CIC-C1 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG 1 _____________________________________________________________________________________________________ Регистрационное удостоверение ФС №2005/1125 от 18.08.2005 г. Циркулирующие иммунные комплексы C1q (IgG) (CIC-C1q ELISA (IgG)) Иммуноферментный тест для количественного определения циркулирующих иммунных комплексов к C1q, содержащих антитела класса IgG, в сыворотке и плазме крови человека Номер по каталогу: EA 1818-9601 G Набор рассчитан на 96 определений НАЗНАЧЕНИЕ Набор для иммуноферментного анализа ЦИК-C1q IgG (CIC-C1q ELISA (IgG)) используется для количественного in vitro определения связывающихся с C1q циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), содержащих антитела класса IgG. Набор применяется при диагностике ревматических, аутоиммунных и инфекционных заболеваний, аллергий, гематологических и неопластических заболеваний. ПРИНЦИП МЕТОДА Набор ЦИК-C1q ИФА (IgG) основан на методе твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). В набор включены 8-луночные стрипы, разделяемые на отдельные лунки, покрытые фрагментом комплемента С1q. На первой стадии реакции в лунках инкубируют разведенные исследуемые образцы. Имеющиеся в положительных образцах циркулирующие иммунные комплексы связываются с C1q через Fc фрагменты иммуноглобулинов. Для выявления связавшихся иммунных комплексов проводят вторую инкубацию, используя меченные ферментом антитела к IgG человека (конъюгат фермента), способные вызывать цветную реакцию. Интенсивность формирующегося окрашивания прямо пропорциональна концентрации циркулирующих иммунных комплексов к C1q в образце. МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ 1. 2. 3. Компоненты набора Лунки планшета покрытые C1q; 12 стрипов 8-луночных (разделяемых на отдельные лунки), в рамке-держателе; готовые к использованию Калибратор 1 200 ОЕд/мл (ЦИК-C1q человека); лиофилизованный Калибратор 2 20 ОЕд/мл (ЦИК-C1q человека); лиофилизованный Цвет --- Количество Обозначение 12 х 8 STRIPS бесцветный 1 × 2,0 мл CAL 1 бесцветный 1 × 2,0 мл CAL 2 4. Калибратор 3 2 ОЕд/мл (ЦИК-C1q человека); лиофилизованный бесцветный 1 × 2,0 мл CAL 3 5. Положительный контроль (ЦИК-C1q человека); лиофилизованный бесцветный 1 × 2,0 мл POS CONTROL 6. Отрицательный контроль (ЦИК-C1q человека); лиофилизованный бесцветный 1 × 2,0 мл NEG CONTROL 7. Конъюгат фермента меченные пероксидазой антитела к IgG человека (кроличьи); готовый к использованию светлозеленый 1×12 мл CONJUGATE 8. Буфер для разведения образцов готовый к использованию голубой 1×100 мл SAMPLE BUFFER 9. Промывочный буфер 10х концентрат бесцветный 1×100 мл WASH BUFFER 10x бесцветный 1×12 мл SUBSTRATE 11. Стоп-реагент бесцветный 0,5 М раствор серной кислоты; готовый к использованию 1×12 мл STOP SOLUTION 10. Раствор хромоген/субстрат ТМБ/Н2О2; готовый к использованию 12. Инструкция к набору --- 1 шт. 13. Протокол с целевыми значениями --- 1 шт. Серия Температура хранения Для in vitro диагностики Невскрытый набор использовать до _______________________________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006, тел.: 737-0363, факс: 737-0365, е-mail: [email protected] CIC-C1 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG 2 _____________________________________________________________________________________________________ ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ НАБОРА Набор должен храниться при температуре 2-8 °С. Замораживание набора не допускается. Невскрытые компоненты набора сохраняют стабильность в течение всего указанного срока годности набора. УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ Обращайтесь с исследуемыми образцами, калибраторами, контролями и проинкубированными стрипами микропланшетов как с потенциально инфицированными материалами. Все реагенты и материалы, являющиеся отходами, должны утилизироваться в соответствии с действующими нормативами. ПРИГОТОВЛЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ Примечание. Перед использованием все реагенты должны быть прогреты до комнатной