03_Основы асептики и антисептики

Основы асептики и антисептики.
Химиотерапевтические препараты.
Антибиотики.
Исторические факты -В 60-е годы 19
века
английский
хирург
Джозеф
Листер, основываясь на открытиях
Пастера, пришел к выводу, что
микроорганизмы попадают в рану из
воздуха и с рук хирурга. В 1865 г.
применил
повязку
с
раствором
карболовой кислоты при лечении
открытого
перелома.
Листер
разработал
систему
мероприятий,
получивших наименование антисепти
ческого метода хирургической работы:
распыление
раствора
карболовой
кислоты в воздухе операционной,
обработке рук хирурга, операционного
поля, инструментов, перевязочного и
шовного материала 3% раствором
карболовой кислоты, использование
многослойных повязок, пропитанных
карболовой кислотой. Метод Листера
получил широкое распространение,
поскольку позволил снизить после
операционную
летальность
в
несколько раз.
Внедрение антисептического метода привело к новому этапу в
развитии хирургии, получившему название антисептического
периода.
Отрицательные стороны антисептического метода: - отравление
персонала и пациентов парами карболовой кислоты - сильнейшие
дерматиты и обширные некрозы тканей в зоне операционного поля
и раны.
В 1890 г. немецким хирургом Бергманом был разработан и
предложен метод использования температуры кипящей воды и пара
для уничтожения микробов на инструментах, белье, перевязочном и
шовном
материале,
названный
асептическим
методом
хирургической работы.
Асептика получила широкое применение в практической хирургии
без использования антисептических препаратов.
Антисептика - комплекс мероприятий, направленных на
уменьшение количества микробов в ране, снижение опасности их
проникновения в рану и развития в ней.
физическая антисептика – методы, создающие в ране неблагоприятные
условия для развития бактерий (марля, тампоны, дренажи).
механическая антисептика – удаление из раны микробов,
некротизированных тканей, свертков крови, инородных тел (ПХО).
химическая – использование химических веществ для уничтожения
бактерий в ране (обработка операционного поля, рук хирурга, шовного
материала и т.д.).
биологическая – повышение иммуно-биологических сил организма
(вакцины, сыворотки, плазма, кровь,антибиотики и т.д.).
Химические антисептики.
В настоящее время существует более 17 групп химических антисептиков:
группа галлоидов :
Йод – 1-5-10%спиртовая настойка. Для наружного применения.
Используется для обработки кожи вокруг раны, для обработки ссадин,
царапин, поверхностных ран;
Йодинол – 1% р- р, используется для промывания ран, полоскания зева;
Йодонат и Йодопирон – органическое соединение йода, используют 1%рр, обрабатывают операционное поле;
Повидон-йодин – органическое соединение йода (0,1 – 1% свободного
йода), используется для обработки кожи, а также раневых поверхностей.
производные нитрофурана : фурагин – применяется в виде 0,1% р-ра
для промывания гнойных ран, полостей абсцессов, санации
трахеобронхиального дерева и т.д.
Химические антисептики кислоты:
борная кислота 2-3% р-р для промывания ран, гнойных полостей и т.д.
салициловая кислота – оказывает антибактериальное действие, используется
в виде 1% и 2% спиртовых р-ров и в виде мазей.
окислители: перекись водорода и перманганат калия – при соединении с
органическими веществами выделяют атомарный кислород, обладающий
антимикробным действием.
красители: бриллиантовый зеленый и метиленовый синий – используются в
виде спиртового и водного растворов для обработки поверхностных ран и
ссадин.
детергенты: хлоргексидина биглюконат, 0,5% спиртовой р-р используется
для обработки рук хирурга и операционного поля; 0,1- 0,2% водный р-р – для
промывания ран и слизистых оболочек, лечения гнойных ран. Входит в
состав растворов для обработки рук и операционного поля ( «Пливасепт» )
Асептика - комплекс мероприятий, направленных на
предупреждение попадания возбудителей инфекции
в рану или организм человека.
Асептика – одна из основ, на которую опирается хирургия. в хирургии
необходимо соблюдение основного положения асептики – все, что
приходит в соприкосновение с раной, должно быть свободно от
бактерий, т.е. стерильно. для соблюдения этого правила следует
помнить об источниках инфекции. Этих источников два: экзогенный и
эндогенный.
СОВРЕМЕННАЯ ХИМИОТЕРАПИЯ
БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
В группу антибиотиков объединяют в
настоящее время химиотерапевтические
вещества, образуемые при биосинтезе
микроорганизмов, их производные и
аналоги, вещества, полученные путем
химического синтеза или выделенные из
природных источников
 (ткани
животных
и
растений),
обладающие способностью избирательно
подавлять в организме возбудителей
заболеваний
(бактерии,
грибы,
простейшие) или задерживать развитие
злокачественных новообразований).
 Антибиотики
могут
оказывать
иммуномодулирующее действие

