ИЗВЛЕЧЕНИЕ БИОФЛАВОНОИДОВ ИЗ ШЕЛУХИ ЛУКА В СРЕДЕ

ÓÄÊ 542.06.542.61.542.46.808.542.97.542.93
ÈÇÂËÅ×ÅÍÈÅ ÁÈÎÔËÀÂÎÍÎÈÄΠÈÇ ØÅËÓÕÈ ËÓÊÀ
 ÑÐÅÄÅ ÑÓÁÊÐÈÒÈ×ÅÑÊÎÉ ÂÎÄÛ
À. Â. Ëåêàðü, 2Î. Â. Ôèëîíîâà, 2Ñ. Í. Áîðèñåíêî, 1Å. Â. Ìàêñèìåíêî,
2
Å. Â. Âåòðîâà, 1Í. È. Áîðèñåíêî*, 2Â. È. Ìèíêèí
1
Ýêîëîãî-àíàëèòè÷åñêèé öåíòð Þæíîãî ôåäåðàëüíîãî óíèâåðñèòåòà (ÞÔÓ),
Ðîñòîâ-íà-Äîíó, Ðîññèÿ
2
Íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèé èíñòèòóò ôèçè÷åñêîé è îðãàíè÷åñêîé õèìèè ÞÔÓ,
Ðîñòîâ-íà-Äîíó, Ðîññèÿ
1
*boni@i poc.ru
Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 7.11.2011 ã.
Ðàçðàáîòàíà ìåòîäèêà èçâëå÷åíèÿ áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû. Ìåòîäèêà ÿâëÿåòñÿ ýêîëîãè÷åñêè ÷èñòîé è áîëåå ýôôåêòèâíîé ïî ñðàâíåíèþ ñ òðàäèöèîííûìè ìåòîäèêàìè ýêñòðàêöèè, îñíîâàííûìè íà
èñïîëüçîâàíèè äîðîãîñòîÿùèõ è òîêñè÷íûõ îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé. Êîëè÷åñòâåííûé è êà÷åñòâåííûé ñîñòàâ ïîëó÷åííûõ ýêñòðàêòîâ èçó÷åí ìåòîäîì
âûñîêîýôôåêòèâíîé æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèè ñ ìàññ-ñïåêòðîìåòðè÷åñêèì
äåòåêòèðîâàíèåì.
Ê ë þ ÷ å â û å ñ ë î â à: ñóáêðèòè÷åñêàÿ âîäà, øåëóõà ëóêà, áèîôëàâîíîèäû, êâåðöåòèí, ãëèêîçèäû êâåðöåòèíà, ãëèêîçèäû èçîðàìíåòèíà.
ÂÂÅÄÅÍÈÅ
Âûðàùèâàíèå ðåï÷àòîãî ëóêà øèðîêî ðàñïðîñòðàíåíî íà òåððèòîðèè Ðîññèè è
çà ðóáåæîì. Ëóê ñëóæèò èñòî÷íèêîì ðàçëè÷íûõ áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñóáñòàíöèé. Óñòàíîâëåíî, ÷òî ïîòðåáëåíèå ëóêà óìåíüøàåò ðèñê ðàçâèòèÿ ðàêà ëåãêèõ,
ïèùåâîäà è æåëóäêà [1—3]. Íàïðèìåð, â ýêñïåðèìåíòàõ íà ñâèíüÿõ â êà÷åñòâå
áèîìåäèöèíñêîé ìîäåëè ïîêàçàíî, ÷òî ëóê ïðèâîäèò ê ñíèæåíèþ â êðîâè îáùåãî õîëåñòåðèíà, ëèïîïðîòåèíîâ è òðèãëèöåðèäîâ, ÿâëÿþùèõñÿ èíäèêàòîðàìè ðèñêà âîçíèêíîâåíèÿ ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòûõ çàáîëåâàíèé [4]. Êðîìå òîãî, ýêñòðàêòû
ëóêà ïðîäåìîíñòðèðîâàëè àíòèòðîìáîòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü in vitro è in vivo â
ýêñïåðèìåíòàõ íà ìûøàõ [5] è àíòèòðîìáîòè÷åñêèé ýôôåêò íà ìîäåëè äèàáåòà,
èíäóöèðîâàííîãî ñòðåïòîçîòîöèíîì, ó êðûñ [6]. Âàæíåéøèìè ôóíêöèîíàëüíî
çíà÷èìûìè ñîåäèíåíèÿìè, ïðèñóòñòâóþùèìè â ëóêå è åãî îòõîäàõ, ÿâëÿþòñÿ ôëàâîíîèäû. Ýòîò êëàññ ïîëèôåíîëüíûõ ðàñòèòåëüíûõ ìåòàáîëèòîâ ïðèñóòñòâóåò â ýêñòðàêòàõ ìíîãèõ ðàñòåíèé è õàðàêòåðèçóåòñÿ íàëè÷èåì â ñîñòàâå ìîëåêóëû (ðèñ. 1)
áåíçîïèðàíîâîãî ãåòåðîöèêëà è ãèäðîêñèëüíûõ ãðóïï, îïðåäåëÿþùèõ èõ àíòèîêñèäàíòíûå ñâîéñòâà. Ôëàâîíîèä êâåðöåòèí, íàïðèìåð, îáëàäàåò àíòèîêñèäàíòíûìè
[7], ñïàçìîëèòè÷åñêèìè [8], ãèïîòåíçèâíûìè ñâîéñòâàìè [9], âõîäèò â ñîñòàâ áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ äîáàâîê è èñïîëüçóåòñÿ äëÿ ïðîôèëàêòèêè ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòûõ çàáîëåâàíèé [10].
