Â. Â. Íîâèöêèé, Î. Á. Æóêîâà, Í. Â. Ðÿçàíöåâà, À. Â.... Î. Â. Ìèõàéëîâà, Í. Í. Ïëîòíèêîâà, Í. Â. Òîêàðåâà, È. Î....

ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÑÎ ÐÀÌÍ, ¹ 4 (110), 2003 ã.
ÓÄÊ 616.988.25-002.954.2:611-018.1:575.116.4
Â. Â. Íîâèöêèé, Î. Á. Æóêîâà, Í. Â. Ðÿçàíöåâà, À. Â. Ëåïåõèí, Í. Ï. Ïèðîãîâà,
Î. Â. Ìèõàéëîâà, Í. Í. Ïëîòíèêîâà, Í. Â. Òîêàðåâà, È. Î. Íàñëåäíèêîâà, À. Ï. Õëàïîâ
ÖÈÒÎÃÅÍÅÒÈÊÀ ËÈÌÔÎÖÈÒΠÏÅÐÈÔÅÐÈ×ÅÑÊÎÉ ÊÐÎÂÈ Ó ÏÀÖÈÅÍÒÎÂ
Ñ ÏÅÐÑÈÑÒÅÍÖÈÅÉ ÂÈÐÓÑÀ ÊËÅÙÅÂÎÃÎ ÝÍÖÅÔÀËÈÒÀ
Ñèáèðñêèé ãîñóäàðñòâåííûé ìåäèöèíñêèé óíèâåðñèòåò ÌÇ ÐÔ, Òîìñê
Ïðîâåäåíî èññëåäîâàíèå õðîìîñîìíîãî àïïàðàòà ëèìôîöèòîâ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè ó
20 ïàöèåíòîâ ñ áåññèìïòîìíûì íîñèòåëüñòâîì âèðóñà êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà è 12 áîëüíûõ ñ õðîíè÷åñêîé àíòèãåíåìèåé ñ ìèíèìàëüíûìè êëèíè÷åñêèìè ïðîÿâëåíèÿìè çàáîëåâàíèÿ, ñîõðàíÿâøèìèñÿ â òå÷åíèå 12 ìåñ. ñ ìîìåíòà èíôèöèðîâàíèÿ. Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó
ñîñòàâèëè 17 çäîðîâûõ äîíîðîâ. Ïîêàçàíî, ÷òî ïåðñèñòåíöèÿ âèðóñà êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà ñîïðîâîæäàåòñÿ öèòîãåíåòè÷åñêîé íåñòàáèëüíîñòüþ ëèìôîöèòàðíûõ êëåòîê: îáíàðóæåíî äîñòîâåðíîå óâåëè÷åíèå äîëè êëåòîê ñî ñòðóêòóðíûìè õðîìîñîìíûìè àáåððàöèÿìè (îäèíî÷íûå è ïàðíûå ôðàãìåíòû), ñíèæåíèå àêòèâíîñòè ñèñòåìû ýêñöèçèîííîé ðåïàðàöèè ÄÍÊ.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: âèðóñ êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà, ëèìôîöèòû, õðîìîñîìíûå àáåððàöèè,
ÄÍÊ-ðåïàðàöèÿ
ðàçâèòèå ñòðóêòóðíûõ è ôóíêöèîíàëüíûõ íàðóøåíèé íà ðàçëè÷íûõ óðîâíÿõ îðãàíèçìà [5, 14,
15].
Ê ÷èñëó âèðóñîâ, ñïîñîáíûõ ê ïðîëîíãèðîâàííîìó ïðåáûâàíèþ â îðãàíèçìå ÷åëîâåêà, îòíîñèòñÿ ÐÍÊ-ñîäåðæàùèé âèðóñ ñåìåéñòâà Flaviviridae – âèðóñ êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà (ÊÝ), ïîðàæàþùèé, êðîìå íåðâíûõ, è èììóíîêîìïåòåíòíûå êëåòêè, ôóíêöèîíàëüíàÿ íåïîëíîöåííîñòü
êîòîðûõ ìîæåò ÿâèòüñÿ ïðè÷èíîé äëèòåëüíîãî
ïîääåðæàíèÿ âèðóñíîãî ïåðñèñòèðîâàíèÿ [14,
15].