ИСТОРИЯ ОТКРЫТИЯ
АНТИБИОТИКОВ
 Александр
Флеминг в 1928
году
открыл
пенициллин.
ИСТОРИЯ ОТКРЫТИЯ
АНТИБИОТИКОВ
Эрнест
Чейн
и
Говард
Вальтер
Флори
получили
стабильную
форму
пенициллина
в
Оксфорде.
 1940
год, Э.Чейн –
пенициллин
имеет
форму В-лактама.
 Г.Флори
и
фирма«Мерк» в США
запустили
производство
пенициллина
1943г

ИСТОРИЯ ОТКРЫТИЯ
АНТИБИОТИКОВ
Эрнест
Чейн
ИСТОРИЯ ОТКРЫТИЯ
АНТИБИОТИКОВ


В нашей стране в 1943
году в промышленное
производство
пенициллин запущен при
активном участии
Ермольевой З.В.
СОВРЕМЕННАЯ ХИМИОТЕРАПИЯ
БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
 Уникальные
свойства антибиотиков:
Мишень-рецептор находится не в тканях
человека, а в клетке микроорганизма.
 Активность антибиотиков не является
постоянной, а снижается со временем, что
обусловлено формированием устойчивости
(резистентности).
 Резистентность – неизбежное биологическое
явление, предотвратить ее практически
невозможно.
 Антибиотикорезистентность – это опасность не
только для пациента, но для многих других
людей.

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ




Распространение
и
эволюция
генов
резистентности – результат взаимодействия
различных генетических структур: хромосом,
плазмид,
фагов,
транслоцирующих
элементов.
Механизмы передачи генов резистентности
общие для всех процессов передачи
генетической информации.
При трансформации переносятся гены,
локализованные как в хромосоме, так и в
плазмидах.
Этот процесс имеет значение прежде всего
для пневмококков и нейссерий.
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ
 Роль
трансдукции трансдукции ( с помощью
фагов), в природе также ограничена.
 Основным
способом
переноса
генов,
локализованных в плазмидах, в пределах
одного вида или между родственными
видами является конъюгация.
 Передача плазмид происходит с высокой
частотой, что приводит к распространению
штаммов с внехромосомной устойчивостью.
 Приобретает характер эпидемии.
КОНЪЮГАЦИЯ У БАКТЕРИЙ
СВОЙСТВА
НИМ.
АНТИБИОТИКОВ И ТРЕБОВАНИЯ К
Высокая
биологическая
активность
по
отношению
к
чувствительным
микроорганизмам.
 Избирательность действия
- активность
в
отношении отдельных групп микроорганизмов.
 Требования :
 Максимальная терапевтическая эффективность
при минимальной концентрации в организме
человека.
 Максимальное
действие при минимальной
токсичности.
 Стабильность при широких диапазонах рН(per
os).
 Не вызывать аллергических реакций у хозяина

КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИБИОТИКОВ
По происхождению:
 Природные:


Из собственно бактерий (грамицидин с)
Из актиномицетов (стрептомицин)
Из грибов и лишайников (пенициллин,
цефалоспорины).
Полусинтетические – продукты модификации
молекул:
Оксациллин, ампициллин и др.

