Продукты пищевые. Методы определения количества

ÃÎÑÒ 10444.15—94
Ì Å Æ Ã Î Ñ Ó Ä À Ð Ñ Ò Â Å Í Í Û É
Ñ Ò À Í Ä À Ð Ò
ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ
ÌÅÒÎÄÛ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÀ ÌÅÇÎÔÈËÜÍÛÕ
ÀÝÐÎÁÍÛÕ È ÔÀÊÓËÜÒÀÒÈÂÍÎ-ÀÍÀÝÐÎÁÍÛÕ
ÌÈÊÐÎÎÐÃÀÍÈÇÌÎÂ
ÌÅÆÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÛÉ ÑÎÂÅÒ
ÏÎ ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÇÀÖÈÈ, ÌÅÒÐÎËÎÃÈÈ È ÑÅÐÒÈÔÈÊÀÖÈÈ
Ìèíñê
ÃÎÑÒ 10444.15—94
Ïðåäèñëîâèå
1. ÐÀÇÐÀÁÎÒÀÍ Âñåðîññèéñêèì íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèì èíñòèòóòîì êîíñåðâíîé è îâîùåñóøèëüíîé ïðîìûøëåííîñòè (ÂÍÈÈÊÎÏ) è Òåõíè÷åñêèì êîìèòåòîì ïî ñòàíäàðòèçàöèè ÒÊ 93
«Ïðîäóêòû ïåðåðàáîòêè ïëîäîâ è îâîùåé»
ÂÍÅÑÅÍ Ãîññòàíäàðòîì Ðîññèè
2 ÏÐÈÍßÒ Ìåæãîñóäàðñòâåííûì Ñîâåòîì ïî ñòàíäàðòèçàöèè, ìåòðîëîãèè è ñåðòèôèêàöèè
(ïðîòîêîë ¹ 6 îò 21 îêòÿáðÿ 1994 ã.)
Çà ïðèíÿòèå ïðîãîëîñîâàëè:
Íàèìåíîâàíèå ãîñóäàðñòâà
Àçåðáàéäæàíñêàÿ Ðåñïóáëèêà
Ðåñïóáëèêà Áåëîðóññèÿ
Ðåñïóáëèêà Àðìåíèÿ
Ãðóçèÿ
Ðåñïóáëèêà Êàçàõñòàí
Êèðãèçñêàÿ Ðåñïóáëèêà
Ðîññèéñêàÿ Ôåäåðàöèÿ
Ðåñïóáëèêà Óçáåêèñòàí
Ðåñïóáëèêà Ìîëäîâà
Óêðàèíà
Íàèìåíîâàíèå íàöèîíàëüíîãî îðãàíà ïî ñòàíäàðòèçàöèè
Àçãîññòàíäàðò
Ãîññòàíäàðò Áåëîðóññèè
Àðìãîññòàíäàðò
Ãðóçñòàíäàðò
Ãîññòàíäàðò Ðåñïóáëèêè Êàçàõñòàí
Êèðãèçñòàíäàðò
Ãîññòàíäàðò Ðîññèè
Óçãîññòàíäàðò
Ìîëäîâàñòàíäàðò
Ãîññòàíäàðò Óêðàèíû
3 Ïîñòàíîâëåíèåì Êîìèòåòà Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè ïî ñòàíäàðòèçàöèè, ìåòðîëîãèè è ñåðòèôèêàöèè 21 ôåâðàëÿ 1995 ã. ¹ 77 ìåæãîñóäàðñòâåííûé ñòàíäàðò ÃÎÑÒ 10444.15—94 ââåäåí â äåéñòâèå íåïîñðåäñòâåííî â êà÷åñòâå ãîñóäàðñòâåííîãî ñòàíäàðòà Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè ñ 1 ÿíâàðÿ
1996 ã.
4 ÂÇÀÌÅÍ ÃÎÑÒ 10444.15—75
5. ÏÅÐÅÈÇÄÀÍÈÅ
II
ÃÎÑÒ 10444.15—94
ÑÎÄÅÐÆÀÍÈÅ
1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3 Ñóùíîñòü ìåòîäîâ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4 Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5 Àïïàðàòóðà, ìàòåðèàëû, ðåàêòèâû è ïèòàòåëüíûå ñðåäû . . . . . . . . . . . . . . . .
6 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèé . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7 Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
III
106
.
.
.
.
.
.
.
. . . . . . .. . .
.. . . . . . . ..
. . . . . . . .. .
.. . . . . . . ..
. . . . . . . . .
.. . . . . . . ..
. . . . . . . .. .
