показатели уровня конечных стабильных метаболитов оксида

«Íîâûå òåõíîëîãèè ìèêðîõèðóðãèè ãëàçà (àêòóàëüíûå âîïðîñû ìîðôîãåíåçà è ðåãåíåðàöèè â îôòàëüìîõèðóðãèè)»
Ìóëäàøåâ Ý.Ð., Ãàëèìîâà Â.Ó., Íóðàåâà À.Á.
ÔÃÓ «Âñåðîññèéñêèé öåíòð ãëàçíîé è ïëàñòè÷åñêîé õèðóðãèè Ðîñçäðàâà», ã. Óôà
ÏÎÊÀÇÀÒÅËÈ ÓÐÎÂÍß ÊÎÍÅ×ÍÛÕ ÑÒÀÁÈËÜÍÛÕ ÌÅÒÀÁÎËÈÒÎÂ
ÎÊÑÈÄÀ ÀÇÎÒÀ ÏÀÖÈÅÍÒÎÂ Ñ ÁÓËËÅÇÍÎÉ ÊÅÐÀÒÎÏÀÒÈÅÉ
 ðàáîòå ïðåäñòàâëåíû ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàòåëåé óðîâíÿ êîíå÷íûõ ñòàáèëüíûõ
ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà ó áîëüíûõ ñ ýíäîòåëèàëúíî-ýøòåëèàëúíîé äèñòðîôèåé ðîãîâèöû. Ðåêîìåíäóåòñÿ ó÷èòûâàòü ïîêàçàòåëè óðîâíÿ îêñèäà àçîòà â ñëåçíîé æèäêîñòè áîëüíûõ ñ ýíäîòåëèàëüíî-ýøòåëèàëúüíîé äèñòðîôèåé êàê êðèòåðèé âûðàæåííîñòè âîñïàëèòåëüíîãî ïðîöåññà ðîãîâèöû.
Àêòóàëüíîñòü
Îäíîé èç âàæíåéøèõ áèîëîãè÷åñêèõ ñèãíàëüíûõ ìîëåêóë ÿâëÿåòñÿ îêñèä àçîòà (NO).
Îêñèä àçîòà ÿâëÿåòñÿ ðåãóëÿòîðîì èììóííûõ
ðåàêöèé, âîñïàëåíèÿ, ñîñóäèñòîé ïðîíèöàåìîñòè è òîíóñà ñîñóäîâ. Ïðîäóêöèÿ îêñèäà
àçîòà îñóùåñòâëÿåòñÿ ôåðìåíòîì èíäóöèáåëüíîé àçîò-ñèíòàçîé (iNOS), ýêñïðåññèðîâàííîé, â îñíîâíîì, â êëåòêàõ ìàêðîôàãàëüíîãî ðÿäà, ïðè÷åì îñíîâíûìè èíäóêòîðàìè
iNOS ÿâëÿþòñÿ ïðîòèâîâîñïàëèòåëüíûå öèòîêèíû [1]. Àêòèâàöèÿ NO-ñèíòàçû, èíäóêöèÿ îáðàçîâàíèÿ NO è ïîñëåäóþùèé êàòàáîëèçì NO ñîïðîâîæäàåòñÿ ïîâûøåíèåì ñîäåðæàíèÿ êîíå÷íûõ ìåòàáîëèòî⠖ NO2, NO3,
NOX. Ýïèòåëèàëüíûå è ñòðîìàëüíûå êëåòêè
ðîãîâèöû ïðè áóëëåçíîé êåðàòîïàòèè ïðîäóöèðóþò ïîâûøåííîå êîëè÷åñòâî ïðîâîñïàëèòåëüíûõ öèòîêèíîâ (IL-1α IL – 8) [4] è â
òêàíè ïðè ýòîì çàáîëåâàíèè íàáëþäàåòñÿ
ïîâûøåííàÿ ýêñïðåññèÿ íåêîòîðûõ ðîñòîâûõ
ôàêòîðîâ ìåòàëëîïðîòåèíàç (IGF – 4,
BMP – 4) [3], êîòîðûå ÿâëÿþòñÿ èíäóêòîðàìè iNOS.  ýòîé ñâÿçè ïðåäñòàâëÿåòñÿ èíòåðåñíûì îöåíèòü ñîñòîÿíèå ëîêàëüíûõ è ñèñòåìíûõ íèòðîêñèäåðãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ ó
áîëüíûõ áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé.
Öåëüþ íàñòîÿùåãî èññëåäîâàíèÿ ÿâèëîñü èçó÷åíèå ïîêàçàòåëåé óðîâíÿ êîíå÷íûõ
ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà ó ïàöèåíòîâ ñ áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé.
