Асистент Кучмак О.Б.

Патогенные коки. Роль в патологии
человека. Принципы
микробиологической диагностики,
специфического лечения.
Асистент Кучмак О.Б.
План лекции
Вступление
• Общая
характеристика
семейства
Enterobacteriaceae
• Биологические свойства
и методы
лабораторнаой
диагностики
заболеваний, вызванных Е. сoli
• Возбудители
сальмонеллезов.
Заболевание, какие они вызывают и
методы лабораторной диагностики
•
Семейство Enterobacteriaceae
• Бактерии
семейства Enterobacteriaceae
включает более чем 20 родов, что
объеденяет около 100 видов бактерий.
Заболевания у человека вызывают бактерии
родов Escherichia, Shigella, Salmonella,
Klebsiella, Proteus, Citrobacter, Serracia,
Yersinia и др.
• На данное время большое значение
приобретает
роль
условно-патогенной
флоры,
которая
часто
вызывает
оппортунистичные инфекции, при этом
вызывают около 50 % всех септицемий, до 70
% всех гастроэнтеритов, и более чем 70 %
инфекций мочевыделительных путей.
Классификация семейства Enterobacteriaceae
Escherichia
Shigella
Edwardsiella
Salmonella
Citrobacter
Enterobacter
Serratia
Providencia
Yersinia
Klebsiella
Hafnia
Proteus
Morganella
Erwinia
Эшерихии (Escherichia)
• Свое название бактерии получили в честь
немецкого педиатра Теодора Ешериха,
который
впервые
выделил
Е.coli
из
содержаимого кишечника детей.
В род
Escherichia входят подвижные (перитрихи)
прямые палочковидные бактерии розмером
1,1-1,5 х 2,0-6,0 мкм. В мазках они
располагаются одиночно или парами. У
большинства штаммов есть капсулы или
микрокапсулы. Температурный оптимум для
роста составляет 37 ˚ С. Ешерихии
ферментируют углеводы с образованием
кислоты
или
кислоты
и
газа,
оксидазоотрицательные
и
каталазоположительные.
Антигенная структура Е. сoli
• Поскольку морфологических отличий между
патогенными и непатогенными кишечными
палочками
нет,
их
дифференциация
базируется на отличиях Аг-структуры. У Е.
сoli
выделяют липополисахаридные (О-),
жгутиковые белковые (Н-), капсульные
полисахаридные (К) Аг, которые обозначают
арабскими цифрами. На практике используют
соотношение О:Н (выделено 173 О- и 56 Нсероваров). За К-Аг бактрии разделяют на
три группы (L, B, и А), за их структурой
выделяют 80 сероваров.
Ферментативные свойства Е. сoli.
• На средах Гисса Е. сoli ферментируют
углеводы с образованием кислоты и газа. На
селективно-дифференциальных
средах
колонии приобретают цвет среды. На агаре
Эндо
лактозоположительные
эшерихии
образуют фуксиново-малиновые колонии с
металлическим блеском, лактозонегативные бледно-розовые или бесцветные с темным
центром.
На
среде
Левина
лактозоположительные - формируют темнофиолетовые колонии с металлическим
блеском, а лактозонегативные - бесцветные.
На среде Плоскирева - соответственно розово-красные и бесцветные. На КА полный гемолиз.
Биохимические свойства E. coli
• По способности Е. сoli ферментировать лактозу их
разделяют
на
лактозоположительные
и
лактозоотрицательные . Бактерии образуют индол,
востанавливают нитраты и декарбоксилируют лизин,
ферментируют глюкозу с образованием кислоты и
газа, некоторые штаммы ферментируют сахарозу,
практически все лактозу и манит.
• Е. сoli имеют типичную для энтеробактерий форму
(короткие подвижные палочки с закругленными
концами). На плотных средах образуют плоские,
мутные, выпуклые S-колонии с неровными или слегка
волнистыми краями 3-5 мм в диаметре, или сухие,
плоские R-колонии с неровными краями. В жидких
средах растут диффузно, вызывая помутнение
среды с образованием осадка (реже образуют
поверхностную пленку или пристеночное кольцо).
E. coli в мазке окрашеном по методу Грамма
E. сoli по Грамму
Р
і
с
т
Колонии E. coli на МПА
Колонии E. coli на среде Эндо
Патогенез поражений и
клинические проявления.
• У человека кишечная палочка вызывает кишечные
инфекции, поражения мочевыделительных путей,
бактериемию, менингит, респираторные инфекции.
• Кишечные инфекции разделяют на 5 типов:
энтеротоксигенные
(ЭТКП),
энтеропатогенные
(ЭПКП),
энтерогеморрагические
(ЭГКП),
энтероинвазивные
(ЭКП)
и
энтероадгезивные
(ЭАКП). Основной путь передачи ешерихий, которые
вызывают диарею - фекально-оральный. Наиболее
часто человек инфицируется при употреблении
контаминированной еды, воды и при контакте с
животными.
