динамика показателей клеточного цикла гепатоцитов амфибий

Àíòîíîâà Å.È.
Омский государственный педагогический университет
ÄÈÍÀÌÈÊÀ ÏÎÊÀÇÀÒÅËÅÉ ÊËÅÒÎ×ÍÎÃÎ ÖÈÊËÀ
ÃÅÏÀÒÎÖÈÒÎÂ ÀÌÔÈÁÈÉ ÂÈÄÀ RANA TERRESTRIS ÈÍÄÓÖÈÐÓÅÌÀß
ÒÅÏËÎÂÛÌ ÑÒÐÅÑÑÎÌ ÊÀÊ ÏÐÎßÂËÅÍÈÅ ÏÅÐÂÈ×ÍÎÉ
ÊÎÌÏÅÍÑÀÒÎÐÍÎ-ÏÐÈÑÏÎÑÎÁÈÒÅËÜÍÎÉ ÐÅÀÊÖÈÈ ÎÐÃÀÍÈÇÌÀ
Ïîñëå âîçäåéñòâèÿ ãèïåðòåðìèè íà îðãàíèçì àìôèáèé âèäà Rana terrestris êîëè÷åñòâåííûå
ïîêàçàòåëè ÄÍÊ ãåïàòîöèòîâ îòðàæàþò ïåðâè÷íûå ïðîÿâëåíèÿ êîìïåíñàòîðíî-ïðèñïîñîáèòåëüíîé
ðåàêöèè îðãàíèçìà – óâåëè÷èâàåòñÿ óðîâåíü êîìïàêòèçàöèè ÄÍÊ, óìåíüøàåòñÿ ïëîùàäü ðàñïðåäåëåíèÿ õðîìàòèíà è ïëîùàäü ÿäåð, ðàçâèâàåòñÿ ìåòàáîëè÷åñêàÿ äåïðåññèÿ çà ñ÷åò ñíèæåíèÿ
êîëè÷åñòâà ãåïàòîöèòîâ â S-è G2-Ì-ñòàäèè êëåòî÷íîãî öèêëà, óâåëè÷èâàåòñÿ äîëÿ ïîãèáøèõ ãåïàòîöèòîâ è óâåëè÷èâàåòñÿ àêòèâíîñòü êàñïàçû 3. Ñîîòíîøåíèå ïóòåé ãèáåëè ãåïàòîöèòîâ ñîñòàâëÿåò
0,8 ñ ïðåîáëàäàíèåì ïðîïèäèóìèîäèä-ïîçèòèâíûõ ãåïàòîöèòîâ íàä õåõñò-ïîçèòèâíûìè.
Ýêñòðåìàëüíàÿ ýêçîãåííàÿ ãèïåðòåðìèÿ
îïðåäåëÿåò ïðîÿâëåíèå êðàéíåãî íàïðÿæåíèÿ
ôóíêöèîíàëüíûõ ñèñòåì îðãàíèçìà ñîïðÿæåííîãî ñ èñòîùåíèåì ôóíêöèîíàëüíîãî
ïîòåíöèàëà è ìåõàíèçìîâ ñîõðàíåíèÿ ãîìåîñòàçà ïå÷åíè, îòðàæàÿ ñòåïåíü òîëåðàíòíîñòè îðãàíèçìà ê ãèïåðòåðìèè ñîãëàñíî èñõîäíîãî èíäèâèäóàëüíîãî óðîâíÿ óñòîé÷èâîñòè, îáóñëîâëåííîãî ãåíîòèïîì îñîáè [27].
Äèíàìè÷åñêèé áàëàíñ ìåæäó ãèáåëüþ è ïðîëèôåðàöèåé êëåòîê â îðãàíèçìå ñîñòàâëÿåò
îñíîâó òêàíåâîãî ãîìåîñòàçà. Ýâîëþöèîííîå
äàâëåíèå ñôîðìèðîâàëî íåñêîëüêî ïðîãðàìì
êëåòî÷íîé ãèáåëè, êîòîðûå ïî ìåðå óñëîæíåíèÿ è óâåëè÷åíèÿ ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè îðãàíèçìîâ îáåñïå÷èâàþò êîíòðîëü çà
êëåòî÷íîé ïîïóëÿöèåé â ìíîãîêëåòî÷íîì
îðãàíèçìå è ðàçíîîáðàçèå áèîëîãè÷åñêèõ
ñîáûòèé, êîòîðûå âêëþ÷àþò ìîðôîãåíåç,
òêàíåâûé ãîìåîñòàç è óñòðàíåíèå äåôåêòíûõ
êëåòîê [26, 10, 17, 33]. Àíàëèç ñòðóêòóðû èíòåðôàçíîãî õðîìàòèíà, íà ñàìûõ ðàííèõ ýòàïàõ ñòàíîâëåíèÿ êîìïåíñàòîðíî-ïðèñïîñîáèòåëüíûõ ðåàêöèé, ìîæíî ðàññìàòðèâàòü
êàê íåñïåöèôè÷åñêîå çâåíî ðåãóëÿöèè êëåòî÷íîé àêòèâíîñòè, êîòîðîå ÷åðåç ñîçäàíèå
êîíôîðìàöèîííûõ ñòðóêòóð ÄÍÊ äàåò ïðåäñòàâëåíèå î ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè
ÿäðà è êëåòêè â öåëîì, î ñêîðîñòè ïðîãðàììèðóåìîé êëåòî÷íîé ñìåðòè è êîìïåíñàòîðíî-ïðîëèôåðàòèâíûõ ïðîöåññàõ [13, 16]. Àíàëèç êîëè÷åñòâà ñîäåðæàíèÿ ÄÍÊ è ðàçìåðà
ãåíîìà ñ ïîìîùüþ öèòîôîòîìåòðèè âàæåí
êàê â áèîëîãè÷åñêîì, òàê è êëèíè÷åñêîì àñïåêòå [34, 21]. Âîïðîñ î òîì, êàê óâåëè÷åíèå
ðàçìåðà ãåíîìà (Ñ-öåííîñòü) âëèÿåò íà òå èëè
ВЕСТНИК ОГУ №6(88)/июнь`2008
èíûå ôóíêöèè æèâîòíûõ íà êëåòî÷íîì, òêàíåâîì è îðãàíèçìåííîì óðîâíÿõ, â ñâÿçè ñ
àäàïòàöèåé ïîëèïëîèäíûõ âèäîâ èëè ïîïóëÿöèé ê îêðóæàþùåé ñðåäå, äàëåê îò ðàçðåøåíèÿ.  ñâÿçè, ñ ÷åì öåëüþ íàøåãî èññëåäîâàíèÿ ÿâèëîñü èçó÷åíèå äèíàìèêè ïîêàçàòåëåé êëåòî÷íîãî öèêëà ãåïàòîöèòîâ Rana
terrestris â ñîîòâåòñòâèè ñ ðàçìåðîì ãåíîìà è
ñîîòíîøåíèÿ óðîâíåé äåñòðóêòèâíûõ è ðåïàðàòèâíûõ ïðîöåññîâ ïîñëå îäíîêðàòíîé òåïëîâîé íàãðóçêè.
