FertiCultFlushing

FertiCultFlushing
Среда с HEPES - буфером для использования в процедурах ЭКО.FertiCultFlushing стерилизована методом
фильтрования.Используемые сокращения ЭКО – экстракорпоральное оплодотворение ИКСИ –
интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида IUI – внутриматочная инсеминацияОбщая информация и
сфера использования FertiCultFlushing - готовая к использованию среда для промывания сперматозоидов,
ооцитов и эмбрионов человека. Может также использоваться в технологиях отмывания сперматозоидов
человека (методом всплытия), для последующего применения их в процедуре ИКСИ, или проведения
внутриматочной инсеминации, а также для переноса эмбрионов. Среда полностью готова к использованию и
не требует других добавлений.FertiCultFlushing содержит HEPES -буфер; не требует преинкубирования СО2.
FertiCultFlushing не содержит Гепарин. Для отбора ооцитов используйте FertiCultAspirationMedium. Также как и
все среды, применяемые для ЭКО-процедур, FertiCultFlushing перед использованием должна пройти
преинкубирование в течение 12 часов с закрытой крышкой. Состав FertiCultFlushing готовая к использованию
среда на основе HEPES- буфера, содержащая также бикарбонат, физиологические соли, лактат и
человеческий альбумин. По желанию заказчика производитель может добавить в среду краситель
RedFenol (фенол красный) и сульфат гентамицина (10мг на 1 литр). Материалы, включённые в набор Код продукта
FLUSH020 5фл х20 мл FertiCultFlushingКод продукта FLUSH050 5фл х50 мл FertiCultFlushingКод продукта FLUSH100 3фл х100 мл
FertiCultFlushingКод продукта FLUSH_002_PHR 1фл х2мл FertiCultFlushing (с фенолом красным) Код продукта FLUSH_020_PHR
5фл х20мл FertiCultFlushing (с фенолом красным) Код продукта FLUSH_100_PHR_G 1фл х100мл FertiCultFlushing (с фенолом красным и
гентамицином)Материалы, не включённые в набор Инкубатор 37º (не СО2) Чашки Петри Ламинарный шкаф Микроскоп, Пробирки, шприц,
катетер Спецификация продукта FertiCultFlushing произведена в соответствии со сл. спецификацией Контроль
рН
7.30 – 7.60 Контроль осмолярности
270-290 mOsm/кг
Тест на уровень эндотоксинов (LAL)
< 0.25 EU/mlТест на стерильность
стерилен
(SAL 10¯¯³) Эмбрионы мыши (бластоцисты после 96 часов) > 80% после 30 часов в среде (стадия зиготы)
Предварительные рекомендации Не используйте продукт, если он потерял окраску (в случае с RedFenol –
фенол красный), появилось помутнение или признаки микробной контаминации. Не используйте продукт,
при условии повреждения крышки во время транспортировки. Инструкция по хранению- хранить
FertiCultFlushing при 2-25° С, после вскрытия храните при 2-8°С, - не замораживать перед использованием хранить в темном месте, беречь от солнца - после вскрытия флакона не использовать продукт дольше 7 дней не использовать после даты, указанной на упаковке Меры предосторожности FertiCultFlushing содержит
человеческий сывороточный альбумин. Источники материалов, из которых эти компоненты получены,
показали отрицательный результат при тестировании на антитела HIV HBc HCV HTLV 1/2 и отрицательную
реакцию на HbsAg, HCV RNA и HIV-1 RNA и сифилис. Известные на сегодняшний день методы
подтверждают, что продукты, полученные из крови человека, не переносят какие-либо инфекции. Тем не
менее, работайте со всеми компонентами так, как если бы они были опасны на ВИЧ или гепатит. Всегда
надевайте защитную одежду. Всегда работайте с соблюдением строгих гигиенических условий во избежание
возможной контаминации, даже если FertiCultFlushingMedium содержит гентамицин (ламинарный шкаф,
ИСО 5 – окружающая среда).
МЕТОД (рекомендуемые процедуры) Промывание сперматозоидов (предлагаемая процедура) Промывание
сперматозоидов должно производиться при комнатной температуре или при 37°С. 1. Добавьте 5 мл
FertiCultFlushing к нативному образцу спермы и перемещайте. Центрифугируйте в течение 15 минут при 300 g.
2.Удалите супернатант и оставьте около 0,5 мл спермы в пробирке. 3.Добавьте 5 мл FertiCultFlushing в
тестируемую пробирку. Осторожно перемешайте раствор до придания смеси однородного состояния.
4.Центрифугируйте снова 10 мин при 300 g. 5.Повторяйте процедуру столько раз, сколько посчитаете нужным.
Два промывочных цикла могут быть достаточными для отделения семенной плазмы. Перейдите к процедуре
флотации. Процедура флотации (рекомендация ВОЗ 2010 года) 1. Хорошо перемешайте образец семени (или
«смесь семени» после промывания сперматозоидов) 2. Поместите 1мл семени в коническую центрифужную
пробирку (15мл) и, осторожно, сверху нанего 1,2 млFertiCultFlushing . Тщательно пропипетируйте семя под
слоем среды. 3. Наклоните и установите пробирку под углом 45° для увеличения площади поверхности, а затем
проинкубируйте её в течение 1 часа при 37° С. 4. Затем осторожно установите её вертикально и снимите 1 мл
верхнего слоя. Он содержит высокоподвижные спермальные клетки. 5. Разбавьте этот объем в 1,5-2 мл среды
FertiCultFlushing; 6. Центрифугируйте в течение 5 мин при 300-500 g и удалите супернатант. 7.
Ресуспендируйтеспермальный сгусток в 0,5 мл FertiCultFlushing. Перенос эмбрионов 1. Возьмите стерильный
шприц, заполните FertiCultFlushing и создайте воздушный пузырёк. Соедините шприц с катетером и введите
среду. 2. Подтяните среду FertiCultFlushing внутрь шприца до отметки 10 мкл. 3. Подтяните эмбрион (эмбрионы)
внутрь катетера так, чтобы объём для переноса составил приблизительно 20-30 мкл. 4. Передайте катетер в
сборе со шприцем для последующего переноса эмбриона в матку.