Âûðàùèâàíèå è èñïîëüçîâàíèå ëóêà ïðèâîäèò ê ïîÿâëåíèþ ìíîãîòîííûõ îòõîäîâ â âèäå øåëóõè. Èñïîëüçîâàíèå îòõîäîâ ñåëüõîçïðîèçâîäñòâà â êà÷åñòâå
4
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
Èçâëå÷åíèå áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû
ñûðüåâûõ èñòî÷íèêîâ áèîôëàâîíîèäîâ è ïîèñê ýêîëîãè÷åñêè ïðèåìëåìûõ òåõíîëîãèé èõ èçâëå÷åíèÿ ÿâëÿåòñÿ àêòóàëüíîé çàäà÷åé ôèòîõèìèè è èìååò ñîöèàëüíî
çíà÷èìûé õàðàêòåð â ïëàíå ðàçðàáîòêè ýôôåêòèâíûõ è íåòîêñè÷íûõ èìïîðòîçàìåùàþùèõ ïðåïàðàòîâ ñ àíòèîêñèäàíòíîé àêòèâíîñòüþ.
 ñâÿçè ñ ýòèì öåëè íàñòîÿùåé ðàáîòû ñîñòîÿëè â ðàçðàáîòêå ýêîëîãè÷åñêè
÷èñòîãî ñïîñîáà ïîëó÷åíèÿ ýêñòðàêòîâ, ñîäåðæàùèõ áèîôëàâîíîèäû, èç øåëóõè
ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû [11] è èçó÷åíèè äàííîãî ñïîñîáà èçâëå÷åíèÿ
äëÿ îïòèìèçàöèè ïàðàìåòðîâ ïðîöåññà.
ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÀß ×ÀÑÒÜ
 êà÷åñòâå îáúåêòà èññëåäîâàíèÿ áûëà âçÿòà øåëóõà êðàñíîãî ëóêà ñîðòà Red
Baron. Òðàäèöèîííàÿ ýêñòðàêöèÿ ôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà ïðîâîäèëàñü ñ
èñïîëüçîâàíèåì îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé (ýòàíîë, ãåêñàí) [12] è âêëþ÷àëà
íåñêîëüêî ñòàäèé. Íàâåñêó 2 ã øåëóõè êðàñíîãî ëóêà ïîäâåðãàëè ïðåäâàðèòåëüíîé îáðàáîòêå — êèïÿ÷åíèþ â 30 ìë ãåêñàíà â êðóãëîäîííîé êîëáå ñ îáðàòíûì
õîëîäèëüíèêîì â òå÷åíèå 150 ìèí äëÿ óäàëåíèÿ ìåøàþùèõ ýêñòðàêöèè íåïîëÿðíûõ îðãàíè÷åñêèõ êîìïîíåíòîâ. Ïîñëåäóþùèå 3 ñòàäèè ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé êèïÿ÷åíèå â 30 ìë 80 % ýòàíîëà ñ îáðàòíûì õîëîäèëüíèêîì â òå÷åíèå 150 ìèí.
Ïîëó÷åííûå ýêñòðàêòû ôèëüòðîâàëè, îáúåäèíÿëè è àíàëèçèðîâàëè.
 íàñòîÿùåé ðàáîòå ïðåäëîæåíî ïðîâîäèòü ýêñòðàêöèþ öåëåâûõ ôëàâîíîèäîâ
èç øåëóõè êðàñíîãî ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû êàê â ñòàòè÷åñêîì âàðèàíòå,
òàê è â ïðîòî÷íîì ðåæèìå [13, 14]. Ïîñëåäîâàòåëüíîñòü ïðîâåäåíèÿ ýêñòðàêöèè â
ñòàòè÷åñêîì âàðèàíòå áûëà ñëåäóþùåé: íàâåñêó øåëóõè êðàñíîãî ëóêà 0,3 ã ïîìåùàëè â ðåàêòîð èç íåðæàâåþùåé ñòàëè åìêîñòüþ 10 ìë, â êîòîðûé äîáàâëÿëè
7 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ðåàêòîð ãåðìåòè÷íî çàêðûâàëè, óñòàíàâëèâàëè â
ñóøèëüíûé øêàô è âûäåðæèâàëè ïðè çàäàííîé òåìïåðàòóðå (òî÷íîñòü ïîääåðæàíèÿ 1 Ñ) 1 ÷àñ. Çàòåì ðåàêòîð îõëàæäàëè äî êîìíàòíîé òåìïåðàòóðû (â òå÷åíèå 15 ìèí) â åìêîñòè ñ ïðîòî÷íîé õîëîäíîé âîäîé [13]. Ñîäåðæèìîå ðåàêòîðà
êîëè÷åñòâåííî ïåðåíîñèëè â ñòåêëÿííûé ñòàêàí, ïðîìûâàÿ ðåàêòîð âîäíûì ðàñòâîðîì 80 %-ãî ýòàíîëà è ôèëüòðóÿ ñ öåëüþ óäàëåíèÿ îñòàòêîâ ðàñòèòåëüíîãî ñûðüÿ
èç ïîëó÷åííîãî ýêñòðàêòà. Àëèêâîòó ðàçáàâëÿëè äî îïðåäåëåííîé êîíöåíòðàöèè
äëÿ àíàëèçà ìåòîäîì âûñîêîýôôåêòèâíîé æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèè (ÂÝÆÕ).