температуры (1825 °С) в течение примерно 30 минут. После первого использования все реагенты стабильны до истечения указанного срока годности при хранении при температуре 2-8°С и предохранении от микробной контаминации, если ниже не оговорены особые условия хранения. - Лунки, покрытые C1q Стрипы с лунками готовы к использованию. Вскройте предохраняющую упаковку микропланшета за бороздку над застежкой. Перед вскрытием упаковки планшет должен быть прогрет до комнатной температуры во избежание конденсации влаги внутри лунок. После вскрытия упаковки неиспользуемые стрипы сразу верните в пакет и плотно закройте его имеющейся на пакете самоуплотняющейся застежкой. (Не удаляйте пакет с влагопоглотителем). После первого вскрытия упаковки стрипы с лунками, покрытыми C1q, можно хранить в сухом месте при температуре 2-8 °С в течение как минимум 4 месяцев. - Калибраторы и контроли Калибраторы и контроли лиофилизованы. Растворите содержимое каждого флакона в 2 мл деионизированной или дистиллированной воды. Перед использованием содержимое флаконов с растворенными калибраторами и контролями необходимо тщательно перемешать. Растворенные калибраторы и контроли стабильны при хранении при температуре 18-25 °С до 4 часов. Если необходимо хранение растворенных калибраторов и контролей в течение более длительного времени, их следует аликвотировать и хранить при температуре минус 20°С и менее до истечения срока годности. Не допускается повторное замораживание размороженных калибраторов и контролей. - Конъюгат фермента Конъюгат фермента готов к использованию. Перед использованием содержимое флакона с конъюгатом необходимо тщательно перемешать. - Буфер для разведения образцов Буфер для разведения образцов готов к использованию. - Промывочный буфер Промывочный буфер поставляется в виде 10-кратного концентрата. Если в концентрате промывочного буфера образовались кристаллы, необходимо подогреть флакон с буфером до температуры 37 оС и тщательно перемешать перед разведением. С помощью чистой пипетки отобрать необходимое количество концентрата буфера и развести деионизированной или дистиллированной водой (1 часть реагента плюс 9 частей дистиллированной воды). Например, для одного стрипа: 5 мл концентрата плюс 45 мл воды. Приготовленный разведенный промывочный буфер стабилен в течение 1 месяца при хранении при температуре 2-8 °С и соблюдении правил использования. - Раствор хромоген/субстрат Раствор хромоген/субстрат готов к использованию. Закрывайте флакон сразу после использования, поскольку содержащийся в нем раствор чувствителен к свету. Используемый раствор хромоген/субстрат должен быть бесцветен. Не используйте раствор, если он окрасился в голубой цвет. - Стоп-реагент Стоп-реагент готов к использованию. Внимание! Используемые в наборе калибраторы и контроли были проверены на наличие антигена гепатита В, а также антител к вирусу гепатита С, ВИЧ-1 и ВИЧ-2 с помощью методов иммуноферментного анализа и непрямой иммунофлюоресценции, и при этом показали отрицательные результаты. Однако, все используемые материалы следует считать потенциально инфекционно опасными и обращаться с ними, соблюдая необходимые меры предосторожности. Часть реагентов содержит токсичный азид натрия. Избегайте контакта реагентов с кожей. _______________________________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006, тел.: 737-0363, факс: 737-0365, е-mail: [email protected] CIC-C1 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG 3 _____________________________________________________________________________________________________ ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ Исследуемые образцы Сыворотка крови или взятая в ЭДТА плазма крови. Стабильность Исследуемые образцы сыворотки или плазмы крови могут храниться до 14 дней при температуре 2-8 °С. Разведенные образцы следует исследовать в течение одного рабочего дня. Разведение образцов: Образцы сыворотки или плазмы крови пациентов разводят 1:51 буфером для разведения образцов. Например, разведите 10 мкл сыворотки крови в 0,5 мл буфера для разведения образцов и тщательно перемешайте на вортексе (пипетка для перемешивания не подходит). ПРИМЕЧАНИЕ. Калибраторы и контроли уже предварительно разведены и готовы к использованию, их разводить не надо. ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ Для полуколичественного анализа используют калибратор 2, а также положительный контроль, отрицательный контроль и исследуемые образцы. Для количественного анализа используют калибраторы 1, 2 и 3, а также положительный контроль, отрицательный контроль и исследуемые образцы. Инкубация образцов: (1-я стадия) Внесите в отдельные лунки микропланшета в соответствии со схемой внесения реагентов по 100 мкл калибраторов, положительного и отрицательного контролей или разведенных образцов сыворотки или плазмы крови. Инкубируйте при комнатной температуре (18-25 °С) в течение 30 минут при встряхивании на шейкере для планшетов при 600 об/мин. Промывка: Ручная: Удалите жидкость из лунок, а затем промойте 3 раза, используя каждый раз по 350 мкл рабочего промывочного буфера на лунку. Автоматическая: проводите в режиме с переполнением (установите в программе для соответствующего автоматического вошера параметр “Overflow”, с 3-мя циклами промывки и внесением в лунки по 450 мкл рабочего промывочного буфера). При каждом цикле промывки после заполнения лунок буфером оставляйте планшет на 30-60 секунд и затем удаляйте жидкость. По окончании промывки (ручной или автоматической) тщательно удалите остатки жидкости из лунок, энергично постукивая перевернутым планшетом по фильтровальной бумаге. Инкубация конъюгата: (2-я стадия) Внесите в каждую лунку микропланшета 100 мкл конъюгата фермента (меченных пероксидазой антител к IgG человека). Инкубируйте при комнатной температуре (18-25 °С) в течение 30 минут при встряхивании на шейкере для планшетов при 600 об/мин. Промывка: Удалите содержимое лунок. Промойте, как описано выше. Примечание. Остатки жидкости (>10 мкл), скапливающейся в лунках после промывки, могут повлиять на субстратную реакцию и привести к получению ложно заниженных значений оптической плотности. Неправильная промывка (например, менее 3 промывочных циклов, слишком маленькие объемы промывочного буфера или слишком короткое время выдерживания буфера в лунках) может привести к получению ложно завышенных значений оптической плотности. Инкубация субстрата: (3-я стадия) Внесите в каждую лунку микропланшета 100 мкл раствора хромоген /субстрат. Инкубируйте при комнатной температуре (18-25 °С) в течение 15 минут (предохраняйте от воздействия прямых солнечных лучей). Остановка реакции: Внесите в каждую лунку микропланшета 100 мкл стоп-реагента в той же последовательности и с той же скоростью, как и раствор хромоген/субстрата. Измерение: С помощью планшетного спектрофотометра измерьте интенсивность окрашивания в лунках при длине волны 450 нм (значение референтной длины волны между 620 нм и 650 нм) в течение 30 минут после добавления стопреагента. Перед измерением осторожно встряхните микропланшет для обеспечения равномерного распределения раствора. _______________________________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006, тел.: 737-0363, факс: 737-0365, е-mail: [email protected] CIC-C1 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG 4 _____________________________________________________________________________________________________ СХЕМА ВНЕСЕНИЯ РЕАГЕНТОВ A B C D E F G H 1 С2 pos. neg. Р1 Р2 Р3 Р4 Р5 2 Р6 Р7 Р8 Р9 Р10 Р11 Р12 Р13 3 Р14 Р15 Р16 Р17 Р18 Р19 Р20 Р21 4 Р22 Р23 Р24 5 6 7 С1 С2 С3 pos. neg. Р1 Р2 Р3 8 Р4 Р5 Р6 Р7 Р8 Р9 Р10 Р11 9 Р12 Р13 Р14 Р15 Р16 Р17 Р18 Р19 10 Р20 Р21 Р22 Р23 Р24 11 12 Схема внесения реагентов в лунки стрипов 1–4 планшета представляет собой образец заполнения лунок при полуколичественном анализе 24 образцов сыворотки или плазмы крови пациентов (от Р1 до Р24). Схема внесения реагентов в лунки стрипов 7–10 планшета представляет собой образец заполнения лунок при количественном анализе 24 образцов сыворотки или плазмы крови пациентов (от Р1 до Р24). Каждый из калибраторов (С1–С3), положительный контроль (pos.), отрицательный контроль (neg.) и каждый из образцов сыворотки или плазмы крови пациентов вносят в отдельную лунку. Надежность иммуноферментного анализа можно повысить внесением каждой пробы в дубликатах. Стрип можно разделить на отдельные лунки. Это позволяет отмерить точное количество реагентов по числу исследуемых образцов и снизить расход реагентов. Как положительный, так и отрицательный контроли служат внутренними контролями правильной постановки анализа. Контроли необходимо включать в каждую постановку анализа. РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ Полуколичественный анализ Оценка результатов полуколичественного анализа производится путем расчета соотношения оптической плотности контроля или исследуемого образца и оптической плотности калибратора 2. При вычислениях руководствуются следующей формулой: Оптическая плотность контроля или исследуемого образца Оптическая плотность калибратора 2 EUROIMMUN рекомендует следующую интерпретацию результатов: Соотношение < 0,8 Соотношение > 0,8 Соотношение > 1,0 = Соотношение отрицательный неопределенный положительный до <1,0 Количественный анализ Для определения концентрации антител в исследуемых образцах по измеренной оптической плотности строится калибровочная кривая в линейных координатах. По оси Y откладывают значения измеренной оптической плотности 3 калибраторов, по оси X – соответствующие концентрации антител в ОЕд/мл в этих калибраторах. Используется принцип построения кривой от точки к точке. При компьютерной обработке данных также используется способ построения калибровочной кривой «от точки к точке». Ниже приводится образец типичной калибровочной кривой. Пожалуйста, не используйте эту кривую для определения концентрации ЦИК в исследуемых образцах. 2,0 Оптическая плотность 1,8 1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 ОЕд/мл Если значение оптической плотности исследуемого образца превышает значение оптической плотности калибратора 1 (200 ОЕд/мл), результат записывают как “>200 ОЕд/мл”. Рекомендуется провести повторный _______________________________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006, тел.: 737-0363, факс: 737-0365, е-mail: [email protected] CIC-C1 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG 5 _____________________________________________________________________________________________________ анализ этого образца после разведения его 1:201. Полученный при расчете по калибровочной кривой результат в ОЕд/мл следует умножить на коэффициент разведения 4. EUROIMMUN рекомендует верхний предел нормальных значений (значение cut-off или уровень отсечения) равный 20 относительным единицам на миллилитр (ОЕд/мл). Это соответствует 4 мкг Экв/мл (эквивалентам в микрограммах агрегировавшего при нагревании IgG человека на миллилитр). EUROIMMUN рекомендует следующую интерпретацию результатов: < 20 ОЕд/мл > 20 ОЕд/мл отрицательный положительный При постановке анализа в дубликатах следует использовать среднее арифметическое значение двух величин. Если две эти величины существенно отличаются друг от друга, анализ образца следует повторить. При постановке диагноза наряду с серологическими результатами следует всегда учитывать и клинические симптомы. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Калибровка Набор откалиброван в относительных единицах (ОЕд). Пять ОЕд/мл соответствуют одному мкг Экв/мл (эквиваленту в микрограммах агрегировавшего при нагревании IgG человека на миллилитр). Для каждой группы выполненных тестов значения оптических плотностей калибраторов и значения концентраций и/или отношений, определенных для положительного и отрицательного контролей, содержащихся в наборе, должны укладываться в указанные для данной серии набора диапазоны. К набору прилагается протокол с указанием этих целевых значений. Если значения контролей выходят за рамки заданных диапазонов, следовательно, результаты анализа могут быть недостоверными, и тест необходимо повторить. Активность циркулирующих иммунных комплексов и использованного фермента термозависима, поэтому значения оптических