отрицательный хронотропный эффект каннабиноидов связан с
advertisement
Âåñòíèê ÒÃÏÓ. 2009. Âûïóñê 3 (81) ÓÄÊ 577.21:616; 577.2:591.2 Ë. Í. Ìàñëîâ, À. Â. Êðûëàòîâ, Î. Â. Ëàñóêîâà, È. Ã. Õàëèóëèí ÎÒÐÈÖÀÒÅËÜÍÛÉ ÕÐÎÍÎÒÐÎÏÍÛÉ ÝÔÔÅÊÒ ÊÀÍÍÀÁÈÍÎÈÄΠÑÂßÇÀÍ Ñ ÀÊÒÈÂÀÖÈÅÉ ÊÀÐÄÈÀËÜÍÛÕ CB1 ÐÅÖÅÏÒÎÐΠÁûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî âíóòðèâåííîå ââåäåíèå êàííàáèíîèäîâ (ACPA, àíàíäàìèä, ìåòàíàíäàìèä), ðàñòâîðåííûõ â ñìåñè (cremophore EL : ýòàíîë : 0.9 % NaCl, 1:1:18), è âîäîðàñòâîðèìàÿ ýìóëüñèÿ ýòèõ æå êàííàáèíîèäîâ êîìïàíèè Tocris âûçûâàåò àáñîëþòíî èäåíòè÷íûé îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò ó êðûñ, íàðêîòèçèðîâàííûõ õëîðàëîçîé. Ñåëåêòèâíûé àãîíèñò ÑÂ1 è ÑÂ2 ðåöåïòîðîâ HU-210 (0,1 ìã/êã) òàêæå èíäóöèðóåò îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò ó êðûñ. Ïðåäâàðèòåëüíîå ââåäåíèå àíòàãîíèñòà ÑÂ1 ðåöåïòîðîâ SR141716A (1 ìã/êã) ïîëíîñòüþ óñòðàíÿåò ýòîò ýôôåêò HU-210. Ñåëåêòèâíûé àíòàãîíèñò ÑÂ2 ðåöåïòîðîâ SR144528 (1 ìã/êã) íå îêàçûâàåò íèêàêîãî ýôôåêòà íà HU-210- èíäóöèðîâàííóþ áðàäèêàðäèþ. Ïðåäâàðèòåëüíîå ââåäåíèå ãàíãëèîáëîêàòîðà ãåêñàìåòîíèÿ (10 ìã/êã) òàêæå íå óñòðàíÿåò îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò HU-210 è ACPA. Ïåðôóçèÿ (10 ìèí) èçîëèðîâàííîãî ñåðäöà êðûñû ðàñòâîðîì Êðåáñà-Õåíçåëàéòà, ñîäåðæàùèì HU-210 â êîíå÷íîé êîíöåíòðàöèè 100 íÌ âûçûâàëà ñíèæåíèå ÷àñòîòû ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé. Äåëàþò âûâîä, ÷òî îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò êàííàáèíîèäîâ îïîñðåäîâàí ÷åðåç àêòèâàöèþ êàðäèàëüíûõ ÑÂ1 ðåöåïòîðîâ. Êëþ÷åâûå ñëîâà: êàííàáèíîèäû, ðèòì ñåðäöà. Êàííàáèíîèäíûå (ÑÂ) ðåöåïòîðû ïðèíàäëåæàò ê ñóïåðñåìåéñòâó G-áåëîê ñîïðÿæåííûõ ðåöåïòîðîâ. Ýòè ðåöåïòîðû äåëÿòñÿ íà äâà òèïà: ÑÂ1 è ÑÂ2. Àêòèâàöèÿ êëîíèðîâàííûõ Ñ ðåöåïòîðîâ ïðèâîäèò ê ñíèæåíèþ àêòèâíîñòè àäåíèëàòöèêëàçû [1].  90-õ ãîäàõ ïðîøëîãî ñòîëåòèÿ áûëè èäåíòèôèöèðîâàíû ýíäîãåííûå àãîíèñòû Ñ ðåöåïòîðîâ: àðàõèäîíîèëýòàíîëàìèä (àíàíäàìèä) è 2-àðàõèäîíîèëãëèöåðîë. Çàèíòåðåñîâàííûé ÷èòàòåëü ìîæåò íàéòè áîëåå ïîäðîáíóþ èíôîðìàöèþ îá ýòèõ ðåöåïòîðàõ â ñîîòâåòñòâóþùèõ îáçîðàõ [2, 3]. Ñðàâíèòåëüíî íåäàâíî, â 2003 ã. ÑÂ1 ðåöåïòîðû áûëè îáíàðóæåíû â ìèîêàðäå [4]. Îäíàêî ðîëü ýòèõ ðåöåïòîðîâ â ðåãóëÿöèè ôóíêöèîíàëüíîãî ñîñòîÿíèÿ ñåðäöà îñòàåòñÿ íå âïîëíå ïîíÿòíîé.  1996 ã. H. Vidrio è ñîàâò. [5] áûëè ïîëó÷åíû äàííûå î òîì, ÷òî ñåëåêòèâíûé ÑÂ-àãîíèñò HU-210 ïðè âíóòðèâåííîì ââåäåíèè âûçûâàåò ó êðûñ ñòîéêóþ áðàäèêàðäèþ. Îñòàâàëîñü íåÿñíûì – ñâÿçàí ëè ýòîò ýôôåêò ñ àêòèâàöèåé Ñ ðåöåïòîðîâ. Åñëè ñâÿçàí, òî ãäå â îðãàíèçìå íàõîäÿòñÿ Ñ ðåöåïòîðû, ðåãóëèðóþùèå ðèòì ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé. Öåëü ðàáîòû: âûÿñíèòü ðåöåïòîðíóþ ïðèðîäó îòðèöàòåëüíîãî õðîíîòðîïíîãî ýôôåêòà êàííàáèíîèäîâ è îïðåäåëèòü ëîêàëèçàöèþ Ñ ðåöåïòîðîâ, ðåãóëèðóþùèõ ðèòì ñåðäöà. Ìåòîäèêà Èññëåäîâàíèå ñîñòîÿëî èç äâóõ ðàçäåëîâ. Ïåðâûé ôðàãìåíò ðàáîòû (ýêñïåðèìåíòû in vivo) áûë âûïîëíåí íà êðûñàõ ëèíèè Âèñòàð ìàññîé 200–250 ã, íàðêîòèçèðîâàííûõ α-õëîðàëîçîé â äîçå 50 ìã/êã âíóòðèáðþøèííî. Âòîðîé ðàçäåë ðàáîòû áûë âûïîëíåí íà èçîëèðîâàííûõ ïåðôóçèðóåìûõ ñåðäöàõ ýòèõ æèâîòíûõ (ýêñïåðèìåíòû