Äèíàìè÷åñêèé ðåæèì ýêñòðàêöèè (ïðîòî÷íûé) îñíîâûâàåòñÿ íà ïðîõîæäåíèè ÷åðåç îáðàçåö ñûðüÿ âîäû ïðè ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðå è äàâëåíèè [14],
äîñòàòî÷íîì äëÿ ïîääåðæàíèÿ âîäû â æèäêîì ñîñòîÿíèè. Ïðîâåäåíèå ýêñïåðèìåíòà ïî ïðîòî÷íîé ýêñòðàêöèè áûëî àíàëîãè÷íî îïèñàííîìó ðàíåå [14]. Íàâåñêó èçìåëü÷åííîé øåëóõè êðàñíîãî ëóêà (0,5 ìì  d  1,0 ìì) ìàññîé 0,05 ã ïîìåùàëè â ýêñòðàêöèîííûé êàðòðèäæ èç íåðæàâåþùåé ñòàëè äëèíîé 150 ìì è
âíóòðåííèì äèàìåòðîì 4,5 ìì. Ïðåäâàðèòåëüíî â ýêñòðàêöèîííûé êàðòðèäæ ïîìåùàëè èçìåëü÷åííîå ñòåêëî ñ ðàçìåðîì ÷àñòèö 0,5—1,0 ìì (0,5 ìë) è ìåíüøå
0,5 ìì (0,5 ìë) äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ çàêóïîðèâàíèÿ ôèëüòðà â êîììóíèêàöèÿõ
ñèñòåìû. Çàòåì ñîåäèíåííûé ñ êîììóíèêàöèÿìè ñèñòåìû êàðòðèäæ ïîìåùàëè â
òåðìîñòàò è íàãðåâàëè äî âûáðàííîé òåìïåðàòóðû ïðè ïîñòîÿííîì ïðîõîæäåíèè
ïîòîêà äèñòèëëèðîâàííîé âîäû 0,6 ìë/ìèí è äàâëåíèè 80 àòì, êîòîðîå îáåñïå÷èâàëîñü íàñîñîì, èñïîëüçóåìûì äëÿ ñèñòåì ÂÝÆÕ (òèï íàñîñà Elilex labs). Ïî èñòå÷åíèè çàäàííîãî âðåìåíè ïîäà÷ó äèñòèëëèðîâàííîé âîäû ïîä äàâëåíèåì ïðåêðàùàëè. Ïîëó÷åííûé íà âûõîäå ïðîòî÷íîé óñòàíîâêè âîäíûé ýêñòðàêò èñïîëüçîâàëè
äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ êâåðöåòèíà.
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
5
À. Â. Ëåêàðü, Î. Â. Ôèëîíîâà, Ñ. Í. Áîðèñåíêî,
Å. Â. Ìàêñèìåíêî, Å. Â. Âåòðîâà, Í. È. Áîðèñåíêî, Â. È. Ìèíêèí
Èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëèñü â îáðàùåííî-ôàçîâîì âàðèàíòå ÂÝÆÕ íà æèäêîñòíîì õðîìàòîãðàôå «Agilent 1200 LC-SPE» ñî ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêèì äåòåêòîðîì, ðàáîòàþùèì â äèàïàçîíå äëèí âîëí îò 195 äî 950 íì.
Äëÿ àíàëèçà ïðîá, ïîëó÷åííûõ â õîäå ïîäáîðà îïòèìàëüíûõ óñëîâèé ýêñòðàêöèè,
áûëè âûáðàíû ñëåäóþùèå óñëîâèÿ õðîìàòîãðàôèðîâàíèÿ: êîëîíêà ZORBAX SB Ñ18
Ðèñ. 1. Ñòðóêòóðíûå ôîðìóëû áèîôëàâîíîèäîâ
6
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
Èçâëå÷åíèå áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû
2,1 150 ìì, 3,5 ìêì; ñîñòàâ ïîäâèæíîé ôàçû CH3CN : 0,01 í H2SO4 —20 : 80 îá. %;
òåìïåðàòóðà êîëîíêè 28 Ñ; ñêîðîñòü ïîòîêà ïîäâèæíîé ôàçû 0,14 ìë/ìèí; äëèíà âîëíû íà ÓÔ-äåòåêòîðå 205 è 254 íì; âðåìÿ àíàëèçà 45 ìèí; îáúåì ââîäèìîé
ïðîáû 0,001 ìë. Êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå êâåðöåòèíà â ýêñòðàêòå øåëóõè
êðàñíîãî ëóêà ïðîâîäèëè ïî ìåòîäó àáñîëþòíîé êàëèáðîâêè ïî ñòàíäàðòíûì
ðàñòâîðàì êâåðöåòèíà ðàçëè÷íîé êîíöåíòðàöèè.  êà÷åñòâå ñòàíäàðòà èñïîëüçîâàëè
ðàñòâîðû êâåðöåòèíà ôèðìû ÄÈÀÝÌ (÷èñòîòà ïðåïàðàòà 98,2 %) â àöåòîíèòðèëå.
