Е.Г. Завгородняя, М.А. Сухина

ЛАБОРАТОРНЫЕ ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ
ПРОЦЕССОВ И ИХ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ЛОР ПРАКТИКИ
Е.Г. Завгородняя, М.А. Сухина
ГУЗ «Московский научно-практический центр оториноларингологии»
Департамент здравоохранения города Москвы (дир. – проф. А.И. Крюков)
Лабораторные
подходы
к
диагностике
инфекционно-воспалительных
процессов
складываются из микробиологического, иммунологического и генодиагностичекого (ПЦРдиагностика) подходов. В
сочетании
с
клинико-эпидемиологическим подходом данные
лабораторных исследований помогают поставить правильный диагноз. Вышеперечисленные
методы диагностики инфекционно-воспалительных процессов подразделяются на прямые и
косвенные. К прямым методам выявления возбудителя относятся методы выявления антигенов,
микробиологический анализ, генодиагностика (ПЦР-анализ). К косвенным методам выявления
инфекционного
возбудителя
(иммуноферментный
относятся,
анализ).
прежде
Разумеется,
всего,
прямые
методы
методы
выявления
выявления
антител
возбудителей
предпочтительней и надежней.
Микробиологический подход
в лабораторной
диагностике инфекций
имеет
свои
достоинства и недостатки. К достоинствам микробиологических исследований относится
возможность
изучения
целого
ряда
клинически
важных
фенотипических
свойств
микроорганизмов. К недостаткам же, в частности, можно отнести некультивируемость или
большую сложность в культивировании ряда микроорганизмов (вирусы и некоторые бактерии), а
так же длительность анализа.
ПЦР – это процесс, благодаря которому стало возможным получать копии молекул ДНК и
РНК разнообразных микроорганизмов практически в неограниченном количестве. ПЦР дает
возможность в течение одного дня получить около 100млрд сходных по структуре молекул.
Значимость и важность ПЦР диагностики невозможно переоценить, прежде всего, в лабораторной
диагностике инфекционных заболеваний вирусного и бактериального происхождения. К
достоинствам идентификации микроорганизмов с помощью ПЦР анализа можно отнести высокую
информативность и точность генетических маркеров,
получение результатов независимо от
сложности культивирования микроорганизмов, стандартизация и автоматизация анализа и, как
следствие, возможность проведения объективных качественных и количественных измерений.
Безусловно, все это требует грамотного проведения ПЦР анализа, исключающего наличие
ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
Иммунологический подход в лабораторной диагностики инфекций очень распространен в
настоящее время. Он позволяет быстро и объективно выявлять реакцию организма человека в
ответ на контакт с различными инфекционными агентами, выражающуюся в выработке
специфических антител. Имея несомненные достоинства, а именно быстроту анализа, возможность
стандартизации и автоматизации, высокую воспроизводимость
результатов анализа, высокую
пропускную способность, данный подход имеет и ряд недостатков. Прежде всего, это не всегда
предсказуемая специфичность, с последующей необходимостью в подтверждающих тестах, а
также период так называемого «серологического окна», когда антитела еще не сформировались в
достаточном для выявления количестве. Тем не менее, существует ряд микроорганизмов, для
определения которых иммунологический подход предпочтительней всего. Это Rubella virus, CMV,
Treponema pallidum, Brucella и некоторые другие. Данный подход позволяет выявлять не только
антитела, но и антигены, т.е. он располагает и прямыми и косвенными методами исследования.
Таким образом, при выборе метода
для определения микроорганизмов, вызвавших
инфекционно-воспалительный процесс, надо хорошо ориентироваться в возможностях того или
иного метода исследования в сочетании со знанием периодов течения инфекционного процесса,
для того чтобы выбрать оптимальный подход (микробиологический, генодиагностичекий или
иммунологический) для лабораторного исследования.
В ЛОР практике микробиологический подход к изучению посевов патологического
материала чрезвычайно значим. Чаще всего с помощью этих методов выделяются следующие
микроорганизмы грамм+кокки (Staph.spp, Strept.spp), грамм - кокки (Neisseria spp), грамм+палочки
(Corynebact.spp), грамм - палочки (Heamoph.spp, Pseudamonas spp), грибы (Candida spp), бактерии
кишечной группы (Esherihia coli, Proteus spp и др.). Данная микрофлора выделяется с помощью
традиционных, доступных и достаточно легко воспроизводимых микробиологических методов
исследования и микроскопически. В то же время, такие микроорганизмы как менингококки,
гонококки, микобактерии туберкулеза, хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, вызывающие
воспалительные процессы ЛОР органов, можно выделить только с помощью очень трудоемких и
дорогостоящих методов микробиологического исследования. Разнообразные вирусы, такие как
вирус папилломы человека (HPV), герпес вирусы (VG), цитомегаловирус (CMV), вирус ЭпштейнБар (VEB), поражающие, в частности ЛОР органы, выделить с помощью микробиологических
методов
вообще
невозможно.
Для
выявления
этих
микроорганизмов
используется
генодиагностический подход, а именно метод ПЦР-анализа, являющийся прямым методом
выявления инфекционных возбудителей.
Иммунологический подход в ЛОР практике в настоящее время предполагает, прежде всего,
использование метода иммуноферментного анализа с целью определения различных классов
иммуноглобулинов, цитокинов и изучаемых инфекционных агентов. Чаще всего это косвенный
метод, выявляющий соответствующие антитела.
Таким образом, вышеперечисленные лабораторные подходы к диагностике инфекционновоспалительных процессов чрезвычайно значимы в ЛОР практике.