in vitro). Ýêñïåðèìåíòû in vivo. ÝÊà ðåãèñòðèðîâàëè âî âòîðîì ãðóäíîì îòâåäåíèè ñ ïîìîùüþ óñèëèòåëÿ áèîïîòåíöèàëîâ (ÓÁÔ4-03, Ðîññèÿ) è êîìïüþòåðà Pentium ñ èñïîëüçîâàíèåì îðèãèíàëüíîãî ïàêåòà ïðèêëàäíûõ ïðîãðàìì ïî îáðàáîòêå ÝÊÃ. Çàïèñü ÝÊà îñóùåñòâëÿëè â òå÷åíèå 15 ìèí ïîñëå èíúåêöèè ÑÂàãîíèñòîâ è â òå÷åíèå 25 ìèí ïîñëå âíóòðèâåííîãî ââåäåíèÿ ÑÂ-àíòàãîíèñòîâ. ×àñòîòó ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé (×ÑÑ) îïðåäåëÿëè ñ ïîìîùüþ ÝÊÃ. Æèâîòíûì âíóòðèâåííî áîëþñîì ââîäèëè ñëåäóþùèå àãîíèñòû Ñ ðåöåïòîðîâ: ñåëåêòèâíûé àãîíèñò ÑÂ1 è ÑÂ2 ðåöåïòîðîâ HU-210 ((6aR)-trans-3-(1,1Dimethylheptyl)-6a,7,10,10a-tetrahydro-1-hydroxy-6,6dimethyl-6H-dibenzo[b,d] pyran-9-methanol) [2, 3] â äîçå 0.1 ìã/êã (100 ìêã/êã); ñåëåêòèâíûé ÑÂ1-àãîíèñò ACPA (arachydonylcyclopropylamide) [2, 3] â äîçå 0.125 ìã/êã; ýíäîãåííûé ÑÂ-àãîíèñò àíàíäàìèä [2, 3] â äîçå 2.5 ìã/êã; ýíçèìîðåçèñòåíòíûé ñèíòåòè÷åñêèé àíàëîã àíàíäàìèäà, ÿâëÿþùèéñÿ ñåëåêòèâíûì àãîíèñòîì ÑÂ1-ðåöåïòîðîâ ìåòàíàíäàìèä ((R)-N-(2hydroxy-1-methylethyl)-5Z,8Z,11Z,14Zeicosatetraenamide) â äîçå 2.5 ìã/êã [2, 3].  ðàáîòå áûëè èñïîëüçîâàíû ñëåäóþùèå àíòàãîíèñòû Ñ ðåöåïòîðîâ: ñåëåêòèâíûé ÑÂ1-àíòàãîíèñò SR141716A (N-[piperidin-1-yl]-1-[1,2-dichlorophenyl]-4-methyl-1Hpyrazole-3-caboxamid HCl) [2, 3] â äîçå 1 ìã/êã è ñåëåêòèâíûé ÑÂ2-àíòàãîíèñò SR144528 (N-(1S)-endo1,3,3-trimethylbicyclo [2.2.1]hepta-2-yl]-5-(4-chloro-3methylphenyl)-1-(4-methyl-benzyl)-pyrazole-3carboxamide) [2, 3] â äîçå 1 ìã/êã, êîòîðûå òàêæå ââîäèëè âíóòðèâåííî çà 10 ìèí äî èíúåêöèè êàííàáèíîèäîâ. Áëîêàòîð ïåðèôåðè÷åñêèõ âåãåòàòèâíûõ ãàíãëèåâ ãåêñàìåòîíèé ìû ïðèìåíÿëè â äîçå 10 ìã/êã âíóòðèâåííî çà 10 ìèí äî êàííàáèíîèäîâ. Ëèãàíäû Ñ ðåöåïòîðîâ ex tempore ðàñòâîðÿëè â ñìåñè cremophore EL : ýòàíîë : 0.9 % ðàñòâîð NaCl (1:1:18). Êðîìå òîãî, â ðÿäå ñåðèé áûëè èñïîëüçîâàíû âîäîðàñòâîðèìûå ýìóëüñèè, ñîäåðæàùèå ACPA, àíàíäàìèä, ìåòàíàíäàìèä. Ãåêñàìåòîíèé ðàñòâîðÿëè â ⎯ 36 ⎯ Ë. Í. Ìàñëîâ, À. Â. Êðûëàòîâ, Î. Â. Ëàñóêîâà, È. Ã. Õàëèóëèí. Îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé... 0.9 % NaCl. Ïðè âûáîðå äîç è êîíöåíòðàöèé ïðåïàðàòîâ ìû ðóêîâîäñòâîâàëèñü ëèòåðàòóðíûìè äàííûìè [2– 6] è ðåçóëüòàòàìè ñîáñòâåííûõ èññëåäîâàíèé [7]. Ýêñïåðèìåíòû in vitro. Ýòè ýêñïåðèìåíòû ïðîâîäèëè íà êðûñàõ-ñàìöàõ ëèíèè Âèñòàð ìàññîé 250– 300 ã. Ïîñëå òîðàêîòîìèè ñåðäöå áûñòðî èçâëåêàëè è ïåðåíîñèëè â îõëàæäåííûé (+4 °Ñ) ðàñòâîð Êðåáñà– Õåíçåëàéòà äî ïðåêðàùåíèÿ ñïîíòàííûõ ñîêðàùåíèé. Ïîñëå îñòàíîâêè ñåðäöå ïîìåùàëè â àïïàðàò Ëàíãåíäîðôà. Ðåòðîãðàäíóþ ïåðôóçèþ ñåðäöà ïðîâîäèëè ïî ìåòîäó Ëàíãåíäîðôà ïî îòêðûòîìó êîíòóðó. Ñîêðàòèòåëüíóþ ôóíêöèþ ñåðäöà ðåãèñòðèðîâàëè ïðè ïåðôóçèè ïîä ïîñòîÿííûì äàâëåíèåì 52 ìì ðò. ñò. ðàñòâîðîì Êðåáñà–Õåíçåëàéòà, íàñûùåííûì êàðáîãåíîì (+37 °Ñ, ðÍ=7.4) è ñîäåðæàùèì (â ìÌ): NaCl – 120; KCl – 4.8; CaCl – 2.0; MgSO4 – 1.2; KH2PO4 – 1.2; NaHCO3 – 20.0; ãëþêîçà – 10.0. Ñòèìóëÿöèþ êàðäèàëüíûõ Ñ ðåöåïòîðîâ îñóùåñòâëÿëè ñ ïîìîùüþ 10-ìèíóòíîé ïåðôóçèè ñåðäöà ðàñòâîðîì Êðåáñà– Õåíçåëàéòà, ñîäåðæàùèì HU-210 â êîíöåíòðàöèè 100 íÌ/ë (38 ìêã/êã). ×àñòîòó ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé îïðåäåëÿëè ïî äàííûì ÝÊà òðè ðàçà: (1) ñðàçó ïîñëå 20-ìèíóòíîãî ñòàáèëèçàöèîííîãî ïåðèîäà; (2) ïîñëå 10 ìèí ïåðôóçèè ñ HU-210; (3) ÷åðåç 10 ìèí ïîñëå ïåðôóçèè áåç ïðåïàðàòà («îòìûâêà» èçîëèðîâàííîãî ñåðäöà). Ïðåïàðàò ðàçâîäèëè â äèìåòèëñóëüôîêñèäå (DMSO) íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä ýêñïåðèìåíòîì.  