Ìàòåðèàëû è ìåòîäû Ýêñïåðèìåíò ïîñòàâëåí íà àìôèáèÿõ âèäà Rana terrestris (îñòðîìîðäûå ëÿãóøêè ïîëîâîçðåëûå ñàìöû 3õ ëåòêè). Â êàæäîé ãðóïïå 15 æèâîòíûõ ñîñòàâèëè êîíòðîëüíóþ ãðóïïó è 15 æèâîòíûõ
ïîäâåðãëèñü ãèïåðòåðìèè. Ó÷èòûâàÿ ëèòåðàòóðíûå äàííûå î ñåçîííîé, ñóòî÷íîé è ôèçèîëîãè÷åñêîé ðèòìèêå, âñå ýêñïåðèìåíòû ïðîâåäåíû â âåñåííå-ëåòíèé ïåðèîä íà ãîëîäíûõ
æèâîòíûõ ñ 9 äî 12 ÷àñîâ äíÿ. Îñòðîãî ïåðåãðåâàíèÿ äîñòèãàëè ïóòåì ïðåáûâàíèÿ æèâîòíûõ â òå÷åíèå 20-30 ìèíóò â ïðèíóäèòåëüíîì ñòàòè÷íîì òåðìîðåæèìå (32°Ñ) â óñëîâèÿõ ñâîáîäíîãî ïëàâàíèÿ â òåðìîãðàäèåíòíîì
ëîòêå ñ äîïîëíèòåëüíîé àýðàöèåé [4]. Äî è
ïîñëå ýêñïåðèìåíòà ó æèâîòíûõ èíäèâèäóàëüíî îïðåäåëÿëè ìàññó òåëà íà ýëåêòðîííûõ
âåñàõ «WA33» è ðåêòàëüíóþ òåìïåðàòóðó
ýëåêòðîòåðìîìåòðîì «ÒÝÏ – 16». Òåìïåðàòóðíîå âîçäåéñòâèå ïðèìåíÿåìûå â ýêñïåðèìåíòå ìîäåëèðîâàëî òåïëîâîé øîê ñðåäíåé
òÿæåñòè [32, 23, 9]. Ìàòåðèàë äëÿ ãèñòîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé âñåãäà çàáèðàëñÿ èç îäíèõ è òåõ æå äîëåé ïå÷åíè ÷åðåç ÷àñ ïîñëå
âîçäåéñòâèÿ. Ìàçêè ïå÷åíè îêðàøèâàëè ïî
Антонова Е.И.
Ôåëüãåíó â ìîäèôèêàöèè G. Olson, â ðåàêòèâå Øèôôà. Íà ïðåïàðàòàõ îïðåäåëÿëè ñîñòîÿíèå îáîèõ ôðàêöèé õðîìàòèíà – èíòåãðàëüíóþ ïëîòíîñòü äåêîíäåíñèðîâàííîãî, êîíäåíñèðîâàííîãî õðîìàòèíà è îáùóþ èíòåãðàëüíàÿ ïëîòíîñòü õðîìàòèíà (ó.å.); ïëîùàäü
ðàñïðåäåëåíèÿ õðîìàòèíà è ïëîùàäü ÿäðà
(ìêì2); ñðåäíþþ îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü è
ïëîòíîñòü îáåèõ ôîðì õðîìàòèíà (ó.å.). Èçìåðåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÄÍÊ ïðîâîäèëèñü íà
ñêàíèðóþùåì ìèêðîñêîïå-ôîòîìåòðå «Ëþìàì ÏÌ-11». Â êàæäîé ãðóïïå ó êàæäîãî
æèâîòíîãî êîëè÷åñòâî ÄÍÊ áûëî èçìåðåíî
â 200 ÿäðàõ. Âî âñåõ ñëó÷àÿõ èññëåäîâàëè
òîëüêî îäíîÿäåðíûå ãåïàòîöèòû [3].
Òåñò «æèâîå è ìåðòâîå» (life and dead assay)
[22] ïðîâîäèëè ïóòåì ïðèæèçíåííîãî îêðàøèâàíèÿ ãåïàòîöèòîâ ÿäåðíûìè êðàñèòåëÿìè
Hoechst 33342 (Sigma, ÑØÀ; ðàñòâîð â êîíöåíòðàöèè 20 ìêã/ìë íà ñðåäå ÌÇ â òå÷åíèå 15
ìèí) [15] è éîäèñòûì ïðîïèäèåì (Sigma,
ÑØÀ; ðàñòâîð â êîíöåíòðàöèè 20 ìêã/ìë íà
ñðåäå ÌÇ â òå÷åíèå 25 ìèí) ÷òî ïîçâîëÿåò ðàçäåëèòü ãåïàòîöèòû íà ãðóïïû, îñíîâûâàÿñü íà
òàêèõ êðèòåðèÿõ, êàê ñîñòîÿíèå ïëàçìàòè÷åñêîé ìåìáðàíû è ÿäðà. Äëÿ ýòîãî îäèí ãðàìì
òêàíè ãîìîãåíèçèðîâàëè, êëåòêè îòìûâàëè 5
ìèí ïðè 1500 îá/ìèí ñ ïîìîùüþ PBS ñ äîáàâëåíèåì 1% áû÷üåãî ñûâîðîòî÷íîãî àëüáóìèíà (BSA) äëÿ óñòðàíåíèÿ íåñïåöèôè÷åñêîãî
ñâÿçûâàíèÿ, â ìèêðîïðîáèðêè ñ êëåòêàìè äîáàâëÿëè êðàñèòåëü Hoechst 33342 è/èëè éîäèñòûé ïðîïèäèé. Êëåòêè öåíòðèôóãèðîâàëè,
îòáðàñûâàëè íàäîñàäî÷íóþ æèäêîñòü è 2 ðàçà
îòìûâàëè ðàñòâîðîì PBS ñ äîáàâëåíèåì 1%
BSA. Äàëåå ðåñóñïåíçèðîâàëè â ðàñòâîðå ãëèöåðèíà ñ 4% ïàðàôîðìàëüäåãèäîì â ñîîòíîøåíèè 1:1 â îáùåì îáúåìå 8 ìêë. Ôèêñèðîâàííûå òàêèì îáðàçîì êëåòêè íàíîñèëè íà
ïðåäìåòíîå ñòåêëî, íàêðûâàëè ïîêðîâíûì
ñòåêëîì è çàïàèâàëè æèäêèì ïàðàôèíîì. Ãåïàòîöèòû, ó êîòîðûõ ÿäðà îêðàøåíû Hoechst
33342, ñ÷èòàþò æèçíåñïîñîáíûìè, åñëè èõ
ÿäðà íå ôðàãìåíòèðîâàíû, èëè àïîïòîçíûìè,
åñëè õðîìàòèí êîíäåíñèðîâàí è(èëè) ÿäðà
ôðàãìåíòèðîâàíû. ßäðà, îêðàøåííûå éîäèñòûì ïðîïèäèåì óêàçûâàþò íà íàðóøåíèå öåëîñòíîñòè ïëàçìàòè÷åñêèõ ìåìáðàí ãåïàòîöèòîâ [29]. Äëÿ ýòîãî èñïîëüçîâàëñÿ ôëóîðåñöåíòíûé ìèêðîñêîï Axioscope (Zeiss) ñ ïðèìåíå-
Динамика показателей клеточного цикла...