Ñîâðåìåííûé
êëèíè÷åñêèé ïàòîìîðôîç ÊÝ ñ òåíäåíöèåé ê óâåëè÷åíèþ ÷àñòîòû ñòåðòûõ ôîðì èíôåêöèè ñ õðîíè÷åñêèì òå÷åíèåì è áåññèìïòîìíîãî âèðóñîíîñèòåëüñòâà îáóñëîâëèâàåò èíòåðåñ èññëåäîâàòåëåé ê èçó÷åíèþ öèòîãåíåòè÷åñêèõ ïîñëåäñòâèé
äëè- òåëüíîãî ïåðñèñòèðîâàíèÿ âèðóñà ÊÝ â
êëåòêàõ èììóííîé ñèñòåìû.  ñâÿçè ñ ýòèì, öåëüþ íàñòîÿùåãî èññëåäîâàíèÿ ÿâèëîñü èçó÷åíèå
Ïåðñèñòèðóþùèå âèðóñíûå èíôåêöèè ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé àêòóàëüíóþ ïðîáëåìó ñîâðåìåííîé ìåäèêî-áèîëîãè÷åñêîé íàóêè.  èçó÷åíèè
ïàòîãåíåçà âèðóñíîé ïåðñèñòåíöèè êëþ÷åâîå ïîëîæåíèå çàíèìàåò âîïðîñ î õàðàêòåðå âçàèìîäåéñòâèÿ ìåæäó âèðóñîì è êëåòêîé, òàê êàê èñõîä èíôåêöèè, ñ îäíîé ñòîðîíû, îïðåäåëÿåòñÿ
ïåðìèññèâíîñòüþ êëåòî÷íîé ñèñòåìû, ñ äðóãîé –
ïàòîãåííîñòüþ øòàììà [5]. Ê íàñòîÿùåìó âðåìåíè óñòàíîâëåíî, ÷òî îäíèì èç ìåõàíèçìîâ óñêîëüçàíèÿ âèðóñà îò äåéñòâèÿ çàùèòíûõ ôàêòîðîâ
îðãàíèçìà ÿâëÿåòñÿ èíòåãðàöèÿ âèðóñíîãî ãåíîìà â ãåíîì ïîðàæåííîé êëåòêè, ÷òî ìîæåò ïðèâåñòè ê åå ãåíåòè÷åñêîé íåñòàáèëüíîñòè [3, 5, 11].
Íàðóøåíèÿ ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè ñèñòåì
êîíòðîëÿ è ïîääåðæàíèÿ ãåíåòè÷åñêîãî ãîìåîñòàçà íà êëåòî÷íîì è ìîëåêóëÿðíîì óðîâíÿõ
âñëåäñòâèå ïîâðåæäàþùåãî äåéñòâèÿ âèðóñíîãî
àãåíòà îáóñëîâëèâàþò âûñîêèé ðèñê âîçíèêíîâåíèÿ õðîìîñîìíûõ àáåððàöèé è, êàê ñëåäñòâèå,
66
ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÑÎ ÐÀÌÍ, ¹ 4 (110), 2003 ã.
