Концентрация циркулирующих иммунных комплексов как

УДК 636.39:612.017
КОНЦЕНТРАЦИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ КОМПЛЕКСОВ КАК
ИНДИКАТОР СОСТОЯНИЯ РЕПРОДУКТИВНОГО ТРАКТА КОЗ
П.В. Трубникова, ГНУ Ставропольский НИИЖК
Экзо- или эндогенные антигены могут образовывать в организме
животного циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК). Биологическое
действие циркулирующих иммунных комплексов, обусловленное
разнообразием их строения и свойств, имеет множество проявлений: от
стимуляции иммунной системы до индуцирования процессов
иммуносупрессии и повреждения тканей (Первиков Ю.В., Эльберт Л.Б.,
1984). Главная функция ЦИК - удаление из организма чужеродных
антигенов. Вместе с тем ЦИК часто играют заметную роль в патогенезе
заболевания, а их длительная циркуляция в организме коррелирует с
продолжительностью и тяжестью течения патологического процесса.
Этот процесс может стать причиной системной или органной патологии,
например, в почках - болезнь циркулирующих иммунных комплексов. В
медицине описано повышение концентрации ЦИКов при стрессах,
системных, аутоиммунных и инфекционных заболеваниях, а также при
злокачественных новообразованиях. Наличие высокого уровня
циркулирующих
иммунных
комплексов
и
антителозависимых
иммунопатологических реакций наглядно свидетельствует о развитии
аутоиммунных процессов в организме животных.
Имеются физические (гельфильтрация, криопреципитация) и
биологические (взаимодействия с комплементом, ревматоидным
фактором, системы с использованием клеток) методы определения
иммунных комплексов. При неоспоримых достоинствах в отношении
точности, специфичности, чувствительности и воспроизводимости
результатов у них имеется общий недостаток – методы довольно
сложны.
Мы приводим здесь простой, доступный и достаточно точный (до
88%) метод определения циркулирующих иммунных комплексов в
сыворотке крови. Это метод Digeon,а. Он основан на повышенной
способности иммунных комплексов осаждаться в присутствии различных
концентраций полиэтиленгликоля (ПЭГ) с молекулярной массой 6000:
чем выше молекулярная масса комплекса, тем меньшая концентрация
ПЭГ требуется. Используют 3- и 4%-ные концентрации ПЭГ,
позволяющие осадить крупные (малопатогенные), средние и мелкие
(патогенные) ЦИК.
Ход работы. Выставляют два ряда центрифужных пробирок. В
пробирки первого ряда добавляют 70 мкл исследуемой сыворотки, 140
мкл боратного буферного раствора (ББР) (4,275 г тетрабората натрия,
3,41 г борной кислоты, до 1 л дистиллированной воды, рН=8,4) и 1,8 мл
полиэтиленгликоля (ПЭГ). В пробирки второго ряда добавляют 70 мкл
исследуемой сыворотки и 1,94 мл ББР. Пробирки оставляют при
комнатной температуре на 1 час. Определяют мутность растворов в
пробирках на фотоэлектрокалориметре при длине волны 450 нм в
кювете толщиной 0,5 см. В качестве стандарта берут ББР. Разница
показаний
прибора
между
параллельными
пробирками
с
полиэтиленгликолем и без и есть концентрация ЦИК.
Мы
попытались
проследить
зависимость
содержания
циркулирующих иммунных комплексов от функционального состояния
репродуктивной системы животного. Для нормального протекания
беременности
особое
значение
придается
иммунологическим
изменениям в организме самки. В настоящее время патогенез
фетоплацентарного синдрома, как иммунокомпетентного процесса,
представляется следующим образом. Хронический стресс, нарушение
гормонального статуса или какой-либо другой фактор, дисрегулирующий
систему гипоталамус матери - плацента, приводят к недостаточной
выработке антител. Это, в свою очередь, способствует нарушению
нейтрализации постоянно поступающих в циркулирующую кровь матери
плацентарных
антигенов,
т.е.
образованию
неполноценных
циркулирующих иммунных комплексов, которые не могут быть адекватно
выведены из организма. Научная гипотеза состоит в следующем: зная
динамику ЦИК при нормально протекающей беременности, мы сможем
вовремя заметить и устранить патологический процесс при отклонении
показателя от нормы.
Объектами исследований были козы зааненской породы (n=30) с
живой массой 50-55 кг, среднесуточным удоем 2 кг, сходные по
фенотипу. Исследования проводились: в отсутствие охоты (определяли
с помощью козлов-пробников), во время охоты, через 24 часа после
осеменения, на 1-5 месяцах беременности, сразу после родов, через 1,
4, 10, 24, 48 часов и 10 суток после родов.
Содержание ЦИК в сыворотке крови коз в течение
воспроизводительного периода изменялось в широких пределах (рис. 1).
Уровень ЦИК во время охоты снизился на 58,7 % по сравнению с
анэстральным периодом - с 15,5±0,56 ЕД до 9,1±0,36, а уже через 24
часа после осеменения показатель вырос до максимума – 16,7±0,50 ЕД.
Такие резкие колебания можно объяснить тем, что введение спермы в
половые пути самки вызывает активный иммунный ответ. Если он будет
слишком велик, то оплодотворения не произойдет, так как спермии
погибнут. Поэтому во время охоты снижается иммунная реактивность
организма, что характеризуется низким фоновым уровнем иммунных
тел. Содержание ЦИК в крови беременных животных было невелико,
причем в первый месяц беременности изучаемый показатель был в 2,6
раз ниже, чем в анэстральный период. С развитием беременности
регистрировалось постепенное увеличение показателя (с 6,02±0,18 ЕД
до 8,55±0,13 ЕД за 4 месяца). Снижение реактивности организма во
время беременности обусловлено необходимостью создания наиболее
комфортных условий для развития плода. С увеличением срока
беременности уровень ЦИК плавно повышался, так как нарастала
сенсибилизация организма. За неделю до родов произошел
значительный скачок до 11,6±0,20 ЕД (на 35,7 %), что вписывается в
теорию о том, что перед родами увеличивается количество иммунных
образований, которые способствуют изгнанию уже зрелого плода из
организма. Во время родов значение ЦИК резко упало (в 2,1 раза) и
составило 5,5±0,26 ЕД. Это произошло, видимо, в результате того, что
из организма исчез сенсибилизирующий объект. Снижение показателя
продолжалось в течение часа после родов, затем его колебания были
незначительны и имели тенденцию к восстановлению до исходного.
Таким образом, изучение циркулирующих иммунных комплексов
при различных физиологических состояниях организма дает
характерную картину преобразований, происходящих в системе
иммунитета и направленных на полноценное оплодотворение и
вынашивание плода.