íèåì áëîêà ôèëüòðîâ «Ãîëóáàÿ» ïðè äëèíå
âîëíû ? 500-550 è 600-700. Ïðîâîäèëñÿ ïîäñ÷åò ôðàãìåíòèðîâàííûõ ÿäåð â ðàñ÷åòå íà 300
êëåòîê â 5 ïîëÿõ çðåíèÿ. Áèîõèìè÷åñêîå îïðåäåëåíèå òåðìèíàëüíîé ñòàäèè àïîïòîçà
ïðîâîäèëè, èñïîëüçóÿ êîììåð÷åñêèé íàáîð
«Caspase-3 Assay Kit» ôèðìû «Sigma» íà ñïåêòðîôîòîìåòðå Platr Reader Star-30 KENSTAR â
ìêì/ìã áåëêà ïî èíñòðóêöèè ïðîèçâîäèòåëÿ.
Ñòàòèñòè÷åñêóþ îáðàáîòêó ïîëó÷åííîãî
ìàòåðèàëà îñóùåñòâëÿëè ñ ïîìîùüþ ïàêåòà
ïðèêëàäíûõ ïðîãðàìì ”STATISTICA-5”
Ð?0,05 [6]. Ðàçëè÷èÿ ìåæäó íåçàâèñèìûìè
âûáîðêàìè îïðåäåëÿëè ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ
Mann-Whitney òåñò, ìíîãîôàêòîðíîãî äèñïåðñíîãî àíàëèçà MANOV, ïî êðèòåðèþ Ñòüþäåíòà (t), Âèëêîêñîíà (U), ? 2 Ïèðñîíà.
Ñîáñòâåííûå äàííûå Îïòèêî-ñòðóêòóðíûé àíàëèç õðîìàòèíà ÿäåð ãåïàòîöèòîâ ïîçâîëèë âûÿâèòü ñîñòîÿíèå õðîìàòèíà ó èíòàêòíûõ è ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ.
Òàê â êîíòðîëå äèôôóçíûé õðîìàòèí Rana
terrestris èìååò áoëüøóþ èíòåãðàëüíóþ îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü (69,4%), â îòëè÷èå îò êîíäåíñèðîâàííîãî (30,6%) – 2,5±0,05 è
1,12±0,04 ó.å. ñîîòâåòñòâåííî. Ñðåäíÿÿ îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü (óðîâåíü êîìïàêòèçàöèè)
âûøå ó ãåòåðîõðîìàòèíà – 0,08±0,001 è
0,16±0,0025 ó.å. ñîîòâåòñòâåííî. Ïëîùàäü
ðàñïðåäåëåíèÿ ýóõðîìàòèíà â ÿäðàõ ãåïàòîöèòîâ çíà÷èòåëüíî ïðåâûøàåò ïëîùàäü ðàñïðåäåëåíèÿ ãåòåðîõðîìàòèíà (33,0±0,76 è
8,19±0,35 ìêì2 ñîîòâåòñòâåííî). Íà îñíîâàíèè ÷àñòîò èíòåãðàëüíîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ÿäåð ïîïóëÿöèÿ ãåïàòîöèòîâ ïî ñòàäèÿì êëåòî÷íîãî öèêëà ðàñïðåäåëåíà ñëåäóþùèì îáðàçîì – 2,25% ãåïàòîöèòîâ ÿâëÿþòñÿ
ãèïîäèïëîèäíûìè, 87,8% íàõîäÿòñÿ â G0-G1
ñòàäèè, 1,75% â G2-M è â S– ñòàäèè – 7,5%
ãåïàòîöèòîâ èíòàêòíîé ïå÷åíè Rana terrestris
(ðèñ. 1, 2). Ïðîñòðàíñòâåííî-òîïîãðàôè÷åñêè õðîìàòèí ïðåäñòàâëåí ìåëêîçåðíèñòûìè
ôðàêöèÿìè ñ ðàâíîìåðíûì ðàñïðåäåëåíèåì
ïî îáúåìó ÿäðà. Âñòðå÷àþòñÿ êðóïíûå çîíû
êîíäåíñàöèè õðîìàòèíà, êîòîðûå ìîãóò
èìåòü ðàçëè÷íóþ ëîêàëèçàöèþ (ðèñ. 3).
Ïîñëå ïåðåãðåâàíèÿ îòìå÷àåòñÿ ñâåðõêîìïàêòèçàöèÿ õðîìàòèíà, ÷òî ïðîÿâëÿåòñÿ
â óìåíüøåíèè ïåðèìåòðà, êîýôôèöèåíòà îêðóãëîñòè, ïëîùàäè ðàñïðåäåëåíèÿ è èíòåãВЕСТНИК ОГУ №6(88)/июнь`2008
!
