АсАТ-ВИТАЛ-06/16

АсАТ-ВИТАЛ-06/16
НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ В СЫВОРОТКЕ
И ПЛАЗМЕ КРОВИ ОПТИМИЗИРОВАННЫМ ЭНЗИМАТИЧЕСКИМ КИНЕТИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
Кат. № В 02.006 - 150 мл
Кат. № В 02.016 - 250 мл
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
ПРИНЦИП МЕТОДА
Длина волны: Hg 334, 340 или 365 нм.
Длина оптического пути: 1 см.
Температура инкубации : 37С (30С, 25С)
Фотометрирование: против воздуха.
1. L-аспартат + -кетоглутарат  АсАТ 
оксалоацетат + L-глутамат
2. оксалоацетат + NADH + H+МДГ  L-малат + NAD+
Cкорость окисления NADH в NAD+ пропорциональна
активности АсАТ.
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ)
Свежая сыворотка или плазма крови без следов гемолиза.
СОСТАВ НАБОРА
РЕАГЕНТ № 1 - БУФЕР, рН 7,5
конечная концентрация в рабочем реагенте
L-аспартат……...…………..…………..........240 ммоль/л
Трис/NaOH………………….…………......….80 ммоль/л
ИЗМЕРЕНИЕ
Перед проведением анализа нагрейте рабочий реагент до
выбранной температуры.
Соотношение рабочий реагент/образец = 10/1
(например, 0,5 мл рабочего реагента + 0,05 мл образца).
Перемешать, инкубировать при выбранной температуре
60 сек. Затем считывать изменения адсорбции с интервалом
1 минута (или через другие равные промежутки времени) в
течение 3 минут.
Вычислить среднее изменение адсорбции за 1 минуту
(А/мин).
РАСЧЕТЫ
РЕАГЕНТ № 2 - ЛИОФИЛИЗАТ
-кетоглутарат…………….………….....…...12 ммоль/л
ЛДГ………………..…………........……………...600 U/л
МДГ………………..…………........……………..600 U/л
NADH……………………..………….....….0,18 ммоль/л
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Расчет активности аспартатаминотрансферазы (U/l):
Активность=3235А365 нм/мин,
Активность=1746А340 нм/мин,
Активность=1780А334 нм/мин.
ТЕМПЕРАТУРНЫЕ КОЭФФИЦИЕНТЫ ПЕРЕСЧЕТА
Температура
инкубации
37С
30С
25С
Линейность - отклонение не более 5 %
в диапазоне активностей 10-190 U/л
Чувствительность - не более 7 U/л
Коэффициент вариации – не более 5 %
Время проведения анализа – не более 4 мин
ХРАНЕНИЕ
1.
Срок годности набора – 12 мес
( хранение при 2-4С).
ВНИМАНИЕ! Тщательно закрывайте флаконы
непосредственно после каждого использования реагентов.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РЕАГЕНТА
Растворить содержимое одного флакона № 2 в 50 мл реагента
№ 1. Для получения оптимальных результатов рекомендуется
выдержать рабочий реагент после полного растворения
лиофилизата при комнатной температуре 5-10 минут.
Рабочий реагент стабилен 45 суток при температуре хранения
2-4С, 7 суток при 18-25С, 10 сут при хранении в "рабочем
режиме № 1" (6 ч при 37С и 18 ч при 2-4С), 20 суток при
хранении в "рабочем режиме № 2" (6 ч при 18-25С и 18 ч при
2-4С).
37С
30С
25С
1,00
1,54
2,08
0,65
1,00
1,37
0,48
0,73
1,00
30С
До 21 U/л
До 25 U/л
25С
До 15 U/л
До 18 U/л
НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
37С
Женщины
До 31 U/л
Мужчины
До 37 U/л
1U/л = 16,67 нмоль/(сл).
ПРИМЕЧАНИЕ
1.
2.
3.
Если А/мин превышает 0,06/мин при фотометрировании в варианте Hg 365 или 0,11/мин в варианте
340/ Hg 334, необходимо развести образец в 10 раз
физраствором. Анализ повторить, результат умножить
на 10.
Активность фермента в сыворотке снижается после 3
дней хранения при 2-4С – на 10%, при 18-25С –
на 17%.
Большинство автоматических приборов позволяет
сократить время измерения
А с последующим
автоматическим вычислением А/мин и активности
фермента.
Программы
к
анализаторам
предоставляются по запросу.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Правильность проверена при помощи контрольных
сывороток “Сontronorm” & “Contropath” (Biocon, Германия),
“Precinorm U” & “Precipath U” (Roche Diagnostics,
Швейцария).