Иммунологические параметры у больных себорейным

— Российский журнал кожных и венерических болезней, 2005, №2, c.26-30.
Иммунологические параметры у больных себорейным дерматитом
Полеско И.В., Пичугин А.В., Атауллаханов Р.И.
Кафедра кожных и венерических болезней с курсом дерматокосметологии (зав. – проф. Ю. С.
Бутов) ФУВ РГМУ им. Н. И. Пирогова, КВК.Д № 23 (главный врач Школьников М.М.),
ГНЦ Институт иммунологии МЗ и СР РФ, Москва.
Изучены изменения иммунного статуса у больных себорейным дерматитом (СД) и их связь с выраженностью
клинических симптомов и давностью заболевания. Установлено наличие хронической иммунной реакции, в которой
+
+
активно участвуют фагоциты, NK-клетки, CD4 -Т-хелперы, CD8 -T-киллеры, а также антитела классов IgG и IgA.
Изменения иммунограммы нарастают с увеличением степени выраженности клинических симптомов болезни. При
продолжительности заболевания более 10 лет возникают признаки недостаточности отдельных звеньев
+
иммунитета (T-киллеров), сопровождающейся дополнительной компенсаторной активацией CD8 -клеток и
усилением продукции IgG и IgA.
Ключевые слова: себорейный дерматит, иммунный статус, клеточный и гуморальный ответ.
Immunological changes were studied in patients with seborrheic dermatitis (SD) and their relationship with the severity of its
clinical symptoms and duration was examined. It has been ascertained that there is a chronic immune reaction that actively
+
+
involves phagocytes, natural killer cells, CD4 -T helper cells, CD8 -T killer cells, and antibodies of classes IgG and IgA.
Immunogram changes are on the increase as the clinical symptoms of the disease become more severe. When the disease
lasts more than 10 years, the signs of insufficiency of some links of immunity (T killer cells) occur, which are accompanied
+
by an additional activation of CD8 -cells and by the enhanced production of IgG and IgA.
Key words: seborrheic dermatitis, immunity, cellular and humoral responses.
Себорейный дерматит (СД) – хроническое воспалительное заболевание кожи,
этиологический фактор которого остается до конца не изученным. Высказывается мнение о
том, что возбудителем СД является дрожжеподобный гриб Pityrosporum ovale (Malassezia
furfur), в пользу чего свидетельствуют данные использования антимкотических средств,
дающих положительный терапевтический эффект [4, 9]. При применении пиритиона цинка и
кетоконазола снижается количество гриба рода Malassezia, концентрация которого
коррелирует с клиническим улучшением [3, 7, 10]. По мере увеличения содержания
дрожжеподобного микроорганизма происходит рецидив заболевания [3].
Большинство сторонников грибковой этиологии СД к факторам риска относят
нейроэндокринные и генетические особенности организма. Известно, что секреция кожного
сала регулируется нейрогенным механизмом и осуществляется вегетативной нервной
системой и что у пациентов, страдающих вегетативным дисбалансом, выявляются
повышенная экскреция кожного сала, потливость, а для роста грибов рода Malassezia
необходим секрет сальных желез. Отмечено также, что у пациентов, страдающих такими
неврологическими заболеваниями, как болезнь Паркинсона, клинические проявления СД
могут характеризоваться более острым началом и вовлечением в патологический процесс
большей площади поражения [5, 6].
В пользу гормональной концепции свидетельствуют данные о возникновении СД
преимущественно в пубертатном и постпубертатном периодах. Кроме того, у грудных детей в
неонатальном периоде жизни регистрируется клиническая картина СД, связанная скорее всего
со стимуляцией организма материнскими гормонами.
Относительно генетической предрасположенности существует мнение о возможности
нерегулярно доминантного наследования и большей частоте встречаемости у лиц с группой
крови В [1]. Хорошо известно о том, что хронические заболевания желудочно-кишечного
тракта (ЖКТ) и печени предрасполагают к возникновению и поддержанию СД.
Как бы там ни было, представления об инфекционной природе заболевания
стимулировали проведение исследований иммунной системы при СД. Показано, что частота
распространенности СД у больных с иммунодефицитными состояниями достигает 30-55% [2,
5, 8,. 11].
