Методы подтверждения диагноза в клинике инфекционных болезней Микроскопия Светооптическая микроскопия позволяет изучать объекты размером более 0,2 мкм (бактерии, простейшие, грибы и др.) и используется в повседневной практике для ускоренной ориентировочной диагностики. Качество диагностики может быть повышено при использовании дифференцирующих методов окраски, осаждении и флотации материала. Недостатками светооптической микроскопии являются относительно низкая чувствительность и невозможность определить чувствительность бактерий к антибиотикам. Электронная микроскопия позволяет изучать вирусы и отдельные структуры микроорганизмов. В силу дороговизны оборудования метод не получил широкого распространения в клинической практике. Бактериологический метод Является «золотым стандартом» в диагностике бактериальных инфекций. Позволяет определить вид возбудителя и его чувствительность к антибиотикам и бактериофагам. По чувствительности значительно превосходит микроскопию. Недостатком метода является длительность выполнения бактериологических анализов: в большинстве случаев результат может быть получен через 2-3 суток, но некоторые бактерии растут на питательных средах очень медленно (например, иерсинии), для выделения других необходимы специальные питательные среды (обогащенные, элективные, селективные). Вирусологический метод Выделение вирусов на культуре тканей или куриных эмбрионах является «золотым стандартом» в диагностике вирусных инфекций. Патогенные для человека вирусы лучше растут на культурах тканей человека (нормальных или злокачественно перерожденных), при этом для большинства из них характерна тканевая специфичность. Для выявления неизвестного вируса целесообразно одномоментное заражение 3-4 культур клеток. Вирус идентифицируют по его цитопатогенному эффекту, развитию специфической дегенерации клеток, появлению специфических включений. Биологический метод Заражение лабораторных животных в ряде случаев позволяет идентифицировать возбудителя, а также определить его патогенность (токсигенность, вирулентность). Воспроизведение заболевания у животного – абсолютное доказательство патогенности микроорганизма. Метод позволяет достоверно подтвердить диагноз при инфекциях, возбудители которых в исследуемых биологических средах организма человека содержатся в малых концентрациях и плохо или медленно растут на питательных средах. При вскрытии зараженного животного можно провести микроскопию или посев тканей паренхиматозных органов (т.е. биологическая проба одновременно является способом накопления возбудителя – повышает чувствительность бактериологии и бактериоскопии). Серологические методы Основаны на взаимодействии антигенов с антителами, поэтому их применение результативно в более поздние сроки, чем микроскопия и бактериологический метод (при большинстве инфекций антитела появляются после 5 дня болезни). Однократное выявление антител к искомому возбудителю не всегда подтверждает диагноз: как правило, предпочтительно повторное определение антител через 7-10 дней (метод парных сывороток). При большинстве инфекций диагноз можно считать подтвержденным при нарастании титра антител в 4 и более раза. Существенным недостатком метода является недостаточная его специфичность (возможны ложноположительные результаты), особенно при наличии у больного сопутствующих ревматологических и онкологических заболеваний. Полимеразная цепная реакция Позволяет определить видовую принадлежность возбудителя, обладает высочайшей специфичностью, высокой чувствительностью и дает ложноположительные результаты только при контаминации исследуемого материала. Не входит в стандарты обследования по большинству инфекционных болезней, поэтому относительно редко применяется в амбулаторной практике (обычно проводится, если больной согласен сам оплатить исследование). Лаборатории инфекционных больниц, как правило, оснащены лучше, поэтому в больницах ПЦР применяется значительно шире. Кожная аллергическая проба Применение кожных аллергических проб в настоящее время очень ограничено (туберкулез, туляремия, сибирская язва, бруцеллез). Метод основывается на введении человеку антигена предполагаемого возбудителя с последующей оценкой местной аллергической реакции. В условиях повышенной аллергической настроенности населения этот метод зачастую дает ложноположительные результаты.