õîäå ïðåäâàðèòåëüíûõ ýêñïåðèìåíòîâ íàìè áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî DMSO â êîíöåíòðàöèè 10 ìêã/ë, êîòîðóþ ìû èñïîëüçîâàëè äëÿ ðàñòâîðåíèÿ HU-210, íå âëèÿåò íè íà ñåðäå÷íûé ðèòì, íè íà ñîêðàòèìîñòü ìèîêàðäà. Êîíòðîëåì ñëóæèëè èçîëèðîâàííûå ñåðäöà êðûñ, êîòîðûå ïåðôóçèðîâàëè ðàñòâîðîì Êðåáñà– Õåíçåëàéòà, ñîäåðæàùèì DMSO â êîíå÷íîé êîíöåíòðàöèè 10 ìêã/ë ïî òîé æå ñõåìå, ÷òî è HU-210. Ïðè âûáîðå êîíöåíòðàöèè HU-210 ìû ðóêîâîäñòâîâàëèñü äàííûìè ëèòåðàòóðû [2] è ðåçóëüòàòàìè ñîáñòâåííûõ èññëåäîâàíèé [8]. Àãîíèñòû êàííàáèíîèäíûõ ðåöåïòîðîâ è âîäîðàñòâîðèìàÿ ýìóëüñèÿ êàííàáèíîèäîâ áûëè ñèíòåçèðîâàíû è ïðåäîñòàâëåíû êîìïàíèåé Tocris Cookson Ltd. (Bristol, Âåëèêîáðèòàíèÿ). Àíòàãîíèñòû ÑÂ-ðåöåïòîðîâ áûëè ñèíòåçèðîâàíû â Research Triangle Institute (Research Triangle Park, ÑØÀ) è ïðåäîñòàâëåíû äð. K. J. Gormley èç National Institute on Drug Abuse (NIDA, Bethesda, ÑØÀ).  êîìïàíèè Sigma-Aldrich (St. Louis, ÑØÀ) áûëè ïðèîáðåòåíû ãåêñàìåòîíèé, êðåìîôîð EL è DMSO. Ðåàãåíòû, èñïîëüçîâàííûå äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ðàñòâîðà Êðåáñà–Õåíçåëàéòà, áûëè çàêóïëåíû â êîìïàíèè ICN Biomedicals (Irvine, ÑØÀ). Âñå èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëèñü ñëåïûì ìåòîäîì. Îäèí ýêñïåðèìåíòàòîð ãîòîâèë ðàñòâîðû ïðåïàðàòîâ, à äðóãîé èõ ïðèìåíÿë, íå çíàÿ, êàêîå ñîåäèíåíèå îí äîáàâëÿåò â ïåðôóçèîííûé ðàñòâîð èëè ââîäèò âíóòðèâåííî. Ðåçóëüòàòû îáðàáàòûâàëè ñòàòèñòè÷åñêè ñ èñïîëüçîâàíèåì t-êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà è êðèòåðèÿ Óèëêîêñîíà–Ìàííà–Óèòíè. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ Âíóòðèâåííîå ââåäåíèå HU-210 âûçûâàëî ó íàðêîòèçèðîâàííûõ êðûñ ñòîéêóþ áðàäèêàðäèþ (ðèñ. 1, à). Óæå ÷åðåç 5 ìèí ïîñëå èíúåêöèè ýòîãî ïðåïàðàòà îòìå÷àëîñü ñíèæåíèå ×ÑÑ íà 28 % ïî ñðàâíåíèþ ñ èñõîäíûìè çíà÷åíèÿìè. Àíàëîãè÷íûé ýôôåêò HU-210 îòìå÷àëè H. Vidrio è ñîàâò. [5]. Ðàñòâîðèòåëü (êðåìîôîð EL + ýòàíîë + 0.9 % ðàñòâîð NaCl) íå âëèÿë íà ×ÑÑ. Ñåëåêòèâíûé ÑÂ1-àãîíèñò ACPA â äîçå 0.125 ЧСС, % * 100 *** ** * ** *** ** *** *** *** 0 5 мин 10 мин 15 мин Растворитель HU-210 ACPA Анандамид Мет-анандамид Ðèñ.1, à. Äèíàìèêà èçìåíåíèÿ ×ÑÑ ïîñëå âíóòðèâåííîãî ââåäåíèÿ àãîíèñòîâ êàííàáèíîèäíûõ ðåöåïòîðîâ: HU-210 (0.1ìã/êã, n=8), ACPA (0.125 ìã/êã, n=7), àíàíäàìèä (2.5 ìã/êã, n=7), ìåò-àíàíäàìèä (2.5 ìã/êã, n=7) è ðàñòâîðèòåëÿ (cremophore EL + ýòàíîë + 0.9 % ðàñòâîð NaCl, n=13). Çíà÷åíèÿ âûðàæåíû â ïðîöåíòàõ ïî îòíîøåíèþ ê ×ÑÑ äî ââåäåíèÿ ïðåïàðàòîâ. Èñõîäíàÿ ×ÑÑ ïðèíÿòà çà 100 %. * – äîñòîâåðíîñòü îòíîñèòåëüíî èñõîäíûõ çíà÷åíèé ð<0.01, ** – ð<0.001, *** – ð<0.0001 ЧСС, % 100 0 5 мин HU-210 10 мин ACPA 15 мин Анандамид Мет-анандамид Ðèñ. 1, á. Äèíàìèêà èçìåíåíèÿ ×ÑÑ ïîñëå âíóòðèâåííîãî ââåäåíèÿ àãîíèñòîâ êàííàáèíîèäíûõ ðåöåïòîðîâ: HU-210 (0.1ìã/êã, n=8) è âîäîðàñòâîðèìûå ýìóëüñèè ACPA (0.125 