Синтетические :






Сульфаниламиды
Хлорамфеникол – природный, но получают синетичесим
путем
КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИБИОТИКОВ
 По
спектру антимикробной
активности:
Антибактериальные
 Противогрибковые
 Антипротозойные

 По
типу взаимодействия:
Бактериостатические – ингибируют рост, но не
вызывают гибели бактерий, клетки сохраняют
способность к росту (макролиды).
 Бактерицидные – убивают бактериальную
клетку (аминогликозиды,
пенициллины,цефалоспорины).

КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИБИОТИКОВ
ПО МЕХАНИЗМУ ДЕЙСТВИЯ
Ингибиторы синтеза клеточной стенки.
 Ингибиторы синтеза белка на рибосомах.
 Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот
 Нарушающие функцию мембран клетки

ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ- ВЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ
МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ В-ЛАКТАМНЫХ
АНТИБИОТИКОВ
Ингибируют
фермент
транспептидазу (осуществляет образование поперечных «межпептидных» связей
между линейными цепями
муреина).
Транспептидаза
один из
пенициллин связывающих
протеинов (ПСП).
В присутствии пенициллина в
бактериальной
клетке
активируют
аутолизины,
разрушающие
пептидогликан.

В-ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ






Пенициллин (природный).
Высокая активность по
отношению Г+ коккам. Г+
палочковидным
бактериям (бациллы и
клостридии), Г- кокки
(менингококки).
Бактерицидный эффект.
Неактивны по отношению
Г- палочковидным
(энтеробактерии:клебсиеллы, эшерихии, протеи).
Разрушаются
Влактамаза-ми
(пенициллиназа).
МЕХАНИЗМЫ ВОЗНИКНОВЕНИЯ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ




Продукция ферментов:
разрушающих антибиотик,
таких
как
B-лактамазы
(разрушают
В-лактамное
кольцо).
Модифицирующих
антибиотик
(добавляются новые химические группы, которые
инактивируют антибиотик).
МЕХАНИЗМЫ ВОЗНИКНОВЕНИЯ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ
Изменение структуры
мишени
транспептидазы
(ПСП)– антибиотик не
может
связаться
с
мишенью и возникает
резистентность ко всем
В-лактамным
антибиотикам (MRSA).
МЕХАНИЗМЫ ВОЗНИКНОВЕНИЯ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ
 Изменение
проницаемости
 клеточных
мембран.
МЕХАНИЗМЫ ВОЗНИКНОВЕНИЯ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ

Изменение
структуры
транспортных
систем.
В-ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ





Полусинтетические
пенициллины.
Антистафилококковые
пенициллины
(оксациллин,
клоксациллин).
Спектр активности как у
пенициллина.
Устойчивы к действию
пенициллиназы,(фермент,
разрушающий антибиотик),
эффективны в отношении
PRSA, в этом основное
клиническое значение
препаратов.
В-ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ






Аминопенициллины
(ампициллин,
амоксициллин).
Широкий спектр активности,
действует на грамотрицательные (эшерихии,протеи,
сальмонеллы).
Неэффективен в отношении
синегнойной палочки и
клебсиелл.
Слабее чем пенициллин в
отношении стрептококков
В-ЛАКТАМНЫЕ
СТРУКТУРНО БЛИЗКИЕ ПЕНИЦИЛЛИНАМ
СОЕДИНЕНИЯ

Карбапенемы

(имипенем, мерапенем)

Широкий спектр активности в
отношении всех клинически
значимых микроорганизмов,
включая
проблемные
(синегнойная
палочка,
энтерококк,
неспорообразующие
анаэробы).
Неактивны
в
отношении
MRSA.
Антибиотики
резерва,
назначаются при тяжелых
инфекциях,
вызванных
множественно
устойчивыми
микроорганизмами
Ингибируют в-лактамазы.

В-ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ
ЦЕФАЛОСПОРИНЫ
Общие свойства цефалоспоринов:
 Выраженный
бактерицидный эффект.
 Низкая токсичность.
 Широкий
терапевтический
диапазон.
 Синергизм
с
аминоглико-зидами.
 Не
действуют
на
энтеро-кокки,MRSA.

В- ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ
ЦЕФАЛОСПОРИНЫ
I поколение цефалоспоринов:
 Цефазолин, цефалотин,цефамезин.
 Спектр активности :
 Активны
в
отношении
грамположительных микроорганизмов.
 Умеренная
активность в отношении
грамотрицательных.
 Не действует на синегнойную палочку,
серрации.
 энтерококки,MRSA.
 Устойчивы
к
стафилококковым
Влактамазам.

В- ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ
ЦЕФАЛОСПОРИНЫ
II поколение цефалоспоринов6
 Цефамандол, цефуроксим, цефаклор,
цефметазол.
 По спектру активности в отношении
грамположительных бактерий аналогичны
цефалоспоринам I поколения.
 Более активны по отношению к
грамотрицательным бактериям
 (клебсиеллы, эшерихии,сальмонеллы).
 Не
действует на синегнойную палочку,
серрации. энтерококки,MRSA.

В- ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ
ЦЕФАЛОСПОРИНЫ





III
поколение
цефалоспоринов:
цефотаксим
(клафоран), цефтазидим (фортум).
Высокая активность в отношении грамотрицательных
бактерий (включая госпитальные штаммы).
Активность в отношении синегнойной палочки.
Избирательная (цефтазидим)
fragilis). активность.
антианаэробная
(
B.
В отношении грамположительных кокков активность ниже,
чем у цефалоспоринов I – II поколений

Не действуют на энтерококки,MRSA.

Применяются для лечения тяжелых форм инфекций.
В- ЛАКТАМНЫЕ АНТИБИОТИКИ
ЦЕФАЛОСПОРИНЫ
IV поколение цефалоспоринов:
 Цефпирон, цефитим.
 Широкий спектр активности в отношении всех
клинически значимых микроорганизмов, включая
проблемные (синегнойная палочка, энтерококк,
неспорообразующие анаэробы).
 Не действуют на энтерококки,MRSA.
 Устойчивы к действию В-лактамаз.

ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ В-ЛАКТАМНЫХ
АНТИБИОТИКОВ.
Ампициллин, пенициллин – аллергические
реакции.
Ампициллин,
в
меньшей
степени
цефалоспорины – дисбактериоз.
Очень
высокие
дозы
пенициллина
нейротоксический
эффект.
ИНГИБИРОВАНИЕ СИНТЕЗА
КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ
ВАНКОМИЦИНОМ



Ванкомицин,
ристомицин.
Нарушают
синтез
клеточной стенки, путем
комплексообразования с
различными пептидными
структурами и блокирует
оба
процесса:
образование
гликозидных
и
межпептид-ных связей.
В результате нарушается
целостность
клеточной
стенки и
наступает
осмотический
лизис
бактериальной клетки.
ГЛИКОПЕПТИДНЫЕ АНТИБИОТИКИ




Ванкомицин активен в
отношении
большинства
грамположительных
кокков, включая MRSA.
Не
действует
на
грамотрицательные
бактерии
и
микобактерии.
Препарат
выбора
для
лечения
инфекций,
вызванных
MRSA
и
энтерококками.
Токсичен
(ототоксичность,
нефротоксичен, флебиты).
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
 Аминогликозиды



Содержат
аминосахара,
соединенные
гликозидной
связью
с
агликановым
фрагментом.
Связываются
с
30Sсубъединицей рибосом.
Бактерицидный
эффект
связан
с
нарушением
механизма
связывания
рибосом
с
Т-РНК
и
образованием дефектных
инициационных
комплексов
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
 Аминогликозиды







I поколение – стрептомицин, канамицин, мономицин.
Активны в отношении грамотрицательных бактерий и
микобактерий, возбудителей туберкулеза, бруцеллеза.
II поколение – гентамицин, тобрамицин.
Активны в отношении грамотрицательных бактерий,
включая синегнойную палочку, энтеробактеры,
серрации.Грамположительные кокки.
III поколение –амикацин, нетилмицин
Активны в отношении грамотрицательных бактерий,
включая синегнойную палочку, энтеробактеры, серрации.
Устойчивы к ферментам, инактивирующими другие
аминогликозиды. Грамположительные кокки.
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
 Аминогликозиды-
побочные действия.
 Нефротоксический эффект – нарушения
функции почек ( выражен у гентамицина).
 Ототоксичность – повреждения слухового
нерва ( стрептомицин).
 Нарушается передача импульса в нервномышечном аппарате (курареподобный
эффект).
МЕХАНИЗМ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К
АМИНОГЛИКОЗИДАМ