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
1
1
1
2
2
2
3
ÃÎÑÒ 10444.15—94
Ì
Å
Æ
Ã
Î
Ñ
Ó
Ä
À
Ð
Ñ
Ò
Â
Å
Í
Í
Û
É
Ñ
Ò
À
Í
Ä
À
Ð
Ò
ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ
Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ
è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ
Food products. Methods for determination of quantity
of mesophilic aerobes and facultative anaerobes
Äàòà ââåäåíèÿ 1996—01—01
1 ÎÁËÀÑÒÜ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß
Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íà ïèùåâûå ïðîäóêòû è óñòàíàâëèâàåò ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ (áàêòåðèé, äðîææåé è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ): ìåòîä ïîñåâà â àãàðèçîâàííûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû è ìåòîä
íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà (ÍÂ×).
Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ ïîñåâîì â àãàðèçîâàííûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû ïðåäíàçíà÷åí äëÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ,
ñîäåðæàùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóêòà áîëåå 150 èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà áîëåå 15 êîëîíèåîáðàçóþùèõ åäèíèö (ÊÎÅ) ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ.
Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ ïðåäíàçíà÷åí äëÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóêòà áîëåå 150 èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà ìåíåå 15 ÊÎÅ ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ.
2 ÍÎÐÌÀÒÈÂÍÛÅ ÑÑÛËÊÈ
 íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå èñïîëüçîâàíû ññûëêè íà ñëåäóþùèå ñòàíäàðòû:
ÃÎÑÒ 6672—75 Ñòåêëà ïîêðîâíûå äëÿ ìèêðîïðåïàðàòîâ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿ
ÃÎÑÒ 9284—75 Ñòåêëà ïðåäìåòíûå äëÿ ìèêðîïðåïàðàòîâ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿ
ÃÎÑÒ 10444.1—84 Êîíñåðâû. Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ ðåàêòèâîâ, êðàñîê, èíäèêàòîðîâ è ïèòàòåëüíûõ ñðåä, ïðèìåíÿåìûõ â ìèêðîáèîëîãè÷åñêîì àíàëèçå
ÃÎÑÒ 24104—88 Âåñû ëàáîðàòîðíûå îáùåãî íàçíà÷åíèÿ è îáðàçöîâûå. Îáùèå òåõíè÷åñêèå
óñëîâèÿ
ÃÎÑÒ 26668—85 Ïðîäóêòû ïèùåâûå è âêóñîâûå. Ìåòîäû îòáîðà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ àíàëèçîâ
ÃÎÑÒ 26669—85 Ïðîäóêòû ïèùåâûå è âêóñîâûå. Ïîäãîòîâêà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ
àíàëèçîâ
ÃÎÑÒ 26670—91 Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Ìåòîäû êóëüòèâèðîâàíèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ
ÃÎÑÒ 30425—97 Êîíñåðâû. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ïðîìûøëåííîé ñòåðèëüíîñòè
3 ÑÓÙÍÎÑÒÜ ÌÅÒÎÄÎÂ
Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ ïîñåâîì â àãàðèçîâàííûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû îñíîâàí íà âûñåâå ïðîäóêòà èëè ðàçâåäåíèÿ íàâåñêè ïðîäóêòà â ïèòàòåëüíóþ ñðåäó, èíêóáèðîâàíèè ïîñåâîâ, ïîäñ÷åòå âñåõ âûðîñøèõ âèäèìûõ êîëîíèé.
107
1
ÃÎÑÒ 10444.15—94
Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ÍÂ× ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ îñíîâàí íà âûñåâå ïðîäóêòà è (èëè) ðàçâåäåíèé íàâåñêè ïðîäóêòà â æèäêóþ ïèòàòåëüíóþ ñðåäó,
èíêóáèðîâàíèè ïîñåâîâ, ó÷åòå âèäèìûõ ïðèçíàêîâ ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ, ïåðåñåâå, ïðè íåîáõîäèìîñòè, êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè íà àãàðèçîâàííûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ, ïîäñ÷åòå èõ êîëè÷åñòâà ñ ïîìîùüþ òàáëèöû ÍÂ×.
4 ÎÒÁÎÐ È ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÏÐÎÁ
Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá — ïî ÃÎÑÒ 26668, ÃÎÑÒ 26669.