Естественные науки
îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè è ÷àñòîòíîìó àíàëèçó âûÿâëåíî
100
90
(ðèñ. 4, 5) óâåëè÷åíèå êîëè÷å80
ñòâà ãèïîäèïëîèäíûõ ãåïàòî70
öèòî⠖ 2,75%, óâåëè÷èâàåòñÿ
60
êîëè÷åñòâî ãåïàòîöèòîâ â G050
40
G1 ñòàäèè êëåòî÷íîãî öèêëà,
30
óìåíüøàåòñÿ êîëè÷åñòâî â S
20
ñòàäèè
– 3,75%, óãíåòàåòñÿ ìè10
Expected
0
òîòè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü ãåïàNormal
0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5 7,0 7,5 8,0 8,5 9,0 9,5
òîöèòîâ ïîêàçàòåëè êîòîðîé
Upper Boundaries (x <= boundary)
ñîñòàâëÿþò 1,25% (ðèñ. 4, 5).
Ðèñóíîê 1. Àìôèáèè Rana terrestris. Êîíòðîëü. Ãèñòîãðàììà
ðàñïðåäåëåíèÿ ïîïóëÿöèè ãåïàòîöèòîâ ïî êëåòî÷íîìó öèêëó. TI –
Òàêèì îáðàçîì, èíäåêñ ïðîèíòåãðàëüíàÿ îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü õðîìàòèíà
ëèôåðàöèè ñíèæàåòñÿ äî 5 â
ñðàâíåíèè ñ êîíòðîëåì, êîãTI vs. T_SR
äà îí ñîñòàâëÿë 9,3. Óâåëè÷åT_SR = ,07484 + ,00532 * TI
Correlation: r = ,22717
íèå ÷èñëà ãèïîäèïëîèäíûõ
0,24
ãåïàòîöèòîâ ñîïðîâîæäàåòñÿ
0,20
óâåëè÷åíèåì íà 66,6% â ñðàâíåíèè ñ êîíòðîëåì àêòèâíîñ0,16
òè êàñïàçû 3 â öèòîçîëüíîé
0,12
ôðàêöèè ãåïàòîöèòîâ Rana
0,08
terrestris (0,4±0,02 è 2,0±0,02*
ìêì/ìã áåëêà ñîîòâåòñòâåí0,04
íî). Àíàëèç òåñòà «life and dead
Regression
0,00
95% confid.
assay» âûÿâèë, ÷òî íàðÿäó ñ ãå0
2
4
6
8
10
TI
ïàòîöèòàìè â ñîñòîÿíèè
Ðèñóíîê 2. Àìôèáèè Rana terrestris. Êîíòðîëü. Äâóìåðíîå ðàñïðåäåëåíèå àïîïòîçà – õåõñò-ïîçèòèâíûå,
ÿäåð ãåïàòîöèòîâ ïî TI – èíòåãðàëüíîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ÄÍÊ
ïðèñóòñòâóþò è ïðîïèäèóìèè T_RS – ñðåäíåé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ÄÍÊ. Ìíîãîôàêòîðíûé
äèñïåðñíûé àíàëèç MANOV.
îäèä-ïîçèòèâíûå, êîòîðûå
ïðîÿâëÿþò íåêðîòè÷åñêèé ôåðàëüíîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ýóõðîìàòèíà.
íîòèï (ðèñ. 7). Ïðè÷åì äîëÿ ïðîïèäèóìèîÒàê óâåëè÷åíèå èíòåãðàëüíîé îïòè÷åñêîé
äèä-ïîçèòèâíûõ ãåïàòîöèòîâ ñîñòàâëÿåò
ïëîòíîñòè ãåòåðîõðîìàòèíà â ñðàâíåíèè ñ
55%, à õåõñò-ïîçèòèâíûõ 45%, â ñîîòíîøåêîíòðîëåì ïðîèñõîäèò íà 19,7% (1,12±0,04 è
íèè 0,8, Îáùàÿ äîëÿ ïîãèáøèõ ãåïàòîöèòîâ
1,67±0,04* ó.å. ñîîòâåòñòâåííî). Íà 20,0%
ïîñëå ïåðåãðåâàíèÿ ñîñòàâèëà 30,8%, â ðàñóâåëè÷èâàåòñÿ ñðåäíÿÿ îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü
÷åòå íà 100 ãåïàòîöèòîâ. Ïîñëå òåïëîâîé íàýóõðîìàòèíà (0,08±0,001 è 0,12±0,001* ó.å.
ãðóçêè áîëüøàÿ ÷àñòü õðîìàòèíà ÿäåð àìôèñîîòâåòñòâåííî), â ñâÿçè, ñ ÷åì íà 28,8%
áèé ìîðôîëîãè÷åñêè ïðåäñòàâëåíà êðóïíîóìåíüøàåòñÿ ïëîùàäü åãî ðàñïðåäåëåíèÿ
çåðíèñòûìè ôðàãìåíòàìè ãåòåðîõðîìàòèíà
(33,0±0,76 è 18,2±0,33* ìêì2 ñîîòâåòñòâåííî).
ñ ðàçëè÷íîé ëîêàëèçàöèåé â îáúåìå ÿäðà, à
Äîïîëíèòåëüíàÿ êîìïàêòèçàöèÿ, êîòîðóþ
òàê æå ïðèñóòñòâóþò ÿäðà â ñîñòîÿíèè ïèêïðîÿâëÿåò ýóõðîìàòèí, îïðåäåëÿåò ðåçêîå
íîçà (ðèñ. 6).
óìåíüøåíèå îáùåé ïëîùàäè ÿäåð ãåïàòîöèÎáñóæäåíèå ðåçóëüòàòîâ. Ðàçìåð ãåíîìà è
òî⠖ íà 22,2% (41,4±0,83 è 26,7±0,35* ìêì2
åãî ìîðôîìåòðè÷åñêèå ïàðàìåòðû, âîâëå÷åíû
â ðåãóëèðîâàíèå ìåòàáîëèçìà êëåòêè. Âíóòðèñîîòâåòñòâåííî). À îáùàÿ êîìïàêòèçàöèÿ, ïî
ÿäåðíûå êîìïëåêñû ïîäâåðãàþòñÿ ïîñòîÿííîé
ðåçóëüòàòàì ñðåäíåé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè,
ñáîðêå è äåìîíòàæó, îáåñïå÷èâàÿ àäåêâàòíîå
îáåèõ ôðàêöèé õðîìàòèíà ñîñòàâèëà 14,2%
ðåàãèðîâàíèå ãåíîìà íà äåéñòâèå ýêîëîãè÷åñ(0,24±0,03 è 0,32±0,02* ó.å. ñîîòâåòñòâåííî).
