М.Ю. Чернуха, Л.Р. Аветисян, И.А. Шагинян

МИКРООРГАНИЗМЫ ИНФИЦИРУЮЩИЕ НИЖНИЕ
ДЫХАТЕЛЬНЫЕ ПУТИ БОЛЬНОГО МУКОВИСЦИДОЗОМ (МВ)
ОПРЕДЕЛЯЮТ ЛЕЧЕНИЕ, КАЧЕСТВО ЖИЗНИ, ПЕРСПЕКТИВЫ
ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ И ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ.
ТОЧНАЯ И СВОЕВРЕМЕННАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ
ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИЙ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ ИМЕЕТ
ВАЖНОЕ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ОБЕСПЕЧЕНИЯ СВОЕВРЕМЕННОГО
НАЧАЛА ЛЕЧЕНИЯ СООТВЕТСТВУЮЩИМИ АНТИБИОТИКАМИ
С ЦЕЛЬЮ ЭЛИМИНАЦИИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПАТОГЕНОВ И
ОРГАНИЗАЦИИ НАДЛЕЖАЩЕГО ИНФЕКЦИОННОГО КОНТРОЛЯ
С ЦЕЛЬЮ ПРОФИЛАКТИКИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ПАТОГЕННЫХ
МИКРООРГАНИЗМОВ СРЕДИ БОЛЬНЫХ МВ.
ПРАВИЛЬНАЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА
ПРЕДСТАВЛЯЕТ ТРУДНОСТИ, ТАК КАК МИКРОБНАЯ
ФЛОРА ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ У ТАКИХ БОЛЬНЫХ
ПРЕДСТАВЛЕНА ЧАСТО АССОЦИАЦИЯМИ, А НЕКОТОРЫЕ
МИКРООРГАНИЗМЫ ПРОЯВЛЯЮТ АТИПИЧНЫЕ ДЛЯ
СВОЕГО ВИДА ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА, НАПРИМЕР
АУКСОТРОФНЫЕ P. AERUGINOSA И SCV (SMALL COLONY
VARIANTS - ФЕНОТИП МЕЛКИХ КОЛОНИЙ) S. AUREUS.
ДОМИНИРУЮЩИЕ ВОЗБУДИТЕЛИ
ХРОНИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Установлено, что доминирующими возбудителями инфекции
легких у больных муковисцидозом, являются
Р. aeruginosa (ассоциация Р. aeruginosa + S. aureus 18,2%),
S. aureus,
H.influenzae,
бактерии комплекса B.cepacia (Всс)
(ассоциация Р. aeruginosa+Bcc 9,1%)
Показано, что в первые годы жизни у больных муковисцидозом
доминирует Staphylococcus aureus,
затем основным возбудителем становится Р. aeruginosa.
Хроническая моно- или смешанная инфекция к 18 годам у 80%.
В лаборатории молекулярной эпидемиологии госпитальных
инфекций собрана коллекция из более 1000 штаммов
доминирующих микроорганизмов, выделенных от пациентов с
муковисцидозом детей и взрослых . В течение более 10 лет
осуществляется мониторинг хронической инфекции у больных
муковисцидозом. Результаты позволили провести ряд
профилактических мероприятий.
Алгоритм идентификации Всс
Северо-западный
АО
Дальневосточный
АО
B.cenocepacia ST709
B.contaminans ST102
B.cenocepacia ST241
B.vietnamensis ST729
Центральный АО
B.cenocepacia ST709
Приволжский АО
(Татарстан)
B.cenocepacia
ST709,ST708
и ST208
ЮЖНЫЙ АО
B.cenocepacia ST208
B.cenocepacia ST709
№
ФИО, возраст,
дата
Результаты лаб. Мол. Эпид.
Госпит. инфекций
Методы лаб. Мол.эпид
госпит инф.
