Nutrient Gelatin

Nutrient Gelatin
Питательный желатин
M060
Среду рекомендуют для определения протеолитических свойств микроорганизмов в тесте
разжижения желатина.
Состав**:
Ингредиенты
Пептический перевар животной ткани
Мясной экстракт
Желатин
грамм/литр
5,00
3,00
120,00
Конечное значение рН (при 25ºС) 6,8 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 128,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до 50ºС для
полного растворения частиц. Разлить в пробирки для тестирования. Стерилизовать
автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Питательный желатин готовят по прописи, используемой для санитарномикробиологических исследований воды, стоков и других материалов (1). Разжижение
желатины является важным тестом для дифференциации кишечных бактерий (2). Эту
среду можно использовать также для подсчета микроорганизмов в воде чашечным
методом.
Пептический перевар животной ткани и мясной экстракт обеспечивают присутствие в
среде соединений азота, углерода, серы и микроэлементов, необходимых для роста
неприхотливых микроорганизмов. Если у них имеется протеолитический фермент
желатиназа, происходит разжижение желатина.
Чистые 18-24-часовые культуры с Трехсахарного железосодержащего агара (М021) или
Среды Клиглера (М078) засевают уколом в пробирки с Питательным желатином. Для
разжижения желатина многим видам требуется длительное инкубирование (3, 4). Желатин
имеет плотную консистенцию при температурах ниже 20ºС и жидкую – при 35ºС и выше.
Желатин разжижается при 28ºС, поэтому посевы инкубируют при 35ºС, но перед учетом
результатов выдерживают их около 2 часов в холодильнике (3). Так как разжижение
желатина происходит в верхних слоях среды, рекомендуется не встряхивать пробирки в
ходе манипуляций (5). Для каждого исследования необходим контроль, так как
желирующие свойства желатина заметно варьируют (3). Превышение концентрации 12%
желатина может привести к подавлению роста микроорганизмов (6). Для подсчета
микроорганизмов в воде чашечным методом инкубирование ведут при 20-22ºС до 30
суток.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 12%-ному желатиновому
гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в
пробирках формируется гель.
Кислотность среды:
При 25ºС водный раствор (12,8% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 1-7 дней при 35-37ºС.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Желатиназа*
Bacillus subtilis (6633)
Хороший или обильный
+
**Clostridium perfringens (12924)
Хороший или обильный
+
Escherichia coli (25922)
Хороший или обильный
–
Staphylococcus aureus (25923)
Хороший или обильный
+
Proteus vulgaris (13315)
Хороший или обильный
+
Примечание: * = для определения желатиназной активности охладить до температуры
ниже 20ºС
** = в анаэробных условиях.
Ссылки:
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.