ìã/êã, n=7), àíàíäàìèä (2.5 ìã/êã, n=7), ìåò-àíàíäàìèä (2.5 ìã/êã, n=7). Çíà÷åíèÿ âûðàæåíû â ïðîöåíòàõ ïî îòíîøåíèþ ê ×ÑÑ äî ââåäåíèÿ ïðåïàðàòîâ. Èñõîäíàÿ ×ÑÑ ïðèíÿòà çà 100 %. * – äîñòîâåðíîñòü îòíîñèòåëüíî èñõîäíûõ çíà÷åíèé ð<0.01, ** – ð<0.001, *** ð<0.0001 ⎯ 37 ⎯ Âåñòíèê ÒÃÏÓ. 2009. Âûïóñê 3 (81) ìã/êã òàêæå âûçûâàë áðàäèêàðäèþ (–8 % íà 15-é ìèíóòå ïîñëå èíúåêöèè). Îäíàêî ýôôåêò ýòîãî êàííàáèíîèäà áûë ñëàáåå, ÷åì ó HU-210 è ôèêñèðîâàëñÿ òîëüêî íà 15-é ìèíóòå ïîñëå èíúåêöèè. Âîäîðàñòâîðèìàÿ ýìóëüñèÿ ACPA äåéñòâîâàëà íåñêîëüêî ñèëüíåå, ÷åì ðàñòâîð ACPA â êðåìîôîðå, íî ñëàáåå ÷åì HU-210 (ðèñ. 1, á). Ðàñòâîð àíàíäàìèäà (2.5 ìã/êã) â êðåìîôîðå ïðè âíóòðèâåííîì ââåäåíèè âûçûâàë äîñòîâåðíîå ñíèæåíèå ×ÑÑ óæå ÷åðåç 5 ìèí ïîñëå èíúåêöèè (–7 %), à ÷åðåç 10 ìèí ÷àñòîòà ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé áûëà íà 9 % íèæå èñõîäíûõ çíà÷åíèé. Âîäîðàñòâîðèìàÿ ýìóëüñèÿ ýòîãî êàííàáèíîèäà èíäóöèðîâàëà óìåíüøåíèå ×ÑÑ íà 10-é ìèíóòå ïîñëå âíóòðèâåííîãî ââåäåíèÿ (–9 %) (ðèñ. 1, á). Ïîñëå âíóòðèâåííîé èíúåêöèè ìåòàíàíäàìèäà (2.5 ìã/êã), ðàñòâîðåííîãî â êðåìîôîðå, áðàäèêàðäèÿ (–8 %) ôèêñèðîâàëàñü ÷åðåç 10 ìèí ïîñëå ïðèìåíåíèÿ ïðåïàðàòà. Âîäîðàñòâîðèìàÿ ýìóëüñèÿ ìåòàíàíäàìèäà îêàçûâàëà ïðàêòè÷åñêè èäåíòè÷íûé ýôôåêò (ðèñ. 1, á).  ýòîì ñëó÷àå ×ÑÑ ñíèæàëàñü íà 8 % íà 10-é ìèíóòå íàáëþäåíèÿ è íà 9 % íà 15-é ìèíóòå ïîñëå èíúåêöèè. Íà ïåðâûé âçãëÿä, àíàíäàìèä è ìåòàíàíäàìèä îêàçûâàëè áîëåå âûðàæåííûé îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò, ÷åì ACPA.  äåéñòâèòåëüíîñòè ACPA äåéñòâîâàë ñèëüíåå, ÷åì íàçâàííûå êàííàáèíîèäû, ïîñêîëüêó àíàíäàìèä è ìåòàíàíäàìèä âûçâàëè áðàäèêàðäèþ â äîçå 2.5 ìã/êã, à ACPA èíäóöèðîâàë ñíèæåíèå ×ÑÑ â äîçå 0.125 ìã/êã, ÷òî â 20 ðàç ìåíüøå äîçû 2.5 ìã/ êã. Ïðåïàðàò HU-210 íå âëèÿë íà ñåðäå÷íûé ðèòì â óñëîâèÿõ áëîêàäû ÑÂ1 ðåöåïòîðîâ ñ ïîìîùüþ ñåëåêòèâíîãî ÑÂ1-àíòàãîíèñòà SR141716A (ðèñ. 2, à).  òî æå âðåìÿ îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò HU-210 ñîõðàíÿåòñÿ ïîñëå ñåëåêòèâíîãî èíãèáèðîâàíèÿ ÑÂ2 ðåöåïòîðîâ ñ ïîìîùüþ ÑÂ2-àíàãîíèñòà SR144528 (ðèñ. 2, à). Ñàìè èíãèáèòîðû êàííàáèíîèäíûõ ðåöåïòîðîâ íå âëèÿëè íà ×ÑÑ (äàííûå íå ïðåäñòàâëåíû íà ðèñóíêå). Îñòàëîñü îòâåòèòü íà âîïðîñ, ãäå â îðãàíèçìå íàõîäÿòñÿ êàííàáèíîèäíûå ðåöåïòîðû, ðåãóëèðóþùèå ðèòì ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé? Ãåêñàìåòîíèé ìû ââîäèëè çà 10 ìèí äî èíúåêöèè HU-210 è ACPA. Îêàçàëîñü, ÷òî ãàíãëèîáëîêàòîð íå óñòðàíÿåò îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò ýòèõ êàííàáèíîèäîâ (ðèñ. 2, á). Ñàì ãåêñàìåòîíèé âûçâàë ñíèæåíèå ×ÑÑ íà 7% òîëüêî íà 10-é ìèíóòå ïîñëå èíúåêöèè, ÷åðåç 15 ìèí ñåðäå÷íûé ðèòì âîçâðàùàëñÿ ê èñõîäíûì çíà÷åíèÿì (äàííûå íå ïðåäñòàâëåíû íà ðèñóíêå). Ïîñêîëüêó â ñëó÷àå ñîâìåñòíîãî ïðèìåíåíèÿ ãàíãëèîáëîêàòîðà è êàííàáèíîèäîâ ðåãèñòðàöèÿ ÝÊà ïðîâîäèëàñü íà 15-é ìèíóòå ïîñëå èíúåêöèè N-õîëèíîáëîêàòîðà, òî ñîáñòâåííûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò ãåêñàìåòîíèè íèêàê íå ìîã ïîâëèÿòü íà êîíå÷íûé ðåçóëüòàò. Ñëåäîâàòåëüíî, îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò HU-210 è ACPA íå çàâèñèò îò âåãåòàòèâíîé íåðâíîé ñèñòåìû.  