Äëÿ àíàëèçà êà÷åñòâåííîãî ñîñòàâà ïîëó÷åííûõ ýêñòðàêòîâ (ïðè îòñóòñòâèè
ñòàíäàðòîâ) èñïîëüçîâàëñÿ ìàññ-ñïåêòðîìåòð «Bruker Daltonics micrOTOF-Q» ñ
èîíèçàöèåé ýëåêòðîðàñïûëåíèåì (ïðîãðàììíîå îáåñïå÷åíèå micrOTOFcontrol TM2.2,
êàëèáðîâî÷íûé ðàñòâîð äëÿ ýëåêòðîðàñïûëåíèÿ (Electrospray Calibrant Solution)
ôèðìû Fluka). Äåòåêòèðîâàíèå îòðèöàòåëüíûõ è ïîëîæèòåëüíûõ èîíîâ âûïîëíåíî â èíòåðâàëå m/z îò 50 äî 3000. Íàïðÿæåíèå íà êàïèëëÿðå ðàñïûëèòåëÿ 400 Â,
ïàðàìåòðû ãàçà-îñóøèòåëÿ: àçîò ìàðêè ÎÑ×, 5 ë/ìèí, 200 Ñ.
ÎÁÑÓÆÄÅÍÈÅ ÐÅÇÓËÜÒÀÒÎÂ
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâåííîãî è êà÷åñòâåííîãî ñîñòàâà öåëåâûõ ïðîäóêòîâ
ýêñòðàêöèè èç øåëóõè ëóêà áûëè ïîëó÷åíû ýêñòðàêòû ïðè ðàçëè÷íûõ ñõåìàõ
ýêñòðàêöèè, êàê óêàçàíî âûøå. Òèïè÷íûå õðîìàòîãðàììû ýêñòðàêòîâ èç øåëóõè
êðàñíîãî ëóêà, ïîëó÷åííûõ ïî òðàäèöèîííîé ñõåìå è â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé
âîäû (120 Ñ, 60 ìèí, ñòàòè÷åñêàÿ ñõåìà), ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 2à è 2á ñîîòâåò-
Ðèñ. 2 à, á. Õðîìàòîãðàììû:
à — ýêñòðàêòà øåëóõè êðàñíîãî ëóêà, ïîëó÷åííîãî òðàäèöèîííûì ìåòîäîì. Ñïëîøíàÿ ëèíèÿ
ñîîòâåòñòâóåò ÓÔ-õðîìàòîãðàììå, øòðèõîâîé ïóíêòèð ñîîòâåòñòâóåò îáùåìó èîííîìó òîêó ïðè
äåòåêòèðîâàíèè â óñëîâèÿõ èîíèçàöèè ýëåêòðîðàñïûëåíèåì; á — ýêñòðàêòà øåëóõè êðàñíîãî
ëóêà, ïîëó÷åííîãî â ñóáêðèòè÷åñêîé âîäå â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå ïðè 130 Ñ;
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
7
À. Â. Ëåêàðü, Î. Â. Ôèëîíîâà, Ñ. Í. Áîðèñåíêî,
Å. Â. Ìàêñèìåíêî, Å. Â. Âåòðîâà, Í. È. Áîðèñåíêî, Â. È. Ìèíêèí
Ðèñ. 2 â. Õðîìàòîãðàììû:
ìàññ-ñïåêòðû ýêñòðàêòà øåëóõè êðàñíîãî ëóêà, ïîëó÷åííîãî òðàäèöèîííûì ìåòîäîì
ñòâåííî. Íà ðèñ. 2â ïðèâåäåíû òàêæå ìàññ-ñïåêòðû ýêñòðàêòà, ïîëó÷åííîãî òðàäèöèîííûì ìåòîäîì.
Ðàçðàáîòàííàÿ ìåòîäèêà ïðîâåäåíèÿ îáðàùåííî-ôàçîâîãî ÂÝÆÕ àíàëèçà ïîçâîëèëà äîáèòüñÿ ðàçäåëåíèÿ âñåõ öåëåâûõ êîìïîíåíòîâ: îò ïèêîâ äèãëèêîçèäîâ
êâåðöåòèíà II (âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ tr  6,1 ìèí) äî ïèêà àãëèêîíà ðóòèíà —
êâåðöåòèíà I (ïðè tr  71,0 ìèí).
Êàê âèäíî èç õðîìàòîãðàìì íà ðèñ. 2à è 2á, ïîìèìî ïèêà ñòàíäàðòà êâåðöåòèíà ïðè tr  71,0 ìèí, íà õðîìàòîãðàììàõ èìåþòñÿ íåèäåíòèôèöèðîâàííûå ïèêè,
îïðåäåëåíèå êîòîðûõ çàòðóäíåíî èç-çà îòñóòñòâèÿ ñòàíäàðòíûõ âåùåñòâ.  ÷àñòíîñòè, íå èäåíòèôèöèðîâàííûå ïî ïèêàì ñòàíäàðòîâ õðîìàòîãðàôè÷åñêèå ïèêè ñ
tr  22,2 è 29,5 ìèí èìåþò ïëîùàäè ïèêîâ, ñîïîñòàâèìûå èëè ïðåâûøàþùèå
ïëîùàäü ïèêà ñòàíäàðòà êâåðöåòèíà ïðè tr  71,0 ìèí. Èç äàííûõ ðàáîò [15, 16]
ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî ýòî ïèêè äèãëèêîçèäîâ êâåðöåòèíà II, ìîíîãëèêîçèäà
êâåðöåòèíà III è ìîíîãëèêîçèäîâ èçîðàìíåòèíà IV.
Äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ïðèðîäû íåèçâåñòíûõ êîìïîíåíòîâ ýêñòðàêòîâ èñïîëüçîâàëàñü
õðîìàòîìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ ñ èîíèçàöèåé ýëåêòðîðàñïûëåíèåì. Êðîìå õðîìàòîãðàìì
ýêñòðàêòîâ äëÿ òðàäèöèîííîãî ñïîñîáà ýêñòðàêöèè (ðèñ. 2à) è ýêñòðàêöèè â ñðåäå
ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû (ðèñ. 2á ), áûëè ïîëó÷åíû õðîìàòîãðàììû ïî îáùåìó èîííîìó
òîêó è ìàññ-ñïåêòðû ýòèõ ýêñòðàêòîâ â óñëîâèÿõ èîíèçàöèè ýëåêòðîðàñïûëåíèåì.
8
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
Èçâëå÷åíèå áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû
Èç ìàññ-ñïåêòðîâ íà ðèñ. 2â âèäíî, ÷òî õðîìàòîãðàôè÷åñêèé ïèê ñ tr  6,1 ìèí
ðåãèñòðèðóåòñÿ â ìàññ-ñïåêòðàõ ïèêîì ïîëîæèòåëüíî çàðÿæåííîãî èîíà ñ m/z 
 627,05. Ýòî çíà÷åíèå çàðÿäà ïðîòîíèðîâàííîãî èîíà äèãëèêîçèäà êâåðöåòèíà II,
îòëè÷àþùåãîñÿ îò ðóòèíà è èìåþùåãî â îñíîâå ñâîåãî ñêåëåòà ãàëàêòîçèäíûé
ìîíîãëèêîçèä êâåðöåòèíà. Ýòîò ïîëîæèòåëüíî çàðÿæåííûé èîí â äàëüíåéøåì
ôðàãìåíòèðóåòñÿ äî ïðîòîíèðîâàííîãî èîíà ñ m/z  465,02 çà ñ÷åò ïîòåðè ãàëàêòîçèäíîãî îñòàòêà ñ ìàññîé 162. Ñëåäîâàòåëüíî, õðîìàòîãðàôè÷åñêèé ïèê ñî âðåìåíåì óäåðæèâàíèÿ tr  6,1 ìèí îòâå÷àåò äèãëèêîçèäó êâåðöåòèíà II (MW  626,51;
C27H30O17). Ïèê ñ m/z  465,02, íàáëþäàåìûé íà õðîìàòîãðàììå ïðè tr  22,2 ìèí,
â ñâîþ î÷åðåäü, îòâå÷àåò ãàëàêòîçèäíîìó ìîíîãëèêîçèäó êâåðöåòèíà III (MW 
 464,3763; C21H20O12), ïîñêîëüêó ýòîò èîí, â óñëîâèÿõ èîíèçàöèè ýëåêòðîðàñïûëåíèåì, ôðàãìåíòèðóåòñÿ äî ïîëîæèòåëüíî çàðÿæåííîãî èîíà ñ m/z  303,00 —
ïðîòîíèðîâàííîìó èîíó êâåðöåòèíà.
Õðîìàòîãðàôè÷åñêèé ïèê ñ tr  29,5 ìèí äàåò â ìàññ-ñïåêòðå ñèãíàë ñ m/z 
 479,03, ÷òî ñîîòâåòñòâóåò ïðîòîíèðîâàííîìó èîíó ìîíîãëèêîçèäà èçîðàìíåòèíà
IV, êîòîðûé ìîæåò ïðèñóòñòâîâàòü â ìàòðèöå øåëóõè ëóêà êàê èíäèâèäóàëüíîå
ñîåäèíåíèå, òàê è îáðàçîâàòüñÿ â ðåçóëüòàòå ãèäðîëèçà äèãëèêîçèäà èçîðàìíåòèíà
[15, 16].
Õðîìàòîãðàôè÷åñêèé ïèê ñ tr  71,0 ìèí èìååò â ìàññ-ñïåêòðå ñèãíàë ñ m/z 
 303,0, ñîîòâåòñòâóþùèé ïðîòîíèðîâàííîìó èîíó êâåðöåòèíà I, ÷òî, â ñâîþ
î÷åðåäü, ïîäòâåðæäàåòñÿ çíà÷åíèåì âðåìåíè óäåðæèâàíèÿ ñòàíäàðòà êâåðöåòèíà
(tr  71,0 ìèí).
Òàêèì îáðàçîì, èñïîëüçîâàíèå õðîìàòîìàññ-ñïåêòðîìåòðèè ïîçâîëèëî äîêàçàòü, ÷òî íà õðîìàòîãðàììàõ èçó÷åííûõ ýêñòðàêòîâ íàáëþäàþòñÿ ïèêè ñëåäóþùèõ
áèîôëàâîíîèäîâ: äèãëèêîçèäîâ êâåðöåòèíà II, ìîíîãëèêîçèäà êâåðöåòèíà III,
ìîíîãëèêîçèäà èçîðàìíåòèíà IV è êâåðöåòèíà I.
Èäåíòèôèêàöèÿ ïèêîâ õðîìàòîãðàìì ýêñòðàêòîâ (ñì. ðèñ. 2à—2â), ïîëó÷åííàÿ
èç äàííûõ ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè, èñïîëüçîâàíà äëÿ õàðàêòåðèñòèêè êà÷åñòâåííîãî
è êîëè÷åñòâåííîãî ñîñòàâà ýêñòðàêòîâ, ïîëó÷åííûõ ðàçëè÷íûìè ñïîñîáàìè. Íà
ðèñ. 3 ïðèâîäÿòñÿ õðîìàòîãðàììû ýêñòðàêòîâ, ïîëó÷åííûõ â äàííûõ óñëîâèÿõ õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî àíàëèçà.