Ìàòåðèàëû è ìåòîäû
Èññëåäîâàíèå óðîâíÿ êîíå÷íûõ ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà â ñëåçíîé
æèäêîñòè è â ñûâîðîòêå êðîâè ïðîâîäèëîñü
ó 35 áîëüíûõ áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé èç îñíîâíîé è êîíòðîëüíîé ãðóïï âûáîðî÷íî.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ìåòàáîëèòîâ NO ñëåçíóþ æèäêîñòü â îáúåìå 0,1 – 0,2 ìë ñîáèðàëè
ñ ïîìîùüþ ìåëàíæåðà èç íèæíåãî êîíúþí-
êòèâàëüíîãî ñâîäà. Çàáîð êðîâè îñóùåñòâëÿëè èç ëîêòåâîé âåíû. Óðîâåíü ñîäåðæàíèÿ
êîíå÷íûõ ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ NO (NO2/
NO 3) îïðåäåëÿëè ìåòîäîì Åì÷åíêî Í.À.
(1994), àäàïòèðîâàííûì ê ìàëûì îáúåìàì.
Ðåçóëüòàòû ó÷èòûâàëèñü ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêè ïðè äëèíå âîëíû 540 íì. Êîíöåíòðàöèþ îêñèäà àçîòà îöåíèâàëè ïî ñîäåðæàíèþ
ñòàáèëüíûõ êîíå÷íûõ ìåòàáîëèòîâ NO2/ NO3
è âûðàæàëè â ìêìîëü/ë. Êîíòðîëåì ñëóæèëè òåñò ïðîáû ñëåçíîé æèäêîñòè è ñûâîðîòêè êðîâè çäîðîâûõ ëèö (20 ÷åëîâåê).
Íîðìàëüíûå ïîêàçàòåëè îêñèäà àçîòà
ñëåçíîé æèäêîñòè, ïî íàøèì äàííûì, ñîñòàâèëè 2,39±0,2 ìêìîëü/ë, â ñûâîðîòêå êðîâè
20,6±2,8 ìêìîëü/ë.
Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå
Ïðîâåäåííûå èññëåäîâàíèÿ ïîçâîëèëè
âûÿâèòü, ÷òî óðîâåíü ñòàáèëüíûõ êîíå÷íûõ
ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà â ñëåçíîé æèäêîñòè ó áîëüíûõ áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé â 4
ðàçà ïðåâûøàë òàêîâîé ó çäîðîâûõ äîíîðîâ
(p<0,001). Óðîâåíü NOX â ñûâîðîòêå êðîâè ó
ïàöèåíòîâ ñ áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé òàêæå
áûë ñóùåñòâåííî ïîâûøåí (p<0,001). Ïî íàøåìó ìíåíèþ, ïîâûøåíèå óðîâíÿ ìåòàáîëèòîâ NO â ñëåçå è ñûâîðîòêå êðîâè ó áîëüíûõ
áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé îáúÿñíÿåòñÿ ïîâûøåíèåì ñèíòåçà èíäóöèáèëüíîé ôîðìû
iNOS, êîòîðàÿ èãðàåò âàæíóþ ðîëü â ðàçâèòèè èììóííîãî âîñïàëåíèÿ.
 òàáëèöå ïðåäñòàâëåíû äàííûå, õàðàêòåðèçóþùèå ñîäåðæàíèå êîíå÷íûõ ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà (NOÕ) â ñûâîðîòêå êðîâè è ñëåçíîé æèäêîñòè.
Èçâåñòíî, ÷òî èçáûòîê NO óâåëè÷èâàåò ïðîíèöàåìîñòü ñîñóäîâ, ñïîñîáñòâóåò
îòåêó òêàíåé, îêàçûâàåò ïðÿìîå öèòîòîêñè÷åñêîå äåéñòâèå, òåì ñàìûì îïðåäåëåíèå
êîëè÷åñòâà NO â ñëåçíîé æèäêîñòè è ñûâîВЕСТНИК ОГУ №78/ДЕКАБРЬ`2007
"#
Ðîññèéñêàÿ íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêàÿ êîíôåðåíöèÿ ñ ìåæäóíàðîäíûì ó÷àñòèåì
Òàáëèöà 1. Óðîâåíü ñòàáèëüíûõ êîíå÷íûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà â ñëåçíîé æèäêîñòè
è ñûâîðîòêå êðîâè ó áîëüíûõ ñ áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé è ó çäîðîâûõ äîíîðîâ.