êèõ ôàêòîðîâ, ïðèâîäÿ ê ôîðìèðîâàíèþ ñòðóêÏîñëå ïåðåãðåâàíèÿ ñîãëàñíî èíòåãðàëüíîé
TI
T_SR
No of obs
110
"
ВЕСТНИК ОГУ №6(88)/июнь`2008
Антонова Е.И.
Динамика показателей клеточного цикла...
T_SR
No of obs
òóðíûõ ïåðåõîäîâ, êîòîðûå êîððåëèðóþò ñ
äèíàìè÷åñêèìè ïðîöåññàìè ÿäåðíîé àêòèâíîñòè [12]. Ñ÷èòàåòñÿ, ÷òî ÿäåðíûå îáúåìû ãåíåòè÷åñêè äåòåðìèíèðîâàíû, ïðåæäå âñåãî, êîëè÷åñòâîì ÄÍÊ, ñòåïåíüþ óïàêîâêè ÄÍÊ èëè
äåêîìïàêòèçàöèåé. Ðåãóëÿöèÿ êîìïàêòèçàöèè
ÄÍÊ â ïðåäåëàõ õðîìàòèíà îñóùåñòâëÿåòñÿ
ôàêòîðàìè òðàíñêðèïöèè, à ñàì ìåõàíèçì ýâîëþöèîííî çàêîíñåðâèðîâàí [28, 11, 14]. Ñîãëàñíî ãèïîòåçå Øàðñêîãî î ñòðàòåãèè ýêîíîìíîãî ìåòàáîëèçìà, óâåëè÷åíèå ðàçìåðà ãåíîìà ó
àìôèáèé, â òîì ÷èñëå ÷åðåç ïðîöåññ ïîëèïëîèäèçàöèè, ïðèâîäèò ê ïîíèæåíèþ ñêîðîñòè ìåòàáîëèçìà íà êëåòî÷íîì è îðãàíèçìåííîì
óðîâíÿõ. Áîëüøèå ãåíîìû ïîääåðæèâàþò áîÐèñóíîê 3. Àìôèáèè Rana terrestris.
Êîíòðîëü. Îêðàñêà ïî Ôåëüãåíó. Óâåëè÷åíèå 10õ90.
ëåå ðàçíîîáðàçíûå ìåòàáîëè÷åñêèå ïóòè è ìîðÃåòåðîãåííîñòü òîïîãðàôèè õðîìàòèíà ãåïàòîöèòîâ
ôîëîãè÷åñêèå ñòðóêòóðû, íåæåëè ìàëåíüêèå,
÷òî îáåñïå÷èâàåò àìôèáèÿì
TI
îäèíàêîâî óñïåøíîå ñóùå130
ñòâîâàíèå êàê â âîäíîé, òàê
120
è â âîçäóøíîé ñðåäå îáèòà110
100
íèÿ. Ñëåäîâàòåëüíî, ê óâåëè90
÷åíèþ ðàçìåðà ãåíîìà ïðè80
âîäèò åñòåñòâåííûé îòáîð â
70
60
áîãàòûõ èíôîðìàöèåé îêðó50
æàþùèõ ñðåäàõ, à ïðîãðåñ40
30
ñèâíî íàêîïëåííàÿ èíôîð20
ìàöèÿ çàêðåïëÿåòñÿ íàñëåä10
ñòâåííî, îáåñïå÷èâàÿ àäàïòàExpected
0
Normal
1,5
2,0
2,5
3,0
3,5
4,0
4,5
5,0
5,5
6,0
6,5
7,0
7,5
8,0
öèþ ê âîäíî-âîçäóøíîé ñðåUpper Boundaries (x <= boundary)
äå îáèòàíèÿ. Âûÿâëåííûé
Ðèñóíîê 4. Àìôèáèè Rana terrestris. Ïåðåãðåâàíèå.
áîëåå âûñîêèé óðîâåíü êîì- Ãèñòîãðàììà ðàñïðåäåëåíèÿ ïîïóëÿöèè ãåïàòîöèòîâ ïî êëåòî÷íîìó öèêëó.
TI – èíòåãðàëüíàÿ îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü õðîìàòèíà
ïàêòèçàöèè ãåòåðîõðîìàòèíà ó àìôèáèé, êîòîðûé íà
TI vs. T_SR
33,4% ïðåâûøàåò óðîâåíü
T_SR = ,07753 + ,01816 * TI
êîìïàêòèçàöèè ýóõðîìàòèCorrelation: r = ,41960
íà, ïî âñåé âèäèìîñòè, îáóñ0,32
ëîâëåí òåì, ÷òî íàëè÷èå «èç0,28
áûòî÷íîñòè» ÄÍÊ ýóêàðèîò,
0,24
ïî êðàéíåé ìåðå, ÷àñòè÷íî,
0,20
îïðåäåëÿåòñÿ ïîòðåáíîñòÿìè
0,16
â êîìïàêòèçàöèè ñàìîé ñåáÿ
[35]. Èçâåñòíî, ÷òî ñóùåñòâó0,12
åò çàâèñèìîñòü ìåæäó ðàçìå0,08
ðîì ãåíîìà è óñòîé÷èâîñòüþ
Regression
0,04
95% confid.
ðÿäà âèäîâ çåìíîâîäíûõ ê
1,5
2,5
3,5
4,5
5,5
6,5
7,5
8,5
TI
ãèïåðòåðìèè è ãèïîêñèè.
Ðèñóíîê 5. Àìôèáèè Rana terrestris. Ïåðåãðåâàíèå. Äâóìåðíîå
Ïîëèïëîèäèÿ àññîöèèðîâàðàñïðåäåëåíèå ÿäåð ãåïàòîöèòîâ ïî TI – èíòåãðàëüíîé îïòè÷åñêîé
íà ñ îêñèäàòèâíûì ñòðåññîì
ïëîòíîñòè ÄÍÊ è T_RS – ñðåäíåé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ÄÍÊ.
Ìíîãîôàêòîðíûé äèñïåðñíûé àíàëèç MANOV
è ýíåðãåòè÷åñêèì ãîëîäàíèВЕСТНИК ОГУ №6(88)/июнь`2008
#
Естественные науки
åì è ÿâëÿåòñÿ ýâîëþöèîííî ñôîðìèðîâàííûì
ìåõàíèçìîì çàùèòû êëåòîê îò ïîâðåæäåíèÿ.