• Энтеротоксигенные эшерихии вызывают
холероподобные заболевания (серовары
О6,О 8,О11,О15,О25, О27,О115, О126,
О148), энтеропатогенные - классические
колиентериты (О26,О55,О125,О127,О142),
энтероинвазивные - дизентериеподобные
поражения (О28,О29,О143,О144),
энтерогеморрагические - диарреи с
выделением крови (О26,О111,О157).
Энтероадгезивные кишечные палочки еще
недостаточно изучены.
Клинические проявления колиэнтеритов
Клинические проявления колиэнтеритов
Клинические проявления колиэнтеритов
Возбудители сальмонеллезов
(гастроэнтероколитов)
• По
морфологическим
и
культуральным
свойствам сальмонеллы похожие на эшерихии,
брюшнотифозные и паратифозные бактерии. Они
отличаются
некоторыми
биохимическими
признаками,
но
дифференцируют
их
по
антигенной структуре в реакции агглютинации.
Кроме того, большинство сальмонелл патогенны
для белых мышей. Возбудители сальмонеллезов
выделяют энтеротоксины и имеют эндотоксины,
которые
предопределяют
клиническую
симптоматику
заболеваний
и
явления
интоксикации организма больного человека.
Родовое название для этих бактерий дали в
честь Д. Сальмона, который описал одного из
возбудителей. Самое частое заболевание
вызывают
Salmonella
typhimurium,
S.
enteritidis, S. heidelberg, S. anatum, S. haifa, S.
derby, S. cholerae suis и др. Всего же известно
свыше 2200 сероваров сальмонелл, которые
отличаются
по
Ои
Н-антигенам.
Большинство сальмонелл патогенны для
человека и для разных животных и птиц.
Сальмонеллы брюшного тифа и паратифа,
патогенны только для человека и вызывают
совсем
другие
клинические
формы
заболеваний.
Електронная микроскопия сальмонелл
Морфология сальмонелл по Грамму
Лабораторная диагностика.
• Материалом для исследования является испражнения,
рвотные массы, промывные воды желудка, кровь,
моча. Одновременно проводят исследование остатков
еды как возможных факторов передачи возбудителей.
Материалы нужно забирать до начала лечения.
•
Посевы делают на среды Эндо, Плоскирева, висмутсульфит агар, выделяют чистые культуры, которые
идентифицируют
в
реакции
агглютинации
с
групповыми и монорецепторными сыворотками.
Целесообразно поставить биологическую пробу на
мышах не только с выделенными культурами, но и с
остатками подозрительной еды. Для ретроспективной
диагностики используют реакцию агглютинации и РНГА
с эритроцитарными диагностикумами. Диагностическое
значение имеет нарастание титра антител в динамике
при использовании парных сывороток. При очаговых
вспышках заболеваний как экспресс-метод используют
реакцию иммунофлуоресценции.
Возбудители брюшного тифа и
паратифов
Возбудитель брюшного тифа Salmonella typhi
открыл К. Еберт в 1880 году, в чистой
культуре его выделил Г. Гаффки в 1884 году.
Г. Шотмюллер описал возбудителя паратифа
B (S. schottmuelleri), А. Брион и Х. Кайзер паратифа А (S. paratyphi А), а Л. Гиршфельд паратифа С (S. paratyphi C).
Колонии сальмонелл на МПА
Колонии сальмонелл на висмут-сульфит агаре
Колонии S. paratyphi B на висмут-сульфит агаре
Антигенная структура S. typhi
Биохимические свойства S. typhi
Ферментативные свойства
тифозо-паратифозных бактерий
Вид
Salmonella
typhi
Salmonella
paratyphi A
Salmonella
schottmuelleri
лактоза глюкоза
мальтоза манит сахароза
индол H2S
-
к
к
к
-
-
+
-
кг
кг
кг
-
-
-
-
кг
кг
кг
-
-
+
Фазы патогенеза брюшного тифа
•
•
•
•
•
•
1. дигестивная
2. инвазии
3. бактериемии
4. паренхиматозной диффузии
5. аллергически-выделительная
6. реконвалесценции
Лабораторная диагностика
•
Цель диагностики - выделение возбудителей и
выявление антител. В первые дни заболевания и
позже, пока есть температура, применяют метод
гемокультури. Для ее выделения сеют 10 мл крови в
среду Раппопорт или желчный бульйон в
соотношении 1:10. Посевы инкубируют при 37 °С,
делают пересев на среду Эндо. Типичные колонии
отсевают на скошенный агар Олькеницкого.
Выделенную чистую культуру идентифицируют за
ферментативними
свойствами
и
реакцией
агглютинации со специфическими сыворотками.
Метод
гемокультуры
является
ранним
и
достоверным методом диагностики. Он имеет
абсолютное диагностическое значение.
• Серологические исследования проводятся
как для диагностики заболевания так и для
установления
бактерионосительства.
С
диагностической целью ставят развернутую
объемную реакцию Видаля (с О- и Ндиагностикумами) и РНГА с О- и Viэритроцитарными диагностикумами. РНГА
более надежная и специфическая реакция.
Последнее время широко используют метод
ИФА.
• Метод
уринои
копрокультуры
преимущественно
используют
для
диагностики
бактерионосительства
у
реконвалесцентов.