разработка и применение генетических методов в области

РАЗРАБОТКА И ПРИМЕНЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ В ОБЛАСТИ
ДИАГНОСТИКИ КОКСИЕЛЛЕЗА
Лазарева Е.Н.1, Федорова М.В.2, Карань Л.С.2, Колясникова Н.М.2, Ниталиева С.Ж.3,
Малеев В.В2, Галимзянов Х.М.1, Буркин А.В.3,Хок М.М.3, Бабаева М.А.3
1
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального
образования Астраханская государственная медицинская академия, Астрахань, Россия
2
3
ФГУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Россия
Областная инфекционная клиническая больница, г. Астрахань, Россия
Ку-лихорадка — острая инфекция из группы риккетсиозов, характеризующаяся
поражением ретикулоэндотелиальной системы, интоксикацией, лихорадкой. Возбудитель
заболевания - риккетсия Coxiella burnetii рода Coxiella трибы Rickettsieae семейства
Rickettsiaceae. Лихорадка Ку относится к зоонозам с природной очаговостью.
Резервуарами возбудителя в природе являются мелкие млекопитающие (преимущественно
грызуны), птицы, а также иксодовые, аргасовые, гамазовые и краснотелковые клещи.
Существование стойких природных очагов инфекции способствует заражению различных
видов домашних животных и формированию вторичных
антропургических очагов.
Основными источниками инфекции в антропургических очагах сельской местности
являются мелкий и крупный рогатый скот, а в городах – собаки и кошки.
Заболевание
регистрируют
повсеместно,
особенно
в
районах
с
развитым
животноводством. Территориями, эндемичными по Ку-лихорадке, являются западная
часть США, Австралия, Африка, Великобритания, страны Средиземноморского бассейна.
В РФ заболеваемость Ку-лихорадкой составляет в среднем 0,02 на 100 тыс. населения,
очаги коксиеллеза зарегистрированы в Западно-Сибирском и Поволжском регионах, в
Центрально-Черноземном регионе и на Северном Кавказе. В настоящее время
наибольший показатель заболеваемости регистрируется в Астраханской области.
Неравномерность территориального распределения заболеваемости скорее всего связана с
недостаточной эффективностью выявления этой инфекционной патологии.
Диагностика
Ку-лихорадки
затруднена
из-за
отсутствия
патогномоничной
симптоматики и практически невозможна без лабораторного обследования больного в
реакции со специфическим диагностикумами. Наиболее часто заболевание проходит под
диагнозом ОРВИ, реже – лихорадка неясной этиологии, бронхит, пневмония, гепатит [1].
Целью
данной
работы
было
изучение
возможности
использования
для
лабораторного подтверждения коксиеллеза метода выявления ДНК Coxiella burnetti,
основанного на ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального
времени.
Материал.
Исследовали 70 проб крови больных с подозрением на инфицированность C.burnetti,
поступивших в Астраханскую областную инфекционную больницу в 2010 г
Результаты.
Диагноз
Ку-лихорадка
подтвержден
методом
ПЦР
с
гибридизационно-
флуоресцентной детекцией в режиме реального времени у 54 пациентов, при этом сроки
забора крови для проведения ПЦР варьировали от 1 до 15 дней от момента заболевания.
Преимущественно заболевали мужчины (83%) в возрасте от 15 до 74 лет. Среди них
47% составили пациенты в возрасте 20-30 лет, в эпиданамнезе которых указан выезд на
природу,
употребление
сырой
некипяченой
воды
и
мясных
продуктов
после
недостаточной термической обработки. В числе иных возможных источников заражения
отмечены употребление в пищу сырого коровьего и козьего молока, работа в степи и на
фермах с домашними животными.
Возраст заболевших женщин колебался от 30 до 60 лет; к моменту начала
заболевания большинство пациенток пребывали за городом и в качестве возможной
причин заболевания называют употребление сырого молока.
Начала заболевания характеризовалось острым началом с подъемы температуры тела
до 38-39С у 48% больных, а 28% - выше 39С. И только в 24% случаев в первые сутки
заболевания отмечался субфебрилитет. У 78% наблюдаемых больных преимущественно
на третьи сутки лихорадки отмечался озноб. Продолжительность лихорадочного периода
варьировала от 4 до 29 дней, в среднем составляла 7-8 дней.
Многие отечественные клиницисты такие симптомы как слабость, головная боль
связывают с проявлениями риккетсиозной интоксикацией. Однако нами было отмечено,
что у наблюдаемых больных в 97% случаев слабость сохранялась и в период регрессии
клинической симптоматики, а в 87% - до момента выписки из стационара. Головная боль
носила преимущественно разлитой характер с
умеренной
интенсивностью и
регистрировалась при подъеме температуры тела.
На 3-4 сутки заболевания у 42% пациентов наблюдалась миалгия конечностей,
интенсивность которой была связана с лихорадкой. Помимо этого 30% больных
предъявляли жалобы на боли в суставах стоп и кистей. Продолжительность этих
симптомов составляла в среднем трое суток и с нормализацией температуры они
регрессировали.
С момента поступления в среднем до 10 дня болезни у 28% больных регистрировали
увеличение печени, в этой группе больных 87% составляли мужчины. В 95% случаев
гепатомегалия сопровождалась желтушностью кожных покровов с отсутствием зуда.
Практически у всех наблюдаемых больных
регистрировалась тромбоцитопения.
Уровень тромбоцитов в крови колебался в диапазоне от 53х109 до 293х109 и в среднем
составлял 114х109 / л.
Заключение
Результаты проведенных исследований показывают, что предложенный метод ПЦР с
гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени может быть
использован
для
ранней
диагностики
данного
инфекционного
заболевания,
не
обладающего специфичными клиническими симптомами.
1. Природная очаговость болезней: исследования института Гамалеи. Москва. Русаки.
2003.