плотностей могут изменяться, если не используется термостат. Чем выше комнатная температура во время инкубации субстрата, тем будут выше значения оптических плотностей. Сходные колебания связаны и с изменением времени инкубации. Однако, калибраторы, контроли и исследуемые образцы подвергаются одним и тем же воздействиям, так что результаты оказываются в значительной степени скомпенсированными при расчете по калибровочной кривой. C1q Лунки микропланшета покрыты фактором комплемента C1q, полученным из человеческой сыворотки. Циркулирующие иммунные комплексы связываются с C1q через Fc фрагмент иммуноглобулинов. C1q является гликопротеидом, состоящим из 18 полипептидных цепей, сформированным тремя неидентичными субъединицами с молекулярной массой 29 000, 26 000 и 19 000, соответственно. C1q в комплексе из двух C1r молекул и двух C1s молекул образует первый компонент комплемента (С1). Активация комплемента по классическому пути запускается присоединением C1q к иммунным комплексам или к другим разнообразным активирующим субстанциям. Вслед за присоединением C1q происходит преобразование C1r и C1s в протеолитические ферменты, ответственные за продолжение активации по классическому пути. Линейность Набор ЦИК-C1q ИФА (IgG) не обладает линейностью для всех образцов из-за нелинейного характера разведения циркулирующих иммунных комплексов. Аналитическая чувствительность Предел определения концентрации циркулирующих иммунных комплексов в наборе ЦИК-C1q ИФА (IgG) рассчитан на основании значения оптической плотности буфера для разведения образцов плюс утроенное среднее квадратичное отклонение. Предел определения набора представляет собой минимальную определяемую концентрацию циркулирующих иммунных комплексов и составляет около 0,1 ОЕд/мл. Аналитическая специфичность Набор ЦИК-C1q ИФА (IgG) специфически определяет циркулирующие иммунные комплексы, содержащие IgG, способные присоединяться к фрагменту комплемента C1q человека. Повышенные концентрации ЦИКC1q наблюдаются почти у 10% доноров крови, не вызывая каких-либо клинических проявлений. Влияние гемоглобина, триглицеридов и билирубина Не отмечено искажения результатов при исследовании в данном наборе гемолизированных, липемических или желтушных образцов с концентрацией гемоглобина до 10 мг/мл, триглицеридов – до 20 мг/мл и билирубина – до 0,4 мг/мл. Воспроизводимость Воспроизводимость ИФА оценивали по коэффициенту вариации (CV) в пределах одной постановки и между постановками, проводя повторные исследования 3 образцов сыворотки крови с различной концентрацией _______________________________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006, тел.: 737-0363, факс: 737-0365, е-mail: [email protected] CIC-C1 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG 6 _____________________________________________________________________________________________________ циркулирующих иммунных комплексов. Коэффициент вариации в пределах одной постановки оценивали по 20 определениям, коэффициент вариации между постановками – по 4 определениям, выполненным в 6 разных постановках. Вариабельность в пределах постановки, n = 20 Сыворотка крови 1 2 3 Среднее значение (ОЕд/мл) 10 17 115 CV (%) 7,3 8,0 4,8 Вариабельность между постановками, n = 4 х 6 Сыворотка крови 1 2 3 Среднее значение (ОЕд/мл) 8 14 100 CV (%) 10,6 14,0 10,2 Сравнение сыворотки и плазмы крови Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов определяли набором в образцах сыворотки (Х) и плазмы (Y) крови, взятых одновременно у 25 пациентов (проживающих в Германии). Концентрацию ЦИКC1q, определенную в этих двух типах образцов, сравнивали с помощью линейного регрессионного анализа. Получены следующие корреляционные характеристики: y = 0,96x + 0,27, r = 0,99. В наборе EUROIMMUN ЦИК-C1q ИФА (IgG) можно использовать как сыворотку крови, так и взятую на ЭДТА плазму крови. Специфичность и чувствительность Концентрацию ЦИК-C1q в 55 образцах сыворотки крови пациентов с системной красной волчанкой (СКВ) или ревматоидным артритом (РА) или здоровых донов крови (проживающих в Европе, Китае) определяли набором EUROIMMUN ЦИК-C1q ИФА (IgG) и другим коммерческим иммуноферментным набором, взятым в качестве набора сравнения. 