А.М. Чибиряев "Биологически активные соединения живых

Сравнительная оценка различных
методов исследования гемоглобина в
крови сельскохозяйственных животных
Исполнитель: студентка 3 курса группы ФВМ
Зуева Е.Н.
Руководители: доцент каф. незаразной
патологии В.А. Шумский;
Зав. ветеринарной лабораторией
УНИЦ«Агротехнопарк»
доцент Н.В. Роменская;
Витамины группы В.
10
O COOH
O
HN
H2N
N
N
OH
N
H
N
H
O
O
O
HN
H2N
N
N
N
H
COOH
N
H
OH
O n
n = 3, 7
âèòàì èí Â9 (ÂÑ)
ô î ëèåâàÿ êèñëî òà
Àí òèàí åì è÷åñêèé âèòàì èí , ðî ñòî âî é ô àêòî ð öû ï ëÿò è ì èêðî î ðãàí èçì î â.
O COOH
HN
O H
N
N
H
N
H
OH
O
òåòðàãèäðî ô î ëèåâàÿ êèñëî òà
N
H
частвует
в
синтезе
аминокислот,
пуриновых
и
пиримидиновых
нований, нуклеиновых кислот и др.
медицине В9 применяют для лечения болезней кроветворной системы,
ри злокачественных анемиях и лучевой болезни.
H2N
сновными источниками являются зелёные листья, дрожжи, мясо, печень,
очки и другие продукты. Синтезируется микрофлорой кишечника человека.
уточная А.М.
потребность
около 2 мг. активные соединения живых организмов", 2009
Чибиряев –"Биологически
11
Антивитамины В9.
При лечении некоторых злокачественных опухолей (лейкозов,
лейкемий) для угнетения биосинтеза нуклеиновых оснований
применяют антивитамины
В9 - антагонисты фолиевой кислоты.
Кроме того, эти вещества проявляют иммуностимулирующую,
цитотоксичную, противоартритную активность.
O
NH2
HN
H2N
N
N
N
H
àì èí î ï òåðèí
COOH
N
H
O
OH
O
NH2
HN
H2N
N
N
N
COOH
N
H
OH
O
CH3
àì åòî ï òåðèí (ì åòî òðåêñàò)
А.М. Чибиряев "Биологически активные соединения живых организмов", 2009
Витамины группы В.
O
O
H2N
H2N
O
R
N N
NH2
Co
N N
O
O
O
O
P
O OH
O
HO
H2N
O
Àí òèàí åì è÷í û é âèòàì èí ,
ô àêòî ð êðî âåòâî ðåí èÿ
R = CN - öèàí êî áàëàì èí
Áî ëåçí ü Àääèñî í à - Áèðì åðà ðàçí î âèäí î ñòü ì àëî êðî âèÿ
O
HN
âèòàì èí Â12
R = OH - î êñèêî áàëàì èí
NH2
H2N
12
O
Èñòî ÷í èê: æèâî òí û å òêàí è, áî áî âû å
ðàñòåí èÿ, áàêòåðèè Pseudomonas
denitrificans, ï ðî ï èî í î âî êèñëû å áàêòåðèè
HO OH
N
N
R=
Êî ô åðì åí ò Â12
- êî áàì àì èä
CH2O N
N
N
N
NH2
В медицине: в гематологии - применяют для лечения Pseudomona
хронических
s
анемий и болезней кроветворной системы; в неврологии
- при
полиневритах, рассеянном склерозе, радикулитах; в дерматологии;
для нормализации
липидного обмена.
Потребность
– менее
0.01 мг. 2009
А.М. Чибиряев "Биологически
активные
соединения живых
организмов",
МИКРООРГАНИЗМЫ-ПРОДУЦЕНТЫ ВИТАМИНОВ
ГРУППЫ В: ПРОПИОНОВОКИСЛЫЕ БАКТЕРИИ
Pseudomonas aeruginosa
Существующие методы определения
содержания гемоглобина в крови
•
•
СПОСОБЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
• 1. Колориметрические методы Сюда можно отнести и
первый метод для определения гемоглобина,
предложенный Велькером в 1854 году и
• модифицированный Тальквистом, при котором цвет капли
крови на фильтровальной бумаге сравнивают с серией
цветных бумажных стандартов.
• 2 Методы, основанные на образовании соляно-кислого
гематина.
• 3.Электрохимические методы.
• 4. Газометрические методы .
• 3. Методы, основанные на определении железа в
• гемоглобиновой молекуле.
