Микроскопические грибы и сопутствующая микробиота

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ И СОПУТСТВУЮЩАЯ МИКРОБИОТА НОГТЕВОЙ
ПЛАСТИНЫ ПРИ ОНИХОМИКОЗАХ ПО ДАННЫМ МАСС-СПЕПКТРОМЕТРИИ
МИКРОБНЫХ МАРКЕРОВ
Осипов Г.А.1, Федосова Н.Ф.2, Стукова Л.П.2
1
Научный центр сердечно-сосудистой хирургии им А.Н.Бакулева, Академическая группа
акад. РАМН Ю.Ф.Исакова
2
Национальный медико-хирургический центр им Н.И.Пирогова
Москва, Россия: Опубликовано в «Успехи медицинской микологии» 2006, т 8, Стр 31-34
Современные молекулярные методы хемодиагностики микробных сообществ позволили в
последнее десятилетие пересмотреть представления о микроэкологии организма человека
и этиологии воспалительных заболеваний. Представление о моноэтиологичности
инфекций и воспалений уступает место модели смешанной инфекции группой
микроорганизмов, объединенных генетическими, трофическими, физиологическими и
другими связями в биопленке. Большое значение в таком пересмотре послужила
возможность учитывать in situ химические компоненты клеток микроорганизмов,
относящихся к разным иерархическим группам, в частности, к царству бактерий и царству
грибов. Такой подход позволил расширить представления о микст-инфекции ряда
заболеваний, агентами которых наряду с прокариотическими микроорганизмами
(бактерии, в основном – легко культивируемые аэробы) были одновременно обнаружены
анаэробы, а также
актинобактерии (актиномицеты) и, к тому же, эукариотические
микроорганизмы (грибы и простейшие).
Молекулярная хемодиагностика с использованием метода газовой хроматографии-масс
спектрометрии (ГХ-МС) была использована в нашей работе при исследовании
онихомикоза. Оказалось, что грибы, плесени и дрожжи, традиционно считающиеся
агентами онихомикозов, дополнены многочисленной бактериальной составляющей.
Анализ специфических для бактерий высших жирных кислот из состава их клеточной
стенки показал присутствие многих бактерий – обычных участников воспалительных
процессов в организме человека. Однако здесь доминируют клостридии разных видов, но
преимущественно представители группы Clostridium ramosum, одной из основных групп
клостридий кишечника. Кроме них, доминантная бактериальная составляющая ногтевой
пластины представлена стрептококками, грамотрицательными бактериями рода
Sphingomonas (альтернативно – Alcaligenes) и актинобактериями родов Rhodococcus,
Nocardia, а также не идентифицированных видов. Обнаружены маркеры дрожжей
кандида. Дерматофиты в этом исследовании не контролировали из-за отсутствия
маркеров. Их определяли культуральным методом.
Результаты исследования состава микробных маркеров в ногтевой пластине методом
газовой хроматографии - масс-спектрометрии приведены в виде описания случаев.
Случай 1. Проба NL-70 Г-ва С.В
Доминируют Clostridium ramosum (и другие виды клостридий), а также стрептококки.
Высокая концентрация маркеров актинобактерий Rhodococcus, Pseudonocardia и не
идентифицированных.
№
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
кл/гх10*5
0
Микроорганизм
Проба
Норма крови
1
Streptococcus
6294
249
2
Bacillus cereus
141
23
3
Clostridium hystolyticum
590
95
4
Clostridium propionicum
1236
288
5
Актиномицеты
374
77
6
Pseudonocardia
249
70
7
Clostridium ramosum
11051
2000
8
Sphingomonas
580
48
9
Rhodococcus
1350
423
10
Mycobacterium/Candida
1093
549
11
Prevotella
87
38
Staphylococcus
190
120
12
Helicobacter pylori, h18
73
14
13
Clostridium perfringens
38
12
14
Actinomycetes 10Me14
1018
309
15
Сумма
24364
4316
2000
4000
6000
8000
10000
12000
Проба
Норма крови
Случай 2. Проба NL-71 Г-ев Н.П.
Доминируют Clostridium ramosum (и другие виды клостридий), а также Sphingomonas.
Высокая концентрация маркеров актинобактерий Rhodococcus и дрожжеподобных грибов
кандида. Эргостерол- содержащие грибы не обнаружены.
