Тестирование на HER

Гистология РМЖ:
Клиническое видение
Др. Джо Анн Зужевски [Jo Anne Zujewski]
Программа оценки качества лечения онкологических
заболеваний
Отделение диагностики и лечения онкологических
заболеваний
Национальный институт рака, США
Ташкент, Узбекистан - Май, 2011 год
Первый шаг в планировании лечения
РМЖ: Определение опухоли
• Стадия
– Размер опухоли
– Статус лимфатических узлов
– Метастатические очаги
• Уровень (степень)
• Хирургические края
• Опухолевая экспрессия генов и
протеинов
– Рецепторы Эстрогена (РЭ)
– Рецепторы Прогестерона (РП)
– HER-2
Инвазивный РМЖ
Рецептор Эстрогена
HER-2
Определение типа опухоли:
Гистология
• Патологические признаки помогают
определиться с рекомендациями для
лечения
– Прогностические факторы: помогают
определить вероятность рецидива
опухоли и смерти
– Предсказательные факторы:
помогают предсказать вероятность
ответной реакции на лечение
Прогностические и
Предсказательные Факторы при раке
•
•
•
•
•
Тип опухоли
Стадия (размер и распространенность)
Степень опухоли (агрессивность)
Хирургические края
Дополнительные обследования: оценка
опухолевого гена и экспрессии протеина
– Иммуногистохимия (Рецептор эстрогена)
– Проточная цитометрия (определение
субтипа; лимфома или лейкемия)
– Гибридизация In situ (FISH для HER-2)
Прогностические и предсказательные факторы:
Стадия опухоли (TNM)
• При определении стадии рака учитывается клиническая
и патологическая картина
Меланома: 5-летняя выживаемость
– Размер опухоли (T)
– Распространение на
региональные ЛУ (N)
– Метастазы в другие
части тела (M)
• Опухоли с более высокой степенью чаще
рецидивируют и имеют хуже показатели выживаемости
Прогностические и предсказательные факторы: Степень опухоли
• Уровень опухоли – это гистологическая система
индексации, основанная на различиях
микроскопической картины клеток опухоли в
сравнении с нормальными клетками
– Вид абнормальных клеток
– Количество митозов
Выживаемость при РМЖ
(деление клеток)
• Опухоли с более
высокой степенью чаще
рецидивируют и
имеют хуже
показатели
выживаемости
Уровень 1 Инфильтративная
протоковая карцинома РМЖ
Уровень 3 Инфильтративная
протоковая карцинома РМЖ
Прогностические и предсказывающие
факторы: Дополнительное
тестирование патологии
• Дополнительное окрашивание клеток рака
может помочь определить:
– Источник раковых клеток (при
неизвестной первичной локализации
рака)
– Подкласс рака (тип лейкемии)
– Агрессивность опухоли
– Возможные варианты лечения
(экспрессия рецептора эстрогена,
экспрессия HER-2)
Тестирование Рецепторов Эстрогена
[Еstrogen Receptor (ER)] при РМЖ:
Иммуногистохимия
Около 70%
РМЖ - ER+
Тестирование на HER-2 при РМЖ
ИГХ: оценивает протеин
Иммуногистохимия
FISH: оценивает копию гена
Флуоречцентная гибридизация in situ
ПРОШЛОЕ
Конференция Национального института рака
в 2000 году по достижению консенсуса по
адъювантному РМЖ
Адъювантная химиотерапия должна
предлагаться большинству женщин с
РМЖ вне зависимости от состояния
ЛУ, менопаузального статуса или
статуса гормональных рецепторов
НАСТОЯЩЕЕ И БУДУЩЕЕ
Индивидуализация
предполагаемого риска рецидива
и пользы от лечения при помощи
геномных/молекулярных
признаков
Гистология РМЖ: Классический
прогноз и прогностические факторы
HER-2 +
25% РМЖ
•
•
•
•
•
•
Размер опухоли
Статус ЛУ
Уровень опухоли
Статус границ
Статус рецепторов эстрогена
Экспрессия HER-2
Рецептор
Эстрогена (ER)
+ 75% РМЖ
Оценка пользы от адъювантной
системной терапии www.adjuvantonline.com
Адъювантная! Ввод данных