Таким образом, ни один из этиопатогенетических факторов не является универсальным
для обоснования механизмов развития СД. Вероятнее всего, данное заболевание представляет
собой определенную совокупность различных факторов, обеспечивающих формирование
патологического процесса, где на первый план выходят иммунопатологические реакции,
приводящие к дисбалансу основных защитных функций человека.
В данной работе мы описываем изменения иммунного статуса больных СД, а также их
связь с выраженностью клинических симптомов СД и давностью заболевания.
Под наблюдением находились 20 больных СД (12 мужчин и 8 женщин в возрасте от 14 до
65 лет). Диагноз ставили на основании типичных клинико-анамнестических данных.
Продолжительность заболевания от 1 года до 15 лет. Поражение кожи волосистой части
головы наблюдалось у 7 пациентов, сочетанное поражение кожи волосистой части головы и
кожи лица у 13.
Чаще всего клинические проявления заболевания сопровождались зудом и шелушением
на эритематозном фоне. У 19 больных в анамнезе имелись указания на сопутствующие
заболевания: у 13 (68%) – встречались изменения со стороны ЖКТ, у 6 (32%) – демодекоз.
Материалы и методы
Кровь для иммунологических исследований забирали из локтевой вены натощак в день
исследования. Иммунный статус исследовали методами лазерной цитометрии,
хемилюминесценции, иммунодиффузии, субпопуляции лимфоцитов, активационные маркеры
– методом иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител и проточного
лазерного цитофлюориметра фирмы "Becton Dickinson". Определение зрелых цитолитических
CD8+-Т-лимфоцитов и NK-клеток ex vivo проводили по содержанию внутриклеточного
перфорина методом проточной цитофлюорометрии. Образцы анализировали на проточном
цитофлюориметре "ФАКС Калибур" фирмы "Becton Dickinson". О состоянии фагоцитарной
активности нейтрофилов периферической крови судили по интенсивности фагоцитоза
меченных флюоресцином бактерий Е. coli с последующей оценкой реакции на проточном
цитофлюориметре и по хемилюминесценции нейтрофилов в ответ на опсонизированный
зимозан и формилмурамилацетат (ФМА). Концентрацию IgG, IgA, IgM определяли
турбодиметрическим методом с помощью наборов фирмы "Human", IgE –
иммуноферментным методом с помощью наборов "Диа Плюс" (Москва), циркулирующие
иммунные комплексы – турбодиметрическим методом по скорости образования агрегатов в
3% и 4% полиэтиленгликоле.
Изменения иммунного статуса у больных СД.
Иммунный статус больных СД характеризовался признаками продолжительной активной
иммунной реакции, развивающейся вследствие хронической инфекции. В частности, у 65%
пациентов содержание IgG в крови оказалось выше верхней границы нормы (K = 1,27, где K –
сдвиг среднего значения mi данного показателя в исследуемой группе больных относительно
среднего значения нормы m0, вычисляется по формуле K = mi / m0), что свидетельствовало об
усиленной продукции антител в течение длительного времени.
Количество активированных клеток, участвующих в иммунном ответе, увеличено. Как
показано в табл. 1, количество циркулирующих моноцитов и юных нейтрофилов повышено у
70% (K = 2) и 50% (K = 2,2) пациентов соответственно. Спонтанная и индуцированная
продукция активных радикалов зрелыми нейтрофилами усилена в 7 и 60% случаев (K = 2,7 и
K = 1,5 соответственно).
Гиперплазия NK-клеток у 45% (K = 1,4) пациентов и усиленная экспрессия
активационных молекул HLA-DR на NK-клетках у 60% (K = 2) являются характерными
признаками хронической инфекции. Соотношение подтипов NK-клеток у 90% больных СД
изменено в пользу NK-клеток, экспрессирующих на клеточной поверхности Fcγ-рецепторы
(CD16) без молекул клеточной адгезии NCAM (CD56).
У 90% обследованных также регистрировали усиленную экспрессию молекул CD25 (αцепь рецептора интерлейкина (IL)-2) на CD4+-Т-клетках, что свидетельствовало об активной
фазе иммунной реакции и, следовательно, активной фазе инфекционно-воспалительного
процесса.
