Методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний МК Методы диагностики • • • • Прямые методы: микроскопический культуральный биологический Непрямые • 1. Серологический метод • 2. Аллергический метод 1.Микроскопический метод • • • • • Световая микроскопия Темнопольная микроскопия Фазовоконтрастная микроскопия Люминисцентная микроскопия Электронная микроскопия 2. Культуральный метод выделение чистой культуры возбудителя и его идентификация по: • морфологии • культуральным свойствам • ферментативным свойствам • факторам патогенности • антигенному строению • чувствительности к фагам 3. Биологический метод Заражение исследуемым материалом лабораторных животных (кролики, мыши) 4. Серологический метод Цель метода - выявление в сыворотке крови больного специфических к возбудителю Ig (антител) Для этого используют серологические реакции: • • • • • • Реакция агглютинации (РА) Реакция преципитации (РП) Реакция связывания комплемента (РСК) Иммуноферментный анализ (ИФА) Радиоиммунный анализ (РИА) Реакция иммуноблоттинга 5. Аллергический метод Цель метода - выявление у больного развития РГЗТ Кожно-аллергическая проба 6.1. Реакция иммунной флюоресценции (РИФ) – используют сыворотки, связанные с флюорохромами (краски, кторые светятся в УФЛ) 6.2. Иммуноферментный анализ (ИФА) – используют сыворотки, меченные ферментами (пероксидазой или щелочной фосфатазой) 6.3. Радиоиммунный анализ (РИА) • Радиоиммунный анализ (РИА) – используют сыворотки, меченные радионуклидами (І125) 6.4. Реакция иммуноблоттинга основана на : • разделении Аг возбудителя методом электрофореза в геле • с помощью ИФА или РИА выявляют специфические комплексы AГ-AТфермент 7. Иммунная электронная микроскопия Выявление иммунных комплексов с помощью электронного микроскопа 8.1. Гибридизация нуклеиновых кислот Выявление в инфекционном материале участков ДНК, характерных для возбудителя с помощью их гибридизации с диагностическими ДНК-зондами. 8.2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) Выявление в инфекционном материале специфических фрагментов ДНК или РНК возбудителя путем его удлинения (амплификации)