Èç ðèñ. 3 âèäíî, ÷òî â õðîìàòîãðàììàõ ýêñòðàêòîâ, ïîëó÷åííûõ ñ èñïîëüçîâàíèåì îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé (ãåêñàíà è ýòàíîëà), è õðîìàòîãðàììàõ ýêñòðàêòîâ, ïîëó÷àåìûõ â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû, íàáëþäàþòñÿ ñóùåñòâåííûå
ðàçëè÷èÿ.
Òàê, ïðè ñðàâíåíèè õðîìàòîãðàììû ýêñòðàêòà, ïîëó÷åííîãî â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû (â ñòàòè÷åñêîé ñõåìå) ïðè 130 Ñ (ðèñ. 3à), è õðîìàòîãðàììû ýêñòðàêòà,
ïîëó÷åííîãî â ñóáêðèòè÷åñêîé âîäå ïðè 230 Ñ (ðèñ. 3á), âèäíî, ÷òî ïðè 230 Ñ
îòñóòñòâóþò ïèêè äèãëèêîçèäà êâåðöåòèíà II, ìîíîãëèêîçèäà êâåðöåòèíà III è
èçîðàìíåòèíà IV. Ïðè ýòîì íà õðîìàòîãðàììå ýêñòðàêòà, ïîëó÷åííîãî â ñóáêðèòè÷åñêîé âîäå ïðè 230 Ñ (ðèñ. 3â), â îáëàñòè âðåìåíè óäåðæèâàíèÿ àãëèêîíîâ
(ïðè tr  38,1 ìèí) íàáëþäàåòñÿ íîâûé íåèäåíòèôèöèðîâàííûé ïèê. Ïðè òàêèõ
óñëîâèÿõ õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî àíàëèçà ïèê ñòàíäàðòà êâåðöåòèíà íàáëþäàåòñÿ
ïðè tr  41,6 ìèí. Ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî ýòîò õðîìàòîãðàôè÷åñêèé ïèê îòâå÷àåò ìèðèöèòèíó V — ïðîäóêòó ãèäðîëèçà îäíîãî èëè íåñêîëüêèõ èç ðàíåå
ïðèñóòñòâîâàâøèõ â øåëóõå ëóêà ïðè îáû÷íûõ (25—100 Ñ) òåìïåðàòóðàõ ìîíîèëè äèãëèêîçèäîâ ìèðèöèòèíà. Ýòî êîñâåííî ïîäòâåðæäàåòñÿ èñ÷åçíîâåíèåì íåêîòîðûõ õðîìàòîãðàôè÷åñêèõ ïèêîâ â îáëàñòè ìàëûõ èëè ñðåäíèõ âðåìåí óäåðæèâàíèÿ (tr  20 ìèí).
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
9
À. Â. Ëåêàðü, Î. Â. Ôèëîíîâà, Ñ. Í. Áîðèñåíêî,
Å. Â. Ìàêñèìåíêî, Å. Â. Âåòðîâà, Í. È. Áîðèñåíêî, Â. È. Ìèíêèí
Ðèñ. 3 à, á. Õðîìàòîãðàììû ýêñòðàêòà øåëóõè êðàñíîãî ëóêà:
à — ïîëó÷åííîãî òðàäèöèîííûì ìåòîäîì; á) ïîëó÷åííîãî â ñóáêðèòè÷åñêîé âîäå â ñòàòè÷åñêîì
ðåæèìå ïðè 130 Ñ
10
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
Èçâëå÷åíèå áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû
Ðèñ. 3 â. Õðîìàòîãðàììà ýêñòðàêòà øåëóõè êðàñíîãî ëóêà, ïîëó÷åííîãî â ñóáêðèòè÷åñêîé
âîäå â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå ïðè 230 Ñ
Èñ÷åçíîâåíèå õðîìàòîãðàôè÷åñêèõ ïèêîâ, ñîîòâåòñòâóþùèõ ãëèêîçèäàì, è èçìåíåíèå èíòåíñèâíîñòè ïèêîâ àãëèêîíîâ ìîæíî îáúÿñíèòü ïðîöåññàìè êèñëîòíîãî ãèäðîëèçà ìîíî- è äèãëèêîçèäîâ, ïðîòåêàþùèìè â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé
âîäû. Âîçìîæíîñòü òàêîãî êèñëîòíîãî ãèäðîëèçà âûòåêàåò èç ñóùåñòâåííîãî (íà
òðè ïîðÿäêà) óâåëè÷åíèÿ êîíñòàíòû äèññîöèàöèè âîäû â îáëàñòè òåìïåðàòóð
200—270 Ñ [11]. Ýòî ñâîéñòâî óæå îòìå÷àëîñü â ðàáîòå [13] è áûëî èñïîëüçîâàíî
àâòîðàìè ïðè ðàçðàáîòêå ìåòîäèêè ñèíòåçà ãëèöèððåòèíîâîé êèñëîòû èç ýêñòðàêòà ñîëîäêè [17].