Табл.1. Достоверные изменения в показателях иммунного статуса, характерные для группы СД в целом
(n=20)
Показатель
единица
измерения
Норма
Среднее
значение
Стандартное
отклонение
Частота
превышения
нормы,
процент
Палочкоядерные нейтрофилы
кл./мкл
40
-
300
375
284
50
Моноциты
кл./мкл
100
-
400
521
237
70
NK-клетки CD3-16+ /56+
кл./мкл
170
-
400
406
166.2
45
5
-
16
22
14
60
2
-
10
22
11
90
14
-
20
35
12
90
1
-
4
5.1
4.3
45
0
-
2
2.2
2.1
45
0
-
350
471
165
75
3500
-
9000
9629
3695
60
Активированные NK-клетки
(эспрессирующие HLA-DRмолекулы)
% от NK-клеток
Фенотип NK-клеток CD3-16+56-
% от NK-клеток
CD4+25+ Т-лимфоциты,
эспрессирующие рецепторы к
IL2
% от CD4-клеток
CD8+ Т-лимфоциты
(эспрессирующие рецепторы к
IL2)
% от CD8-клеток
Незрелые Т-лимфоциты
CD3+4+8+
% от
лимфоцитов
Хемилюминесценция
нейтрофилов спонтанная
имп./мин на мкл
крови
Хемилюминесценция
нейтрофилов, индуцированная
зимозаном
имп./мин на мкл
крови
Хемилюминесценция
нейтрофилов, индуцированная
ФМА
имп./мин на мкл
крови
4000
-
10000
10000
4764
50
Иммуноглобулин G
мг%
700
-
1100
1140
195
65
Иммуноглобулин E
мг%
0
-
120
133
219
29
Примечание. Достоверность отличия от нормы 0,01
Корреляция между изменениями иммунного статуса и клиническими вариантами СД.
СД кожи лица наряду с поражением волосистой части головы имел место у 65% больных.
Установлено, что поражение кожи лица достоверно чаще (р = 0,036) наблюдалось у мужчин.
При сравнении иммунограмм больных СД с поражением кожи лица или без него оказалось,
что у больных дерматитом кожи лица достоверно более активны функциональные реакции
нейтрофилов (K = 1,38, р = 0,027).
Больных распределили на 2 группы по степени выраженности клинических проявлений
СД: одна (n = 12) с обычными признаками неосложненного СД – десквамацией и зудом,
другая (n = 8) наряду с десквамацией и зудом с наличием эритемы. Сравнение
иммунологических показателей в указанных группах позволило выявить у пациентов с
эритемой достоверно высокий уровень экспрессии молекул HLA-DR на CD4+-Т-хелперах (р =
0,008), CD8+-T-клетках (р = 0,06) и NK-клетках (р = 0,08). В среднем на 60% (р = 0,02)
увеличена функциональная активность пейтрофильных гранулоцитов. Достоверно повышена
и цитолитическая активность комплемента (р = 0,02).
Табл.2. Изменения в иммунном статусе, коррелирующие с длительностью заболевания СД.
1
Показатель
СОЭ, мм/час
Метаболичнская
активность нейтрофилов,
имп./мин/клетку
Норма
0 - 15
1.2
-
2.5
Достоверности
отличий между
группами
1-2
1-3
2-3
0.006 0.008
Группа 1, n=6
Группа 2, n=6
Группа 3, n=8
1-5 лет
M
SD
7.0
5.7
5-10 лет
M
SD
7.5
5.4
более 10
M
SD
18.3
6.8
2.2
0.6
2.5
0.7
2.9
0.9
0.092
1035.3
185.2
1125.0
196.9
1230.4
179.8
0.071
2
3
Иммуноглобулин G, мг%
700
-
1100
Иммуноглобулин А, мг%
80
-
250
140.2
43.9
184.5
57.4
242.8
78.2
0.014
14
-
20
24.8
6.9
33.4
10.1
45.1
9.6
0.001
0.046
5
Активированные Тхелперы, CD4+25+,
процент
6
Цитолитические Тлимфоциты, кл./мкл
250
-
600
603.2
183.2
395.5
67.4
416.1
213.6
Активированные
цитолитические Тлимфоциты, CD8+25+,
процент
1
-
4
2.0
1.5
4.2
3.6
8.2
4.3
0.006
0.096
NKT-лимфоциты, процент
2
-
20
9.3
4.4
5.4
2.7
13.1
6.1
0.092
0.015
Цитолитические Тлимфоциты, содержащие
перфорин, процент
7
-
30
22.2
7.4
13.7
5.7
29.3
18.8
0.049
0.075
Цитолитические Тлимфоциты, содержащие
перфорин, кл./мкл
24
-
122
130.5
44.3
52.5
14.3
137.6
141.1
0.002
4
7
8
0.026
9
10
Примечание: М - среднее значение, SD - стандартное отклонение
Изменения иммунного статуса в зависимости от длительности заболевания СД.
