèìàëüíîãî âîçäåéñòâèÿ. Èçâåñòåí ôåíîìåí ìåòàáîëèòè÷åñêîé êîîïåðàöèè ìåæäó êëåòêàìè [9]. Êëåòêà ìîæåò äåéñòâîâàòü êàê ðåöèïèåíò ìîëåêóë îò
îäíîé êëåòêè è êàê äîíîð ìîëåêóë äëÿ äðóãîé.
Ïîäîáíàÿ âòîðè÷íàÿ ìåòàáîëè÷åñêàÿ êîîïåðàöèÿ
ìîæåò èíäóöèðîâàòü öåïíóþ ðåàêöèþ ïåðåäà÷è
1. Áóðëàêîâà Å.Á. // Ðîñ. õèì. æóðí. 1999. Ò. 42, ¹ 5.
Ñ. 3-11.
2. Áóðëàêîâà Å.Á. // Âåñòí. ÐÀÍ. 1994. Ò. 64, Âûï. 5.
Ñ. 425-431.
3. Áóðëàêîâà Å.Á., Êîíðàäîâ À.À., Õóäÿêîâ È.Â. // Èçâ.
ÀÍ ÑÑÑÐ, Ñåð. áèîë. 1990. ¹ 2. Ñ. 184-187.
4. Ãîí÷àðîâà Ñ.À., Äåìèäîâà Í.Ñ., Øèðÿåâà Î.À. è äð. //
Ýêñïåð. îíêîë. 1987. Ò. 9. Ñ. 42-47.
5. Êðóòîâà Ò.Â., ×åðíèêîâà Ñ.Á., Êîíðàäîâ À.À., Áóðëàêîâà Å.Á. // Èçâ. ÐÀÍ, Ñåð. áèîë. 1992. ¹ 5. Ñ. 511-514.
6. ×åðäûíöåâà Í.Â., Êîêîðåâ Î.Â., Êîíîâàëîâà Í.Ï.,
Êàãèÿ Â.Ò. // Ýêñïåð. îíêîë. 1997. Ò. 19. Ñ. 333-337.
7. Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ îöåíêà ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ â ÑÑÑÐ è ÑØÀ / Ïîä ðåä. Ç.Ï.Ñîôüèíîé.
Ì., 1979.
8. Bonavida B., Safrit J.,Tsuchitani T., Zighelboim J. // Ultra
low doses / Ed. C.Doutremepuich. L., Washington, 1991.
P. 27-29.
9. Frankfurt O.S., Seckinger D., Sugarbaker E.V. // Cancer
Res. 1991. Vol. 51, N 4. P. 1190-1195.
10. Konovalova N., Volkova L., Tatyanenko L. et al. //
Neoplasma. 1997. Vol. 44, N 6. P. 361-365.
11. Konovalova N., Diachkovskaya R., Volkova L. et al. //
Radiosensitization Newsletter. 1991. N 10. P. 1-4.
12. Sakano K., Kimura R., Shibianoto Y. et al. // Ibid. 1986.
Vol. 5, N 2. P. 1-2.
13. Silvestrini B. // Semin. Oncol. 1991. Vol. 18. N 2,
Suppl. 4. P. 2-6.
14. Toge T., Nakazato H., Nishiyamam et al. // Gan To
Kagaku Ryoho. 2000. Vol. 27, N 4. P. 549-558.