Èññëåäîâàíèå àêòèâíîñòè ýêñöèçèîííîé ðåïàðàöèîííîé ñèñòåìû ÄÍÊ ëèìôîöèòàðíûõ
êëåòîê, èíäóöèðîâàííîé óëüòðàôèîëåòîâûì îáëó÷åíèåì, ïðîâîäèëè ìåòîäîì ñöèíòèëëÿöèîííîé ðàäèîìåòðèè [6].  êàæäîì ñëó÷àå 50 ìêë öåëüíîé ãåïàðèíèçèðîâàííîé êðîâè îáëó÷àëè â òå÷åíèå 15 ñ äâóìÿ óëüòðàôèîëåòîâûìè ëàìïàìè
ÄÁ-15 ïðè äîçå è ìîùíîñòè èçëó÷åíèÿ 15 Äæ/ì2
è 1,6 Äæ/ñ/ì2 ñîîòâåòñòâåííî.  êà÷åñòâå êîíòðîëÿ èñïîëüçîâàëè íåîáëó÷åííóþ êðîâü. Ïðîáû
èíêóáèðîâàëè â òå÷åíèå 2 ÷ ïðè 37°Ñ â êóëüòóðàëüíîé ïèòàòåëüíîé ñðåäå, ñîäåðæàùåé 10 ìêÊþðè/ìë ñðåäû (3Í)-òèìèäèíà. Ðàäèîàêòèâíîñòü
èçìåðÿëè ñ ïîìîùüþ ñöèíòèëëÿöèîííîãî ñ÷åò÷èêà Mark-3 (ÑØÀ). Îá èíòåíñèâíîñòè ðåïàðàòèâíîãî ñèíòåçà ÄÍÊ ñóäèëè ïî âåëè÷èíå èíäåêñà ñòèìóëÿöèè (ÈÑ), ïðåäñòàâëÿþùåãî ñîáîé îòíîøåíèå ïîêàçàòåëÿ ðàäèîàêòèâíîñòè (èìïóëüñ/ñ) ïðîáû ïîñëå âîçäåéñòâèÿ óëüòðàôèîëåòîâûì ñâåòîì ê ðàäèîàêòèâíîñòè íåîáëó÷åííûõ
îáðàçöîâ.
Ñòàòèñòè÷åñêóþ îáðàáîòêó ïîëó÷åííûõ äàííûõ ïðîâîäèëè ñ ïîìîùüþ t-êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà è íåïàðàìåòðè÷åñêîãî êðèòåðèÿ Ìàííà–Óèòíè.
Ðåçóëüòàòû. Ìíîãî÷èñëåííûìè èññëåäîâàíèÿìè ïîêàçàíî, ÷òî âîçáóäèòåëè âèðóñíûõ èíôåêöèé, ïîïàäàÿ â îðãàíèçì, ïðèâîäÿò ê ðàçíîîáðàçíûì ïåðåñòðîéêàì õðîìîñîìíîãî àïïàðàòà ëèìôîöèòàðíûõ êëåòîê: îò ñòðóêòóðíûõ èçìåíåíèé îäíîé èëè íåñêîëüêèõ õðîìîñîì äî èçìåíåíèÿ èõ ÷èñëà. Òàê, ïðè ïîëèîìèåëèòå ó äåòåé â ëèìôîöèòàõ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè áûëî
âûÿâëåíî çíà÷èòåëüíîå óâåëè÷åíèå äîëè õðîìàòèäíûõ ðàçðûâîâ [10], âèðóñ ïðîñòîãî ãåðïåñà
èíäóöèðîâàë õðîìàòèäíûå è õðîìîñîìíûå ðàçðûâû [5]. Öèòîãåíåòè÷åñêèå íàðóøåíèÿ èììóíîêîìïåòåíòíûõ êëåòîê îáíàðóæèâàëèñü ó áîëüíûõ êîðüþ [1], ãðèïïîì [7], à òàêæå âèðóñíûì ãåïàòèòîì [11, 14]. Ïðè ýòîì êàêîé-ëèáî êîððåëÿöèè ìåæäó ñïåêòðîì àáåððàöèé õðîìîñîì è âèäîì âèðóñà óñòàíîâëåíî íå áûëî. Ñóùåñòâåííîå
óâåëè÷åíèå ÷èñëà öèòîãåíåòè÷åñêèõ àáåððàöèé â
ëèìôîöèòàõ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè ïðè âèðóñíûõ èíôåêöèÿõ ìîæåò áûòü îáóñëîâëåíî èíòåãðàöèåé íóêëåîòèäíûõ ïîñëåäîâà- òåëüíîñòåé ãåíîìà âèðóñà â ãåíîì êëåòêè [14], ïîâðåæäàþùèì
äåéñòâèåì ïðîòåàç âèðóñîâ, êëåòî÷íûõ ëèçîñîìàëüíûõ íóêëåàç, öèñòåèí-ïðîòåèíàç [2], à òàêæå
èíòåíñèôèêàöèåé ïðîöåññîâ ñâîáîäíîðàäèêàëüíîãî îêèñëåíèÿ áåëêîâ, ëèïèäîâ è íóêëåèíîâûõ
êèñëîò [9].
