инструкцию к набору

(812) 412-8380
www.olvex-d.ru
АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗА
Кат. №: 002.005 – 40 мл + 10 мл
Кат. №: 002.015 – 80 мл + 20 мл
Кат. №: 002.035 – 400 мл + 100 мл
Количество определений зависит
от характеристик используемого анализатора
и минимального рабочего объема кюветы.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор «АСТ-ОЛЬВЕКС» предназначен для количественного
определения активности аспартатаминотрансферазы
(АСТ) в сыворотке или плазме крови оптимизированным
кинетическим энзиматическим методом в клинической
лабораторной диагностике.
Согласно стандартной процедуре анализа набор рассчитан
на проведение 50, 100 или 500 определений при расходе
1мл рабочего реагента на один анализ.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Исследование проводите непосредственно в термостатируемой при +37 °С фотометрической кювете с длиной
оптического пути 1 см при длине волны 340 нм против
воздуха или воды.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Под действием фермента аспартатаминотрансферазы
(АСТ) в результате переаминирования происходит
перенос аминогруппы с аспартата на α-кетоглутарат.
Образующийся в данной реакции оксалоацетат при участии
фермента малатдегидрогеназы (МДГ) и кофермента
НАДН2 превращается в малат. Скорость окисления НАДН2
в ходе второй реакции определяется по уменьшению
оптической плотности реакционной среды при 340 нм и
пропорциональна активности АСТ.
СХЕМА РЕАКЦИИ
АСТ
L-аспартат + α-кетоглутарат ___> оксалоацетат + L-глутамат
МДГ
оксалоацетат + НАДН + Н+ _________> малат + НАД
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1.
Реагент 2.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Реакция линейна в течение 3-х мин в диапазоне активности
АСТ от 10 до 190 ед/л.
Отклонение от линейности не превышает – 5%.
Чувствительность – не более 7 ед/л.
Коэффициент вариации – не более 5%.
Качество набора может проверяться на отечественных или
зарубежных контрольных сыворотках, с аттестованным по
данному методу показателем.
Нормальные величины активности АСТ в сыворотке или
плазме крови у мужчин – от 10 до 40 ед/л, у женщин – от 10
до 31 ед/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон
нормальных величин для обследуемого контингента.
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Свежая негемолизированная сыворотка или плазма крови.
Активность АСТ в сыворотке или плазме крови снижается
после 3-х дней хранения: при +2-8 °С – на 10%, при +1825 °С – на 17%.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РЕАГЕНТА
Перед проведением анализа смешать необходимые
количества Реагента 1 и Реагента 2 в соотношении 4:1.
Рабочий реагент стабилен при +2-8 °С в защищенном от
света месте в плотно закрытом флаконе не менее 30 дней.
Тщательно закрывайте флаконы с реагентами после
каждого использования!
Запуск реакции образцом:
Смешайте 1 мл предварительно прогретого рабочего реагента и 0,1 мл анализируемого материала (соотношение
10:1). Через 1 минуту начните считывание величины
экстинкции с интервалом в 1 минуту в течение 3-х минут.
Вычислить среднее изменение экстинкции за 1 минуту (&Е/
мин).
РАСЧЕТ
Расчет активности фермента проведите по формуле:
Ед/л=1746 х ΔЕ340нм/мин
Если
&Е/мин
при
запуске
реакции
образцом
превышает 0,110 Abs разведите исследуемый образец
физиологическим раствором в 10 раз и повторите анализ;
результат умножьте на фактор разведения 10.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор должен храниться в упаковке предприятияизготовителя при +2-8 °С в защищенном от света месте в
течение всего срока годности.
Срок годности набора – 12 месяцев.
Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов стабильны не
менее 3-х месяцев при условии достаточной герметизации
флакона и хранении в защищенном от света месте при
+2-8 °С.
ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ПОТРЕБИТЕЛЯ
Запуск реакции Реагентом 2, рекомендуется для автоматических биохимических анализаторов:
Смешать 1 мл Реагента 1 и 0,1 мл анализируемого
материала; соотношение 10:1. Через 1 минуту добавить
0,250 мл Реагента 2. Инкубируйте 1 минуту и начните
считывание величины экстинкции с интервалом в 1 минуту
в течение 3-х минут. Вычислить среднее изменение
экстинкции за 1 минуту (&Е/мин).
РАСЧЁТ
Активность фермента рассчитать по формуле:
Ед/л=2142 х ΔЕ340нм/мин
Если &Е/мин при запуске реакции Реагентом 2 превышает
0,160 Abs, разведите исследуемый образец физиологическим раствором в 10 раз и повторите анализ; результат
умножьте на 10.
При запуске реакции Реагентом 2 реакция линейна в течение
3-х мин в диапазоне активности АСТ от 10 до 350 ед/л.