ýêñïåðèìåíòàõ íà èçîëèðîâàííîì ñåðäöå ìû èñïîëüçîâàëè HU-210 â êîíå÷íîé êîíöåíòðàöèè 100 íÌ/ë (38 ìêã/ë), êîòîðàÿ ñîïîñòàâèìà ñ äîçîé HU- ЧСС,% * 100 0 5 мин ** 10 мин SR141716+HU-210 15 мин SR144528+HU-210 Ðèñ. 2, à. Äèíàìèêà èçìåíåíèÿ ×ÑÑ ïîñëå ïîñëåäîâàòåëüíîãî âíóòðèâåííîãî ââåäåíèÿ áëîêàòîðîâ êàííàáèíîèäíûõ ÑÂ1 è ÑÂ2 ðåöåïòîðîâ (SR141716 è SR144528 ñîîòâåòñòâåííî n = 13 è n= 13) â äîçå 1 ìã/êã è êàííàáèíîèäà HU-210 (0.1 ìã/êã, n=11). Çíà÷åíèÿ âûðàæåíû â ïðîöåíòàõ ïî îòíîøåíèþ ê ×ÑÑ äî ââåäåíèÿ ïðåïàðàòîâ. Èñõîäíàÿ ×ÑÑ ïðèíÿòà çà 100 %. * – äîñòîâåðíîñòü îòíîñèòåëüíî èñõîäíûõ çíà÷åíèé ð<0.05, ** – ð<0.01 ЧСС, % 100 0 5 мин 10 мин Гексаметоний+HU-210 15 мин Гексаметоний+ACPA Ðèñ. 2, á. ×àñòîòà ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé ïîñëå âíóòðèâåííîãî ïîñëåäîâàòåëüíîãî ââåäåíèÿ ãåêñàìåòîíèÿ è êàííàáèíîèäîâ: HU-210 (0.1 ìã/êã, n=15) è ÀÑÐÀ (0.125 ìã/êã, n= 11). Çíà÷åíèÿ âûðàæåíû â ïðîöåíòàõ ïî îòíîøåíèþ ê ×ÑÑ äî ââåäåíèÿ ïðåïàðàòîâ. Èñõîäíàÿ ×ÑÑ ïðèíÿòà çà 100 %. * –- äîñòîâåðíîñòü îòíîñèòåëüíî èñõîäíûõ çíà÷åíèé ð<0.05 210 100 ìêã/êã â îïûòàõ in vivo. Ïðè âûáîðå èìåííî ýòîé êîíöåíòðàöèè êàííàáèíîèäà ìû ðóêîâîäñòâîâàëèñü äàííûìè C. C. Felder è ñîàâò. [2] î òîì, ÷òî â óêàçàííîé êîíöåíòðàöèè HU-210 äåéñòâóåò òîëüêî íà Ñ ðåöåïòîðû è íå îêàçûâàåò êàêèõ-ëèáî íåñïåöèôè÷åñêèõ ýôôåêòîâ. Îêàçàëîñü, ÷òî óæå ÷åðåç 10 ìèí ïåðôóçèè èçîëèðîâàííîãî ñåðäöà ðàñòâîðîì ÊðåáñàÕåíçåëàéòà, ñîäåðæàùèì HU-210, ×ÑÑ ñíèæàåòñÿ íà 23 % ïî ñðàâíåíèþ ñ èñõîäíûìè çíà÷åíèÿìè (ðèñ. 2, â). ×åðåç 10 ìèí ïîñëå «îòìûâêè» îò êàííàáèíîèäà áðàäèêàðäèÿ íå òîëüêî íå èñ÷åçàåò, íî äàæå óñèëèâàåòñÿ. ×ÑÑ â ýòîì ñëó÷àå íèæå èñõîäíûõ ïîêàçàòåëåé íà 31 %. ⎯ 38 ⎯ Ë. Í. Ìàñëîâ, À. Â. Êðûëàòîâ, Î. Â. Ëàñóêîâà, È. Ã. Õàëèóëèí. Îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé... 250 ЧСС (уд./мин) 200 150 100 50 0 20 мин адаптации 10 мин 10 мин перфузии перфузии без препаратом препарата Контроль HU-210 (0,1 мкМ ) Ðèñ. 2, â. Èçìåíåíèå ×ÑÑ èçîëèðîâàííîãî ñåðäöà êðûñ êîíòðîëüíîé (ïåðôóçèÿ ðàñòâîðîì Êðåáñà–Õåíçåëàéòà + DMSO, n=20) è îïûòíîé (HU-210 0.1 ìêÌ, n=17) ãðóïï. * – äîñòîâåðíîñòü îòíîñèòåëüíî èñõîäíûõ çíà÷åíèé â ãðóïïå ð<0.05 Îáñóæäåíèå ðåçóëüòàòîâ Òàêèì îáðàçîì, ïî ñïîñîáíîñòè îêàçûâàòü îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò êàííàáèíîèäû âûñòðàèâàëèñü â ðÿä: HU-210 > ACPA > ìåòàíàíäàìèä = àíàíäàìèä. Ïî ñðîäñòâó ê ÑÂ1 ðåöåïòîðàì êàííàáèíîèäû ðàñïîëàãàþòñÿ ñëåäóþùèì îáðàçîì: HU-210 > ACPA > ìåòàíàíäàìèä > àíàíäàìèä [3]. Ñëåäîâàòåëüíî, îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò êàííàáèíîèäîâ, ïî âñåé âèäèìîñòè, ÿâëÿåòñÿ ðåçóëüòàòîì àêòèâàöèè ÑÂ1 ðåöåïòîðîâ. Äàëüíåéøèå ýêñïåðèìåíòû ïîäòâåðäèëè ýòî ïðåäïîëîæåíèå. Îêàçàëîñü, ÷òî HU210 íå âëèÿåò íà ñåðäå÷íûé ðèòì â óñëîâèÿõ áëîêàäû ÑÂ1 ðåöåïòîðîâ, à â óñëîâèÿõ ñåëåêòèâíîãî èíãèáèðîâàíèÿ ÑÂ2 ðåöåïòîðîâ îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò HU-210 ñîõðàíÿåòñÿ. Ñëåäîâàòåëüíî, àêòèâàöèÿ ÑÂ1 ðåöåïòîðîâ ïðèâîäèò ê ñíèæåíèþ ×ÑÑ. Îñòàëîñü îòâåòèòü íà âîïðîñ, ãäå â îðãàíèçìå íàõîäÿòñÿ êàííàáèíîèäíûå ðåöåïòîðû, ðåãóëèðóþùèå ðèòì ñåðäå÷íûõ ñîêðàùåíèé?  