Важнейший механизм –
ферментативный.
Добавляются
новые
химические
группы,
которые
инактивируют
антибиотик.
Метилирование
Ацетилирование
Фосфорилирование
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА







Макролиды в структуре
содержат макроциклическое
лактонное кольцо, связанное
с углеводными остатками.
Природные :
эритромицин,
олеанодомицин,
рокситромицин
Полусинтетические
Азитромицин
Кларитромицин
МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ МАКРОЛИДОВ

Связываются с 50S
субъединицей
рибосом.
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
Общие свойства макролидов:
 Бактеристатическое действие.
 Преимущественная
активность
против
грамположительных
кокков
(стрептококки, стафилококки).
 Активность
против хламидий, микоплазм.
риккетсий.
 Неактивны
в
отношении
грамотрицательных бактерий.
 Очень низкая токсичность.
 Усиливают перистальтику кишечника

ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
Производное эритромицина азитромицин
(азалиды).
 Обладает
уникальной
способностью
накапливаться внутри эукариотической
клетки
и
во
внесосудистом
русле.Концентрация в тканях в 100 раз
выше, чем в сыворотке.
 Более
активны
в
отношении
грамотрицательных бактерий, включая
H.influensa, N. gonorrhoeae.
 Препарат выбора для лечения инфекций,
передающихся половым путем и инфекций
верхних дыхательных путей.

МЕХАНИЗМ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К
МАКРОЛИДАМ

Механизм резистентности к
макролидам
ферментатив-ный,
метилирование
2х
адениловых остатков в 23S
рибосомальной РНК, антибиотик не соединяется с
рибосомой.
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА







Линкомицин
дамицин.
Связываются
субъединицей
и
с
клин50S
По антимикробному действию
близки к макролидам.
Активны
а
отношении
грамположительных кокков
Некоторых
грамположительных
палочек, микоплазм.
Выражена антианаэробная
активность
Не
действуют
грамотрицательные.
на
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
 Линкомицин
и клиндамицин.
Накапливается в костной ткани.
 Иммуномодуляторы.
 Побочные
эффекты
–
псевдомембранозный
 колит,
что
связано
с
избыточным
размножением Closridium difficile.

ПСЕВДОМЕМБРАНОЗНЫЙ КОЛИТ
Побочные
эффекты
псевдомембранозный
 колит.
 Связано
с
избыточным
размножением
Closridium difficile.
 2 токсина
 Энтеротоксин
 Цитотоксин
Возникает
диарея,
воспаление.
Лечение ванкомицином

ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
 Тетрациклины
(доксациклин)
связываются с 30S
субъединицей,
воздействует и на 70S
млекопитающих.
 Широкий
спектр
активности: Г+, Г-,
хламидии, риккетсии,
бруцеллы, йерсинии.
 Новое
поколениеглилцилциклин.
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
Побочные эффекты тетрациклинов.
 «Черные зубы у детей».Откладываются в
костной ткани.
 Фотосенсибилизация.
 ЖКТ – рвота натощак.

ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
 Оксазолидины
 Линезолид
- новое
поколение
антибиотиков.
ИНГИБИТОРЫ СИНТЕЗА БЕЛКА
Линезолид новая группа антибиотиков.
 Связывается с 23S рибосомальной РНК в 50
Sсубъединице рибосом.
 Активен в отношении ванкомицинрезистентных энтерококков метициллинрезистентных стафилококков, пенициллинрезистентных пневмококков.
 Бактерицидный эффект в отношении
пневмококков.
 Бактериостатический по отношению
энтерококков и метициллин-резистентных
стафилококков.

ПРЕПАРАТЫ, НАРУШАЮЩИЕ СИНТЕЗ
НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ.

Первые хинолоны налидиксовая кислота.

