20 Возбудители шигеллезов и холеры

Возбудители шигеллезов
и холеры
Доц. Ткачук Н.И.
План лекции
Вступление
• Возбудители
бактериальной
дизентерии. Биологические свойства и
методы лабораторной диагностики
• Общая характеристика возбудителей
холеры
Семейство Enterobacteriaceae
• Бактерии
семейства Enterobacteriaceae
включает более чем 20 родов, что
объеденяет около 100 видов бактерий.
Заболевания у человека вызывают бактерии
родов Escherichia, Shigella, Salmonella,
Klebsiella, Proteus, Citrobacter, Serracia,
Yersinia и др.
• На данное время большое значение
приобретает
роль
условно-патогенной
флоры,
которая
часто
вызывает
оппортунистичные инфекции, при этом
вызывают около 50 % всех септицемий, до 70
% всех гастроэнтеритов, и более чем 70 %
инфекций мочевыделительных путей.
Классификация семейства Enterobacteriaceae
Escherichia
Shigella
Edwardsiella
Salmonella
Citrobacter
Enterobacter
Serratia
Providencia
Yersinia
Klebsiella
Hafnia
Proteus
Morganella
Erwinia
Шигеллы (Shigella)
• Бактерии получили название в честь
японского
бактериолога
Кийоси
Шига,
который
впервые
описал
возбудителя
бактериальной дизентерии (шигеллеза). В
соответствии с антигенной структурой О-Аг и
биохимическими свойствами известно 39
сероваров шигелл, которые разделяют на 4
вида: Shigella dysenteriae (серогруппа А),
Shigella flexneri (серогруппа В), Shigella boydii
(серогруппа С) и Shigella sonnei (серогруппа
D). Род образуют прямые неподвижные
палочки,
хеморганотрофы,
оксидазонегативные,
каталазопозитивные.
Оптимальная
t˚
для
культивирования
составляет 37 ˚ С.
Классификация шигелл
Подгруппы
Виды и
серотипы
Подсеротипы
A. Манитнегативные S.Dysenteria
1-12
B. Манитпозитивные S. flexneri
1, 2, 3, 4, 5, 6,
X variant Y
variant
C. Манитпозитивные S. Boydii, 1-18
D. Ферментируют
манит, медленно
сахарозу и лактозу
S. sonnei
1a, 1b, 2a,
2b, 3a, 3b,
4a, 4b
Морфология шигелл по Грамму
Рост S. Zonnei на среде Эндо
Патогенез заболевания
Важнейшей особенностью шигелл, которая
обусловливает
их
патогенность
есть
способность проникать в эпителий слизистой
оболочки толстой кишки и размножаться в
ней. Также она обусловлена факторами
адгезии, инвазии, и стойкостью к действию
защитных механизмов, а также способностью
к
токсинообразованию.
Гены,
которые
кодируют
комплекс
вирулентности
расположенные в хромосоме и плазмидах.
Микробиологическая диагностика
• Материалом для исследований являются
испражнения. Целью исследования является
определение биохимических признаков и антигенной
структуры возбудителя.
• Сеют материал на среду Эндо и Плоскирева или на
жидкие питательные среды накопления. После
выделения чистых культур определяют их видовую
принадлежность.
• Определения антигенной структуры проводят по
способности моно- и поливалентных антисывороток
агглютинировать бактерии.
• Для выявления Аг шигелл в крови, моче и
испражнениях используют РЗК, ИФА, реакцию
коагглютинации.
Особенности забора материала
при подозрении на дизентерию:
• Бактериологическое исследование по
возможности нужно начинать до начала
этиотропной терапии, забор проводят
натощак;
• Посуду для материала ошпаривают кипятком
и ни в коем случае не обрабатывают
дезрастворами;
• Исследуемый материал быстро высевают на
среду обогащения и параллельно на
селективный агар.
Возбудитель холеры (Vibrio cholerae)
• Холера - острая, карантинная, особо опасная
инфекционная болезнь с фекально-оральным
механизмом
передачи,
характеризуется
обильным
поносом,
рвотой,
сильной
интоксикацией и обезвоживанием организма.
• Холерный
вибрион
впервые
описал
итальянский ученый Ф. Пачини в 1854 г.,
детально изучил его свойства и выделил в
чистой культуре Р. Кох в 1883 г., Ф. Готшлих в
1906 г. выделил из кишечника паломника
вибрион Эль-Тор, который отличается от
холерного гемолитическими свойствами, но
также вызывает холеру.
Морфология и физиология.
•
V. cholerae, V. eltor имеют форму
изогнутых (напоминают запятую) или
прямых полиморфных палочек длиной
1,5-3 мкм, шириной 0,3-0,6 мкм, спор и
капсул не образуют, имеют один, полярно
расположенный
жгутик
(монотрих),
благодаря
которому
очень
активно
двигаются. В мазках из чистых культур
располагаются поодиночно, а в свежих
препаратах из фекалий больного имеют
вид стаек рыб.
Vibrio cholerae: 1-pure culture; 2- flagellate
Vibrio cholerae
Vibrio cholerae (електронная микроскопия)
Мазок Vibrio cholerae (чистая культура)
Культуральные свойства
• Холерные вибрионы - факультативные анаэробы,
легко культивируются в аеробних условиях при 37 °С.