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû îòêðûâàþò ïåðñïåêòèâó ðàçðàáîòêè òåõíîëîãèè ñåëåêòèâíîé ýêñòðàêöèè áèîôëàâîíîèäîâ ïóòåì óïðàâëåíèÿ êà÷åñòâåííûì ñîñòàâîì
ýêñòðàêòà ïîñðåäñòâîì èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ñðåäû — ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû
(òåìïåðàòóðà è âðåìÿ) — ñ öåëüþ ïîëó÷åíèÿ ñìåñè ñ çàäàííûì ñîîòíîøåíèåì
êîëè÷åñòâ ãëèêîçèäîâ è àãëèêîíîâ áèîôëàâîíîèäîâ. Ïîñëåäíåå ïîçâîëèò èçìåíÿòü áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå ñâîéñòâà ýêñòðàêòîâ, ïîëó÷åííûõ â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ îïòèìàëüíûõ óñëîâèé ïðåäëîæåííîé àâòîðàìè ýêñòðàêöèè
áèîôëàâîíîèäîâ â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû èç øåëóõè ëóêà èçó÷åíà çàâèñèìîñòü âûõîäà öåëåâîãî áèîôëàâîíîèäà êâåðöåòèíà (ÊÂ) îò çíà÷åíèé òåìïåðàòóðû ýêñòðàêöèè, ñêîðîñòåé ïîòîêà è âðåìåíè ýêñòðàãèðîâàíèÿ.
Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ çàâèñèìîñòè ýôôåêòèâíîñòè èçâëå÷åíèÿ Ê èç øåëóõè ëóêà îò òåìïåðàòóðû ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 4.
Êàê âèäíî èç äèàãðàììû (ñì. ðèñ. 4), îïòèìàëüíîé äëÿ ýêñòðàêöèè ñóáêðèòè÷åñêîé âîäîé â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå ÿâëÿåòñÿ òåìïåðàòóðà 120 Ñ.
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
11
À. Â. Ëåêàðü, Î. Â. Ôèëîíîâà, Ñ. Í. Áîðèñåíêî,
Å. Â. Ìàêñèìåíêî, Å. Â. Âåòðîâà, Í. È. Áîðèñåíêî, Â. È. Ìèíêèí
Ðèñ. 4. Çàâèñèìîñòü âûõîäà Ê îò òåìïåðàòóðû ýêñòðàêöèè ñóáêðèòè÷åñêîé âîäîé
â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå
Òåìïåðàòóðà íèæå 120 Ñ îêàçûâàåòñÿ íåäîñòàòî÷íîé äëÿ ïîëíîöåííîãî ïðîöåññà
ýêñòðàãèðîâàíèÿ, à ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû ïðèâîäèò ê èçìåíåíèþ íàòèâíîãî
ñîñòàâà ïîëó÷àåìîãî ýêñòðàêòà çà ñ÷åò ÷àñòè÷íîãî ðàçëîæåíèÿ èñõîäíûõ êîìïîíåíòîâ, íàïðèìåð, â ðåçóëüòàòå ãèäðîëèçà ãëèêîçèäîâ.
Âëèÿíèå ïîëÿðíîãî îðãàíè÷åñêîãî ìîäèôèêàòîðà íà ýôôåêòèâíîñòü èçâëå÷åíèÿ
öåëåâûõ ñîåäèíåíèé èçó÷åíî íà ïðèìåðå äîáàâëåíèÿ ýòàíîëà ê âîäå â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå. Ðåçóëüòàòû ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 1.
Êàê âèäíî èç ïîëó÷åííûõ äàííûõ, èñïîëüçîâàíèå 10 % ýòàíîëà äëÿ èçâëå÷åíèÿ ýêñòðàêòà èç øåëóõè ëóêà íå ïðèâåëî ê ïîçèòèâíûì èçìåíåíèÿì ïî êîëè÷åñòâó èçâëå÷åííîãî ÊÂ. Ïîñëåäíåå ìîæåò áûòü ñâÿçàíî ñ óñêîðåíèåì ïðîöåññîâ
äåãðàäàöèè öåëåâûõ ïðîäóêòîâ çà ñ÷åò èçìåíåíèÿ ïîëÿðíîñòè ñðåäû ïðè ïîâûøåíèè òåìïåðàòóð, êàê ýòî îòìå÷åíî ðàíåå (ñì. ðèñ. 4).
Èçó÷åíèå çàâèñèìîñòè âûõîäà Ê îò âðåìåíè ýêñòðàêöèè â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå
ïðîâåäåíî ïðè âûáðàííîé ðàíåå òåìïåðàòóðå 120 Ñ è çàãðóçêå ñûðüÿ 0,3 ã. Ñîîòâåòñòâóþùèå äàííûå ïðèâåäåíû íà ðèñ. 5. Êàê âèäíî èç ïîëó÷åííîé çàâèñèìîñòè,
óâåëè÷åíèå âðåìåíè ýêñòðàãèðîâàíèÿ äî 80 ìèí ïðèâîäèò ê ñíèæåíèþ êîíöåíòðàöèè öåëåâûõ ñîåäèíåíèé â ñìåñè. Òàêèì îáðàçîì, îïòèìàëüíûå óñëîâèÿ ýêñòðàãèðîâàíèÿ â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå: òåìïåðàòóðà 120 Ñ, âðåìÿ ýêñòðàãèðîâàíèÿ 60 ìèí.
Âëèÿíèå âðåìåíè ýêñòðàêöèè íà âûõîä öåëåâûõ ñîåäèíåíèé ïðè ðàçëè÷íûõ
çíà÷åíèÿõ òåìïåðàòóð â äèíàìè÷åñêîì ðåæèìå ýêñòðàêöèè îòðàæåíî â âèäå äèàãðàììû íà ðèñ. 6.