5 ÀÏÏÀÐÀÒÓÐÀ, ÌÀÒÅÐÈÀËÛ, ÐÅÀÊÒÈÂÛ È ÏÈÒÀÒÅËÜÍÛÅ ÑÐÅÄÛ
5.1 Äëÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ïðèìåíÿþò àïïàðàòóðó, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû ïî ÃÎÑÒ 10444.1
ñî ñëåäóþùèìè äîïîëíåíèÿìè:
âåñû ëàáîðàòîðíûå îáùåãî íàçíà÷åíèÿ ñ ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè ïî ÃÎÑÒ 24104*
ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ 200 ã, 2-ãî êëàññà òî÷íîñòè (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ðåàêòèâîâ);
âåñû ëàáîðàòîðíûå îáùåãî íàçíà÷åíèÿ ñ ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè ïî ÃÎÑÒ 24104*
ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ 1 êã, 4-ãî êëàññà òî÷íîñòè (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ïðîäóêòà);
ëóïà ñ óâåëè÷åíèåì 5—10×;
ìèêðîñêîï ñâåòîâîé áèîëîãè÷åñêèé ñ óâåëè÷åíèåì 900—1000×;
ïåòëÿ áàêòåðèîëîãè÷åñêàÿ;
ñòåêëà ïðåäìåòíûå ïî ÃÎÑÒ 9284;
ñòåêëà ïîêðîâíûå ïî ÃÎÑÒ 6672;
òåðìîñòàò ñ äèàïàçîíîì ðàáî÷èõ òåìïåðàòóð 28—55 °Ñ, ïîçâîëÿþùèé ïîääåðæèâàòü çàäàííóþ
òåìïåðàòóðó ñ äîïóñòèìîé ïîãðåøíîñòüþ ±1 °Ñ.
5.2 Äëÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ïðèìåíÿþò ïèòàòåëüíûå ñðåäû ïî ÃÎÑÒ 10444.1;
ãëþêîçî-òðèïòîííûé àãàð (áóëüîí);
ìÿñî (ðûáî)-ïåïòîííûé àãàð (áóëüîí);
ìÿñî (ðûáî)-ïåïòîííûé àãàð (áóëüîí) ñ ãëþêîçîé;
ìÿñî (ðûáî)-ïåïòîííûé àãàð (áóëüîí) ñ ãëþêîçîé è äðîææåâûì ýêñòðàêòîì;
ïëîòíóþ ñðåäó Õîòòèíãåðà ñ ãëþêîçîé è äðîææåâûì ýêñòðàêòîì;
ñðåäó èç ñóõîãî ïèòàòåëüíîãî àãàðà;
ñðåäó èç ñóõîãî ïèòàòåëüíîãî àãàðà ñ ãëþêîçîé;
ñðåäó èç ñóõîãî ïèòàòåëüíîãî àãàðà Ä (ñ äðîææåâûì ýêñòðàêòîì).
6 ÏÐÎÂÅÄÅÍÈÅ ÈÑÏÛÒÀÍÈß
6.1 Èç íàâåñêè ïðîäóêòà ãîòîâÿò èñõîäíîå è ðÿä äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé ïî ÃÎÑÒ 26669 òàê,
÷òîáû ìîæíî áûëî îïðåäåëèòü â ïðîäóêòå ïðåäïîëàãàåìîå êîëè÷åñòâî ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ èëè êîëè÷åñòâî, óêàçàííîå â íîðìàòèâíî-òåõíè÷åñêîé äîêóìåíòàöèè íà êîíêðåòíûé ïðîäóêò.
6.2 Ïðè îïðåäåëåíèè êîëè÷åñòâà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ ïîñåâîì â àãàðèçîâàííûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû èç ïðîäóêòà è (èëè) èç êàæäîãî ñîîòâåòñòâóþùåãî ðàçâåäåíèÿ ïî 1 ñì3 âûñåâàþò â äâå ïàðàëëåëüíûå ÷àøêè Ïåòðè. Ïîñåâû çàëèâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670
îäíîé èç àãàðèçîâàííûõ ñðåä ïî ï. 5.2. Åñëè îæèäàþò ïîëçó÷èé ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ èç ðîäîâ
Bacillus èëè Proteus, ïîñåâû çàëèâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670 âòîðûì ñëîåì ïèòàòåëüíîé ñðåäû èëè ãîëîäíîãî
àãàðà (ïðèáëèçèòåëüíî 4 ñì3).
6.3 Ïðè îïðåäåëåíèè êîëè÷åñòâà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ ïî ìåòîäó ÍÂ× âûñåâàþò òðè ïîñëåäîâàòåëüíûå íàâåñêè ïðîäóêòà è (èëè) åãî ðàçâåäåíèÿ,
îòëè÷àþùèåñÿ ïî êîëè÷åñòâó âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà â 10 ðàç.
Êàæäóþ íàâåñêó ïðîäóêòà è (èëè) åãî ðàçâåäåíèÿ â òðåõêðàòíîé ïîâòîðíîñòè âûñåâàþò â êîëáû
èëè ïðîáèðêè ñ îäíîé èç æèäêèõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä ïî ï. 5.2.