Всех больных распределили на 3 группы: 1-я – с продолжительностью заболевания от 1
года до 5 лет, 2-я – от 5 до 10 лет, 3-я – более 10 лет. Установлено, что иммунологические
изменения значительно зависели от продолжительности заболевания. Характерной
особенностью начальной стадии заболевания (от 1 года до 5 лет) оказалось накопление CD8+Т-клеток-киллеров, содержащих в цитоплазме киллерный белок перфорин (табл. 2, см.
рисунок). При продолжительном (более 10 лет) течении заболевания эта клеточная популяция
истощается, т. с. по данному признаку развивается декомпенсация. По-видимому, для
частичной компенсации дефицита указанных клеток при продолжительности заболевания
больше 10 лет происходит еще более выраженная активация экспрессии рецепторов IL-2
(CD25) на CD8+-и CD4+-Т-клетках. В этом же периоде наблюдается существенное нарастание
продукции IgG и IgA, что характерно для хронического инфекционного воспаления
эпителиальных покровов (см. табл. 2, рисунок).
Активированные CD8-лимфоциты (CD8+25+)
Активированные Т-хелперы (CD4+25+)
65
14
12
55
10
45
%
8
35
6
25
4
2
15
0
1
5
1
2
Иммуноглобулин А
850
320
750
280
650
240
550
200
450
160
350
120
250
80
2
3
Цитолитические Т-лимфоциты
360
1
2
3
3
150
В
1
2
3
Г
Изменение показателей иммунного статуса у больных СД is зависимости от продолжительности заболевания.
А – активированные T-хелперы CD4’25 (%), Б – активированные CD8’25’ (%), В – IGA (мг%), Г – цитолитические Tлимфоциты (кл. на мкл).
По горизонтали – продолжительность заболевания: 1 – менее 5 лет, 2 – от 5 до 10, 3 – более 10.
Описанные выше изменения иммунного статуса у больных СД доказывают наличие
хронической иммунной реакции, в которой активно участвуют фагоциты, NK-клетки, CD4+-Тхелпсры, CD8+-T-киллеры, а также антитела классов IgG и IgA. Изменения иммунограммы
нарастают с нарастанием степени выраженности клинических симптомов пикают признаки
недостаточности отдельных болезни, например с появлением эритемы. При звеньев
иммунитета, в частности звена Т-киллеров. продолжительности заболевания более 10 лет
возникают признаки недостаточности отдельных звеньев иммунитета (T-киллеров). В то же
время происходят дополнительная компенсаторная активация CD4+-и CD8+-T-клеток, а также
усиление продукции IgG и IgA.
Изменения иммунограммы у больных СД,
не связанные с сопутствующими заболеваниямим ЖКТ
Изменения иммунограммы у больных СД могли быть связаны не с основным
заболеванием, а с сопутствующими. В частности, у 70% из них имели место различные
заболевания ЖКТ. Сравнение иммунологических сдвигов у больных СД, имевших
сопутствующие заболевания ЖКТ, с таковыми у больных СД без сопутствующих заболеваний
ЖКТ показало, что большинство из описанных выше изменений иммунограммы не связано с
сопутствующей патологией (табл. 3).