Метод Сали
• 1.Образование солянокислого гематина
• 2.Разбавление солянокислого гематина и
доведение его цвета до стандарта,
соответствующей определенной концентрации
гемоглобина:
• Существующие в инструкциях варианты:
• А) Дистилированной водой;
• Б) Физиологическим раствором;
• В) 1% раствором соляной кислоты;
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЙ:
ОПРЕДЕЛИТЬ НАИБОЛЕЕ ИНФОРМАТИВНЫЙ ВАРИАНТ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ГЕМОГЛОБИНА ПО САЛИ
• Задачи: 1). Сравнительное изучение эффективности методик
определения содержание гемоглобина в крови с
использованием
• А). Воды;
• Б). Физиологического раствора;
• В). Соляной кислоты;
• 2). Изучить содержание гемоглобина современным
гемиглобинцианидным способом;
• 3). Установить коррелятивную взаимосвязь
гемиглобинцианидного способа с применяемыми в районных
ветеринарных лабораториях вариантами метода Сали
• 4). Подготовить рекомендации по определению содержания
гемоглобина в ветеринарных лабораториях
АЛГОРИТМ ПРОВЕДЕННЫХ
ИССЛЕДОВАНИЙ
• А.Опыт 1. Определение содержания
гемоглобина по методу Сали с
использованием для окраски до стандарта
солянокислого гематина дистиллированной
воды;
• Опыт 2. Определение содержания
гемоглобина по методу Сали с
использованием физиологического
раствора;
• Опыт 3. Определение содержания
гемоглобина по методу Сали с
использованием раствора соляной кислоты;
• Опыт 4. Определение содержания
гемоглобина гемиглобинцианидным
методом;
• Б.Математическая обработка полученных
данных;
• В. Установление коррелятивной взаимосвязи
полученных данных
• Г. Подготовка рекомендации по исследованию
гемоглобина в практических условиях
районных ветеринарно-диагностических
лабораторий;
Результаты сравнительного изучения методов определения
содержания гемоглобина в крови(опыт 1)
Порядковый номер
пробы(№)
ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ МЕТОДИКИ
Метод Сали с
дистиллированной водой
Гемиглобинцианидный метод
1
108
149,2
2
110
143,0
3
107
М
108,3
141,3
∆
3,0
17,6
м
1,36
7,36
P
В опыте меньше,
чем в контроле на
%
r
131,6
0,01
23,31
0,48
Результаты сравнительного изучения методов
определения содержания гемоглобина в крови(опыт 2 )
ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ МЕТОДИКИ
Порядковый
номер пробы(№)
Метод Сали с 0,85%
раствором NaCl
Гемиглобинцианидный
метод
1.
114
149,2
2.
112
143,0
3.
115
131,6
М
113,7
141,3
∆
3
17,6
м
1,26
7,36
P
0,05
В опыте меньше,
чем в контроле на %
R
19,54
0,48
Результаты сравнительного изучения и анализа вариантов и
методов изучения содержания гемоглобина
(Опыт 3)
ИСПОЛЬЗУЕМАЯ МЕТОДИКА
Порядковый номер
пробы(№)
1.
Метод Сали с раствором
соляной кислоты
115
Гемиглобинцианидный
метод
149,2
2.
110
143,0
3.
120
131,6
М
115
141,3
∆
10
17,6
м
4,18
17,36
P
В опыте меньше,
чем в контроле, на
%
r
0,01
18,59
0,64
Итоговый анализ характера коррелятивной
взаимосвязи(коэффициента корреляции) различных
методов определения содержания гемоглобина
• 1-й ОПЫТ - (Н2О) – 0,48 - связь средняя;
• 2-й ОПЫТ - (0,85% раствор NaCl) - 0,48 - связь
средняя;
• 3-й ОПЫТ - (1% раствор НСl) - 0,64 – связь
средняя;
• Резюме: коррелятивная взаимосвязь(коэффициент
корреляции) определяет методику третьего опыта
по исследованию гемоглобина как наиболее
информативную и эффективную в использовании;
• Критерии оценки: R меньше 0,3-связь слабая; R –
0,31-0,69 – связь средняя; R – 0,70-0,99 – связь
сильная;
Рекомендации по определению
содержания гемоглобина в крови
• При определении содержания гемоглобина
в крови сельскохозяйственных животных
методом Сали для разбавления
солянокислого гематина до существующих
стандартов концентраций использовать 1%
раствор соляной кислоты.
•
СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