 ñâÿçè, ñ ÷åì âûÿâëåííîå íàìè ñíèæåíèå êîëè÷åñòâà ãåïàòîöèòîâ â S-ñòàäèè êëåòî÷íîãî
öèêëà ïîñëå âîçäåéñòâèÿ ãèïåðòåðìèè íîñèò
àäàïòèâíûõ õàðàêòåð è ñîãëàñóåòñÿ ñ ñèñòåìîé
òåðìîðåãóëÿöèè àìôèáèé è ýêîëîãè÷åñêîé ñïåöèàëèçàöèåé. Ò.ê. òåìïåðàòóðû, íèæå 50°Ñ, ÿâ-
Ðèñóíîê 6. Àìôèáèè Rana terrestris. Ïåðåãðåâàíèå.
Îêðàñêà ïî Ôåëüãåíó. Óâåëè÷åíèå 10õ90. Ïèêíîç.
Ðàçâèòèå êîìïàêòèçàöèè õðîìàòèíà
Ðèñóíîê 7. Àìôèáèè Rana terrestris. Ïåðåãðåâàíèå.
Îêðàñêà (À, Â) Õ¸õñò 33342 (àïîïòè÷åñêèé ôåíîòèï),
ïèêíîç è ôðàãìåíòàöèÿ ÿäðà ïðè àïîïòîçå,
àïîïòîçíûå òåëà. (Ñ) ïðîïèäèóì éîäèä
(íåêðîòè÷åñêèé ôåíîòèï). Óâåëè÷åíèå îê10õîá40
$
ВЕСТНИК ОГУ №6(88)/июнь`2008
ëÿþòñÿ ïåðìåññèâíûìè òî ÄÍÊ-ïîâðåæäàþùåå äåéñòâèå îïîñðåäóåòñÿ ðàçâèâàþùåéñÿ òêàíåâîé ãèïîêñèåé, óâåëè÷åíèåì ïðîäóêöèè
ÀÔÊ, íóêëåàçàìè, ôåðìåíòàìè ëèçîñîì, ìåìáðàíà êîòîðûõ ïðè ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðå
ìîæåò ñòàòü ïðîíèöàåìîé, à òàê æå êñåíîáèîòèêàìè, êîòîðûå âûçûâàþò ñäâèã ðàâíîâåñèÿ
â ñèñòåìå ïðîîêñèäàíòû/àíòèîêñèäàíòû, ñ
äàëüíåéøèì ðàçâèòèåì îêñèäàòèâíîãî ñòðåññà [1]. Âûÿâëåííîå íàìè óâåëè÷åíèå àêòèâíîñòè êàñïàçû 3, àêòèâíîñòü êîòîðîé ñòàëà ïî÷òè
ñèíîíèìîì êëåòî÷íîé ãèáåëè, îòðàæàåò ïðîöåññ óâåëè÷åíèÿ ãèáåëè ãåïàòîöèòîâ. Åå ñóáñòðàòàìè ÿâëÿþòñÿ áåëêè öèòîñêåëåòà, ôåðìåíòû ðåïàðàöèè ÄÍÊ, ðåãóëÿòîðû êëåòî÷íîãî
öèêëà ÿäðà, ïðîòåèíêèíàçû, ñïåöèôè÷åñêèé
èíãèáèòîð CAD, êîòîðûé âûçûâàåò êîíäåíñàöèþ è ôðàãìåíòàöèþ õðîìàòèíà êëåòêè [24,
19]. Áëåááèíã íå ïðîèñõîäèò â êëåòêàõ, â êîòîðûõ íå óâåëè÷èâàåòñÿ àêòèâíîñòü êàñïàçû 3.
Ïðîêàñïàçà-3 îáíàðóæèâàåòñÿ êàê â ìåæìåìáðàííîì îáúåìå ìèòîõîíäðèé, òàê è â öèòîïëàçìå. Åå âûõîä èç íàáóõøèõ ìèòîõîíäðèé â
ðåçóëüòàòå îïîñðåäîâàí ïîâðåæäåíèåì ìåìáðàí, óâåëè÷åíèåì ïðîíèöàåìîñòè âíóòðåííåé
ìåìáðàíû ìèòîõîíäðèé âñëåäñòâèå àêòèâàöèè
ÏÎË, èñòîùåíèåì âîññòàíîâëåííîãî ãëóòàòèîíà, îáðàçîâàíèåì àêòèâíûõ ôîðì êèñëîðîäà,
ðàçîáùåíèåì îêèñëèòåëüíîãî ôîñôîðèëèðîâàíèÿ, óâåëè÷åíèåì ñîäåðæàíèÿ èîíîâ Ca2+ â öèòîïëàçìå [5]. Òåïëîâîé øîê ñòàáèëèçèðóåò ïðèñîåäèíåíèå ê ìàòðèêñó 5'-êîíöà MAR– ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ÄÍÊ â òðàíñêðèïöèîííî-àêòèâíîì ó÷àñòêå ãåíîâ, âñëåäñòâèå ÷åãî àêòèâíàÿ ÷àñòü ãåíîìà ïîëó÷àåò äîïîëíèòåëüíóþ
êîìïàêòèçàöèþ ïîñëå ãèïåðòåðìèè, ïðèîáðåòàÿ ÷åðòû êîëëàïñèðîâàííîãî õðîìàòèíà. Ïîäàâëåíèå ðåïëèêàöèè è òðàíñêðèïöèè, èíèöèèðóþòñÿ èçìåíåíèÿ àññîöèàöèè ÄÍÊ ñ ÿäåðíûì ìàòðèêñîì â òðàíñêðèïöèîííîàêòèâíûõ
ãåíàõ, íàðóøàþòñÿ òåðìîäèíàìè÷åñêèå ñâîéñòâà ÄÍÊ ïîä äåéñòâèåì ãèïåðòåðìèè, îïðåäåëÿÿ ðàçâèòèå ìåòàáîëè÷åñêîé äåïðåññèè â óñëîâèÿõ òåìïåðàòóðíîãî ñòðåññà, êîòîðàÿ íîñèò
çàùèòíûé õàðàêòåð è îáåñïå÷èâàåò âûæèâàåìîñòü ãåïàòîöèòîâ â ðàííåé ïåðèîä êîìïåíñàöèè ïîñëå âîçäåéñòâèÿ ãèïåðòåðìèè. Ò.ê. îïðåäåëÿåò ñíèæåíèå ïðîäóêöèþ ÀÔÊ è ìèíèìèçèðóåò ïîâðåæäàþùåå èõ äåéñòâèå íà áåëêè, ÄÍÊ [20].  ñâÿçè, ñ ÷åì ïîñëå âîçäåéñòâèÿ
Антонова Е.И.