К питательным средам нетребовательны, но требуют
щелочной реакции (рН 8,5-9,5). Очень хорошо и
быстро растут в 1 % щелочной пептонной воде (ПВ),
опережая рост других бактерий. Уже через 5-6 год на
ее поверхности возникает нежная пленка голубого
цвета. На щелочном МПА через 10-12 год образуют
средних размеров гладкие и блестящие круглые
прозрачные колонии с голубым оттенком и четко
очерченным краем.
Колонии Vibrio cholerae на щелочном агаре
Колонии Vibrio cholerae на среде Аронсона
Антигенная структура
• Холерные вибрионы имеют термостабильные
специфические
О-антигены
и
термолабильные жгутиковые Н-антигены. По
О-антигену все вибрионы разделены на
многие серогруппы О1, О2, О3... О80.
Холерный
вибрион
относится
до
01
серогруппе. В свою очередь 01-антиген
состоит из отдельных антигенных фракций А,
В, С. Ризные комбинации их свойственные
трем сероварам: Oгава (АВ), Инаба (АС) и
Гикошима
(АВС).
Все
три
серовара
аглютинируються 01 сывороткой. V. eltor
принадлежит к серогруппе О1. Кроме того,
есть еще серогруппы RO и О139.
Агглютинация О1
холерной сывороткой
Чувствительность
к полимиксину В
Лизис
A
A
–
–
+
+
+
Vibrio cholerae
biovar El Tor
A
A
–
+
+
+
–
Vibrio cholerae
biovar Proteus
A
A
–
+
–
–
–
Vibrio cholerae
biovar albensis
А
–
–
–
–
–
–
Vibrio
специфическим О1
арабиноз
а
манноза
фагом
Гемолиз
эритроцитов
барана
сахароза
Vibrio cholerae
biovar cholerae
Ферментация
через 24 ч.
Токсинообразование
• Холерные вибрионы выделяют два типа
токсинов: 1) белковый экзотоксин (холероген),
который действует на энтероциты тонкого
кишечника, вызывая энтерит с водянистыми
испражнениями и обезвоживание организма; 2)
эндотоксин - липополисахаридний комплекс,
который освобождается только при разрушении
вибрионов, он также принимает участие в
механизме
развития
болезни.
Токсигенные
штаммы О1, О139 имеют ген холерного токсина
(vct+) и вызывают холеру, склонную к широкому
эпидемическому распространению
Патогенез холеры
Лабораторная диагностика
• Основным и решающим в лабораторной
диагностике холеры есть бактериологическое
исследование.
От
больных
берут
испражнения,
рвотные
массы,
кусочки
загрязненного белья, от трупов - отрезки
тонкого кишечника и желчный пузырь.
Исследуют также пищевые продукты, воду,
ил, рыб, лягушек и др. Широко практикуют
прямокишечный забор. Стерильные ватный
тампон или алюминиевую петлю вводят в
прямую кишку на глубину 5-10 см, забирают
содержимое и вносят в флакон (пробирку) с 1
% щелочной ПВ.
• Микробиологические
исследования
проводят
круглосуточно. В соответствии с инструкцией МОЗ Украины
от 30.05.1997 г. они включают несколько этапов.
•
1-й этап - материал засевают в 10-50 мл 1 % ПВ;
применяют
также
экспресс-методы:
иммунофлуоресцентный и РНГА.
•
2-й этап – посев со 1-ой среды обогащения на ЩМПА
(щелочной МПА) или селективные среды и у 5 мл 2-ой
среды обогащения. Пересев в жидкие и на плотные среды
проводят с поверхности ПВ большой бактериологической
петлей диаметром 5 мм
•
3-й этап – посев со 2-ой среды обогащения на ЩМПА (или
селективные среды) через 5-6 ч. культивирования.
•
4-й этап - проводят отбор подозрительных колоний из
плотных сред через 16-24 год инкубации.
• 5-й этап - идентификация.
• 6-й этап - учитывают результаты идентификации и выдают
окончательный ответ о выделенной культуре холерного
вибриона соответствующей серогруппы: О1, RO (Инаба,
Огава, Гикошима) или О139 с указанием гемолитической
активности, чувствительности к антибиотикам.
Профилактика и лечение
• Основным в профилактике холеры является раннее
выявление больных и вибрионосителей, их госпитализация,
выявление и обсервация всех контактных лиц. Необходимо
провести
профилактическую
и
заключительную
дезинфекцию в очаге заболевания. Важное значение имеют
карантинные
мероприятия,
включая
охрану
государственных границ от заноса инфекции. Локализацию
и ликвидацию очага холеры проводят чрезвычайные
противоэпидемические комиссии области, города, района.
•
Лица, которые были в тесном контакте с больными
холерой,
подлежат
экстренной
профилактике
тетрациклином. С этой целью им дают по 0,3 г препарата 3
раза в день на протяжении 4 суток. Проводится также
широкая
санитарно-просвитительная
работа
среди
населения.
• Специфическая
профилактика
не
проводится, поскольку все три типа
вакцин (живая, убитая, холерогенанатоксин)
оказались
малоэффективными.
• Лечат
больных
эритромицином,
тетрациклином,
метациклином,
доксациклином или левомицетином на
протяжении не меньше 5 дней.
Восполняют дефицит жидкости в
органирзме.