Тема: Метаболизм гемоглобина

Тема: Биохимия крови.
Занятию №1.
Учебные и воспитательные цели:
- Общая цель: привить знания о физико-химических свойствах, химическом
составе крови, белках крови, роли кальция в организме.
- Частные цели:
- уметь определять уровень кальция в сыворотке крови.
Входной контроль знаний.
1. Тесты.
1. Устный опрос.
Основные вопросы темы
1.
2.
3.
3.
4.
5.
Что такое кровь и каковы ее
функции?
Физико-химические свойства и
химический состав крови.
Белки крови и их роль в организме.
Гипопротеинемия, гиперпротеинемия,
диспротеинемия, парапротеинемия,
причины возникновения.
Небелковые азотсодержащие
вещества крови. Азотемия, виды,
причины.
Роль кальция в организме. Регуляция
уровня кальция в крови.
Лабораторно-практические работы
Методика определения кальция в
сыворотке крови.
Выходной контроль.
Ситуационные задачи.
Литература.
Биохимия под ред. Е.С. Северина, А.Я. Николаева М.: ГЭОТАРМЕД, 2011г
Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 2004.С.
567-582.
Материал лекций.
Лабораторно-практическая работа.
Методика определения кальция в сыворотке крови.
ПРИНЦИП
МЕТОДА:
органические
соединения-комплексоны
взаимодействуют с кальцием. В качестве комплексона используется трилон Б
(ЭДТА-этилендиаминтетраацетат). Трилоном Б титруют ионы кальция,
предварительно связанные с мурексидом (индикатор). Комплекс кальциймурексид имеет красно-оранжевый цвет.
ХОД РАБОТЫ: свободный от кальция мурексид окрашивается в синефиолетовый цвет.
1. Готовится раствор мурексида для всей группы: в колбу вносят 100мл
воды и 0,8мл 36% р-ра NaOH, перемешивают, затем добавляют смесь
мурексида до появления ярко-фиолетовой окраски.
2. В широкую пробирку наливают 5мл р-ра мурексида и вносят 0,2мл
исследуемой сыворотки (раствор розовеет), титруют (без промедления) р-ром
трилона Б до фиолетовой окраски.
РАСЧЕТ:
1мл 0,1 моль/л р-ра трилона Б эквивалентен 0,12 мг кальция
Х= х 0,12 х 100 мг%
 - количество мл трилона Б, пошедшего на титрование опытной пробы.
Коэффициент перерасчета: 0,2495 на ммоль/л
N = 2,25 – 2,64 ммоль/л
Тема: Метаболизм гемоглобина.
Занятие №1
Учебные и воспитательные цели:
Общая
цель:
привить
знания
о
метаболизме
дифференциальной диагностике различных видов желтух.
Частные цели:
- уметь определять концентрацию гемоглобина в крови.
гемоглобина,
Входной контроль знаний.
1. Тесты.
2. Устный опрос.
Основные вопросы темы
Лабораторно-практические работы
Методика определения концентрации
Основные вопросы темы:
гемоглобина в крови.
1. Строение гемоглобина.
2. Физиологические и аномальные
формы гемоглобина. Серповидноклеточная
анемия, талассемии, гликозилированный
гемолглобин.
3. Синтез гема, гемоглобина.
4. Распад гемоглобина. Прямой
(конъюгированный) и непрямой
(неконъюгированный) билирубин.
5. Гемолитическая желтуха. Причины.
Диагностика.
6. Желтуха новорожденных. Причины.
7. Обтурационная (механическая)
желтуха. Причины. Диагностика.
8. Паренхиматозная (печеночная)
желтуха. Причины. Диагностика.
Выходной контроль.
Ситуационные задачи.
Литература:
Биохимия под ред. Е.С. Северина, А.Я. Николаева М.: ГЭОТАР-
МЕД, 2011г.
Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина,
2004, С. 582-585, 599-607.
Материалы лекций.
Лабораторно-практическая работа.
Методика определения концентрации гемоглобина в крови.
ПРИНЦИП
МЕТОДА: Гемоглобин
при
взаимодействии с
железосинеродистым
калием (красная кровяная соль) окисляется в
метгемоглобин,
образующий
с
ацетонциангидридом окрашенный
гемиглобинцианид, поглощающий свет при длине волны 540 (520-560) нм.
Концентрация образовавшегося гемиглобинцианида пропорциональна
концентрации гемоглобина.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА:
В пробирку вносят 5 мл трансформирующего раствора, затем
добавляют 1 каплю крови и тщательно перемешивают. Инкубируют при
комнатной температуре (+18-+20) в течение 20 минут и затем
фотометрируют при длине волны 540 (520-560) нм.
Концентрация гемоглобина в пробе крови вычисляют по формуле:
Е________
С= Ек*Ск*251, где:
С – концентрация гемоглобина, г/л.
Е – оптическая плотность пробы;
Ек – оптическая
плотность в
калибровочном
растворе
гемиглобинцианида;
Ск –концентрация гемиглобинцианид в калибровочном растворе, г/л.
251 –коэффициент разведения пробы крови
Оптическая плотность калибровочного раствора гемиглобинцианида
Ек=0,54
Ск = 0,602 г/л
Норма гемоглобина у мужчин равна 130-160 г/л , у женщин – 120-145 г/л