ãèïåðòåðìèè âûÿâëåí ðèñóíîê õðîìàòèíà, êîòîðûé îòðàæàåò óìåíüøåíèå ìåëêîçåðíèñòîñòè ñòðóêòóðû õðîìàòèíà è óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà êðóïíûõ ôðàãìåíòîâ õðîìàòèíà. Äîïîëíèòåëüíàÿ ãåòåðîõðîìàòèçàöèè îïðåäåëÿåò
ñíèæåíèè â ãåïàòîöèòàõ Rana terrestris ïðîëèôåðàòèâíûõ è ìåòàáîëè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, è
óâåëè÷åíèå äîëè ãèïîäèïëîèäíûõ ãåïàòîöèòîâ. Óâåëè÷åíèå, êîòîðûõ â ñâîþ î÷åðåäü ÿâëÿåòñÿ ïóñêîâûì ìåõàíèçìîì äëÿ àêòèâàöèè
ìåæòêàíåâûõ ñòðîìàëüíî-ïàðåíõèìàòîçíûõ
èíäóêöèé â ïå÷åíè, êîòîðûå èíèöèèðóþò ïðîöåññ ðåãåíåðàöèè ïàðåíõèìû [2, 31].
Òàêèì îáðàçîì, ýôôåêòû òåìïåðàòóðû
ìîãóò ðàññìàòðèâàòüñÿ êàê ïðèìåðû òåïëîâîé ôåíîòèïè÷åñêîé ïëàñòè÷íîñòè, êîíòðîëèðóåìûå ãåíîòèïîì [7, 8, 18]. Îñîáåííîñòè â êîëè÷åñòâåííîì è ïðîñòðàíñòâåííî-òîïîãðàôè÷åñêèõ ïîêàçàòåëÿõ ÄÍÊ îïðåäåëÿþò ôîðìèðîâàíèå àäàïòèâíûõ ìîäèôèêàöèé ìåòàáîëè÷åñêîãî ôóíêöèîíèðîâàíèÿ
Динамика показателей клеточного цикла...
ãåïàòîöèòîâ Rana terrestris, êîòîðûå ïðîÿâëÿþòñÿ â ðàçâèòèè êîìïåíñàòîðíî-ïðèñïîñîáèòåëüíîé ìåòàáîëè÷åñêîé äåïðåññèè –
óìåíüøåíèå êîëè÷åñòâà ãåïàòîöèòîâ â S-è
G2-Ì-ñòàäèè êëåòî÷íîãî öèêëà, êàê çàùèòíûõ ìåõàíèçìîâ îò ïîâðåæäàþùåãî äåéñòâèÿ ðàçâèâàþùèõñÿ äåñòðóêòèâíûõ áèîõèìè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, èíäóöèðóåìûå ãèïåðòåðìèåé. Óâåëè÷åíèå æå äîëè ïîãèáøèõ ãåïàòîöèòîâ õàðàêòåðèçóåòñÿ ïðåâûøåíèåì
äîëè ãåïàòîöèòîâ ñ íåêðîòè÷åñêèì ôåíîòèïîì íàä êîëè÷åñòâîì ïîãèáøèõ, ãåïàòîöèòîâ êîòîðûå, ïðîÿâëÿþò àïîïòè÷åñêóþ ìîðôîëîãèþ, íà ôîíå óâåëè÷åíèÿ àêòèâíîñòè
êàñïàçû 3. Íî óâåëè÷åíèå ÷èñëà ïîãèáøèõ
ãåïàòîöèòîâ ñëåäóåò ðàññìàòðèâàòü ñ ïîçèöèè äàëüíåéøåãî çàïóñêà êàñêàäà ñòðîìàëüíî-ïàðåíõèìàòîçíûõ êîììóíèêàöèé â ïå÷åíè, êîòîðûå îáåñïå÷èâàþò ìåõàíèçìû âûæèâàíèÿ è ðåïàðàöèè ãåïàòîöèòîâ Rana
terrestris â óñëîâèÿõ ãèïåðòåðìèè [30, 2, 25].
Ñïèñîê èñïîëüçîâàííîé ëèòåðàòóðû:
1. Ãàíóñîâà Ã.Â. Èçó÷åíî âëèÿíèå CoCl2 íà àêòèâíîñòü NADP-çàâèñèìûõ äåãèäðîãåíàç è ñîäåðæàíèå ìèêðîñîìàëüíûõ
öèòîõðîìîâ Ð-450 è b5 â ïå÷åíè êðûñ ðàçíîãî âîçðàñòà // ³ñíèê Õàðê³âñüêîãî íàö³îíàëüíîãî óí³âåðñèòåòó ³ìåí³ Â.Í.Êàðàç³íà Ñåð³ÿ: á³îëîã³ÿ. 2005. 1-2. ¹709. 2005ð.
2. Êèÿñîâ À. Ï., Ãóìåðîâà À. À. Êëåòêè Èòî â îíîãåíåçå è ðåãåíåðàöèè ïå÷åíè. Öèòîëîãèÿ. 2002. 44 (4): 342-349.
3. Êîçèíåö Ã.È., Ïîãîðåëîâ Â.Ì., Øìàðîâ Ä.À., Áîåâ Ñ.Ô., Ñàçîíîâ Â.Â. Êëåòêè êðîâè. Ñîâðåìåííûå òåõíîëîãèè èõ
àíàëèçà. Ì.: Òðèàäà-Ôàðì, 2002.-171ñ.
4. Êîíñòàíòèíîâ À.Ñ., Â.Â. Çäàíîâè÷, Â.ß. Ïóøêàðü Ýíåðãîáþäæåò êàðïà Cyprinus Carpio è çîëîòîé ðûáêè Carassius
Auratus â îïòèìàëüíûõ ñòàöèîíàðíûõ è ïåðåìåííûõ òåðìîðåæèìàõ // Âåñòí. Ìîñê. Óí-òà. Ñåð. 16. Áèîëîãèÿ. 2005. ¹
1. Ñ. 39-44.
5. Ïðîñêóðÿêîâ Ñ.ß. Íåêðîç – àêòèâíàÿ ôîðìà ïðîãðàììèðóåìîé êëåòî÷íîé ãèáåëè // Áèîõèìèÿ. 2002. Ò.67. Âûï 4. Ñ.
468-487.
