Амплификация нуклеиновых кислот – самая высокая

advertisement
Амплификация неклеиновых кислот
Система AmpliGrid
Анализ в 1 мкл
Амплификация нуклеиновых кислот –
самая высокая чувствительность уже
всего с ОДНОЙ клеткой
2
НОВЫЕ СТАНДАРТЫ В ПЦР
Искусство уменьшения объемов биологических реакций
До сих пор исследователи, работающие в области молекулярной биологии
одиночных клеток, при проведении амплификационных анализов полагаются
на микропланшеты или пробирки. Вследствие этого, большие «мертвые»
объемы, абсорбция матрицы и отсутствие оптического контроля качества
приводят к значительному ухудшению достоверности и низкой
воспроизводимости результатов. Кроме того, средняя чувствительность
систем на основе микропланшетов обычно намного ниже ожиданий
пользователей. Инновационная система AmpliGrid компании Advalytix
позволяет достичь надежного постоянного уровня чувствительности,
эффективности и воспроизводимости результатов в использовании методик
амплификации с одиночными клетками и ультрамалыми объемами. В
результате обеспечивается быстрое и удобное выполнение поставленных
задач.
Компания Advalytix представляет платформу для амплификации
высшего
качества,
в
основе
которой
лежит
химически
структурированный слайд для микроскопии. Система AmpliGrid является
ключевым элементом, позволяющим получить безупречные результаты, в
особенности при работе с одиночными клетками, а также практически с
любым другим изучаемым материалом, например при окрашивании
очищенных нуклеиновых кислот для судебно-медицинских исследований.
Двумерная конструкция AmpliGrid облегчает нанесение одиночных клеток на
поверхность
слайда,
например
при
помощи
активированной
флуоресценцией сортировки клеток (FACS), микроманипулятора или
микродиссекции, что делает возможными разнообразные варианты работы с
одиночными клетками, а также дает полноценный доступ к «одноклеточному
геному».
При
использовании
комбинации
системы
AmpliGrid
с
термоциклером AmpliSpeed снижение времени реакции амплификации
достигает 50 % по сравнению с альтернативными методиками с
использованием микропланшетов. В дополнение к ручной обработке
образцов, платформа AmpliGrid совместима с любыми типами
автоматизированных систем работы с жидкими материалами, что делает
данную платформу наиболее предпочтительным вариантом для применения
при высокопроизводительном скрининге (HTS, «high throughput screening»).
Своей системой AmpliGrid/AmpliSpeed компания Advalytix создает новый
стандарт для исследований малых объемов и одиночных клеток. Если мы
говорим одиночная клетка, мы имеем в виду всего лишь ОДНУ
единственную клетку.
3
НЕ СОДЕРЖАЩИЙ ДНК МИКРОЛИТРОВЫЙ СЛАЙД ДЛЯ
ПРОВЕДЕНИЯ РЕАКЦИИ
Вы устали от переноса крохотных объемов пипеткой на
микропланшеты? Новый слайд AmpliGrid может выполнить точные
манипуляции за вас!
Перенос малых объемов пипеткой в
микропланшеты часто приводит к появлению капель на слайдах или на
краях лунок. Компания Advalytix использует усовершенствованную
систему
полупроводниковой литографии для структурирования
поверхности слайдов AmpliGrid с целью обеспечения четкого
позиционирования ровно одного микролитра (1 мкл) в каждую из 48
дискретных точек реакции. Благодаря гидрофильному характеру точек
реакции все водные реагенты самостоятельно центрируются в
идеальном положении, даже если они не очень аккуратно нанесены
пипеткой, что делает обработку образцов простой и точной.
AmpliGrid AG480F
Теперь объемы реакции 1 мкл могут стать для вас «стандартными»;
снижение потребления реагента и ферментов может достигать 25 раз.
Кроме
того,
снижение
объема
реакции
также
повышает
чувствительность и эффективность реакции в 10 раз, одновременно
снижая время, требуемое для проведения реакции.
Ошибки работы с пипеткой уйдут в прошлое, поскольку плоская
поверхность обеспечивает точный оптический контроль нанесения
образца. Благодаря высококачественной двумерной поверхности в
сочетании с системой AmpliGrid можно использовать любой вид
оптического контроля.
Слайды AmpliGrid удобны как для проведения большого количества
исследований, так и для небольшого количества образцов при ручной
обработке, поскольку эту технологию легко приспособить для
применения в сочетании сAmpliGrid
большинством
стандартных автоматических
Specifications
систем работы с жидкими материалами, предназначенных для
применения при высокопроизводительном скрининге (HTS).
Для того, чтобы использовать весь потенциал системы AmpliGrid,
компания Advalytix предлагает оптимизированные наборы для
амплификации и обратной транскрипции. Эти ориентированные на
удобство пользователя наборы специально разработаны для
усовершенствованной геометрии реакций в малых объемах на слайде
AmpliGrid.