êîíöå ïðîøëîãî ñòîëåòèÿ ïðåîáëàäàëè äâå òî÷êè çðåíèÿ î ìåõàíèçìå îòðèöàòåëüíîãî õðîíîòðîïíîãî ýôôåêòà êàííàáèíîèäîâ. Îäíè èññëåäîâàòåëè ïîëàãàëè, ÷òî îí ñâÿçàí ñ àêòèâàöèåé Ñ ðåöåïòîðîâ, ðàñïîëîæåííûõ â âåãåòàòèâíûõ öåíòðàõ ãîëîâíîãî ìîçãà [9, 10], à äðóãèå ñ÷èòàëè, ÷òî ýôôåêò çàâèñèò îò îêêóïàöèè àãîíèñòàìè Ñ ðåöåïòîðîâ, ðàñïîëîæåííûõ ïðåñèíàïòè÷åñêè íà îêîí÷àíèÿõ ñèìïàòè÷åñêèõ íåðâîâ, èííåðâèðóþùèõ ñåðäöå [11]. Ïîëàãàëè, ÷òî àêòèâàöèÿ öåíòðàëüíûõ Ñ ðåöåïòîðîâ ìîæåò âåñòè ê ïîâûøåíèþ òîíè÷åñêîé àêòèâíîñòè âàãóñà è îãðàíè÷åíèþ ñèìïàòè÷åñêîãî âëèÿíèÿ íà ñåðäöå è, ñîîòâåòñòâåííî, ê áðàäèêàðäèè [9, 10].  íàñòîÿùåå âðåìÿ ðàñïðîñòðàíåíà òî÷êà çðåíèÿ î òîì, ÷òî îêêóïàöèÿ ïðåñèíàïòè÷åñêèõ Ñ ðåöåïòîðîâ âåäåò ê îãðàíè÷åíèþ âûáðîñà íîðàäðåíàëèíà èç àäðåíåðãè÷åñêèõ òåðìèíàëåé â ìèîêàðäå è, ñîîòâåòñòâåííî, ê ñíèæåíèþ ×ÑÑ [11]. Îäíàêî â 1996 ã. H. Vidrio è ñîàâò. [5] áûëè ïîëó÷åíû äàííûå î òîì, ÷òî îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò HU-210 ñîõðàíÿåòñÿ â óñëîâèÿõ âàãîòîìèè, à õèìè÷åñêàÿ ñèìïàòýêòîìèÿ äàæå óñèëèâàåò HU-210-èíäóöèðîâàííóþ áðàäèêàðäèþ. Ýòè ôàêòû ïîçâîëèëè H. Vidrio è ñîàâòîðàì óñîìíèòüñÿ â ðåøàþùåé ðîëè âåãåòàòèâíîé íåðâíîé ñèñòåìû â ðåàëèçàöèè îòðèöàòåëüíîãî õðîíîòðîïíîãî ýôôåêòà êàííàáèíîèäîâ [5]. Ìû ïðîäîëæèëè èññëåäîâàíèÿ, íà÷àòûå ìåêñèêàíñêèìè êîëëåãàìè. Äëÿ áëîêàäû ïåðèôåðè÷åñêèõ ñèìïàòè÷åñêèõ è ïàðàñèìïàòè÷åñêèõ ãàíãëèåâ ìû èñïîëüçîâàëè ãåêñàìåòîíèé. Ýòîò ôàðìàêîëîãè÷åñêèé àãåíò, êàê èçâåñòíî, áëîêèðóåò N-õîëèíîðåöåïòîðû â íàçâàííûõ ãàíãëèÿõ è òåì ñàìûì ïðåðûâàåò ñèìïàòè÷åñêóþ ïåðåäà÷ó [6]. Îêàçàëîñü, ÷òî ãàíãëèîáëîêàòîð íå óñòðàíÿåò îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò ýòèõ êàííàáèíîèäîâ. Ñëåäîâàòåëüíî, îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò HU-210 è ACPA íå çàâèñèò îò âåãåòàòèâíîé íåðâíîé ñèñòåìû. Îñòàâàëîñü âûÿñíèòü, ÿâëÿåòñÿ ëè äàííûé ýôôåêò ñëåäñòâèåì ïðÿìîãî äåéñòâèÿ êàííàáèíîèäà íà ñåðäöå èëè æå îí ñâÿçàí ñ èçìåíåíèåì â êðîâè êîíöåíòðàöèè ãóìîðàëüíûõ ôàêòîðîâ (íàïðèìåð àäðåíàëèíà), êîòîðûå ìîãëè áû ïîâëèÿòü íà ñåðäå÷íûé ðèòì. Ïîìî÷ü îòâåòèòü íà ýòîò âîïðîñ ìîãëè áû òîëüêî ýêñïåðèìåíòû íà èçîëèðîâàííîì ïåðôóçèðóåìîì ñåðäöå. Îáùåèçâåñòíî, ÷òî èçîëèðîâàííîå ïåðôóçèðóåìîå ïî Ëàíãåíäîðôó ñåðäöå ÿâëÿåòñÿ äåíåðâèðîâàííûì îðãàíîì, èçîëèðîâàííûì îò âñÿêèõ ãóìîðàëüíûõ âëèÿíèé, ïîòîìó ÷òî åãî ïåðôóçèðóþò îêñèãåíèðîâàííûì ðàñòâîðîì Êðåáñà–Õåíçåëàéòà, à íå êðîâüþ. Òàêîå ñåðäöå ÿâëÿåòñÿ èäåàëüíîé ìîäåëüþ äëÿ èçó÷åíèÿ äåéñòâèÿ ïðåïàðàòîâ íåïîñðåäñòâåííî íà ñåðäöå. Îêàçàëîñü, ÷òî óæå ÷åðåç 10 ìèí ïåðôóçèè èçîëèðîâàííîãî ñåðäöà ðàñòâîðîì, ñîäåðæàùèì HU-210, ðàçâèâàåòñÿ ñòîéêàÿ áðàäèêàðäèÿ. Òàêèì îáðàçîì, ðåçóëüòàòû íàøèõ èññëåäîâàíèé ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò èñïîëüçîâàííûõ íàìè êàííàáèíîèäîâ íå çàâèñèò îò òèïà ðàñòâîðèòåëÿ, ïîñêîëüêó îíè âûçûâàëè ïðàêòè÷åñêè èäåíòè÷íîå ñíèæåíèå ×ÑÑ íåçàâèñèìî îò òîãî, ðàñòâîðÿëè ëè ìû èõ â ñìåñè êðåìîôîðà è ñïèðòà èëè æå äëÿ èõ ðàñòâîðåíèÿ èñïîëüçîâàëè ýìóëüãàòîð, ðàçðàáîòàííûé êîìïàíèåé Tocris Cookson. Îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé ýôôåêò HU-210 ñâÿçàí ñ àêòèâàöèåé ÑÂ1 ðåöåïòîðîâ, ëîêàëèçîâàííûõ â ñåðäöå. Îòíîñèòåëüíî îñòàëüíûõ êàííàáèíîèäîâ ïîäîáíîå óòâåðæäåíèå ìîæåò íîñèòü ëèøü ãèïîòåòè÷åñêèé õàðàêòåð.  