Набор цитомегаловирусу реагентов для иммуноферментного определения антител класса G к

Набор реагентов для иммуноферментного определения антител класса G к
цитомегаловирусу в сыворотке крови (ИммуноФА-IgG-ЦМВ)
Номер по каталогу ИФ-20-01
ТУ 9398-034-41566050-2009
Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/06883
Набор реагентов ИммуноФА-IgG-ЦМВ предназначен для качественного
определения антител класса G к цитомегаловирусу человека в сыворотке крови
методом иммуноферментного анализа на стрипованных полистироловых планшетах.
Цитомегаловирус (ЦМВ) человека принадлежит к семейству герпес-вирусов.
В большинстве случаев первичная инфекция протекает практически бессимптомно,
при этом ЦМВ, долго оставаясь в организме в латентном состоянии, при
определенных условиях может переходить в активное состояние, что приводит к
серьезным последствиям. Наиболее распространенные осложнения, вызываемые
повторным развитием инфекции: 1) инфекция во время беременности, которая
может вызывать врожденные нарушения у новорожденных; 2) инфекция вследствие
переливания крови, что может приводить к ЦМВ–мононуклеозу; 3) инфекция при
подавлении иммунитета (пересадка органов и тканей), которая может
сопровождаться отторжением пересаженного органа.
Антитела класса G обнаруживаются у 50 –70 % взрослого населения.
Клинический диагноз цитомегаловирусной инфекции требует подтверждения
специальными лабораторными тестами.
Определение IgG-антител к ЦМВ с использованием набора ИммуноФА-IgGЦМВ может быть рекомендовано в качестве скринингового исследования
беременных, реципиентов трансплантантов и пациентов с ослабленным
иммунитетом с целью выявления ранее перенесенной ЦМВ-инфекции.
Принцип метода – непрямой двухстадийный ИФА
S
Е
Е
Е
Е
Е
Е
P
Иммобилизованный
антиген
Анализируемый
образец
Иммобилизованные иммунокомплексы
Конъюгат
вторичных
антител с
пероксидазой
Иммобилизованные
иммунокомплексы с
мечеными антителами
Субстратная
реакция
СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА
1. Внесение в лунки планшета: по 0,1 мл положительного, отрицательного и
порогового контрольных образцов, разведенных в 101 раз образцов исследуемых
сывороток крови и инкубация (30 мин, +37оС).
2. Промывка лунок планшета.
3. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл конъюгата и инкубация (30 мин, +37оС).
4. Промывка лунок планшета.
5. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл субстратного раствора и инкубация (15 мин,
+37оС).
6. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл стоп-реагента.
7. Измерение оптической плотности (λ=450 нм), интерпретация результатов.
ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Чувствительность набора относительно ОСО 42-28-360-01 (утверждена ГИСК им. Л.А.
Тарасевича) составляет 100%.
Специфичность набора относительно ОСО 42-28-360-01 (утверждена ГИСК им. Л.А.
Тарасевича) составляет 100%.
Результаты ИФА учитываются при следующих условиях:
Значение ОПК+(ср) - не ниже 1,0.
Значение ОПК-(ср) - не выше 0,15.
Значение ОПКпор(ср) - не выше 0,2.
В противном случае исследование необходимо повторить.
Интерпретация результатов
Результат анализа исследуемых образцов следует считать:
положительным при ОП выше 1,1х ОПпор(исследуемый образец содержит IgG к ЦМВ),
отрицательным при ОП ниже 0,9х ОПпор (исследуемый образец не содержит IgG к ЦМВ).
Результаты при ОП в диапазоне 0,9хОПпор – 1,1хОПпор являются сомнительными,
рекомендуется исследовать образцы сыворотки крови повторно. Также рекомендуется повторное
исследование вновь полученных сывороток.
Длина волны измерения: 450 нм.
Субстрат: 3,3`,5,5`-тетраметилбензидин (ТМБ).
Условия инкубации (время, tоС) :
- 1-ая инкубация 30 мин при +37оС;
- 2-ая инкубация 30 мин при +37оС;
- инкубация с ТМБ 15 мин при +37оС.
Время проведения анализа: 1 час 30 минут.
Объем пробы: 100 мкл.
Количество анализируемой сыворотки: 10 мкл (для анализа сыворотка разводится в 101
раз и анализируется 100 мкл разведенной сыворотки).
Количество анализов: набор рассчитан на проведение 96 анализов, включая контрольные
образцы.
Планшеты: стрипованные, разделяющиеся на отдельные лунки.
Срок годности набора: 12 месяцев.
Все реагенты набора представлены в жидком виде.