Конвенциональные животные - Rus-LASA

Проведение
поведенческих
экспериментов в
условиях SPF вивария
Заведующий виварноэксперименальным комплексом
НИИ Митоинженерии МГУ,
к.б.н. Ловать М.Л.
Исследование поведения животных
• Доклиника:
специфическая активность
скрининг
• Фундаментальные исследования:
Этология
Нейробиология
Фармакология
Специфика постановки
поведенческих опытов
•Плотный контакт с животными
•Большая продолжительность работ
•Большое количество животных
•Громоздкое оборудование, непосредственно
контактирующее с животными
•Риск инфицирования исследователя и животного
•Физическая, психическая нагрузка
Решающее значение следования
принципам GLP:
•Необходимость поддерживать одинаковые
условия в течение всего эксперимента
(требования к помещению)
•Жесткие временные рамки опыта (протокол)
•Высокая субъективность измерений (СОПы)
•Невозможность повторения опыта
(отклонения)
•Сложность интерпретации поведения
(комиссия по биоэтике)
Проблемы в содержании животных
Проблемы
микроклимата:
•
Колебания температуры,
влажности
• Плохая вентиляция
• Неравномерное
освещение
• Отсутствие нормального
суточного ритма у
животных
ID
001
Customer ID
11.
RAT ASSESSMENT PLUS
ELISA SEND
ELISA PVM
ELISA
SDAV/RCV
ELISA KRV
ELISA H-1
ELISA GD-7
ELISA RE0-3
ELISA MPUL
ELISA LCMV
-
002
12.
003
13.
-
-
-
+
-
+
-
ELISA MAD 1+2 -
-
-
ELISA HANT
ELISA CARB
ELISA CPIL
ELISA ECUN
ELISA NS-1
ELISA NS-1
IFA SDAV/RCV
-
-
+
-
-
-
+
IFA SDAV/RCV
++
IFA KRV
IFA KRV
IFA MPUL
IFA MPUL
IFA CPIL
IFA CPIL
++
+
Проблемы ухода за
животными:
• отсутствие воды,
• некачественный корм и
нестандартная вода,
• пылящая подстилка,
• запах аммиака
• нерегулярное посещение
животных
• заболевания животных
(диарея, клещ, гепатит
мышей и крыс и т.п.)
++
IFA RPV
IFA RPV
+++
Искажение результатов научных исследований
Что для нас означают стандарты GLP:
(Good Laboratory Practice -надлежащая лабораторная практика)
• Система норм, правил и указаний, для получения
достоверного и воспроизводимого результата
лабораторных исследований.
• Животное = биологическая модель для
получения таких результатов
• Главная задача GLP - обеспечить возможность
полного прослеживания и восстановления всего
хода исследования по бумагам.
Оптимально работать на животных SPF категории
* SPF (Specific Pathogen Free) – категория животных с контролируемой микрофлорой
Конвенциональные животные – здоровые животные, содержащиеся по стандартам GLP, у которых
микрофлора не мониторируется (а не с помойки)
ПОДДЕРЖАНИЕ SPF-СТАТУСА ВОЗМОЖНО ПРИ
ИСПОЛЬЗОВАНИИ:
•Гнотоизолятора
•Системы индивидуально
вентилируемых камер (IVC)
•Вивария барьерного типа
Требования к блоку исследования поведения:
1.
Достаточно большое пространство для проведения эксперимента
2.
Защита от заражения в процессе тестирования, транспортировки,
манипуляций
3.
Сведение различий в условиях содержания и опыта к минимуму
(минимальность адаптации животных)
4.
Возможность проведения нескольких тестов одновременно (в том числе
в хронических экспериментах)
5.
Возможность работы нескольких экспериментаторов одновременно
Еженедельная дезинфекция оборудования, помещений
Мы: виварно-экспериментальный комплекс
НИИ Митоинженерии МГУ - барьерного типа
Три технологически разделенных блока, общей площадью 610 кв.м.
1.Административнобытовой комплекс
2.Технологический сектор
3.SPF-зона
В виварии контролируются условия содержания
животных :
избыточное давление в SPF зоне- 7-15 Па
воздухообмен – 10-12 объемов/час
температура – 22+2С
влажность - 30-70%
световой день - 12 часов
Резервирование,
мониторинг всех
процессов:
системаGLP-SCADA
(параметры микроклимата,
перемещения, доступ)
вода
воздух
эл-во
материалы
люди
Особенности оснащения помещений для
поведенческих экспериментов
• Зонирование лаборатории SPF
• Соседство с технологической
зоной (СО2 наркоз, компьютер,
установки)
• Возможность дезинфекции
помещений и крупного
оборудования (УФ, Н2О2)
Контроль качества дезинфекции:
Экспресс АТФ- тест
Микробиологический мониторинг
Heath monitoring сентинел
! Большие затраты !
Разборный модуль для исследования
поведения
- Оснащенность «под ключ»
-Быстрая сборка в любом
помещении
-Простота монтажа
-Легкость обслуживания
-Стандартность условий
- Взаимозаменяемость
установок (например,хирургияповедение-эмбриология)
-Относительно невысокая цена
ООО «НПК Открытая Наука»
! Для поддержания SPFстатуса должна
комплектоваться системой
обеспечения и дезинфекции
«SPF –капсула»
площадью 18 м2 (пример)
6
5
фильтр
7
приток
Сопутствующее
1.- поведенческие установки
оснащение:
2. стол операторов
1. Мойка большая
3. зона передержки и манипуляции с животными (ламинар)
2. Стиральная машина
4. Склад «чистый»
3. Стерилизатор
5. Стол, мойка и стеллажи для «грязных» предметов и манипуляций
4. Склады
6. Банкетка (переобувание) и вешалка (внутренняя одежда)
5. Архивы
7. Душ
6. офис
Требования к оборудованию
•
•
•
•
Компактное, разборное
(складное)
Не содержит хрупких, мелких,
пористых деталей, полостей (легко
моется),
Не боится стерилизации (едких рров или температуры),
Соответствует стандартным
методикам эксперимента
Спасибо за внимание!