Набор цитомегаловирусу реагентов для иммуноферментного определения антител класса M к

Набор реагентов для иммуноферментного определения антител класса M к
цитомегаловирусу в сыворотке крови (ИммуноФА-IgM-ЦМВ)
Номер по каталогу ИФ-20-06
ТУ 9398-035-41566050-2009
Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/06884
Набор реагентов ИммуноФА-IgM-ЦМВ предназначен для качественного
определения антител класса M к цитомегаловирусу (ЦМВ) человека в сыворотке
крови методом иммуноферментного анализа на стрипованных полистироловых
планшетах.
Цитомегаловирус человека принадлежит к семейству герпес-вирусов. Крайне
важным является выявление текущей цитомегаловирусной инфекции по
определению IgM-антител к цитомегаловирусу. Наиболее распространенные
осложнения, вызываемые развитием инфекции: 1) инфекция во время беременности,
которая может вызывать врожденные нарушения у новорожденных; 2) инфекция
вследствие переливания крови, что может приводить к ЦМВ-мононуклеозу; 3)
инфекция при подавлении иммунитета (пересадка органов и тканей), которая может
сопровождаться отторжением пересаженного органа.
Клинический диагноз цитомегаловирусной инфекции требует подтверждения
специальными лабораторными тестами.
Определение IgМ-антител к ЦМВ с использованием набора ИммуноФА-IgMЦМВ может быть рекомендовано в качестве скринингового исследования
беременных, реципиентов трансплантантов и пациентов с ослабленным
иммунитетом с целью выявления первичной ЦМВ-инфекции.
Принцип метода – непрямой двухстадийный ИФА
Е
Е
S
Е
Е
Е
Е
P
Иммобилизованный
антиген
Анализируемый образец
Иммобилизованные
иммунокомплексы
Конъюгат
вторичных
антител с
пероксидазой
Иммобилизованные
иммунокомплексы с мечеными
антителами
Субстратная
реакция
СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА
1. Внесение в лунки планшета: по 0,1 мл положительного, отрицательного и
порогового контрольных образцов, разведенных в 101 раз образцов исследуемых
сывороток крови и инкубация (30 мин, +37оС).
2. Промывка лунок планшета.
3. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл конъюгата и инкубация (30 мин, +37оС).
4. Промывка лунок планшета.
5. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл субстратного раствора и инкубация (15 мин,
+37оС).
6. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл стоп-реагента.
7. Измерение оптической плотности (λ=450 нм), интерпретация результатов.
ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Результаты ИФА учитываются при следующих условиях:
Значение ОПК+(ср) - не ниже 1,0.
Значение ОПК-(ср) - не выше 0,1.
Значение ОПКпор(ср) - не выше 0,15.
Интерпретация результатов
Результат анализа исследуемых образцов следует считать:
положительным при ОП выше 1,1х ОПпор (исследуемый образец содержит IgM к ЦМВ),
отрицательным при ОП ниже 0,8х ОПпор (исследуемый образец не содержит IgM к ЦМВ).
Результаты при ОП в диапазоне 0,8хОПпор – 1,1хОПпор являются сомнительными,
рекомендуется исследовать образцы сыворотки крови повторно. Также рекомендуется повторное
исследование вновь полученных сывороток.
Длина волны измерения: 450 нм.
Субстрат: 3,3`,5,5`-тетраметилбензидин (ТМБ).
Условия инкубации (время, tоС) :
- 1-ая инкубация 30 мин при +37оС;
- 2-ая инкубация 30 мин при +37оС;
- инкубация с ТМБ 15 мин при +37оС.
Время проведения анализа: 1 час 30 минут.
Объем пробы: 100 мкл.
Количество анализируемой сыворотки: 5 мкл (для анализа сыворотка разводится
блокирующим буферным раствором в 101 раз и анализируется 100 мкл разведенной
сыворотки).
Количество анализов: набор рассчитан на проведение 96 анализов, включая контрольные
образцы.
Планшеты: стрипованные, разделяющиеся на отдельные лунки.
Срок годности набора: 12 месяцев.
Все реагенты набора представлены в жидком виде.