Е.Г. Завгородняя, М.А. Сухина
реклама
ЛАБОРАТОРНЫЕ ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ И ИХ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ЛОР ПРАКТИКИ Е.Г. Завгородняя, М.А. Сухина ГУЗ «Московский научно-практический центр оториноларингологии» Департамент здравоохранения города Москвы (дир. – проф. А.И. Крюков) Лабораторные подходы к диагностике инфекционно-воспалительных процессов складываются из микробиологического, иммунологического и генодиагностичекого (ПЦРдиагностика) подходов. В сочетании с клинико-эпидемиологическим подходом данные лабораторных исследований помогают поставить правильный диагноз. Вышеперечисленные методы диагностики инфекционно-воспалительных процессов подразделяются на прямые и косвенные. К прямым методам выявления возбудителя относятся методы выявления антигенов, микробиологический анализ, генодиагностика (ПЦР-анализ). К косвенным методам выявления инфекционного возбудителя (иммуноферментный относятся, анализ). прежде Разумеется, всего, прямые методы методы выявления выявления антител возбудителей предпочтительней и надежней. Микробиологический подход в лабораторной диагностике инфекций имеет свои достоинства и недостатки. К достоинствам микробиологических исследований относится возможность изучения целого ряда клинически важных фенотипических свойств микроорганизмов. К недостаткам же, в частности, можно отнести некультивируемость или большую сложность в культивировании ряда микроорганизмов (вирусы и некоторые бактерии), а так же длительность анализа. ПЦР – это процесс, благодаря которому стало возможным получать копии молекул ДНК и РНК разнообразных микроорганизмов практически в неограниченном количестве. ПЦР дает возможность в течение одного дня получить около 100млрд сходных по структуре молекул. Значимость и важность ПЦР диагностики невозможно переоценить, прежде всего, в лабораторной диагностике инфекционных заболеваний вирусного и бактериального происхождения. К достоинствам идентификации микроорганизмов с помощью ПЦР анализа можно отнести высокую информативность и точность генетических маркеров, получение результатов независимо от сложности культивирования микроорганизмов, стандартизация и автоматизация анализа и, как следствие, возможность проведения объективных качественных и количественных измерений. Безусловно, все это требует грамотного проведения ПЦР анализа, исключающего наличие ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Иммунологический подход в лабораторной диагностики инфекций очень распространен в настоящее время. Он позволяет быстро и объективно выявлять реакцию организма человека в ответ на контакт с различными инфекционными агентами, выражающуюся в выработке специфических антител. Имея несомненные достоинства, а именно быстроту анализа, возможность стандартизации и автоматизации, высокую воспроизводимость результатов анализа, высокую пропускную способность, данный подход имеет и ряд недостатков. Прежде всего, это не всегда предсказуемая специфичность, с последующей необходимостью в подтверждающих тестах, а также период так называемого «серологического окна», когда антитела еще не сформировались в достаточном для выявления количестве. Тем не менее, существует ряд микроорганизмов, для определения которых иммунологический подход предпочтительней всего. Это Rubella virus, CMV, Treponema pallidum, Brucella и некоторые другие. Данный подход позволяет выявлять не только антитела, но и антигены, т.е. он располагает и прямыми и косвенными методами исследования. Таким образом, при выборе метода для определения микроорганизмов, вызвавших инфекционно-воспалительный процесс, надо хорошо ориентироваться в возможностях того или иного метода исследования в сочетании со знанием периодов течения инфекционного процесса, для того чтобы выбрать оптимальный подход (микробиологический, генодиагностичекий или иммунологический) для лабораторного исследования. В ЛОР практике микробиологический подход к изучению посевов патологического материала чрезвычайно значим. Чаще всего с помощью этих методов выделяются следующие микроорганизмы грамм+кокки (Staph.spp, Strept.spp), грамм - кокки (Neisseria spp), грамм+палочки (Corynebact.spp), грамм - палочки (Heamoph.spp, Pseudamonas spp), грибы (Candida spp), бактерии кишечной группы (Esherihia coli, Proteus spp и др.). Данная микрофлора выделяется с помощью традиционных, доступных и достаточно легко воспроизводимых микробиологических методов исследования и микроскопически. В то же время, такие микроорганизмы как менингококки, гонококки, микобактерии туберкулеза, хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, вызывающие воспалительные процессы ЛОР органов, можно выделить только с помощью очень трудоемких и дорогостоящих методов микробиологического исследования. Разнообразные вирусы, такие как вирус папилломы человека (HPV), герпес вирусы (VG), цитомегаловирус (CMV), вирус ЭпштейнБар (VEB), поражающие, в частности ЛОР органы, выделить с помощью микробиологических методов вообще невозможно. Для выявления этих микроорганизмов используется генодиагностический подход, а именно метод ПЦР-анализа, являющийся прямым методом выявления инфекционных возбудителей. Иммунологический подход в ЛОР практике в настоящее время предполагает, прежде всего, использование метода иммуноферментного анализа с целью определения различных классов иммуноглобулинов, цитокинов и изучаемых инфекционных агентов. Чаще всего это косвенный метод, выявляющий соответствующие антитела. Таким образом, вышеперечисленные лабораторные подходы к диагностике инфекционновоспалительных процессов чрезвычайно значимы в ЛОР практике.