 ïðîâåäåííîì íàìè öèòîãåíåòè÷åñêîì àíàëèçå ëèìôîöèòîâ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè ó ïàöèåíòîâ ñ ïåðñèñòåíöèåé âèðóñà ÊÝ áåç ÿâíûõ êëèíè÷åñêèõ ïðîÿâëåíèé çàáîëåâàíèÿ áûëî óñòàíîâëåíî äîñòîâåðíîå óâåëè÷åíèå äîëè êëåòîê ñî
ñòðóêòóðíûìè àáåððàöèÿìè õðîìîñîìíîãî àïïàðàòà (ïðèìå÷àòåëüíî, ÷òî êëåòêè ñ èçìåíåí-
õàðàêòåðà õðîìîñîìíûõ àáåððàöèé è ñîñòîÿíèÿ
ñèñòåìû ðåïàðàöèè ÄÍÊ â ëèìôîöèòàõ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè ó ïàöèåíòîâ – íîñèòåëåé âèðóñà
ÊÝ.
Ìåòîäèêà.  èññëåäîâàíèå áûëè âêëþ÷åíû
32 ïàöèåíòà ñ âèðóñîì ÊÝ (13 ìóæ÷èí, 19 æåíùèí) â âîçðàñòå îò 23 äî 50 ëåò. Äèàãíîç êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà âåðèôèöèðîâàëè íà îñíîâàíèè
äàííûõ ýïèäåìèîëîãè÷åñêîãî àíàìíåçà, îöåíêè
íåâðîëîãè÷åñêîãî ñòàòóñà, îïðåäåëåíèÿ óðîâíÿ
ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ê àíòèãåíó âèðóñà êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà ìåòîäàìè íåïðÿìîé ðåàêöèè
ãåìàããëþòèíàöèè è èììóíîôåðìåíòíîãî àíàëèçà, îáíàðóæåíèÿ âèðóñíîé ÐÍÊ ìåòîäîì ïîëèìåðàçíî-öåïíîé ðåàêöèè.  çàâèñèìîñòè îò îñîáåííîñòåé êëèíè÷åñêèõ è ëàáîðàòîðíûõ ïðîÿâëåíèé êëåùåâîé íåéðîèíôåêöèè áûëà âûäåëåíà
ãðóïïà èç 20 ïàöèåíòîâ ñ áåññèìïòîìíûì âèðóñîíîñèòåëüñòâîì (ñóáêëèíè÷åñêàÿ ôîðìà êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà). Ó ëèö, îòíåñåííûõ ê äàííîé
êëèíè÷åñêîé êàòåãîðèè, ïðè îòñóòñòâèè êëèíè÷åñêèõ ñèìïòîìîâ â êðîâè îáíàðóæèâàëàñü âèðóñíàÿ ÐÍÊ. Âòîðóþ ãðóïïó ñîñòàâèëè 12 áîëüíûõ ñ õðîíè÷åñêîé ïîëèîìèåëèòè÷åñêîé ôîðìîé êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà (íåïðîãðåäèåíòíîå
òå÷åíèå, ñòàäèÿ ðåìèññèè). Îñíîâíûìè ïðîÿâëåíèÿìè ïàòîëîãèè áûëè ñòîéêèé àñòåíîâåãåòàòèâíûé ñèíäðîì, óïîðíûå ãîëîâíûå áîëè, áåññîííèöà, ñíèæåíèå ïàìÿòè â òå÷åíèå 12 ìåñ. ïîñëå ïåðåíåñåííîãî îñòðîãî êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà. Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó ñîñòàâèëè 17 ïðàêòè÷åñêè çäîðîâûõ äîíîðîâ ñ ñîïîñòàâèìûìè õàðàêòåðèñòèêàìè ïî ïîëó è âîçðàñòó. Ìàòåðèàëîì
èññëåäîâàíèÿ ÿâëÿëàñü âåíîçíàÿ êðîâü îáñëåäîâàííûõ ëèö, ñòàáèëèçèðîâàííàÿ ãåïàðèíîì (25
ÅÄ/ìë).