Ñîîòíîøåíèå ìåæäó êîëè÷åñòâîì âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèåì è êîëè÷åñòâîì
ïèòàòåëüíîé ñðåäû îò 1 : 5 äî 1 : 7.
* Ñ 01.07.2002 ã. ââîäèòñÿ â äåéñòâèå ÃÎÑÒ 24104—2001.
2
108
ÃÎÑÒ 10444.15—94
6.4 Ïîñåâû ïî ïï. 6.2 è 6.3 èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (30±1) °Ñ â òå÷åíèå (72±3) ÷ â
àýðîáíûõ óñëîâèÿõ.
6.5 Ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ïîñåâîâ ïîäñ÷èòûâàþò êîëè÷åñòâî êîëîíèé, âûðîñøèõ íà ÷àøêàõ
Ïåòðè. Äëÿ ïîäñ÷åòà îòáèðàþò ÷àøêè Ïåòðè, íà êîòîðûõ âûðîñëî îò 15 äî 300 êîëîíèé.
 æèäêèõ ïèòàòåëüíûõ ñðåäàõ îòìå÷àþò íàëè÷èå èëè îòñóòñòâèå âèäèìûõ ïðèçíàêîâ ðîñòà
(ãàçîîáðàçîâàíèå, ïîÿâëåíèå ìóòè, îñàäîê).
Åñëè ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ â æèäêèõ ïèòàòåëüíûõ ñðåäàõ âûðàæåí íåäîñòàòî÷íî ÷åòêî, òî
ïðîâîäÿò ìèêðîñêîïèðîâàíèå ïîñåâîâ ìåòîäîì ðàçäàâëåííîé èëè âèñÿ÷åé êàïëè ñ îäíîâðåìåííûì
ïîäòâåðæäåíèåì âîçìîæíîñòè ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ ïóòåì ïåðåñåâà êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè ïî
ÃÎÑÒ 26670 âíóòðü èëè íà îäíó èç àãàðèçîâàííûõ ñðåä ïî ï. 5.2.
6.6 Ïðè óñòàíîâëåíèè ïðîìûøëåííîé ñòåðèëüíîñòè ïîëíûõ êîíñåðâîâ, ïðè âûÿñíåíèè ïðè÷èí âîçíèêíîâåíèÿ èõ äåôåêòîâ, åñëè íåò ñïåöèàëüíûõ óêàçàíèé â íîðìàòèâíî-òåõíè÷åñêîé äîêóìåíòàöèè, óñòàíàâëèâàþò ìîðôîëîãèþ âûðîñøèõ ìèêðîîðãàíèçìîâ.
Ïðè íåîáõîäèìîñòè èç êîëîíèé ãîòîâÿò ìàçêè, îêðàøèâàþò ïî Ãðàìó (ïî ÃÎÑÒ 30425) è
ìèêðîñêîïèðóþò, îïðåäåëÿþò íàëè÷èå êàòàëàçû (ïî ÃÎÑÒ 30425).
7 ÎÁÐÀÁÎÒÊÀ ÐÅÇÓËÜÒÀÒÎÂ
7.1 Ðåçóëüòàòû îöåíèâàþò ïî êàæäîé ïðîáå îòäåëüíî.
7.2 Ðåçóëüòàòû ïîäñ÷åòà êîëè÷åñòâà êîëîíèé ïî ï. 6.5 ïåðåñ÷èòûâàþò íà 1 ã (ñì3) ïðîäóêòà ïî
ÃÎÑÒ 26670.
Ïðè àíàëèçå êîíñåðâîâ, ïðè íåîáõîäèìîñòè, óêàçûâàþò ðåçóëüòàòû äîïîëíèòåëüíûõ èñïûòàíèé ïî îïðåäåëåíèþ ìîðôîëîãèè âûðîñøèõ ìèêðîîðãàíèçìîâ.
7.3 ÍÂ× ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ îïðåäåëÿþò
ïî êîëè÷åñòâó ïîëîæèòåëüíûõ êîëá (ïðîáèðîê) ïî ÃÎÑÒ 26670.
7.4 Ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ìåçîôèëüíûõ àýðîáíûõ è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ
ìèêðîîðãàíèçìîâ çàïèñûâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670.
109
3
ÃÎÑÒ 10444.15—94
ÌÊÑ 07.100.30
Í59
ÎÊÑÒÓ 9109
Êëþ÷åâûå ñëîâà: àýðîáíûå è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûå ìèêðîîðãàíèçìû, èíêóáèðîâàíèå ïîñåâîâ, ïèòàòåëüíûå ñðåäû, ïëåñíåâûå ãðèáû, äðîææè, ìèêðîñêîïèðîâàíèå, êàòàëàçà
4