Фторхинолоны






Ципрофлоксацин
Офлоксацин
Норфлоксацин.
«Респираторные
фторхинолоны»
Левофлоксацин, мoксифлоксацин.
МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ
ФТОРХИНОЛОНОВ



Ингибируют фермент –
ДНК-гиразу,
бактериальную)
нарушается
суперспирализация ДНК.
Бактериальная клетка не
может осуществлять
репликацию ДНК
МЕХАНИЗМ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К
ФТОРХИНОЛОНОВ
Изменение структурымишени ДНК-гиразы
и топоизомеразы IV.
ПРЕПАРАТЫ, НАРУШАЮЩИЕ
НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ






Рифампицин –
нарушает синтез
бактериальной РНК,
блокируя фермент
фермент РНК
полимеразу.
Активны в отношении
M.tuberculosis,
N.meningitidis,
H.influenzae.
Окрашивает при
выведении в оранжевый
цвет мочу, слюну.
СИНТЕЗ
АНТИБИОТИКИ, НАРУШАЮЩИЕ
ФУНКЦИЮ МЕМБРАН КЛЕТКИ.






Полимиксины
семейство полипептидных
Антибиотиков.
Полимиксин
Е
–
циклический полипептид, в
его составе 10 аминокислот.
Положительно
заряженные
аминогруппы действуют как
детергент,
разрывает
фосфолипидные структу-ры в
мембране клетки.
Активен в отношении Гбактерий,
особенно
синегнойной палочки.
Нефротоксичен,
нейротоксичен.
АНТИБИОТИКИ, НАРУШАЮЩИЕ ФУНКЦИЮ
МЕМБРАН КЛЕТКИ.
 Липопептидные
антибиотики-новый
класс мембраноактивных антибиотиков.
 Даптомицин – бактерицидная активность
в отношении резистентных Г+ кокков
(энтерококков, метициллин-резистентных
стафилококков. Вызывает деполяризацию
 Цитоплазматическойю
 Резистентность редкою
 Токсичны
ПРЕПАРАТЫ, НАРУШАЮЩИЕ
МЕМБРАНЫ КЛЕТОК ГРИБОВ
Полиеновые
антибиотики (
содержат много
ненасыщенных
двойных связей в
макролидной
структуре), связываются
с эргостеролами
мембран грибов.
 Амфотерицин В

Методы определения чувствительности к антимикробным
средствам.
1) серийные разведения в жидких средах;
2) серийные разведения в плотных средах;
3) диффузные методы;
4) новые методы определения чувствительности бактерий к
химиопрепаратам.
Разведение в плотных питательных средах
Ускореные методы определения
чувствительности микроорганизмов к
антибиотикам
· определение изменений ферментативной
активности микроорганизмов под
воздействием антибиотиков;
· определение цвета редокс-индикаторов при
изменении окислительно-восстановительного
потенциала во время роста бактерий в
питательной среде;
цитологичная оценка изменений морфологии
бактериальных клеток под воздействием
антибиотиков;
автоматизированное.
К первой группе принадлежит метод Роджерса,
который
ориентируется
на
способность
антибиотиков
подавлять
ферментативную
активность чувствительных микроорганизмов,
которая сопровождается изменением цвета
соответствующего
индикатора.
Суть
его
заключается в дифференцированном изменении
красного цвета фенолового красного на желтый
или
фиолетовый
в
зависимости
от
чувствительности исследуемого штамма. В
случае
чувствительности
к
действию
антибиотика не происходит разложение глюкозы
при культивировании в среде, которое содержит
ее и определены концентрации препарата.
Вторая группа методов регистрирует
изменения
окислительновосстановительного потенциала среды
в процессе роста микроорганизмов, о
чем свидетельствует изменение цвета
резазурина, 1,3,5-трифенилтетразолия
хлорида, 2,6-дихлорфенолиндофенола
и других, которые добавляются к среде.
Этот метод технически простой, а
результаты могут быть получены через
2-6 часа.
Третья группа методов. Образование
инволюционных форм бактерий под
воздействием антибиотиков исследуют
под фазово-контрастным или
антоптральным микроскопом в
специальных микрокапсулах. Они
образуются в результате действия
бактериостатических концентраций
препарата. Под воздействием
суббактериостатических концентраций, а
также при резистентности исследуемого
штамма на поверхности агара вырастают
нормальные микроколонии.
Автоматизированное определение
антибиотикочувствительности