Особенности наборов серии «РеалБест» для диагностики

 Особенности наборов серии «РеалБест» для диагностики
инфекций методом ПЦР с детекцией в реальном времени.
Основные преимущества наборов «РеалБест»
1.
2.
3.
4.
5.
Высокая аналитическая чувствительность, для ряда инфекций на порядок
превышающая чувствительность тест-систем других российских производителей.
Высокая стабильность качества проводимых исследований, максимально
приближенная к стабильности автоматизированных систем.
Уникальная устойчивость при хранении, позволяющая экономить на списании
некондиционных наборов и перепостановке «неудачных» исследований.
Уникальная методика проведения количественных исследований, которая
обеспечивает экономию, достигающую 50% в денежном выражении.
Единый для всех инфекций протокол амлификации, позволяющий увеличить
скорость выдачи результатов анализа, а также уменьшить износ реал-тайм
амплификатора.
Свойства, которые делают наборы «РеалБест» уникальными,
непохожими на существующие аналоги.
Чувствительность наборов «РеалБест» для ряда инфекций на порядок
превышает
чувствительность
тест-систем
других
российских
производителей и сравнима с зарубежными аналогами.
Основным ориентиром сотрудников ЗАО «Вектор-Бест» при разработке наборов
является достижение максимальной чувствительности и воспроизводимости. Эти
параметры особенно важны при диагностике вирусов гепатита В и С, а также вируса
иммунодефицита человека. Чувствительность наших наборов для диагностики данных
возбудителей является максимальной среди ассортимента российских производителей и
сравнима с зарубежными аналогами. Так, например, чувствительность тест-системы на
вирус гепатита В составляет 5 МЕ/мл, гепатита С – 15 МЕ/мл, а ВИЧ – 20 МЕ/мл. Это на
порядок выше, чем у существующих сейчас на рынке тест-систем российского
производства.
Использование готовой
лиофилизированной
реакционной
смеси
обеспечивает высокую стабильность качества проводимых исследований,
максимально приближенную к стабильности автоматизированных систем.
Использование готовой реакционной смеси (ГРС), содержащей ВСЕ необходимые
компоненты, позволяет на этапе постановки ПЦР минимизировать влияние человеческого
фактора на результаты анализа. Лиофилизация (высушивание) компонентов ГРС
обеспечивает непревзойденную стабильность при хранении, что исключает влияние на
результаты анализов факторов, связанных с порчей компонентов реакционной смеси. Все
выше перечисленное максимально приближает стабильность качества проводимых
исследований к таковой полностью автоматизированных систем, сохраняя при этом
основное достоинство «ручного» метода – низкую стоимость.
1 Наборы «РеалБест» адаптированы для работы на всех наиболее
распространенных в России приборах реал-тайм ПЦР.
Мы постоянно расширяем линейку диагностируемых инфекций, ориентируясь не
только на актуальность их выявления среди населения, но и на разнообразие
оборудования, доступного для детекции с помощью ПЦР в реальном времени. В
частности, в данный момент для большинства наборов доступен формат детекции с
помощью таких приборов как IQ5, CFX96 («BioRad», США), ДТ-96 («ДНК-технология»,
Россия) и RotorGene («Corbett Research», Австралия). Соответственно Вы можете
выбрать набор в такой комплектации, которая подходит под Ваше оборудование.
Неконкурентный внутренний контрольный образец обеспечивает
надежный контроль эффективности выделения и амплификации.
Проведение анализа совместно с внутренним контрольным образцом позволяет
оценить погрешности, обусловленные как потерями при выделении нуклеиновых кислот,
так и присутствием в пробе ингибиторов. Внутренний контрольный образец,
используемый в наборах «РеалБест», добавляется в пробу на начальной стадии
пробоподготовки и не является конкурентом целевой последовательности на
специфические компоненты реакционной смеси, что повышает его надежность как
контроля эффективности выделения и амплификации.
Качества, которые позволяют экономить время и деньги.
Простота хранения наборов (все компоненты хранятся при 2-8 ОС), а
также устойчивость к несоблюдению условий транспортировки (до 10 дней
при комнатной температуре) позволят вам использовать ВСЕ купленные
реактивы.
Как правило, наборы для проведения ПЦР-анализа являются достаточно
требовательными к условиям их хранения. Часть компонентов необходимо хранить в
замороженном виде, ведь их размораживание может привести к потере
работоспособности части реагентов и весь набор придет в негодность. Другие
компоненты плохо переносят нарушения условий транспортировки. В итоге, время от
времени часть закупаемых лабораторией наборов приходит в уже неработающем
состоянии, часть портится во время хранения. Все это обуславливает увеличение затрат
лаборатории, связанных со списанием реактивов и перепостановкой неудавшихся
анализов.
В наборах серии «РеалБест» все компоненты хранятся при единой температуре (2-8
О
С) и очень устойчивы к нарушениям режима хранения (до 10 дней при комнатной
температуре). К тому же, лиофильно высушенные компоненты реакционной смеси не
меняют своих свойств с течением времени и обладают уникально длинным сроком
хранения – 1 год, поэтому Вам не придется списывать некондиционные наборы или
делать повторные постановки. Вы сможете полноценно использовать все купленные
реактивы, что в свою очередь позволит сэкономить на затратах.
