Набор реагентов для выявления и типирования вирусов

117587, Москва, Варшавское
ш., д.125ж, к.6
Тел./факс +7 (495) 980-45-55
Е-mail: [email protected]
www.dna-technology.ru
Только для научноисследовательских целей
Набор реагентов для выявления и типирования вирусов папилломы
человека методом полимеразной цепной реакции (HPV)
HPV 16/18 Комплекс
HPV 6/11 Комплекс
Информация о наборе
Назначение:
Набор реагентов HPV предназначен для выявления и типирования вирусов папилломы человека
низкого и высокого канцерогенных рисков (HPV6, 11, 16, 18) методом полимеразной цепной реакции
в режиме реального времени.
Набор выпускается в следующих формах комплектации:
HPV 16/18 Комплекс - предназначен для выявления и типирования вирусов папилломы человека 16
и 18 типов.
HPV 6/11 Комплекс - предназначен для выявления и типирования вирусов папилломы человека 6 и
11 типов.
Метод:
Полимеразная цепная реакция с детекцией результатов в режиме реального времени; качественный
мультиплексный анализ.
Материал для исследования:
Соскобы эпителиальных клеток из цервикального канала, с шейки матки, из уретры.
Выделение ДНК:
Рекомендуются комплекты реагентов для выделения ДНК ПРОБА-ГС, ПРОБА-НК и ПРОБА-РАПИД
(ООО «НПО ДНК-Технология»).
Особенности комплекта:
Одновременная детекция (мультиплексный анализ) — в одной пробирке определяется
несколько ДНК-мишеней.
Внутренний контрольный образец (ВК) – присутствует в каждой пробирке с амплификационной
смесью, необходим для контроля прохождения полимеразной цепной реакции.


Приборное обеспечение:
Амплификаторы детектирующие (ООО «НПО ДНК-Технология») ДТлайт1, ДTпрайм2 и ДТ-96; версия
программного обеспечения не ниже 7.3.4.0, рекомендуемая версия 7.3.5.843
Внимание! Возможность использования других амплификаторов
представителя компании.
Время проведения анализа (с учётом пробоподготовки): от 2,5 ч.
необходимо
уточнить
Количество определений: 96
Состав набора




1
Реактив
Смесь
для
амплификации,
запечатанная
парафином
Раствор Taq-полимеразы
Минеральное масло
Положительный контрольный образец («К+»)
20 мкл
480 мкл
960 мкл
150 мкл
Количество
96 пробирок или
12 стрипов по 8 пробирок
2 пробирки
2 пробирки
1 пробирка
только модели 4S1; 4S2; 5S1; 5S2; 6S1; 6S2.
– только модели 4M1; 4M3; 4M6; 5M1; 5M3; 5M6; 6M1; 6M3; 6M6.
3
– по мере обновления программного обеспечения рекомендуемая версия ПО может измениться.
Последнюю рекомендуемую версию ПО можно скачать на сайте компании «ДНКТехнология»:http://www.dna-technology.ru/support/
2
–
у
Каналы детекции продуктов амплификации
Fam
Hex
Rox
Cy5
Cy5.5
HPV18
ВК
-
HPV16
-
HPV6
ВК
-
HPV11
-
Инструкция по применению
1. Подготовка и проведение полимеразной цепной реакции
1.1. Промаркируйте по одной пробирке со смесью для амплификации для каждого исследуемого
образца, отрицательного контрольного образца («K–») и положительного контрольного образца
(«К+»).
Например, необходимо проанализировать 2 образца. Нужно промаркировать две пробирки для
исследуемых образцов, одну пробирку для «K-» и одну пробирку для «К+». Общее количество
пробирок – 4.
1.2. Встряхните пробирку с раствором Taq-полимеразы в течение 3–5 сек и центрифугируйте в
течение 1–3 сек на микроцентрифуге/вортексе
1.3. Добавьте в каждую пробирку, не повреждая слой парафина, по 10 мкл раствора Taqполимеразы.
1.4. Добавьте в каждую пробирку по 1 капле (около 20 мкл) минерального масла. Закройте крышки
пробирок.
1.5. Для предотвращения контаминации следует перед внесением образцов открывать крышку
только той пробирки, в которую будет вноситься данный образец, и закрывать ее перед
внесением следующего. Препараты ДНК следует вносить наконечниками с аэрозольным
барьером.
Внесите, не повреждая слой парафина, по 5,0 мкл выделенного из образцов препарата ДНК в
соответствующие пробирки для исследуемых образцов (кроме пробирок «К–», «K+»).
1.6. Внесите, не повреждая слой парафина, 5,0 мкл отрицательного контрольного образца,
прошедшего этап выделения ДНК, в пробирку, маркированную «K–»». Внесите, не повреждая
слой парафина, 5,0 мкл положительного контрольного образца в пробирку, маркированную
«K+».
1.7. Центрифугируйте пробирки на микроцентрифуге/вортексе в течение 1–3 сек.
1.8. Установите все пробирки в блок амплификатора детектирующего.
1.9. Запустите программное обеспечение RealTime_PCR в режиме «Работа с прибором». При первом
проведении ПЦР загрузите ini файл с соответствующим названием. При последующих
постановках добавьте в протокол соответствующий тест, укажите количество и
идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и положительного контрольных
образцов, отметьте расположение пробирок на матрице термоблока в соответствии с их
установкой (п. 1.8) и проведите ПЦР.
2. Регистрация и учёт результатов ПЦР проводится автоматически программным обеспечением
для амплификаторов детектирующих.
Интерпретация результатов проводится в соответствии с таблицей 1.
Условия хранения
Набор следует хранить при температуре 2-8 °С в течение всего срока годности.
Срок годности набора - 6 месяцев с даты изготовления.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов для выявления и типирования вирусов
папилломы человека методом полимеразной цепной реакции (HPV), следует обращаться к
официальному представителю производителя по адресу:
ООО «ДНК-Технология», 117587, Москва, Варшавское шоссе, д.125ж, к.6, тел./факс +7 (495) 98045-55, www.dna-technology.ru
Служба клиентской поддержки: 8 800 200-75-15 (звонок по России бесплатный),
E-mail: [email protected]
Анкета для осуществления обратной связи находится на сайте компании «ДНК-Технология»:
http://www.dna-technology.ru/support/
Таблица 1
Интерпретация результатов ПЦР
Выбранный флуорофор
Fam, Cy5
Результат
Hex
Интерпретация результата
Анализируемые образцы
Ср указан (по одному
или двум флуорофорам)
Не
учитывается
«+»
Обнаружена ДНК одного или двух типов вируса
папилломы человека (HPV16 и/или HPV18, HPV6
и/или HPV11)
Ср не указан (по обоим
флуорофорам)
Cp указан
«-»
ДНК определяемых возбудителей не обнаружена
Ср не указан (по обоим
флуорофорам)
Cp не указан
«нд»
Результат недостоверный
Положительный контрольный образец
Ср указан (по обоим
флуорофорам)
Ср указан
«+»
Результат положительный
Отрицательный контрольный образец
Ср не указан (по обоим
флуорофорам)
Cp указан
«-»
Результат отрицательный
Номер: 275
02.10.13
ДНК-Технология
117587, Москва, Варшавское ш., д.125ж, корп.6
Тел./факс +7 (495) 980-45-55
Служба клиентской поддержки:
8 800 200-75-15 (звонок по России бесплатный)
Е-mail: [email protected]