Wilkins Chalgren Anaerobic Agar

advertisement
Wilkins Chalgren Anaerobic Agar / Broth
Анаэробный агар по Вилкинсу-Чалгрену / Анаэробный
бульон по Вилкинсу-Чалгрену
M832 /
M863
Этот агар используют для выделения и культивирования, а также определения
чувствительности методом разведения в агаре анаэробных бактерий.
Состав**:
Ингредиенты
Гидролизат казеина
Пептический перевар животной ткани
Дрожжевой экстракт
Глюкоза
Натрия хлорид
L-Аргинин
Натрия пируват
Гемин
Менадион
Агар-агар
М832
грамм/литр
М863
грамм/литр
10,00
10,00
5,00
1,00
5,00
1,00
1,00
0,005
0,0005
10,00
10,00
10,00
5,00
1,00
5,00
1,00
1,00
0,005
0,0005
–
Конечное значение рН (при 25ºС) 7,1 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 43,0 г порошка М832 или 33,0 г порошка М863 в 1000 мл дистиллированной
воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в соответствующую
посуду. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15 мин. Перед
внесением антибиотиков остудить до 50ºС. Осторожно перемешать и разлить в
стерильные чашки Петри. Для культивирования анаэробов в стерильную расплавленную
среду перед розливом в чашки внести добавку FD001 или добавку FD002 (по желанию).
Принцип и оценка результата:
Эти среды готовят по прописи Wilkins и Chalgren (1), предложенной для определения
минимальных ингибирующих концентраций (МИК) антибиотиков в отношении
анаэробных бактерий. Последние хорошо растут на этих средах. В отличие от других
сред, в данном случае не требуется добавление крови.
Дрожжевой экстракт является источником витаминов и других факторов роста, например,
пуринов и пиримидинов, которые важны для роста Prevotella melaninogenica. Аргинин
служит источником аминокислот, в частности, для Eubacterium lentum, а пируват –
источником энергии для асахаролитических кокков, например, вейллонелл (2). Гемин
нужен для роста бактероидов (3), а менадион – для роста Prevotella (Bacteroides)
melaninogenica. Пептический перевар животной ткани и гидролизат казеина способствуют
стандартизации условий в среде.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю (М832).
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри
или пробирках формируется гель.
Кислотность среды:
При 25ºС водные растворы М832 (4,3% вес/об) или М863 (3,3% вес/об) имеют рН 7,1 ±
0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35ºС в анаэробных условиях.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Bacteroides fragilis (25285)
Bacteroides melaninogenicus (15930)
Clostridium perfringens (12924)
Escherichia coli (25922)
Рост
Обильный
Обильный
Обильный
Подавляется
Ссылки:
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.
Download