Ïðèãîòîâëåíèå ïðåïàðàòîâ äëÿ õðîìîñîìíîãî àíàëèçà ëèìôîöèòîâ ïðîâîäèëè ïî ìåòîäó
P.S. Moorhead è äð. [13]. Äëÿ ýòîãî 1 ìë ãåïàðèíèçèðîâàííîé êðîâè (25 ÅÄ/ìë) ñìåøèâàëè ñ 3
ìë ïèòàòåëüíîé ñðåäû, ñîñòîÿùåé èç 90%
RPMI-1640 (“Sigma”, ÑØÀ), 10% èíàêòèâèðîâàííîé ýìáðèîíàëüíîé òåëÿ÷üåé ñûâîðîòêè,
280 ìã/ìë L-ãëóòàìèíà, 5 ìã/ìë ãåíòàìèöèíà ñ
äîáàâëåíèåì ôèòîãåìàããëþòèíèíà (“Difco”,
Ãåðìàíèÿ) â êîíöåíòðàöèè 0,01 ìã/ìë êóëüòóðàëüíîé ñðåäû. Êóëüòèâèðîâàíèå ëèìôîöèòîâ
ïðîâîäèëè â êóëüòóðàëüíûõ ôëàêîíàõ ïðè 37°Ñ
â òå÷åíèå 52 ÷. Äëÿ íàêîïëåíèÿ êëåòîê â ñòàäèè
ìåòàôàçû âî ôëàêîíû ñ êóëüòóðîé ëèìôîöèòîâ
çà 2 ÷ äî îêîí÷àíèÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ ââîäèëè
ïî 0,25 ìë 0,01% ðàñòâîðà êîëõèöèíà (“Fluka”,
Øâåéöàðèÿ). Ïîëó÷åííûå ïðåïàðàòû îêðàøèâàëè ðàñòâîðîì àçóð II-ýîçèíà â òå÷åíèå 10 ìèí.
Ó êàæäîãî îáñëåäîâàííîãî àíàëèçèðîâàëè 100
ìåòàôàçíûõ ïëàñòèíîê. Ó÷èòûâàëè ÷èñëî êëåòîê ñ õðîìîñîìíûìè íàðóøåíèÿìè, êîëè÷åñòâî
è òèïû õðîìîñîìíûõ àáåððàöèé â ñîîòâåòñòâèè
ñ êëàññèôèêàöèåé [4].
67
ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÑÎ ÐÀÌÍ, ¹ 4 (110), 2003 ã.
íîé õðîíè÷åñêîé àíòèãåíåìèåé (1,25±0,09 ó. å.;
ð<0,01), òàê è ó õðîíè÷åñêèõ âèðóñîíîñèòåëåé ñ
êëèíè÷åñêèìè ïðîÿâëåíèÿìè ÊÝ (1,32±0,17 ó. å.;
ð<0,05) ïî ñðàâíåíèþ ñî ñðåäíèìè çíà÷åíèÿìè
äàííîãî
ïîêàçàòåëÿ, çàðåãèñòðèðîâàííîãî ó
çäîðîâûõ äîíîðîâ (1,91± 0,15 ó. å.). Âåðîÿòíî,
ñíèæåíèå àêòèâíîñòè ÄÍÊ ðåïàðàöèîííîé ñèñòåìû ïðè ïðîëîíãèðîâàííîé ïåðñèñòåíöèè âèðóñà ÊÝ ìîæåò îáóñëîâëèâàòü ïîâûøåííûé óðîâåíü õðîìîñîìíûõ àáåððàöèé â ëèìôîöèòàõ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè. Ïîäîáíûå íàðóøåíèÿ öèòîãåíåòè÷åñêîãî ñòàòóñà èììóíîêîìïåòåíòíûõ
êëåòîê ìîãóò ÿâèòüñÿ ïðè÷èíîé èõ ôóíêöèîíàëüíûõ èçìåíåíèé [7, 8, 14, 15]. Âìåñòå ñ òåì íàëè÷èå íåðåïàðèðóåìûõ ïîâðåæäåíèé ÄÍÊ âûçûâàåò óñèëåíèå ýêñïðåññèè ãåíà ð53, êîòîðûé èíäóöèðóåò ïðîöåññ àïîïòîçà [12], ÷òî çàêîíîìåðíî
ïðèâîäèò ê ýëèìèíàöèè âèðóñèíôèöèðîâàííûõ
êëåòîê. Óñèëåíèå àïîïòîòè÷åñêîé ãèáåëè è ôóíêöèîíàëüíàÿ íåïîëíîöåííîñòü èììóíîêîìïåòåíòíûõ êëåòîê ìîãóò ÿâèòüñÿ ïðè÷èíîé íåàäåêâàòíîñòè èììóííîãî îòâåòà îðãàíèçìà, ÷òî, íå
èñêëþ÷åíî, è ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ôàêòîðîâ, ñïîñîáñòâóþùèì äëèòåëüíîé ïåðñèñòåíöèè âèðóñà
ÊÝ.
