Основа бульона для определения токсигенности Clostridium

Основа бульона для определения токсигенности Clostridium botulinum
Tryptone Peptone Glucose Yeast Extract Broth Base
Основа бульона для определения токсигенности Clostridium botulinum
Этот бульон используют для определения типа токсина у Clostridium botulinum.
Состав**:
Ингредиенты
грамм/литр
Ферментативный гидролизат казеина
50,00
Пептический перевар животной ткани
5,00
Дрожжевой экстракт
20,00
Глюкоза
4,00
Натрия тиогликолят
1,00
M969
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 80,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для
полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в
течение 15 мин. Остудить среду и хранить до использования. Перед посевом добавить в
среду стерилизованный фильтрованием 1,5 %-й раствор трипсина до конечной
концентрации 0,1 % (при необходимости).
Принцип и оценка результата:
Это среда готовится по прописи, рекомендованной специалистами АРНА, и используется
для определения типа токсигенности у Clostridium botulinum из пищевых продуктов (1).
Гидролизат казеина, пептон и дрожжевой экстракт являются источниками необходимых
питательных веществ, витаминов группы В и других необходимых факторов роста,
глюкоза — ферментируемым субстратом, а тиогликолят натрия — редуцирующим
агентом. В 15 мл обогатительного бульона засевают 1-2 г плотных или 1-2 мл жидких
пищевых продуктов (по 2 пробирки). Материал вносят медленно, в глубину бульона, и
инкубируют при 26–28 °С. Через 7 сут инкубирования определяют тип токсина. При
отсутствии роста через 7 сут дополнительно инкубируют посев в течение 10 сут, чтобы
дать возможность прорасти спорам клостридий ботулизма. Непротеолитические токсины
не проявляют максимальной токсичности без активации, поэтому для активации
надосадочный слой суспензии продукта, жидкие продукты обогатительный бульон или
культуры из термически обработанного мяса обрабатывают раствором трипсина.
Протеолитические токсины в подобной обработке не нуждаются.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтый цвет, без существенного преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (8,0 % вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 7 сут при 26-28 °С .
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Clostridium botulinum (25763)
Обильный
Ссылки:
1. Vanderzand C. and Splittstosser, (Ed,) 1992, Compendium of Methods for the
Microbiological Examination of Foods, 3rd Ed., APHA, Washington, D. C.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.