Результаты лаб. Анализа
геномов
(получение ДНК
непосредственно из
мокроты)
187
Б-на
16
23.10.12
B.cepacia 4х102
S.epidermidis 101
Candida spp. -103
Посев на пит. Среды (рост
на BCSA)
PCR : 3A и CeMuVi+
ложноположит. р-я
A.xylosoxidans
200
Л-л
16
20.11.12
B.cepacia 104 3A
S.aureus102
Candida spp. -103
Посев на пит. Среды
PCR : 3A и CeMuVi+
Положительные
B.cenocepacia 709
206
Г-ва
10
23.11.12
B.cepacia 103 3А
Enterococcus spp. 102
Neisseria subflava 102
Streptococcus spp. -102(ά гем)
S.epidermidis 10
Candida spp. -101
Посев на пит. Среды
PCR : 3A и CeMuVi+
положительные
B.cenocepacia 709
286
Б-на
19
13.03.13
Candida spp. - 103
A.xylosoxidans 103
Посев на пит. Среды
PCR : 3A и BCRОтрицательные
ПЦР: ACHR+
A.xylosoxidans
304
К-ва , 16
20.05.
S.viridans 103
Candida spp. - 102
A.xylosoxidans 103
Neisseria subflava 103
S.epidermidis 5х101
Посев на пит. Среды
PCR : 3A и BCRОтрицательные
ПЦР: ACHR+
Streptococcus sp.
Отдельно штамм A.xylosoxidans
286
Б-на
19
13.03.13
Candida spp. - 103
A.xylosoxidans 103
Посев на пит. Среды
PCR : 3A и BCRОтрицательные
ПЦР: ACHR+
A.xylosoxidans
287
К-в
13.03.13
P.aeruginosa - 103
B.cepасia 3А 3х105
Candida spp. - 1КОЕ
Enterococcus spp. (гем-) - 103
Посев на пит. Среды
PCR : 3A и BCR+
положительные
B.cenocepacia 709
299
C-на
13
15.04.13
Candida spp. - 101
Streptococcus spp. -103(ά гем)
Неферм. Мо !03
Посев на пит. Среды
Тесты не прошли
P.aeruginosa, Prevotella
spp., Firmicutes
(Staphilococcus sp)
311
C-на
13
15.04.13
S.maltophilia 2x101
S.epidermidis 2x101
Candida spp. 101
Посев на пит. Среды
Biomerieux
Prevotella spp.
244
Т-ов,
23
24.12.12
P. aeruginosa - 103
Streptococcus spp. -103(ά гем)
Candida spp. - 103
S.maltophilia - 104
Посев на пит. Среды
Biomerieux
S.maltophilia
267
Г-oв
8
08.-2.13
P.aeruginosa 106 (немукоидный
фенотип)
P.aeruginosa 106 (мукоидный
фенотип)
Candida spp. - 104
S.epidermidis 103
P.putida 104
Посев на пит. Среды
Тесты
P.aeruginosa
Штаммы 709 генотипа представляют опасность для
пациентов с муковисцидозом.
1.Молекулярно-генетические методы RAPD-ПЦР,
пульсэлектрофорез и мультилокусное
секвенирование позволили подтвердить способность
штаммов 709 генотипа длительно персистировать
в организме больного муковисцидозом в ассоциации
с другими микроорганизмами Pseudomonas
aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida spp. и др.
2.Идентичность штаммов, выделенных от
госпитализированных больных, и отсутствие
бактерий Bcc на предметах, в больничной среде,
доказывает передачу этих штаммов от человека к
человеку при стационарном лечении.
Мониторинг возбудителей хронической инфекции
легких у больных муковисцидозом.
Задачи:
1.Установить долю хронической инфекции легких, особенности
персистенции возбудителей P.aeruginosa и S.aureus.
2.Установить основные источники возбудителей хронической инфекции
у больных муковисцидозом, вызванной P.aeruginosa и S.aureus.
3.Установить уровень эрадикации возбудителей при лечении
обострений хронической инфекции легких антимикробными
препаратами.
4. В случаях эрадикации возбудителей и при новых обострениях
установить возможные механизмы ремиссии инфекции.
5. В процессе мониторинга выявить эволюцию возбудителей и
установить гены, подвергающиеся наибольшей изменчивости при
персистенции возбудителя.