подтверждение и дифференциация. Авдонина А - congress
реклама
ИММУННЫЙ БЛОТТИНГ В ДИАГНОСТИКЕ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ: ПОДТВЕРЖДЕНИЕ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ г. Санкт-Петербург, 2015 г. Динамика роста числа лиц с впервые выявленным диагнозом ВИЧинфекции в Российской Федерации* 79728 70744 63863 62385 80000 70000 58527 58633 54563 60000 50000 49903 44761 39857 36213 35649 33619 40000 30000 20000 *по данным Федерального научно-методического профилактике и борьбе со СПИДом Центра 2014 2013 2012 2011 2010 2009 2008 2007 2006 2005 2004 2003 0 2002 10000 по (за 2014 год данные представлены по состоянию на 01.11.2014) 2 Классификация ВИЧ ВИЧ ВИЧ-1 ВИЧ-2 Субтипы от А до Е Группа М Группа О Группа N Субтипы от А до K 3 Отличие ВИЧ-2 от ВИЧ-1 Группа белков Белки оболочки вируса Белки сердцевины Ферменты вируса ВИЧ -1 ВИЧ -2 gр160, 120, gp140, 105, 41 кД 36 кД p55, 24, 18 кД p56, 26, 16 кД p68, 51, 31 кД p68 кД 4 Алгоритм диагностики ВИЧинфекции ИФА 1(АГ-АТ) Отрицательный результат (-) Положит ИФА 2 ИФА 3 (АГ-АТ ) Отрицат. (АГ-АТ ) Положит. Отрицат. Положит. Блот подтверждающий АГ тест Отрицат. Серологическ ие маркеры ВИЧ – отсутствуют Положит. Первичная ВИЧ – инфекция. Отрицат. Положит. Неопред. Диагноз ВИЧ-1 Иммуноблот на ВИЧ-2 Отрицат. Неопред. Диспансерное наблюдение Положит. Диагноз ВИЧ-2 5 Иммунный блоттинг Аналитический метод, используемый для определения специфичных белков в образце. В его основе лежит явление высокоспецифичного взаимодействия антиген–антитело. 6 Иммуноблот: принцип метода 1. Нанесение антигенов ВИЧ (с использованием нативного вирусного лизата ВИЧ – формат Western Blot, или рекомбинантных антигенов – формат Line Blot) 2.Инкубация с добавлением исследуемой сыворотки – специфическое соединение белков ВИЧ с соответствующими отдельными антителами к ВИЧ из добавленной сыворотки 3. Инкубация с добавлением конъюгата (меченные ферментом антитела к человеческим Ig) 4. Детекция окрашенных полос 7 Белковый профиль ВИЧ на контрольном положительном образце gp140 gp105 gp160 gp120/110 p68/66 p55 p52 gp41 p40 p34 ENV GAG POL Env 160 Env 41 Gag1 Pol1 Env 2 p68 p55 gp36 p34 POL ENV p26 GAG p24\25 p18 Kp ВИЧ-1 (WB) Каг Кр ВИЧ-1,2 (LB) p16 ВИЧ-2 (WB) 8 Интерпретация результатов иммуноблота **CRSS: Консорциум по стандартизации исследования ретровирусов 9 Иммуноферментные тест-системы ЗАО «ЭКОлаб» для диагностики ВИЧ-инфекции 10 «ИФА-БЛОТ-ВИЧ-1» Тест-система иммуноферментная для выявления антител к индивидуальным белкам вируса иммунодефицита человека 1 типа методом иммунного блоттинга, формат WESTERN BLOT. Количество определений: 24 возможна дробная постановка по 6 определений, включая контроли Срок годности: 1год. 11 «ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2» Тест-система иммуноферментная для выявления антител к антигенам вируса иммунодефицита человека типов 1 и 2 методом иммунного блоттинга с использованием рекомбинантных антигенов, формат Line Blot. Количество определений: 24 возможна дробная постановка по 8 определений, включая контроли Срок годности: 1,5 года. 12 «ИФА-БЛОТ-ВИЧ-2» Тест-система иммуноферментная для выявления антител к индивидуальным белкам вируса иммунодефицита человека 2 типа методом иммунного блоттинга, формат WESTERN BLOT. Количество определений: 24 возможна дробная постановка по 6 определений Срок годности: 1год. 13 Актуальные аспекты подтверждения ВИЧ-инфекции Для подтверждения ВИЧ-1 инфекции может быть использован и лизатный, и рекомбинантный иммуноблот Рекомбинантный блот может быть использован в качестве дифференцирующего теста на ВИЧ-2 Наиболее достоверный метод подтверждения ВИЧ-2 инфекции – лизатный иммуноблот 14