2 Упрощенный и экономичный протокол проведения количественного
анализа позволяет получить экономию до 50% по себестоимости одного
исследования.
При проведении количественных исследований себестоимость одного анализа зависит
не только от стоимости используемой реакционной смеси. Существенный вклад в
себестоимость вносит необходимость ставить образцы калибратора, а также
контрольные образцы. Таким образом, при использовании наборов российских
производителей в одной постановке требуется затратить от 8 до 10 реакционных смесей
только на эти образцы, при этом неважно, сколько исследуемых образцов находится в
постановке, пусть даже один. В результате при небольшом потоке количественных
исследований стоимость анализа сильно возрастает.
Необходимость использовать калибровочные образцы в каждой постановке
обусловлена тем, что компоненты ПЦР смеси хранятся в жидком состоянии и меняют
свои свойства с течением времени (а для ряда наборов еще и требуют предварительного
смешивания). В результате, эффективность ПЦР сильно варьирует в зависимости от
того, как долго хранились реагенты и как они были смешаны (если смесь требует
подготовки). При такой вариабельности использование единой калибровочной кривой для
серии реакций невозможно (реакции могут идти очень по-разному) и приходится строить
такую кривую для КАЖДОЙ реакции, а для этого нужны калибровочные образцы.
Количественные наборы серии «РеалБест» устроены иначе. Благодаря использованию
сухой ГРС эффективность амплификации не зависит от сроков хранения и квалификации
исполнителя, и остается в пределах 100+10% в течение всего срока годности. Это дает
возможность не использовать калибровочные образцы в каждой постановке, и
реакционная смесь помимо исследуемых образцов расходуется только для постановки 4х контролей (3 положительных и 1 отрицательный). Таким образом, стоимость одного
анализа существенно снижается.
Для иллюстрации приведем пример. Допустим, Вам нужно проанализировать 8 проб
при стоимости одной реакционной смеси в 300 рублей. При использовании стандартного
алгоритма вам потребуется 10+8 реакционных смесей, что в денежном выражении будет
5400 рублей, а себестоимость одного анализа составит 5400/8=675 рубля.
При использовании подхода «РеалБест» требуется 4+8 реакционных смесей, и
стоимость одного анализа составит 3600/8=450рублей. То есть, только за счет экономии
на реакционных смесях мы получаем 33% экономии в денежном выражении. И это без
учета затрат на выделение! Если же в одной постановке будет не 8, а 4 анализируемых
образца, то экономия в денежном выражении достигает 43%, а в отдельных случаях
может превышать 50%.
Проведение реакций обратной транскрипции и амплификации ДНК
последовательно в одной пробирке позволяет минимизировать время
анализа и повысить его качество.
Для обнаружения РНК инфекционного агента перед постановкой ПЦР необходимо
провести реакцию обратной транскрипции. В наборах других производителей,
реализующих технологию «горячего старта» для ДНК-полимеразы за счет физического
разделения реакционных смесей («пробирки под парафином»), для этого требуется
3 отдельная реакционная пробирка. Из этой пробирки, после прохождения обратной
транскрипции, часть материала нужно перенести в пробирку с реактивами для
амплификации ДНК. Такой алгоритм увеличивает количество дополнительных
манипуляций и расход лабораторного пластика, а что еще более важно, увеличивает
возможность ошибки, которая может возникнуть на стадии переноса материала из одной
пробирки в другую.
В наборах «РеалБест» технология «горячего старта» реализуется через
ферментативную инактивацию, что позволяет проводить реакции обратной транскрипции
и амплификации ДНК последовательно в одной пробирке на одном амплификаторе. Это в
свою очередь сводит количество дополнительных манипуляций к нулю и повышает
качество и скорость проводимого анализа.
Единый протокол амплификации для всех инфекций позволяет
максимально загружать амплификатор в каждой постановке, что повышает
скорость выдачи результатов анализа и приводит к меньшему износу
прибора и увеличению его срока службы.
Благодаря единому протоколу амплификации, а также объединению в одной пробирке
реакций обратной транскрипции и амплификации ДНК, в одной постановке можно
одновременно выявлять различные, как ДНК так и РНК-содержащие, инфекционные
агенты. Вам не придется делать две постановки вместо одной, только потому, что
протокол амплификации для выявляемых вами инфекций различается. Таким образом, в
одной постановке можно ставить пробы на одновременное определение вирусов гепатита
В и С, ИППП, TORCH и других инфекций.
Использование компьютерной программы «РеалБест Диагностика»,
специально разработанной для нужд КДЛ, позволяет максимально
упростить и ускорить процесс постановки ПЦР и обработки полученных
результатов.
Для амплификаторов производства компании «BioRad» (IQ5, CFX) сотрудники нашей
компании разработали специальную программу – надстройку к собственным программам
данных приборов. Она значительно упрощает постановку ПЦР и ОТ-ПЦР, поскольку
позволяет вводить штрих-коды наборов и контролей с помощью сканера (штрих-коды
всегда содержатся в наших наборах) и легко запускать протокол амплификации, а также
упрощает обсчет результатов при диагностике гепатитов и ВИЧ, выдавая концентрации
выявленных мишеней в МЕ.
4