ГЛЮКОЗА (812) 412-8380 www.olvex-d.ru
реклама
(812) 412-8380 www.olvex-d.ru ГЛЮКОЗА Кат. №: 005.004 - 200 мл Кат. №: 005.014 - 500 мл Кат. №: 005.024 - 1000 мл Количество определений зависит от характеристик используемого анализатора и минимального рабочего объема кюветы. НАЗНАЧЕНИЕ Набор «ГЛЮКОЗА-4-ОЛЬВЕКС» предназначен для количественного определения содержания глюкозы в цельной (капиллярной или венозной) крови человека энзиматическим колориметрическим методом с депротеинизацией в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в научно-исследовательской практике. Набор рассчитан на проведение 100, 250 или 500 определений при расходе 2,0 мл рабочего реагента на один анализ. содержимом одного флакона с Реагентом 1 при аккуратном перемешивании. Рабочий реагент готов к применению через 2 минуты после полного растворения лиофилизата. Рабочий реагент хранить в защищённом от света месте при +2-8 °С в плотно закрытом флаконе не более 6 месяцев. ПРИНЦИП МЕТОДА D-D-глюкоза под действием фермента глюкозооксидазы (GOD) окисляется с образованием эквимолярного количества перекиси водорода. Образующаяся в данной реакции перекись водорода (Н2О2) при участии фермента пероксидазы (POD) способствует окислительному азосочетанию 4-аминоантипирина (4-ААP) и фенола с образованием окрашенного соединения (хинониминовый краситель). Интенсивность окраски реакционной среды пропорциональна содержанию глюкозы в исследуемом материале и определяется фотометрически при длине волны 500 (490-540) нм. СХЕМА РЕАКЦИИ GOD β-D-глюкоза + О2 + Н2О _______> глюконовая кислота + Н2О2 POD 2Н2О2 + 4-ААР + фенол _____> хинонимин.краситель + 4Н2О СОСТАВ НАБОРА Реагент 1 (буферный раствор). Реагент 2 (лиофилизат). Реагент 3 (хлорная кислота). Калибратор – раствор глюкозы 10 ммоль/л. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Линейная область определения концентрации глюкозы в диапазоне от 1,0 до 30,0 ммоль/л. Отклонение от линейности не более 5%. Чувствительность определения не более 0,5 ммоль/л. Коэффициент вариации результатов определений не > 5%. Окраска стабильна в течение 1 часа. Качество набора может проверяться на отечественных или зарубежных контрольных сыворотках с аттестованным по данному методу показателем. Нормальные величины содержания глюкозы в крови 3,5 5,7 ммоль/л. В венозной крови содержание глюкозы на 0,5 ммоль/л меньше, чем в капиллярной. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнять диапазон нормальных величин для обследуемого контингента. ! АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Капиллярная или венозная кровь человека. Отделить от клеточных элементов немедленно! Для замедления гликолиза и предотвращения свертывания при заборе крови использовать пробирки, содержащие фторид натрия и антикоагулянт. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ Приготовление рабочего реагента. Содержимое одного флакона с Реагентом 2 растворить в Тщательно закрывайте флаконы с реагентами после каждого использования! Подготовка анализируемых образцов к анализу. Пробоподготовку провести в соответствии с таблицей: КОМПОНЕНТЫ РЕАКЦИОННОЙ СРЕДЫ ОПЫТНАЯ ПРОБА КАЛИБРОВОЧН. ПРОБА КОНТРОЛЬНАЯ (ХОЛОСТАЯ) ПРОБА Реагент 3, мл 0.5 0.5 0.5 Цельная кровь, мл 0.05 - - Калибратор, мл - 0.05 - Вода дистиллир., мл - - 0.05 Пробы тщательно перемешать и выдержать в течение 10 минут при +18-25 °С, после чего опытные пробы центрифугировать с ускорением 900 g в течение 10 минут при комнатной температуре. Для дальнейшего анализа использовать прозрачную надосадочную жидкость (супернатант). Надосадочную жидкость опытной пробы можно хранить в герметично закупоренном флаконе (эппендорф) при +2-8 °С не более 5 дней. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Приготовить пробы в соответствии с таблицей: КОМПОНЕНТЫ РЕАКЦИОННОЙ СРЕДЫ Рабочий реагент, мл Супернатант опытной пробы, мл Супернатант калибровочной пробы, мл Супернатант контрольной (холост.) пробы, мл ОПЫТНАЯ ПРОБА КАЛИБРОВОЧН. КОНТРОЛЬНАЯ ПРОБА (ХОЛОСТАЯ) ПРОБА 2.0 2.0 2.0 0.1 - - - 0.1 - - - 0.1 Реакционную смесь тщательно перемешать и инкубировать в течение 20 минут при +37 °С. Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 500 (490-540) нм в кювете с длиной оптического пути 1,0 см. Окраска растворов стабильна не менее 1 часа после окончания инкубации при хранении проб в защищённом от света месте при комнатной температуре (+18-25 °С). Объёмы исследуемого образца и рабочего реагента можно изменить, соблюдая соотношение 1:20. РАСЧЕТ Расчет концентрации глюкозы в крови (С): Е пробы С = ____________ x 10 ммоль/л, Е калибр. где: Е пробы - оптическая плотность исследуемой пробы, Е калибр. - оптическая плотность калибровочной пробы, 10 ммоль/л - концентрация глюкозы в калибраторе. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА Набор хранить в упаковке предприятия-изготовителя при +2-8 °С в защищённом от света месте в течение всего срока годности. Срок годности набора 12 месяцев. Калибратор после вскрытия флакона хранить при +2-8 °С не более 6 месяцев.