Возраст = 48 лет
Здоровье: «малые пробл.» по умолчанию»
ER = негативный
Уровень = 3
T-размер = 1.5cм
ЛУ = 2+ из 11
Варианты лечения
Ravdin P et al, JCO 19: 980-991, 2001
Очень полезно, но мы все еще используем только несколько факторов, связанных с опухолями, для оценки риска
Тестирование Рецептора эстрогена (РЭ)
[Estrogen Receptor (ER)] при РМЖ:
Иммуногистохимия
Около
70% РМЖ
- ER+
Рецептор Эстрогена как мишень (таргет)
для терапии
Рецептор эстрогена:
обнаруживается в 75-80% РМЖ
Ингибиторы ароматаз,
супрессия яичников
Эстроген
Рецептор
Эстрогена
SERMS, SERDS
Рост и
деление
клетки
Тестирование на HER-2 при РМЖ
ИГХ: оценивает протеин
Иммуногистохимия
FISH: оценивает копию гена
Флуоречцентная гибридизация in situ
Регуляторные мутации
Normal expression
Overexpression
Her2 protein
Her2 protein
Messenger
RNA
Chromosome 17
Her2 gene
Her2 gene amplification
HER-2 как мишень
при таргетной терапии
• Рецептор фактора роста
• Связан с ускорением роста и деления клеток
• Повышенная экспрессия в 20-25% случаев РМЖ
HER-2
клетка рака
ядро
деление клетки
Tрастузумаб (герцептин)
Aнти-HER-2 Антитела
При добавлении герцептина к
химио при лечении ранних
стадий РМЖ на 50% снижается
вероятность рецидивов и на 33%
смертность
Лапатиниб (тукерб)
Дуал HER-1/HER-2
Ингибитор тирозин киназы
Пособие по рекомендациям
проведения тестирования
рецепторов 2 человеческого
эпидермального фактора роста
при РМЖ Американского
общества клинической
онкологии / Колледжа
американских патологов
Journal of Clinical Oncology, Vol
25, No 1 (January 1), 2007: pp.
118-145
Источники различий:
Преаналитические
• Преаналитические
•
Время фиксации
•
Метод обработки ткани
•
Время фиксации
•
Тип фиксации
Источники различий:
Аналитические различия
• Подтверждение истинности результатов
исследования
•
Калибровка оборудования
•
Использование стандартизированных
лабораторных процедур
•
Тренинг и компетентность персонала
•
Тип извлечения антигена
•
Реагенты, используемые для теста
•
Использование стандартизированных
контрольных материалов
•
Использование автоматических лабораторных
методов
Источники различий:
Постаналитические
• Критерии чтения / толкования
• Использование анализа изображений
• Элементы, подлежащие описанию/
отчетности
• Процедуры, гарантирующие качество
– Аккредитация лаборатории
– Тестирование степени профессиональности
– Оценка компетентности патолога
.
Wolff A C et al. JCO 2007;25:118-145
©2007 by American Society of Clinical Oncology
.
Wolff A C et al. JCO 2007;25:118-145
©2007 by American Society of Clinical Oncology
Руководство по рекомендациям
для иммунногистохимического
тестирования рецепторов
эстрогена и прогестерона при
РМЖ Американского общества
клинической онкологии /
Колледжа американских
патологов
JCO June 1, 2010 vol. 28 no. 16
2784-2795
Новая эра: Индивидуализация
характеристик экспрессии
ракового гена
Зеленые точки: ген
«выключен» при этом
раке
Красные точки: ген
«включен» при этом раке
Cancer Microarray Analysis
Оценка рака на предмет экспрессии от десятков до сотен генов и протеинов
Молекулярная классификация РМЖ
Sorlie et al, Proc Natl Acad Sci 100:8418, 2003
Luminal Luminal HER-2+ Basal Normal
Subtype A Subtype B
Subtype как РМЖ
Красные
точки:
Гены
«включены» в
раковых
клетках
при
сравнении с
нормальными
клетками
Индивидуальные
гены
Индивидуальные
опухоли
Подтипы и прогноз
Sorlie T et al, PNAS 2001
Эра молекулярных характеристик / признаков
Agendia Mammaprint 70-Gene Prognostic Signature
Assay
Кто не нуждается в химиотерапии?
