Основа среды Киршнера

Основа среды Киршнера
Kirschner Medium Base, Modified
Основа среды Киршнера, модифицированная
Основа среды Киршнера, с добавлением глицерина и лошадиной сыворотки,
используется для культивирования Mycobacterium tuberculоsis.
Состав**:
Ингредиенты
грамм/литр
Натрия гидрофосфат
3,00
Калия дигидрофосфат
4,00
Магния сульфат
0,60
Натрия цитрат
2,50
L–Аспарагин
5,00
М161
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 15,1 г порошка в 700 мл дистиллированной воды. Добавить 200 мл глицерина.
Нагреть до кипения для полного растворения компонентов среды. Разлить по 9 мл в
пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 0,5 атм ( 1150С ) в течение 15 мин.
Непосредственно перед использованием асептически добавить по 1 мл лошадиной
сыворотки (Horse Serum FD074 или RM1239) и 100 ед бензилпенициллина в каждую
пробирку.
Принцип и оценка результата:
Cреда Киршнера, основанная на прописи Лонга (1) и впоследствии модифицированная
добавлением глицерина и лошадиной сыворотки, предназначенадля
культивирования M.tuberculоsis. Среда широко используется в исследованиях активности
противотуберкулезных препаратов, а также для дифференциации культурM.tuberculоsis,
выделенных из патогенного материала.
Среда Киршнера содержит сильную буферную систему, поэтому вносить образцы можно
без предварительной нейтрализации. L-Аспарагин поддерживает рост микобактерий,
лошадиная сыворотка усиливает их рост, бензилпенициллин ингибирует рост
сопутствующей флоры.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок белого цвета.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Бесцветный раствор имеет слабый белый преципитат на дне.
Кислотность среды:
При 250С водный раствор (1,51% вес/объем) имеет pH 7,4+0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
M.tuberculоsis H37 Rv (25618)
Обильный
M.smegmatis (14468)
Обильный
M.fortuitum (6841)
Обильный
Ссылки:
1. Bacer F.J. and Breach M.R., 1980, Medical Microbiological Tectniques, Butterworths and
Co. Ltd.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.