22 из исследованных образцов оказались положительными, а 30 отрицательными при исследовании обоими методами. Две сыворотки крови были положительными только в наборе EUROIMMUN ЦИК-C1q ИФА (IgG), одна – только в наборе сравнения. Специфичность набора EUROIMMUN ИФА составила 94%, чувствительность – 96%. Ожидаемые значения Концентрацию ЦИК-C1q определяли с помощью набора EUROIMMUN ЦИК-C1q ИФА (IgG) в образцах сыворотки крови 250 здоровых доноров (проживающих в Германии). Диапазон концентраций ЦИК-C1q варьировал от 1 до 296 ОЕд/мл. Расчетная величина 90,0% доверительного интервала составила 15 ОЕд/мл (3 мкг Экв/мл), 95,0% доверительного интервала - 31 ОЕд/мл (6,2 мкг Экв/мл) (см. рисунок в оригинале инструкции). КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ Иммунные комплексы образуются при присоединении антител к антигенам. Взаимодействие иммунных комплексов с растворимыми клеточными эффекторными системами приводит к элиминации связанных антигенов. Иммунные комплексы формируются постоянно в результате иммунного ответа организма. Поскольку они быстро разрушаются, в организме здорового человека они не определяются или определяются только в низких концентрациях. Большие количества циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), образующиеся вследствие неполного разрушения иммунных комплексов, выявляются особенно часто в острой фазе инфекционного процесса и при некоторых аутоиммунных заболеваниях. Постоянно циркулирующие или экстраваскулярные иммунные комплексы вызывают заболевание. Отложение этих иммунных комплексов в органах может приводить к развитию воспалительных процессов, характеризующихся соответствующей клинической картиной. Формирование иммунных комплексов играет важную роль в патогенезе таких заболеваний, как системная красная волчанка (СКВ), ревматоидный артрит (РА), криоглобулинемия и васкулит. Помимо этих болезней иммунных комплексов повышенные концентрации ЦИК в сыворотке крови также наблюдаются при многих других заболеваниях, например, при бактериальных, вирусных и паразитарных заболеваниях, аллергических, аутоиммунных заболеваниях, хронических заболеваниях кожи и пищеварительного тракта, неоплазмах и неврологических заболеваниях. Хотя обнаружение циркулирующих иммунных комплексов не является специфичным для какого-либо определенного заболевания, оно обеспечивает необходимую информацию относительно иммунопатологии, развития и прогноза заболевания. Наличие иммунных комплексов является признаком протекающего иммунного защитного процесса или аутоиммунного конфликта, которые могут быть выявлены позже специальными тестами. При некоторых микробных, аутоиммунных или неопластических заболеваниях циркулирующие иммунные комплексы служат маркером активности заболевания, их определение способствует оценке состояния органа и мониторингу терапии. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ Список литературы приведен в оригинале инструкции на английском языке. _______________________________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006, тел.: 737-0363, факс: 737-0365, е-mail: [email protected] CIC-C1 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG 7 _____________________________________________________________________________________________________ Внимание! Перевод сделан с английского оригинала инструкции. Перед постановкой исследования сверьте номер и дату издания вложенного в набор оригинала с указанными в настоящем переводе (см. внизу справа). При несовпадении номеров или дат обратитесь в «Аналитику» за новым переводом, либо руководствуйтесь оригиналом инструкции. CIC-C1q-EA1818-9601G_rus.doc 9/23/2008 9:18:00 AM Оригинал CIC-C1q ELISA (IgG) EA_1818G_A_UK_C03.doc 16.07.2008 _______________________________________________________________________________________________________________ © Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006, тел.: 737-0363, факс: 737-0365, е-mail: [email protected]