Çàêëþ÷åíèå. Òàêèì îáðàçîì, ïîëó÷åííûå
íàìè äàííûå ïîêàçûâàþò, ÷òî, íåñìîòðÿ íà îòñóòñòâèå ÿâíîé êëèíè÷åñêîé ñèìïòîìàòèêè èíôåêöèîííîãî ïðîöåññà, ïåðñèñòåíöèÿ âèðóñà
êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà ñîïðîâîæäàåòñÿ öèòîãåíåòè÷åñêîé íåñòàáèëüíîñòüþ ëèìôîöèòàðíûõ
êëåòîê, ðåãèñòðèðóåìîé êàê íà ìîëåêóëÿðíîì
(ÄÍÊ-ðåïàðàöèîííûé àíàëèç), òàê è íà êëåòî÷íîì (õðîìîñîìíûé àíàëèç) óðîâíÿõ.
íûì êîëè÷åñòâîì õðîìîñîì îòñóòñòâîâàëè).
Àíàëèç ñïåêòðà àáåððàöèé õðîìîñîì âûÿâèë,
÷òî öèòîãåíåòè÷åñêèå íàðóøåíèÿ õðîìàòèäíîãî
òèïà áûëè ïðåäñòàâëåíû îäèíî÷íûìè ôðàãìåíòàìè, à õðîìîñîìíîãî òèïà – ïàðíûìè ôðàãìåíòàìè (òàáë.). Óâåëè÷åíèå ÷èñëà ëèìôîöèòîâ ñ
îäèíî÷íûìè è ïàðíûìè ôðàãìåíòàìè ó àñèìïòîìàòè÷åñêèõ âèðóñîíîñèòåëåé è ó õðîíè÷åñêèõ
íîñèòåëåé âèðóñà ÊÝ ñ ìèíèìàëüíîé êëèíè÷åñêîé ñèìïòîìàòèêîé èíôåêöèè áûëî ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìûì ïî ñðàâíåíèþ ñî ñðåäíèìè çíà÷åíèÿìè äàííûõ ïîêàçàòåëåé ó çäîðîâûõ äîíîðîâ. Îäíàêî äîñòîâåðíûõ ðàçëè÷èé ñïåêòðà õðîìîñîìíûõ àáåððàöèé ìåæäó ãðóïïàìè ïàöèåíòîâ ñ ðàçëè÷íûìè êëèíè÷åñêèìè ôîðìàìè ÊÝ
îáíàðóæåíî íå áûëî (òàáë.).