ñëó÷àå ñ ñåëåêòèâíûìè ÑÂ1-àãîíèñòàìè ACPA è ìåòàíàíäàìèäîì ýòî ïðåäïîëîæåíèå, ïî âñåé âèäèìîñòè, íîñèò óòâåðäèòåëüíûé õàðàêòåð, ïîñêîëüêó âûðàæåííîñòü îòðèöàòåëüíîãî õðîíîòðîïíîãî ýôôåêòà ýòèõ êàííàáèíîèäîâ íàïðÿìóþ çàâèñèò îò èõ ⎯ 39 ⎯ Âåñòíèê ÒÃÏÓ. 2009. Âûïóñê 3 (81) ñðîäñòâà ê ÑÂ1 ðåöåïòîðàì [3]. Òðóäíåå ñóäèòü î ðåöåïòîðíîé ïðèðîäå àíàíäàìèä-èíäóöèðîâàííîé áðàäèêàðäèè, ïîñêîëüêó ñðîäñòâî ýòîãî êàííàáèíîèäà ê ÑÂ1 ðåöåïòîðàì â 4 ðàçà íèæå ÷åì ó ìåòàíàíäàìèäà [3]. Êðîìå òîãî, àíàíäàìèä â îòëè÷èå îò ìåòàíàíäàìèäà, â êðîâè è òêàíÿõ áûñòðî ïîäâåðãàåòñÿ ýíçèìàòè÷åñêîìó ãèäðîëèçó [2]. Èñõîäÿ èç ýòèõ ïðåäïîñûëîê ìîæíî áûëî áû îæèäàòü, ÷òî ïî ñïîñîáíîñòè èíäóöèðîâàòü ñíèæåíèå ×ÑÑ àðàõèäîíîèëýòàíîëàìèä áóäåò ñóùåñòâåííî óñòóïàòü ìåòàíàíäàìèäó.  äåéñòâèòåëüíîñòè æå îêàçàëîñü, ÷òî ýòè êàííàáèíîèäû îêàçûâàþò ïðàêòè÷åñêè èäåíòè÷íûé îòðèöàòåëüíûé õðîíîò- ðîïíûé ýôôåêò.  ôîðìèðîâàíèè îòðèöàòåëüíîãî õðîíîòðîïíîãî îòâåòà íà èíúåêöèþ àíàíäàìèäà, ïî-âèäèìîìó, ïðèíèìàþò ó÷àñòèå íå òîëüêî ÑÂ1 ðåöåïòîðû, íî è âàíèëëîèäíûå ðåöåïòîðû è òàê íàçûâàåìûå àíàíäàìèäîâûå ðåöåïòîðû, ê êîòîðûì àðàõèäîíîèëýòàíîëàìèä ïðîÿâëÿåò äîñòàòî÷íî âûñîêóþ àôôèííîñòü [2]. Ðàáîòà âûïîëíåíà ïðè ïîääåðæêå ãðàíòà Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî îáðàçîâàíèþ (ðåã. ¹ 2.1.1/ 530), Ðîññèéñêîãî ôîíäà ôóíäàìåíòàëüíûõ èññëåäîâàíèé, Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî íàóêå è èííîâàöèÿì. Ñïèñîê ëèòåðàòóðû 1. Felder C. C., Veluz J. S., Williams H. L. et al. Cannabinoid agonists stimulate both receptor- and non-receptor-mediated signal transduction pathways in cells transfected with and expressing cannabinoid receptor clones // Mol. Pharmacol. 1992. V. 42. Ð. 838–845. 2. Howlett A. C., Barth F., Bonner T. I. et al. International Union of Pharmacology. XXVII. Classification of cannabinoid receptors // Pharmacol. Rev. 2002. 54. N 2. Ð. 161–202. 3. Pertwee R. G. Pharmacology of cannabinoid receptor ligands // Current Med. Chem. 1999. V. 6. Ð. 635–664. 4. Bonz A., Laser M., Kullmer S. et al. Cannabinoids acting on CB1 receptors decrease contractile performance in human atrial muscle // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2003. V. 41. N 4. P. 657–664. 5. Vidrio H. et al. Cardiovascular effects of (-)-11-OH-∆ 8-tetrahydrocannabinol-dimethylheptyl in rats // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1996. V. 28. P. 332–336. 6. Sander G. E., Lowe R. F., Given M. B., Giles T. D. Interactions between circulating peptides and the central nervous system in hemodynamic regulation // Am. J. Cardiol. 1989. V. 64. P. 44C–50C. 7. Êðûëàòîâ À. Â., Áåðíàöêàÿ Í. À., Ìàñëîâ Ë. Í. è äð. Ïîâûøåíèå óñòîé÷èâîñòè ñåðäöà ê àðèòìîãåííûì âîçäåéñòâèÿì è óìåíüøåíèå çîíû èøåìè÷åñêîãî íåêðîçà ìèîêàðäà ïðè àêòèâàöèè êàííàáèíîèäíûõ ðåöåïòîðîâ // Ðîñ. ôèçèîë. æóðí. 2002. Ò. 88. ¹ 5. Ñ. 560–567. 8. Ìàñëîâ Ë. Í., Ëàñóêîâà Î. Â., Êðûëàòîâ À. Â. è äð. Èçìåíåíèå èíîòðîïíîé ôóíêöèè ñåðäöà è ñòåïåíè ïîâðåæäåíèÿ êàðäèîìèîöèòîâ ïðè àêòèâàöèè êàííàáèíîèäíûõ ðåöåïòîðîâ â óñëîâèÿõ èøåìèè è ðåïåðôóçèè // Ðîñ. ôèçèîë. æóðí. 2003. Ò. 89. ¹ 9. Ñ. 1108–1116. 