6. Ðåáðîâ Î.Þ. Ñòàòèñòè÷åñêèé àíàëèç ìåäèöèíñêèõ äàííûõ. Ïðèìåíåíèå ïàêåòà ïðèêëàäíûõ ïðîãðàìì STATISTICA.
Ì.: ÌåäèàÑôåðà. 2002. 305c.
7. Angilletta M. J., Wilson R. S., Navas C. A., James R. S. Tradeoffs and the evolution of thermal reaction norms. Trends Ecol.
Evol. 2003.18:234-240.
8. Calboli F. C., Gilchrist G. W., Partridge L. Different cell size and cell number contribution in two newly established and one
ancient body size cline of Drosophila subobscura. Evolution. 2003. 57:566-573.
9. Chang Y.-M., Hou P.-C. L. Thermal Acclimation of Metabolic Rate May Be Seasonally Dependent in the Subtropical Anuran
Latouche’s Frog (Rana latouchii, Boulenger). Physiological and Biochemical Zoology. 2005. 78(6):947-955.
10. Danial N. N., Korsmeyer S.J. Cell death: critical control points. Cell. 2004. 116:205–219.
11. Dion M. F., Altschuler S. J., Wu L. F., Rando, O. J. Genomic characterization reveals a simple histone H4 acetylation code.
Proc. Natl. Acad. Sci. 2005. 102, 5501-5506.
12. Dundr M., Misteli T. Functional architecture in the cell nucleus. Biochem. J. 2001. 356, 297-310.
13. Felsenfeld, G., Groudine, M. Controlling the double helix. Nature. 2003. 421: 448-453.
14. Frith M. C., Ponjavic J., Fredman D., Kai1 C., Kawai1 J., Carninci P., Hayshizaki Y., Sandelin A. Evolutionary turnover of
mammalian transcription start sites Genome Research. 2006. 16:713-722.
15. Harada J. N., Bower K. E., Orth A. P., Callaway S., Nelson C. G., Laris C., Hogenesch J. B., Vogt P. K., Chanda S. K.
Identification of novel mammalian growth regulatory factors by genome-scale quantitative image analysis. Genome Research.
2005. 15:1136-1144.
16. Hase J., Stein S., Vincent S., Molloy K.R., Kreth G., Cremer C., Bult C.J., O’Brien T.P. Folding and organization of a
contiguous chromosome region according to the gene distribution pattern in primary genomic sequence. JCB. 2006. V.174.
N.1. 27-38.
17. James E. R., Green, D. R. Manipulation of apoptosis in the hostparasite interaction. Trends Parasitol. 2004. 20,280 -287.
18. Kingsolver J. G., Izem R., Ragland G. J. Plasticity of Size and Growth in Fluctuating Thermal Environments: Comparing
Reaction Norms and Performance Curves. Integrative and Comparative Biology. 2004. 44(6):450-460.
19. Kivinen K, Kallajoki M, Taimen P. Caspase-3 is required in the apoptotic disintegration of the nuclear matrix Exp Cell Res.
2005. 15;311(1):62-73.
20. Koehler R. T., Peyret N. Thermodynamic properties of DNA sequences: characteristic values for the human genome
Bioinformatics. 2005. 21(16):3333-3339.
ВЕСТНИК ОГУ №6(88)/июнь`2008
%
Естественные науки
21. Krishan A, Dandekar P, Nathan N, Hamelik R, Miller C, Shaw J. DNA index, genome size, and electronic nuclear volume
of vertebrates from the Miami Metro Zoo Cytometry. 2005. 65(1):26-34.
22. Liu C.-C., Chien C.-H., Lin M.-T. Glucocorticoids reduce interleukin-1? concentration and result in neuroprotective effects
in rat heatstroke, J. Physiol. 2000. 527. pp. 333–343.
23. McKechnie A.E., Wolf B.O. Partitioning of evaporative water loss in white-winged doves: plasticity in response to shortterm thermal acclimation. Exp Biol. 2004. 207(Pt 2):203-10.
24. McLaughlin B. et al. Caspase 3 activation is essential for neuroprotection in preconditioning. Proc. Natl Acad. Sci. USA.
2003. 100, 715-720.
25. Milosevic N, Maier P. Lead stimulates intercellular signalling between hepatocytes and Kupffer cells. Eur J Pharmacol. 2000.
11;401(3):317-28.
26. Mizushima N. Methods to supervise autophagy Int J Biochem Alveole Biol. 2004; 36 (12):2491-502.
27. O’Brien, T. P., Bult C. J., Cremer C., Grunze M., Knowles B. B., Langowski J., McNally J., Pederson T., Politz J. C., Pombo
A., Schmahl G., Spatz J. P., van Driel R. Genome function and nuclear architecture: from gene expression to nanoscience.
Genome Res. 2003. 13:1029-1041.
28. Ono T., Fang Y., Spector D. L., Hirano T. Spatial and temporal regulation of condensins I and II in mitotic chromosome
assembly in human cells. Mol. Biol. Cell. 2004. 15: 3296–3308.
29. Patel T., Gores G. Apoptosis and hepatobiliary disease. Hepatology. 1995. Vol. 21. P. 1725-1741.
30. Prosser C. C., Yen R. D., Wu J. Molecular therapy for hepatic injury and fibrosis: where are we? World J Gastroenterol.
2006. 28;12(4):509-15.
31. Schlaf G., Schmitz M., Heine I., Demberg T., Schieferdecker H. L., Gotze O. Upregulation of fibronectin but not of entactin,
collagen IV and smooth muscle actin by anaphylatoxin C5a in rat hepatic stellate cells. Histol Histopathol. 2004. 19 (4): 1165-1174.
32. Somero G.N. Thermal Physiology and Vertical Zonation of Intertidal Animals. Optima, Limits, and Costs of Living Integrative
and Comparative Biology. 2002. 42(4):780-789.
33. Tsujimoto Y, Shimizu S. Other mean{method} to die: autophagic has programmed mors of an alveole Mors of the Alveole
Differs. 2005; 12 Suppl 2:1528-34.
34. Vinogradov A.E. Paradox of the dimension of a genome and a problem of superfluous DNA. A cytology 1999. 41: 5-13.
35. Vinogradov A.E., A spiral of DNA: importance of to be the rich collector of DUST. Nucleic acids Res. 2003. 31: 1838-1844.
Ñòàòüÿ ðåêîìåíäîâàíà ê ïóáëèêàöèè 21.12.07
&
ВЕСТНИК ОГУ №6(88)/июнь`2008