AMPLISPEED ASC100D/200D/400D4
Передовая технология управлениятемпературой на предметных стеклах
Amplispeed- ультракомпактный прибор специально разработанный для достижения
высокоскоростных, воспроизводимых циклических изменений температуры на
стеклянных слайдах. Оптимальные температурные параметры в ячейках слайдов
гарантируются превосходной теплопередачей, основанной на использовании
высоко-планарной кремний - органической подложки. Это уникальная система
воспроизводит чрезвычайно гомогенные температуры на стекле и эффективное
0
нагревание и охлаждение в лунке до 3 С в секунду. Это может быть
классифицировано как ВЫСОКОСКОРОСТНАЯ технология.
AMPLISPEED
5
Термальный цикл – следующая ступень в
амплификации
Новаторский
и
интуитивный
контактный
графический
пользовательский дисплей
доступен для
программирования
непосредственно с дисплея или с использованием компьютера.
Система может быть интегрирована с Вашим ежедневным
технологическим процессом путем использования Ethernet: вы можете
параллельно работать с компьютером
или наслаждаться чашечкой
кофе, система пошлет Вам сообщение, что цикл амплификации на
приборе закончен. Индивидуальные программы могут быть сохранены
или перенесены с помощью стандартного SD носителя, обеспечивая
удобство в пользовании и хранении пользовательских рабочих
программ.
AmpliSpeed slide
Передовая технология обеспечивает простоту и
эффективность пользования
С системой Amplispeed/AmpliGrid фирма Advalytix определила новый
стандарт для молекулярногенетических исследований на одной
клетке и ПЦР диагностике в различных областях медицины.
В приборе доступны 1,2,3 и 4 модуля для слайдов, с независимым
температурным контролем.
Integration in liquid handling
При использовании роботизированной системы пробоподготовки к
прибору могут быть легко добавлены дополнительные термоблоки до
20 штук. Еще одной особенностью прибора является его бесшумность
из-за отсутствия охлаждающих вентиляторов для элементов Пельтъе.
Для достижения максимальной точности во время амплификационного
процесса
возможно применение устройства для температурной
калибровки в лунке слайда, которое может быть интегрировано с
Amplispeed.
Graphical user
A
A
Применение
B
Генетическое типирование единичных клеток
Генетическое типирование человеческих ДНК
является
развивающийся
областью
молекулярной
биологии.
Использование наборов для основывающихся на определении
коротких тандемных повторах ( STR) может быть использовано в
онкологии, для идентификации циркулирующих опухолевых клеток
и для идентификации
личности. Использую технологию
амплификации на одной клетке возможно значительно увеличить
чувствительность и специфичность определения изучаемых
последовательностей ДНК.
C
Определение мутаций и секвенирование
Использование технологии ПЦР на одной клетке можно
значительно расширить область применения ее в таких областях
как
научные исследования в области фундаментальной
молекулярной биологии клетки, так и в практических областях
таких
как
иммунология,
популяционная
генетика,
предимплантационная диагностика, пренатальная диагностика,
онкологическая диагностика, типирование стволовых клеток. С
Amplispeed амплификация и анализ гена ( секвенирование,
единичные SNP) могут быть интегрированы в одном
технологическом процессе. Реакция амплификации проходит
точно в месте осаждения клетки. Все шаги в процессе подготовки
и амплификации исключают риск контаминации и получения
артефактов.
D
Анализ вариации числа хромосом
Анализ числа хромосом, их отсутствия или наличия
дополнительных хромосом, также
и их фрагментов, играет
огромную роль в медицинской диагностике особенно в
предимплантационной и пренатальной диагностике. Применение
Amplispeed в данном случае значительно облегчает диагностику и
делает ее незаменимой из-за одно- временного анализа всего
хромосомного набора на одной клетке. Advalytix разработал
протоколы позволяющие значительно уменьшить сложность
полногеномной амплификации ДНК. Применение этой технологии
позволяет на единичных клетках проводить детекцию числа
хромосом и хроматид очень аккуратно и точно.
Генетическое типирование
еденичных клеток.
B
Определение мутаций и секвенеирование.
C
Анализ вариации числа хромосом .
D
Комбинированный
иммунофенотипирующий и
экспрессионный анализ на
еденичных клетках
.
Комбинированный
иммунофенотипирующий
и
экспрессионный анализ на еденичных клетках
Анализ экспрессии генов по определению уровня РНК с помощью
RT-PCR одна из последних продвинутых методик для анализа
функции генов. С функциональной точки зрения использование
проточной цитометрии и сортинга для анализа экспрессии генов
является очень интересным. Действительно фенотипический
отбор клеток по флуоресцентному маркеру с последующим
анализом экспрессии генов отражающих функцию клеток несущих
этот маркер имеет ключевое значение для понимания функции
клеток. Анализ на одной клетке – крупное достижение для новой
области науки-« Cellomics». Advalytix единственная платформа
позволяющая делать подобные исследования и может
интегрирована с любим сортировщиком клеток.
Download