Ïîäîáíûå íàðóøåíèÿ öèòîãåíåòè÷åñêîãî
ñòàòóñà èììóíîêîìïåòåíòíûõ êëåòîê ìîãóò
áûòü ñâÿçàíû êàê ñ ãåíîòîêñè÷åñêèì ýôôåêòîì
âèðóñà ÊÝ, òàê è ñ íåäîñòàòî÷íîé ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòüþ ñèñòåì ïîääåðæàíèÿ ãåíåòè÷åñêîãî ïîñòîÿíñòâà [7]. Êàê èçâåñòíî, öåëîñòíîñòü
ãåíîìà êîíòðîëèðóåò ñèñòåìà ÄÍÊ-ðåïàðàöèè,
“âûÿâëÿþùàÿ” è “èñïðàâëÿþùàÿ” îøèáêè, êîòîðûå ïðèâîäÿò ê èçìåíåíèÿì ïîñëåäîâàòåëüíîñòè íóêëåîòèäîâ â ÄÍÊ [6, 7].
Ó÷èòûâàÿ âàæíóþ ðîëü ðåïàðàöèîííîé ñèñòåìû ÄÍÊ â ïîääåðæàíèè ñòàáèëüíîñòè öèòîãåíåòè÷åñêîãî ãîìåîñòàçà êëåòêè, íàìè áûëà ïðîâåäåíà îöåíêà àêòèâíîñòè ñèñòåìû ýêñöèçèîííîé ðåïàðàöèè ÄÍÊ ëèìôîöèòîâ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè ó áîëüíûõ ñ ïåðñèñòåíöèåé âèðóñà
ÊÝ. Áûëî âûÿâëåíî äîñòîâåðíîå ñíèæåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé ÈÑ êàê ó ïàöèåíòîâ ñ áåññèìïòîì-
Òàáëèöà
Óðîâåíü õðîìîñîìíûõ àáåððàöèé â ëèìôîöèòàõ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè ó ïàöèåíòîâ
ñ ïåðñèñòåíöèåé âèðóñà êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà (̱m)
Ïîêàçàòåëè
Çäîðîâûå äîíîðû
Äîëÿ àáåððàíòíûõ êëåòîê, %
1,28±0,35
Êîëè÷åñòâî àáåððàöèé
õðîìàòèäíîãî òèïà, %
0,66±0,19
â òîì ÷èñëå:
îäèíî÷íûå ôðàãìåíòû
Õàðàêòåðèñòèêà ãðóïï îáñëåäîâàííûõ ëèö
Ïàöèåíòû ñ áåññèìïòîìíûì
Õðîíè÷åñêèå âèðóñîíîñèòåëè
âèðóñîíîñèòåëüñòâîì
êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà
êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà
ñ êëèíè÷åñêèìè ïðîÿâëåíèÿìè
çàáîëåâàíèÿ
2,86±0,34**
3,13±0,40**
1,42±0,30*
1,75±0,37**
0,66±0,19
1,42±0,30*
1,75±0,37**
Íå îáíàðóæåíû
Íå îáíàðóæåíû
Íå îáíàðóæåíû
Êîëè÷åñòâî àáåððàöèé
õðîìîñîìíîãî òèïà, %
0,65±0,20
1,43±0,48*
1,50±0,38*
â òîì ÷èñëå:
ïàðíûå ôðàãìåíòû
0,65±0,20
1,29±0,26*
1,24±0,22*
êîëüöåâûå õðîìîñîìû
Íå îáíàðóæåíû
íå îáíàðóæåíû
Åäèíè÷íûå
äèöåíòðè÷åñêèå õðîìîñîìû
Íå îáíàðóæåíû
Åäèíè÷íûå
Åäèíè÷íûå
èçîõðîìàòèäíûå îáìåíû
Ïðèìå÷àíèå. * – p<0,05; ** – p<0,01 ïî ñðàâíåíèþ ñ àíàëîãè÷íûìè ïàðàìåòðàìè ó çäîðîâûõ äîíîðîâ; ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìûõ îòëè÷èé ìåæäó èçó÷àåìûìè ïîêàçàòåëÿìè ó ïàöèåíòîâ ñ áåññèìïòîìíûì âèðóñîíîñèòåëüñòâîì è ó õðîíè÷åñêèõ âèðóñîíîñèòåëåé êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà ñ êëèíè÷åñêèìè ïðîÿâëåíèÿìè çàáîëåâàíèÿ âûÿâëåíî íå áûëî.