9. Cavero I., Solomon T., Buckley J.P., Jandhyla B. S. Studies on the bradycardia induced by (-)-Ä 9-trans-tetrahydrocannabinol in anesthetized dogs // Eur. J. Pharmacol. 1973. V. 22. N 3. P. 263–269. 10. Volmer R. R., Cavero I., Ertel R. J. et al. Role of central autonomic nervous system in the hypotension and bradycardia induced by (-)-Ä9trans-tetrahydrocannabinol // J. Pharm. Pharmac. 1974. V. 26. N 3. Ð. 186–192. 11. Randall M. D., Harris D., Kendall D. A., Ralevic V. Cardiovascular effects of cannabinoids // Pharmacol. Ther. 2002. V. 95. N 2. Ð. 191–202. Ìàñëîâ Ë. Í., äîêòîð ìåäèöèíñêèõ íàóê, ïðîôåññîð. ÍÈÈ êàðäèîëîãèè ÑÎ ÐÀÌÍ. óë. Êèåâñêàÿ, 111, ã. Òîìñê, Ðîññèÿ, 634012. E-mail: maslov@cardio.tsu.ru Êðûëàòîâ À. Â., êàíäèäàò ìåäèöèíñêèõ íàóê, ñòàðøèé íàó÷íûé ñîòðóäíèê. ÍÈÈ êàðäèîëîãèè ÑÎ ÐÀÌÍ. óë. Êèåâñêàÿ, 111, ã. Òîìñê, Ðîññèÿ, 634012. E-mail: maslov@cardio.tsu.ru Ëàñóêîâà Î. Â., ìëàäøèé íàó÷íûé ñîòðóäíèê. ÍÈÈ êàðäèîëîãèè ÑÎ ÐÀÌÍ. óë. Êèåâñêàÿ, 111, ã. Òîìñê, Ðîññèÿ, 634012. E-mail: maslov@cardio.tsu.ru Õàëèóëèí È. Ã., êàíäèäàò ìåäèöèíñêèõ íàóê. Áðèñòîëüñêèé óíèâåðñèòåò. Университет Вок, Бристоль, BS8 1TD UK. E-mail: I.Khaliulin@bristol.ac.uk Ìàòåðèàë ïîñòóïèë â ðåäàêöèþ 16.01.2009 L. N. Maslov, A. V. Krylatov, O. V. Lasukova, I. G. Khaliulin NEGATIVE CHRONOTROPIC EFFECT OF CANNABINOIDS IS DEPENDED ON THE ACTIVATION OF CARDIAC CB1 RECEPTORS It has been found that intravenous administration of cannabinoids (ACPA, anandamide, methanandamide) solubilized in the mixture (cremophore EL : ethanol : 0.9 % NaCl, 1:1:18) and Tocris water soluble emulsion of the same cannabinoids ⎯ 40 ⎯ Ë. Í. Ìàñëîâ, À. Â. Êðûëàòîâ, Î. Â. Ëàñóêîâà, È. Ã. Õàëèóëèí. Îòðèöàòåëüíûé õðîíîòðîïíûé... induced a completely identical negative chronotropic effect in chloralose-anesthetized rats. The selective CB1 and CB2 receptor agonist HU-210 (0.1 mg/kg) also induced a negative chronotropic effect in rats. Pretreatment with the CB1 receptor antagonist SR141716A (1 mg/kg) completely abolished this effect of HU-210. The CB2 receptor antagonist SR144528 (1 mg/kg) had no effect on the HU-210-induced bradycardia. Pretreatment with the ganglion blocker hexamethonium (10 mg/kg) also did not eliminate a negative chronotropic effect of HU-210 and ACPA. A 10-min perfusion of isolated rat heart by Krebs-Heseleit solution containing HU-210 in a final concentration 100 nM/L induced a decrease in the heart rate. It has been concluded that negative chronotropic effect of cannabinoids is mediated via an activation of cardiac CB1 receptors. Key words: cannabinoids, heart rhythm Maslov L. N. SI RI for cardiology SB RAMS. ul. Kievskaya, 111à, Tomsk, Russia, 634012. E-mail: maslov@cardio.tsu.ru Krylatov A. V. SI RI for cardiology SB RAMS. ul. Kievskaya, 111à, Tomsk, Russia, 634012. E-mail: maslov@cardio.tsu.ru Lasukova O. V. SI RI for cardiology SB RAMS/ ul. Kievskaya, 111à, Tomsk, Russia, 634012. E-mail: maslov@cardio.tsu.ru Khaliulin I. G. University of Bristol. University Walk, Bristol, BS8 1TD UK. E-mail: I.Khaliulin@bristol.ac.uk ⎯ 41 ⎯
