Раствор 2 Растворите содержимое флакона с реагентом (стандартный раствор) деионизованной водой в соотношении 1+9. Раствор 2 содержит Fe2+ 20 мкмоль/л. Устойчивость: 1 месяц в полиэтиленовых банках при (с +2 до +8) °С. ЖЕЛЕЗО ПСТ (Fe 100 PST) Ном. номер: 10003169 Хранить (с +2 до +25) °С Набор реактивов для приготовления 100 мл рабочего раствора для определения железа в сыворотке крови. Данный набор может быть использован тaкже для определения общей железосвязывающей способности сыворотки - смотри рабочую инструкцию БЛТ Общая связывающая способность. Принцир метода Реактив, содержащий двунатревую соль 3-(2-пиридил)-5,6бис (4-сульфо-фенил)-1,2,4-триазина, образует с ионами Fe2+ комплекс фиолетового цвета, пригодный для фотометрического определения. Литература Ceriotti, F., Ceriotti, G.: Clin. Chem. 26, 327 (1980) Stooky, L. L.: Anal. Chem. 42, 779 (1970) Ruuto, R.: Clin. Chim. Acta 61, 229 (1975) Реактивы 1 Хромоген (2 флаконы) двунатриевая соль 3-(2-пиридил)-5,6-бис (4-сульфофенил)-1,2,4-триазина (ПСТ) 0,077 ммоль, тиомочевина 0,792 ммоль, кислота L-аскорбиновая 5,72 ммоль/флакон 2 Стандартный раствор (1,2 мл) Fe2+ 200 мкмоль/л Состав реакционной смеси ПСТ1,15 Тиомочевина11,90 Кислота L-аскорбиновая85,80 Соотношение сыворотка/реакционная смесь ммоль/л ммоль/л ммоль/л 1/4 Нормальные величины (нтБ) С – Ион железа, вщ-к (мкмоль/л) мужчины 10,6 – 28,3 женщины 6,6 – 26,0 Приведеный диапазон референтных значений является ориентировочным. Рекомендуется каждой лаборатории вычислять свои диапазоны нормальных величин. Калибровка и контроль качества Для калибровки рекомендуется Био-ЛА-Тест ® ЛИОНОРМ КАЛИБРАТОР, Ном. номер 10003200 или стандарт, который является составной частью набора. Для контроля рекомендуется Био-ЛА-Тест® ЛИОНОРМ ГУМ Н, Ном. номер 10003204 Био-ЛА-Тест® ЛИОНОРМ ГУМ П, Ном. номер 10003206 Вспомогательный раствор (не входит в состав набора) Раствор кислоты хлористоводородной, 0,08 моль/л Приготавливают растворением 0,7 мл хлористо­во­до­родной кислоты в 100 мл деионизированной воды. Приготовление растворов Раствор 1 Содержимое одного флакона с Реактивом 1 растворяют в хлористоводородной кислоте в мер­ной колбе вместимостью 50 мл. Устойчивость: 1 месяц при (с +2 до +8) °С в темном месте. Проведение анализа Образцы: негемолиз. сыворотка Длина волны (540 – 570) нм Кювета 1 см Температура (с +15 до +25) °С В трех пробирках смешивают раствор 1 в соотношении 3 + 1 с сывороткой (проба), раствором 2 (стандарт) или деиони­зированной водой (контрольный раствор 1) – напр. 1,5 мл раствора 1 и 0,5 мл сыворотки, раствора 2 или деиони­зированной воды. В другой пробирке смешивают раствор хлористоводородной кислоты в соотношении 3 + 1 с сыво­роткой (контрольный раствор 2) – напр. 1,5 мл раствора хлористоводородной кислоты и 0,5 мл сыворотки. Оставляют стоять 15 мин и измеряют оптическую плотность пробы (А1), стандарта (А2), контрольного раствора 1 (А3) и контрольного раствора 2 (А4) против дистиллированной воды. Отмерить Проба Стандарт Контр. раств. 1 Контр. раств. 2 Раствор 1 1,5 1,5 1,5 – Сыворотка 0,5 – – 0,5 Раствор 2 – 0,5 – – Дистил. вода – – 0,5 – Кислота хлористовород– – – 1,5 ная Оставляют стоять 15 мин и измеряют оптическую плотность пробы (А1), стандарта (А2), контрольного раствора 1 (А3) и контроль­ ного раствора 2 (А4) против дистиллированной воды. Расчет (нтБ) С - Ион железа, вщ-к в мкмоль/л = 20 . А1 – (А3 + А4) А2 – А3 Примечания Определение должно проводиться в совершенно чистой посуде, предназначенной исключительно для анализа железа, с использованием бидистиллизированной или деионизи­рованной воды. Рекомендуется мыть лабораторную посуду в 20%-ной HCl или в хромсерной кислоте (оставлять в них посуду на ночь), потом тщательно промыть дист. водой и, наконец, деионизированной водой. Меры предосторожности Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально обученным лаборантом. Реактив 1 содержит тиомочевину (5,5 %) являющийся потенциально раковым веществом (Категория 3). При приеме внутрь следует выпить 0,5 л воды. При попадании на кожу или в глаза следует вымыть проточной водой. Пострадавшему необходимо оказать медицинскую помощь. Стабильность и хранение Набор храните при температуре с (+2 до +25) °С. Храните в темном месте. Срок годности приведен на упаковке. После употребления пузырьки немедленно закройте, чтобы предотвратить возможность испарения реактива или его контаминации. Ликвидация мусора Все тестированные пробы считают материалом, который может быть инфицирован, и совместно с возможными остатками реактивов подлежит уничтожению в соответствии с утвержденными внутрибольничными правилами. Бумажную упаковку сдайте в макулатуру, выполосканую заводскую тару в сортированный мусор. Дата проведения последнего контроля: 28. 12. 2006 В случае любых вопросов обращайтесь в Представи­тельство PLIVA - Lachema а.s. в Москве. Tел/факс: 095-755 78 51, 095-755 55 80. Выпускает PLIVA-Lachema Diagnostika s.r.o. Карасек 1, 621 33 Брно, CZ e-mail: [email protected], www.lachema.com