ЗНАЧИМОСТЬ ПЦР АНАЛИЗА В ДИАГНОСТИКЕ

ЗНАЧИМОСТЬ
ПЦР
АНАЛИЗА
В
ДИАГНОСТИКЕ
ИНФЕКЦИОННЫХ
ПРОЦЕССОВУХА, ГОРЛА И НОСА
Е.Г. Завгородняя, В.Г. Жуховицкий
ГУЗ « Московский
научно-практический центр оториноларингологии» Департамента
здравоохранения города Москвы (дир. – проф. А.И. Крюков)
ПЦР – это процесс, благодаря которому стало возможным получать копии молекул ДНК и
РНК разнообразных микроорганизмов практически в неограниченном количестве. ПЦР дает
возможность в течение одного дня получить около 100млрд сходных по структуре молекул.
Этапы проведения ПЦР анализа складываются из обработки клинического материала
(выделение ДНК или РНК), собственно полимеразной цепной реакции (амплификация) c
участием термостабильной ДНК полимеразы и детекции продуктов амплификации.
Значимость и важность ПЦР диагностики невозможно переоценить, прежде всего, в
лабораторной
диагностике
инфекционных
заболеваний
вирусного
и
бактериального
происхождения.
Помимо генотипического подхода, к которому относится ПЦР диагностика, лабораторная
диагностика
инфекционных
процессов
включает
в
себя
микробиологический
и
иммунологический подходы. В сочетании с клинико-эпидемиологическим подходом данные
лабораторные исследования помогают поставить правильный диагноз.
Необходимо отметить, что микробиологические исследования и ПЦР анализ являются
прямыми
методами
исследования,
а
иммунологические
рассматриваются, как косвенные. Разумеется прямые методы
методы
исследования
выявления возбудителя
предпочтительней и надежней.
Микробиологический подход в лабораторной диагностике инфекций имеет свои
достоинства и недостатки. К достоинствам микробиологических исследований относится
возможность
изучения
целого
ряда
клинически
важных
фенотипических
свойств
микроорганизмов. К недостаткам же, в частности, можно отнести некультивируемость или
большую сложность в культивировании
ряда микроорганизмов (вирусы и некоторые
бактерии), а так же длительность анализа.
К достоинствам идентификации микроорганизмов с помощью ПЦР анализа можно отнести
высокую информативность и точность генетических маркеров, получение результатов
независимо от сложности культивирования
микроорганизмов,
стандартизация и
автоматизация анализа и, как следствие- возможность проведения объективных качественных
и количественных измерений. Безусловно, все это требует грамотного проведения ПЦР
анализа, исключающего наличие ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
Иммунологический подход в лабораторной диагностике инфекций, как уже сказано
выше, является косвенным методом исследования. Этот подход очень распространен в
настоящее время. Он позволяет быстро и объективно выявлять, в частности,
реакцию
организма человека в ответ на контакт с различными инфекционными агентами,
выражающуюся в выработке специфических антител. Этот подход очень распространен в
настоящее
время.
Существует
ряд
микроорганизмов,
для
определения
иммунологический подход предпочтительней всего: Это Rubella virus,
которых
CMV, Treponema
pallidum, Brucella spp. и некоторые другие.
Таким образом, при выборе метода
инфекционный процесс,
для определения микроорганизмов, вызвавших
надо хорошо ориентироваться в возможностях
того или иного
метода исследования в сочетании со знанием периодов течения инфекционного процесса, с
тем, чтобы выбрать оптимальный подход (микробиологический, генодиагностичекий или
иммунологический) для лабораторного исследования.
Микробиологически при исследовании посевов патологического материала, взятого из ЛОР
органов в виде пунктатов и мазков, чаще всего выделяются следующие микроорганизмы:
грампозитивные кокки (Staphylococcus spp, Streptococcus.spp), грамнегативные
кокки
(Neisseria spp), грампозитивные палочки (Corynebacterium spp), грамнегативные палочки
(Heamophilus spp, Pseudomonas spp), грибы (Candida spp),
бактерии кишечной группы
(Escherichia coli, Proteus spp. и др.). Данная микрофлора выделяется с помощью
традиционных, доступных и достаточно легко воспроизводимых микробиологических
методов и микроскопически.
В то же время,
такие микроорганизмы как
менингококки, гонококки, микобактерии
туберкулеза, хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, вызывающие воспалительные процессы
ЛОР органов,
можно выделить только с помощью очень трудоемких и дорогостоящих
методов микробиологического исследования.
Разнообразные
вирусы такие как вирус
папилломы человека (HPV), герпес вирусы (VG), цитомегаловирус (CMV), вирус ЭпштейнБарр
(VEB),
поражающие,
в
частности
ЛОР
органы,
выделить
с
помощью
микробиологических методов вообще невозможно.
Изучение доступной отечественной и иностранной литературы за последние 10 лет по
изучаемой тематике указало на ограниченное количество исследований, связанных с ПЦР
диагностикой при патологии ЛОР органов. Это может быть объяснено, в частности,
небольшим количеством лабораторий, оснащенных оборудованием для ПЦР анализа и
недостаточной информированностью ЛОР врачей о значимости и целесообразности ПЦР
исследований. Тем не менее, проанализировав специальную литературу по данному вопросу
можно сделать вывод, что необходимость в ПЦР диагностике при заболеваниях уха, горла и
носа прежде всего связана с выявлением вирусной инфекции. Это вирус папилломы человека
№ 6, 11, 16, 18 и герпес вирусы различных типов. При синуситах и экссудативных отитах
производилась оценка бактериальной флоры, и таких возбудителей, как хламидии различных
видов, пневмококки, гемофильная палочка и некоторые другие виды бактерий.
Таким образом, можно сделать вывод, что использование ПЦР анализа при патологии ЛОР
органов необходимо более активно внедрять в лечебную практику, используя современное
оборудование, высоко чувствительные лицензированные тест системы, а главное адекватно
оценивая необходимость применения именно этого способа оценки инфекционного процесса.