Оценка индекса рецидивирования (ИР) 21-гена
Фиксированная ткань
Экстракт
РНК
опухоли
Хирургическое
удаление ткани
Оценка
опухоли
на 21 ген
Результаты ИР
Отдаленный рецидив
через 10 лет = 12% при
лечении только
тамоксифеном
40%
Intermediate
Risk Group
Low Risk Group
Distant Recurrence at 10 Years
Индекс рецид-ния = 21
Оценка
онкотипа
Dx
35%
High Risk Group
Проверен при ЛУ(-),
ER(+) опухолях
после получения
тамоксифена
30%
25%
20%
15%
10%
5%
0%
0
5
10
15
95% CI
20
25
30
Recurrence Score
35
40
45
50
Оценка индекса рецидивирования
[Recurrence Score (RS)] 21 гена: 16 ганов
рака и 5 контрольных генов
ПРОЛИФЕРАЦИЯ
Ki-67
STK15
Survivin
Cyclin B1
MYBL2
ИНВАЗИЯ
Stromolysin 3
Cathepsin L2
ЭСТРОГЕН
ER
PR
Bcl2
SCUBE2
GSTM1
CD68
BAG1
HER2
GRB7
HER2
КОНТРОЛЬНЫЕ
Beta-actin
GAPDH
RPLPO
GUS
TFRC
21-Gene Recurrence Score Assay for
Predicting Recurrence in РМЖ Cancer
Paik S et al, N Engl J Med 351:2817-26, 2004
Lymph Node -, ER+ patients treated with tamoxifen
Группа риска
%
пациентов
Низкий (RS<18)
51%
Показатель 10-летнего
отдаленного рецидивирования
6.8%
Средний (RS 18-30) 22%
14.3%
Высокий (RS≥31)
30.5%
27%
По международным руководствам, <10% ЛУ(-),
ER+ пациентов
относятся к
категории низкого
риска
Группа с высоким риском индекса
рецидивирования получает пользу от
химиотерапии, а группа с низким риском - нет
Paik S et al, J Clin Oncol 24: 3726-34, 2006
1.0
1.0
0.9
0.9
0.8
0.8
p = 0.02
0.6
DRFS
0.6
DRFS
p = 0.76
0.7
0.7
0.5
Все пациенты
С низк. риском (RS
<18)
0.5
0.4
0.4
0.3
0.3
0.2
0.2
All Patients
Tam + Chemo
Tam
0.1
Low Risk Patients (RS < 18)
Tam + Chemo
Tam
0.1
0.0
0.0
0
2
4
6
8
10
12
0
2
4
6
8
10
12
Years
Years
Исследование
NSABP B20
Tamoxifen + Химио
Tamoxifen
1.0
1.0
0.9
0.9
0.8
0.8
p = 0.71
0.7
0.7
p = 0.001
0.6
DRFS
DRFS
0.6
0.5
Ср. риск (RS 18-30)
0.4
0.3
0.3
0.2
Int Risk (RS 18 - 30)
Tam + Chemo
Tam
2
High Risk Patients (RS  31)
Tam + Chemo
Tam
0.1
0.0
0
High
Выс.Risk
риск(RS
(RS>30)
>30)
0.4
0.2
0.1
0.5
4
6
Years
8
10
12
0.0
0
2
4
6
Years
8
10
12
Протокол исследования образцов
тканей при РМЖ у пациентов с
инвазивной карциномой
Протокол относится ко всем формам
инвазивной карциномы РМЖ,
включая протоковую карциному in
situ (DCIS) с микроинвазией
www.cap.org
Протоколы и
контрольный список (перечень) действий