Табл.3.Показатели иммунного статуса больных СД с заболеваниями ЖКТ
Показатель
единица
измерения
Норма
С
заболеваниями
ЖКТ, n=14
M
SD
Без
заболеваний
ЖКТ, n=6
M
SD
Достоверность
р
Палочкоядерные
нейтрофилы
кл./мкл
40
-
300
326.2
182.4
488.7
444.2
0.25
Моноциты
кл./мкл
100
-
400
547.6
220.5
459.8
283.9
0.46
NK-клетки CD3-16+ /56+
кл./мкл
170
-
400
408.1
136.6
401.5
237.7
0.94
Активированные NK-клетки
(эспрессирующие HLA-DRмолекулы)
% от NK-клеток
5
-
16
17.3
13.1
31.9
8.9
0.02
Фенотип NK-клеток CD316+56-
% от NK-клеток
2
-
10
23.9
11.2
18.2
9.4
0.29
CD4+25+ Т-лимфоциты,
эспрессирующие
рецепторы к IL2
% от CD4-клеток
14
-
20
35.4
12.7
35.7
12.2
0.95
CD8+ Т-лимфоциты
(эспрессирующие
рецепторы к IL2)
% от CD8-клеток
1
-
4
5.8
4.2
3.7
4.5
0.33
Незрелые Т-лимфоциты
CD3+4+8+
% от лимфоцитов
0
-
2
2.4
2.5
1.8
0.9
0.63
Хемилюминесценция
нейтрофилов спонтанная
имп./мин на мкл
крови
0
-
350
501.6
166.1
400.8
151.7
0.22
Хемилюминесценция
нейтрофилов,
индуцированная зимозаном
имп./мин на мкл
крови
3500
-
9000
10455.6
3473.5
7699.8
3758.4
0.13
Хемилюминесценция
нейтрофилов,
индуцированная ФМА
имп./мин на мкл
крови
4000
-
10000
9764.6
2974.5
10550.0
7919.2
0.75
Иммуноглобулин G
мг%
700
-
1100
187.1
61.0
211.7
104.7
0.52
Иммуноглобулин E
мг%
0
-
120
97.8
232.8
262.0
91.0
0.27
Выводы
1. У больных СД выявлено наличие хронической иммунной реакции, в которой активно
участвуют фагоциты, NK-клетки, CD4+-Т-хелперы, CD8+-Т-киллеры, а также антитела
классов IgG и IgA. Обнаруженные изменения иммунограммы свидетельствуют о
напряженности клеточного и гуморального звеньев иммунитета.
2. У пациентов с распространенной формой СД (поражение кожи лица и волосистой
части головы, эритема) наблюдается достоверная активация нейтрофильных гранулоцитов,
CD4+-и CD8+-Т-лимфоцитов и NK-клеток.
3. На начальных стадиях заболевания (менее 5 лет) происходит гиперплазия ростка
цитолитических CD8+-Т-клеток, содержащих перфорин. При продолжительности болезни
более 10 лет эта клеточная популяция истощается, хотя оставшиеся CD8+-Т-клетки
усиленно экспрессируют рецептор IL-2. Кроме того, у больных СД с давностью
заболевания более 10 лет происходят дополнительная активация CD4+-Т-клеток и
значительное нарастание синтеза IgG и IgA.
Литература
1. Мордовцев В. Н., Алиева П. М., Сергеев А. С. Заболевания кожи с наследственным предрасположением. – Махачкала, 2002. –
С. 213-214.
2. Berger R. S., Stoner M. F, Hobbs Е. R. et al. // J. Am. Acad. Dermatol. – 1988. - Vol. 19. – P. 298–303.
3. Faergemann J. // Br. J. Dermatol. – 1986. – Vol. 114. – P. 695–700.
4. Ford G. P., Ive F. A., Shuster S. // Br. J. Dermatol. – 1984. -Vol. 111. - P. 603-607.
5. Goodman D. S., Teplitz E. D., Wishner et al. // J. Am. Acad. Dermatol. - 1987. - Vol. 17. - P. 210-220.
6. Groisser D.. Bollone E. ./., Lebwohl M. // J. Am. Acad. Dermatol. – 1989. – Vol. 20. – P. 770–773.
7. Marks R., Pearse А. П., Walker A. P. // Br. J. Dermatol. – 1985. -Vol. 112. - P. 415-422.
8. Man's W. L., Triana A., Shapiro R. et al. // J. Am. Acad. Dermatol. – 1987. – Vol. 17. - P. 746–751.
9. Shuster S. // Br. J. Dermatol. - 1984. - Vol. 1 1 1. – P. 235-242.
10. Skinner R. B. Jr.. Noah P. W., Taylor R. M. et al. // J. Am. Acad. Dermatol. - 1985. - Vol. 12. - P. 852-856.
11. Smith K. J., Sketlon H. (}., YeagerJ. ct al. // J. Am. Acad. Dermatol. – 1994. - Vol. 31. – P. 746–754.