МОЛОЧНАЯ КИСЛОТА

(812) 412-8380
www.olvex-d.ru
МОЛОЧНАЯ КИСЛОТА
Количество определений зависит
от характеристик используемого анализатора
и минимального рабочего объема кюветы.
Кат. №: 019.002 - 50 мл
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор «МОЛОЧНАЯ КИСЛОТА-ОЛЬВЕКС» предназначен
для количественного определения содержания молочной
кислоты в плазме крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Согласно стандартной процедуре анализа набор рассчитан
на 25 определений при расходе 2,0 мл монореагента на
один анализ.
ОПЫТНАЯ
ПРОБА
КАЛИБРОВОЧН.
ПРОБА
КОНТРОЛЬНАЯ
(ХОЛОСТАЯ)
ПРОБА
Монореагент, мл
2.0
2.0
2.0
Плазма крови, мкл
20
-
-
Калибратор, мкл
-
20
-
Вода дистилл., мкл
-
-
20
КОМПОНЕНТЫ
РЕАКЦИОННОЙ СРЕДЫ
ПРИНЦИП МЕТОДА
Определение основано на проведении сопряжённых
реакций, катализируемых лактатоксидазой и пероксидазой.
Молочная кислота под действием фермента лактатоксидазы окисляется до аллантоина, перекиси водорода и
двуокиси углерода. Образующаяся в данной реакции
перекись водорода при участии фермента пероксидазы
способствует окислительному азосочетанию хлорфенола и
4-аминоантипирина (4-ААП) с образованием окрашенного
соединения (хинонимин). Интенсивность окраски реакционной среды пропорциональна содержанию молочной
кислоты в пробе и определяется фотометрически при
длине волны 500 нм (490 – 520 нм).
Объёмы исследуемого образца и монореагента можно
изменить, соблюдая соотношение 1:100.
Содержимое пробирок тщательно перемешать и
инкубировать в в течение 5 минут при +37 °С или в течение
10 минут при комнатной температуре (+18-25 °С).
Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной
проб против контрольной (холостой) пробы при длине
волны 500 (490-520) нм в кювете с длиной оптического пути
1,0 см.
Окраска растворов стабильна не менее часа после
окончания инкубации при хранении проб в защищённом от
света месте при комнатной температуре (+18-25 °С).
ПРИНЦИП МЕТОДА
Тщательно закрывайте флаконы с реагентами после
каждого использования!
лактатоксидаза
Молочнаякислота+2Н2О+О2________>аллантонин+СО2+Н2О2
пероксидаза
хлорфенол + 4-ААП+ Н2О2 _____________> хинонимин + 2 Н2О
СОСТАВ НАБОРА
Монореагент.
Калибратор – раствор лактата лития, 3,34 ммоль/л
(30 мг/100 мл).
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейная область определения концентрации молочной
кислоты в диапазоне от 0,5 до 16,6 ммоль/л.
Отклонение от линейности не более 5%.
Чувствительность определения не более 0,3 ммоль/л.
Коэффициент вариации результатов не более 5%.
Окраска стабильна в течение 1 часа.
Качество набора может проверяться на отечественных или
зарубежных контрольных сыворотках с аттестованным по
данному методу показателем.
Нормальные значения содержания молочной кислоты в
плазме крови 0,63 - 2,44 ммоль/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнять диапазон
нормальных величин у обследуемого контингента.
!
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Компоненты реакционной среды внести в пробирки в
соответствии с таблицей:
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Гепаринизированная или ЭДТА-плазма крови с добавлением натрия фторида для ингибирования гликолиза.
Плазму хранить не более суток при +2-8 °С или 3 часа при
комнатной температуре (+18-25 °С).
При взятии крови жгут накладывать не более чем на 30
секунд.
РАСЧЕТ
Концентрацию молочной кислоты в плазме крови (С,
ммоль/л) рассчитать по формуле:
Е пробы
С = __________________ х 3,34 ммоль/л
Е калибр.
где: Е пробы – оптическая плотность опытной пробы;
Е калибр. – оптическая плотность калибровочной пробы;
3,34 – концентрация мочевой кислоты в калибраторе,
ммоль/л.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при +2-8 °С в течение всего срока годности.
Срок годности набора - 12 месяцев.
Монореагент и калибратор после вскрытия флаконов
хранить в защищённом от света месте при +2-8 °С не более
1 месяца.