Ãðóïïû
n
Êîíöåíòðàöèÿ ìåòàáîëèòîâ
NOx â ñëåçå, ̱m (ìêìîëü/ë)
Êîíöåíòðàöèÿ ìåòàáîëèòîâ NOx
â ñûâîðîòêå êðîâè, ̱m (ìêìîëü/ë)
Ïàöèåíòû ñ áóëëåçíîé
êåðàòîïàòèåé
35
10,5±1,5
39,7±3,1
Ãðóïïà çäîðîâûõ äîíîðîâ
20
2,39±0,2
20,6±2,8
ðîòêå êðîâè ìîæåò ÿâëÿòüñÿ ïîêàçàòåëåì
àêòèâíîñòè âîñïàëèòåëüíîãî è äèñòðîôè÷åñêîãî ïðîöåññà, ò. å. ñòåïåíè âûðàæåííîñòè áóëëåçíîé êåðàòîïàòèè. Ýòè äàííûå ñîãëàñóþòñÿ ñ ðåçóëüòàòàìè, ïîëó÷åííûìè
R.Buddi et al. (2002), êîòîðûå îáíàðóæèëè
óâåëè÷åíèå ýêñïðåññèè iNOS è ýíäîòåëèàëüíîé àçîò-ñèíòàçû (eNOS) ïðè êåðàòîêîíóñå, áóëëåçíîé êåðàòîïàòèè è ãåòåðîõðîìíîì öèêëèòå.  òî æå âðåìÿ, ïðè áóëëåçíîé
êåðàòîïàòèè, â îòëè÷èå îò êåðàòîêîíóñà,
àâòîðû íå îáíàðóæèëè óâåëè÷åíèÿ ñîäåð-
æàíèÿ ïåðîêñèíèòðèòà – íàèáîëåå òîêñè÷íîãî ïðîäóêòà âçàèìîäåéñòâèÿ àêòèâíûõ
ôîðì êèñëîðîäà è NO.
Çàêëþ÷åíèå
Òàêèì îáðàçîì, îïðåäåëåíèå óðîâíÿ êîíå÷íûõ ñòàáèëüíûõ ìåòàáîëèòîâ îêñèäà àçîòà ó ïàöèåíòîâ ñ áóëëåçíîé êåðàòîïàòèåé ÿâëÿåòñÿ ïðîãíîñòè÷åñêèì êðèòåðèåì îöåíêè
ñòåïåíè âîñïàëåíèÿ ðîãîâèöû äëÿ ïîäáîðà
ïàòîãåíåòè÷åñêè îðèåíòèðîâàííîãî ìåòîäà
ëå÷åíèÿ.
Ñïèñîê èñïîëüçîâàííîé ëèòåðàòóðû:
1. Áîíäàðåíêî, Â.Ì. Àíòèìèêðîáíàÿ àêòèâíîñòü îêèñè àçîòà è åå ðîëü â èíôåêöèîííîì ïðîöåññå / Â.Ì.Áîíäàðåíêî,
Í.À. Âèíîãðàäîâ, Â.Â. Ìàëååâ // Êëèíè÷åñêàÿ ìèêðîáèîëîãèÿ è ýïèäåìèîëîãèÿ. – 1999. – ¹6. – Ñ.61-66.
2. Åì÷åíêî, Í.Ë. Óíèâåðñàëüíûé ìåòîä îïðåäåëåíèÿ íèòðàòîâ â áèîñðåäàõ îðãàíèçìà / Í.Ë.åì÷åíêî, Î.È.Öûãàíåíêî,
Ò.Â.Êîâàëåâñêàÿ // Êëèí. Ëàá.Äèàãíîñòèêà. – 1994. – ¹6. – Ñ.19-20.
3. Altered expression of growth factors and cytokines in keratoconus, bullosd keratopathy and diabetic human corneas / M.
Sadhizadeh, Chwa M., Aoki A., Lin B. et al. // Exp.Eye Res. – 2001. – Vol.73. – P.179 – 189.
4. Detection of mRNA for the cytokines, interleukin-1 alpha and interleukin-8, in corneas from patients with pseudophakic bullos
keratopathy / J. Rosenbaum, S.Planck, Huang X., I. Rich et al. // Invest. Ophtalm. Vis. Sci. – 1995. – Vol.36. – P.2151 – 2155.
5. Evidence of oxidative stress in human corneal diseases / R.Buddi, B.Lin, S. Atilano, N. Zorapapel et al // J.Histochem.Cytochem.
– 2002. – Vol.50. – P.341-351.
"$
ВЕСТНИК ОГУ №78/ДЕКАБРЬ`2007