68
ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÑÎ ÐÀÌÍ, ¹ 4 (110), 2003 ã.
2. Àéçåíçîí Ì.Ã., Àëåêñàíäðîâ Þ.Í., Áóæèåâñêàÿ Ò.È.
Ìóòàãåííîå äåéñòâèå ïðèðîäíûõ è ñèíòåòè÷åñêèõ
ïîëèíóêëåîòèäîâ. Êèåâ, 1990.
3. Àíòîíîâ Ï.Â., Öèíçåðëèíã Â.À. // Àðõèâ ïàòîëîãèè.
2001. Ò. 63. ¹ 1. Ñ. 47–51.
4. Áî÷êîâ Í.Ï., Êóëåøîâ Í.Ï., Æóðêîâ Â.Ñ. // Öèòîëîãèÿ. 1972. Ò. 14. ¹ 10. Ñ. 1267-1273.
5. Áóêðèíñêàÿ À.Ã., Æäàíîâ Â.Ì. Ìîëåêóëÿðíûå îñíîâû ïàòîãåííîñòè âèðóñîâ. Ì., 1991.
6. Çàñóõèíà Ã.Ä. Ðåïàðàòèâíûå ìåõàíèçìû êëåòîê è
ïðîáëåìû îêðóæàþùåé ñðåäû. Ì., 1979.
7. Èëüèíñêèõ Í.Í., Íîâèöêèé Â.Â., Âàí÷óãîâà Í.Í., Èëüèíñêèõ È.Í. Ìèêðîÿäåðíûé àíàëèç è öèòîãåíåòè÷åñêàÿ íåñòàáèëüíîñòü. Òîìñê, 1992.
8. Èñàåâà Ì.Ë., Ëåîíîâà Ã.Í., Êîæåìÿêî Â.Á. // Âîïðîñû âèðóñîëîãèè. 1998. Ò. 43. ¹ 4. Ñ. 182–186.
9. Ìàåäà Õ., Àêàèêå Ò. // Áèîõèìèÿ. 1998. Ò. 63. ¹
7. Ñ. 854–865.
10. Bhatnagar A., Rani R., Ghosh P. // Mutat. Res. 1984.
Vol. 141. ¹ 1. P. 55–58.
11. Jablonska M. // Cas. Lek. Cesk. 1997. Vol. 136. ¹
20. P. 619–623.
12. Jayaraman J., Prives C. // Cell. 1995. Vol. 81. ¹ 7.
P. 1021–1029.
13. Moorhead P.S., Nowell P.S., Mellman W.J. // Exp. Cell.
Res. 1960. ¹ 20. P. 613–618.
14. Sakakura C., Hagiwara A., Taniguchi H. et al. // Brit. J.
Cancer. 1999. Vol. 80. ¹ 12. P. 2034–2039.
15. Uehara T., Miyawaki T., Ohta K. // Blood. 1992. Vol.
80. ¹ 2. P. 452–458.
CYTOGENETICS OF PERIPHERAL BLOOD
LYMPHOCYTES
IN
PATIENTS
WITH
PERSISTENCE BY TICK-BORNE ENCEPHALITIS
VIRUS
V.V. Novitsky, O.B. Zhukova, N.V. Ryazantseva,
A.V. Lepekhin, N.P. Pirogova, O.V. Mikhaylova,
N.N. Plotnikova, N.V. Tokareva, I.O. Naslednikova,
A.P. Hlapov
A research of the chromosomal apparatus of peripheral blood lymphocytes in 20 patients with asymptomatic
carrier state of tick-borne encephalitis virus and 12 patients with minimal clinical symptoms being kept during 12
months was carried out. 17 normal donors composed the
control group. It has been shown that the tick-borne encephalitis virus persistence is followed with changes in cytogenetic indices of lymphocytes. A statistically significant increase in percentage of structural chromosome
aberrations (single and double fragments), reduction of
the excision DNA-repair activity was revealed.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Àâàêîâà À.Í., Ðàïîïîðò Ð.È. // Öèòîëîãèÿ. 1971. Ò.
13. ¹ 7. Ñ. 830–836.
69