№
18
20
23
29
34
37
39
кл/гх10*5
0
Микроорганизм
Проба Норма крови
1
Clostridium ramosum
3518 2000
2
Sphingomonas
714
48
3
Rhodococcus
725
423
4
Mycobacterium/Candida
714
549
5
Prevotella
100
38
Staphylococcus
176
120
6
Helicobacter pylori, h18
52
14
7
Сумма
5999 3193
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
4000
Проба
Норма крови
Случай 3. Проба NL-72 К-на О.О.
Доминируют Clostridium ramosum и другие виды (C. perfringens, C. propionicum, C.
hystoliticum), а также стрептококки и Sphingomonas. Высокая концентрация маркеров
актинобактерий Rodococcus и дрожжеподобных грибов кандида,. Эргостеролсодержащие грибы не обнаружены.
№
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
кл/гх10*5
Микроорганизм
Проба Норма крови0
Clostridium hystolyticum
443
95
1
Clostridium propionicum
775
288
2
Актиномицеты
111
77
3
4
Pseudonocardia
91
70
5
Clostridium ramosum
7785 2000
6
Sphingomonas
852
48
7
Rhodococcus
652
423
8
Mycobacterium/Candida
727
549
9
Prevotella
86
38
10
Staphylococcus
178
120
11
Helicobacter pylori, h18
71
14
12
Clostridium perfringens
458
12
13
Streptococcus
1238
229
14
Actinomycetes 10Me14
392
309
Сумма 13858 4273
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
Проба
Норма крови
Случай 4. Проба NL-73 И-ва А.А.
Доминируют стрептококки, Sphingomonas, дрожжеподобные грибы кандида, Clostridium
ramosum и другие виды (C. propionicum, C. hystoliticum. Высокая концентрация маркеров
стафилококков и превотелл. Эргостерол- содержащие грибы не обнаружены.
№
2
5
12
18
20
23
24
29
34
37
39
40
44
52
55
кл/гх10*5
Микроорганизм
Проба Норма крови0
1
Eubacterium lentum (группа А)226
68
2
Clostridium hystolyticum
219
95
3
Clostridium propionicum
627
288
4
Clostridium ramosum
2504 2000
5
Sphingomonas
2869
48
6
Rhodococcus
524
423
7
Staphylococcus intermedius
0
756
8
Mycobacterium/Candida
1985
549
9
Prevotella
122
38
10
Staphylococcus
282
120
11
Helicobacter pylori, h18
98
14
12
Clostridium perfringens
33
12
13
Streptococcus
1816
229
14
Actinomycetes 10Me14
296
309
15
Actinomyces viscosus
777 1190
Сумма 12379 6139
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
Проба
Норма крови
Случай 5. NL-74 О-ов
Доминируют Clostridium ramosum и другие виды клостридий (C. perfringens, C.
propionicum, C. hystoliticum), а также стрептококки и Sphingomonas. Высокая
концентрация маркеров актинобактерий Rodococcus, Nocardia и не идентифицированных,
а также дрожжей кандида,. Здесь обнаружен эргостерол- маркер большой группы
грибов, который в клической практике приписывают обычно роду Aspergillus.
№
1
3
5
6
10
12
15
16
18
20
23
29
34
37
39
40
41
44
47
48
49
52
56
кл/гх10*5
Микроорганизм
Проба Норма крови0
Streptococcus
439
249
1
Bacillus cereus
565
23
2
3
Clostridium hystolyticum
2769
95
4
Nocardia, 14:1d11
259
262
5
Propionibacterium
151
0
6
Clostridium propionicum
6912
288
7
Актиномицеты
998
77
8
Pseudonocardia
609
70
9
Clostridium ramosum
7808 2000
10
Sphingomonas
204
48
11
Rhodococcus
2484
423
12
Mycobacterium/Candida
5577
549
13
Prevotella
70
38
14
Staphylococcus
325
120
15
Helicobacter pylori, h18
43
14
16
Clostridium perfringens
129
12
17
Enterococcus
504
290
18
Streptococcus
307
229
19
Nocardia asteroides
1229
274
20
Цитомегаловирус
188
166
21
Микр грибы, ситостерол
225
384
22
Actinomycetes 10Me14
2974
309
23
Aspergillus
20
0
Сумма 34790 5922
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
Проба
Норма крови
Обнаружение бактериальной составляющей при онихомикозах вполне закономерно из
общих соображений микроэкологии, равно как человека, так и окружающей среды, где
равновесно представлены все виды микроорганизмов. Разница лишь в их количественном
представлении, которое определяется средой обитания и питательным субстратом.
Представляется полезным учесть новые данные в лечении онихомикозов, что может
сократить их сроки при добавлении в программу лечения антибиотиков.
.