Влияние питания человека на процессы метаболизма в ротовой полости человека Выполнила:Тегай Татьяна, ученица 10 класса МОБУ СОШ №6, г.Сибай Научный Руководитель: учитель химии и биологии Бобровская Ирина Леонидовна Цель работы: исследовать, как овощная диета влияет на изменения биохимического состава слюны: вызывает повышения нитритов. 2 Задачи работы: 1. Овладеть методикой определения нитритов в ротовой жидкости. 2. Изучить литературу о биохимии ротовой жидкости. 3. Изучить литературу о влиянии нитратов на здоровье человека. 4. Узнать о способах снижения содержания нитратов в домашних условиях. 3 Строение ротовой полости человека 4 Компонент Сухой остаток Белки Аммиак Мочевина Аминокислоты Глюкоза Неорганические фосфаты Кальций Холестерин Хлориды Молочная кислота Процент 0,1-1,0 0,08-0,6 0,002-0,01 0,011 0,013 0-0,02 0,007-0,02 0,004-0,01 0,003-0,015 0,04-0,07 0,054 Химический состав ротовой жидкости 5 NH + HONO N-N=O + H2O COOH COOH Реакция нитритов с аминокислотой пролином 6 Овощи Капуста Огурцы Томаты Лук ранний Лук поздний Кукуруза Картофель Свёкла Перец сладкий Листовая зелень Яблоки Дыни Мг на 1 кг сырой массы 500-900 100-300 50-100 1200 100-120 100-1700 250 1400 200 2000 60 90 Содержание нитратов в овощах 7 Определение нитритов в ротовой жидкости К объему свежесобранной слюны добавляем 1-2 мл воды и 1мл 1%-ного раствора реактива Грисса (порошок, представляющий собой смесь сульфаниловой кислоты и 1-нафтиламина), приготовленного на 20%-ной уксусной кислоте. Если нитритов в образце много, пурпурная окраска постепенно развивается уже при комнатной температуре, однако, лучший результат получается при нагревании в горячей водяной бане 5-10 минут. Интенсивность окрашивания пробы от бледно-розового до ярко-пурпурного в зависимости от уровня нитритов в пробе. 8 Дата проведения эксперимента 14 ноября 2010г. Что делали В течение суток употребляли только овощные блюда. После овощного ужина была собрана слюна в количестве 1 мл, к которой добавили воду в количестве 2 мл и раствор реактива Грисса. Что наблюдали Наблюдали появление ярко-розового окрашивания жидкости. Вывод Содержание нитрита в ротовой жидкости высокое. 9 Дата проведения эксперимента 15 ноября 2010г. Что делали Что наблюдали Вывод В течение суток употребляли пищу, не содержащую овощи и фрукты: молочная каша, пельмени. Вечером собрали слюну в количестве 1 мл, добавили воду в количестве 2 мл и реактив Грисса. Наблюдали появление бледно-розового окрашивания жидкости. Содержание нитрита в ротовой жидкости низкое. 10 Вывод по результатам: После проведения эксперимента мы убедились, что после употребления овощных блюд содержание нитритов в ротовой жидкости резко увеличилось по сравнению с употреблением пищи, не содержащих овощи и фрукты. Поэтому это ещё раз доказывает, что питание должно быть не только сбалансированным, но и разнообразным, то есть в меню человека должны быть продукты и растительного, и животного происхождения. 11 Определение нитратредуктазы К 0,1-0,2 мл ротовой жидкости добавляем несколько капель 0,01 раствора нитрата натрия. Проба инкубируется 20-30 минут в водяной бане при температуре около 400С. Для сравнения ставится ещё одна проба с тем же количеством слюны, но без нитрата. В ротовой жидкости и так присутствует немного нитрита. А ведь именно по нарастанию концентрации нитрита мы судим о наличии в слюне бактериальной нитратредуктазы. Определяем появление нитрита с помощью уже описанной цветной диазореакции Грисса: в пробе с нитратом будет ярко-розовое окрашивание, а в пробе без нитрата – бледно-розовое или вообще проба будет бесцветной. 12 Дата проведения эксперимента Что делали Что наблюдали Вывод 16 ноября 2010г. К 0,2 мл ротовой жидкости добавили несколько капель раствора нитрата натрия. Далее мы инкубировали пробу с ротовой жидкостью 20 минут в водяной бане при температуре около 400С. После этого мы добавили в пробу реактив Грисса. Наблюдали появление ярко-розового окрашивания жидкости в пробе. Содержание нитритов в ротовой жидкости высокое, значит и содержание в ротовой жидкости бактериальной нитратредуктазы высокое. 16 ноября 2010г. К 0,2 мл ротовой жидкости мы уже не добавляли раствор нитрата натрия. Далее мы инкубировали пробу с ротовой жидкостью 20 минут в водяной бане при температуре около 400С. После этого мы добавили в пробу реактив Грисса. Наблюдали появление бледно-розового окрашивания жидкости в пробе. Содержание нитритов в ротовой жидкости присутствует, значит и содержание в ротовой жидкости бактериальной нитратредуктазы тоже присутствует. 13 Пробы с ротовой жидкостью (слева – проба без нитрата, справа – проба с нитратом) 14 Вывод по результатам: Определение фермента нитратредуктазы в ротовой жидкости по указанной прописи получилось очень хорошо. Высокая активность этого фермента говорит о том, что в ротовой полости содержится много микроорганизмов, восстанавливающих минеральные нитраты пищевых овощей. 15 Выводы. Исследования показывают, что нитраты с пищей попадают в организм человека и их избыточное содержание может отрицательно сказаться на здоровье человека. Если быть вегетарианцем, придерживаться овощной диеты, то можно увеличить концентрацию нитратов в организме. Поэтому это ещё раз доказывает, что питание должно быть не только сбалансированным, но и разнообразным. В меню человека должны быть продукты не только растительного, но и животного происхождения. Теоретические исследования и проведенный эксперимент показывают, насколько важна микрофлора ротовой полости. Различные бактерии не только связаны с гигиеной рта, они влияют на работу всего желудочно-кишечного тракта. В наше время антибактериальные ополаскиватели для рта становятся всё популярнее. Но, если ополаскиватель уничтожает бактериальную флору ротовой полости, он уничтожает не только болезнетворные, но и полезные бактерии. Поэтому ротовую полость нужно ополаскивать чистой водой. В результате исследований, можно сказать, что если иметь определённое знание по данной теме, то можно снизить уровень нитратов в продукте. Например, следует приобретать овощи и фрукты средних размеров так как в них меньше содержание нитратов, на своем садово-огородном участке разумно применять минеральные удобрения. 16 Спасибо за внимание! 17