Òàáëèöà 1
Çàâèñèìîñòü âûõîäà êâåðöåòèíà îò ñîñòàâà ýêñòðàãåíòà ïðè ðàçëè÷íûõ òåìïåðàòóðàõ
â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå
Âûõîä êâåðöåòèíà, ìã/ãñûðüÿ
Òåìïåðàòóðà,
C
10 %-íûé ýòàíîë
Âîäà
120
14,94
20,70
140
16,31
19,25
160
2,50
17,45
12
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
Èçâëå÷åíèå áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû
Äëÿ îöåíêè ýôôåêòèâíîñòè ìåòîäà ïîëó÷åíèÿ ýêñòðàêòà èç øåëóõè êðàñíîãî
ëóêà ñóáêðèòè÷åñêîé âîäîé áûëà ïðîâåäåíà òàêæå òðàäèöèîííàÿ ýêñòðàêöèÿ 80 %
ýòàíîëîì [12]. Ñðàâíåíèå ðàçëè÷íûõ ìåòîäîâ ýêñòðàêöèè ïðåäñòàâëåíî â âèäå
äèàãðàììû íà ðèñ. 7 è â òàáëèöå 2.
Ðèñ. 5. Çàâèñèìîñòü âûõîäà Ê îò âðåìåíè ýêñòðàêöèè ñóáêðèòè÷åñêîé âîäîé ïðè òåìïåðàòóðå 120 Ñ â ñòàòè÷åñêîì ðåæèìå
Ðèñ. 6. Çàâèñèìîñòü âûõîäà Ê îò óñëîâèé äèíàìè÷åñêîé ýêñòðàêöèè ñóáêðèòè÷åñêîé
âîäîé
Ðèñ. 7. Çàâèñèìîñòü âûõîäà ÊÂ îò âèäà ýêñòðàêöèè ïðè îïòèìàëüíûõ, äëÿ êàæäîé ýêñïåðèìåíòàëüíîé ñõåìû, óñëîâèÿõ ýêñòðàêöèè (ñòàò. ìåòîä: 120 Ñ; äèíàì. ìåòîä: 250 Ñ;
òðàä. ìåòîä: êèïÿ÷åíèå â 80% ýòàíîëå)
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
13
À. Â. Ëåêàðü, Î. Â. Ôèëîíîâà, Ñ. Í. Áîðèñåíêî,
Å. Â. Ìàêñèìåíêî, Å. Â. Âåòðîâà, Í. È. Áîðèñåíêî, Â. È. Ìèíêèí
Òàáëèöà 2
Ñðàâíåíèå ýôôåêòèâíîñòè ìåòîäèê ýêñòðàêöèè êâåðöåòèíà èç øåëóõè ëóêà
Ïðîäîëæèòåëüíîñòü, Òåìïåðàòóðà,
Êîëè÷åñòâî
ìèí
Ñ
êâåðöåòèíà, ìã/ã
Ñïîñîá ýêñòðàêöèè
Ðàñòâîðèòåëü
 ñóáêðèòè÷åñêîé âîäå,
ñòàòè÷åñêàÿ ñõåìà
Âîäà
60
120
20,7
 ñóáêðèòè÷åñêîé âîäå,
ïðîòî÷íàÿ ñõåìà
Âîäà
35
250
21,6
Ãåêñàí,
80 % ýòàíîë
480—600
80
17,6
Òðàäèöèîííàÿ
ýêñòðàêöèÿ
Êîëè÷åñòâî êâåðöåòèíà, èçâëåêàåìîãî â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû, êàê ñëåäóåò èç ïðèâåäåííûõ â òàáëèöå 2 äàííûõ, ñîïîñòàâèìî ñ åãî êîëè÷åñòâîì, èçâëåêàåìûì ïî òðàäèöèîííîé ìåòîäèêå. Íî ïðîöåññ ïðîòåêàåò â 3—4 ðàçà áûñòðåå è
èñêëþ÷àåò èñïîëüçîâàíèå äîðîãîñòîÿùèõ è òîêñè÷íûõ îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé.
ÇÀÊËÞ×ÅÍÈÅ
Ïðåäëîæåíà è èçó÷åíà ýêîëîãè÷åñêè ÷èñòàÿ è ýôôåêòèâíàÿ ìåòîäèêà èçâëå÷åíèÿ öåëåâûõ áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû.
Ñ óâåëè÷åíèåì òåìïåðàòóðû ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû êîëè÷åñòâåííûé è êà÷åñòâåííûé ñîñòàâ ýêñòðàêòîâ èçìåíÿåòñÿ â ñòîðîíó âîçðàñòàíèÿ êîëè÷åñòâà àãëèêîíîâ ðóòèíîçèäîâ çà ñ÷åò ïðîöåññîâ êèñëîòíîãî ãèäðîëèçà. Ýòî â ïåðñïåêòèâå
ïîçâîëÿåò ðåàëèçîâàòü òåõíîëîãèþ ñåëåêòèâíîé ýêñòðàêöèè ñ öåëüþ ïîëó÷åíèÿ
ýêñòðàêòîâ ñ çàäàííûì ñîîòíîøåíèåì ãëèêîçèäîâ è àãëèêîíîâ.
Ïî ýôôåêòèâíîñòè èçâëå÷åíèÿ êâåðöåòèíà ýêñòðàêöèÿ â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû ñîïîñòàâèìà ñ òðàäèöèîííûìè ìåòîäèêàìè ýêñòðàêöèè, íî ïðîòåêàåò
â 3—4 ðàçà áûñòðåå è èñêëþ÷àåò èñïîëüçîâàíèå äîðîãîñòîÿùèõ è òîêñè÷íûõ îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé.
Ðàáîòà âûïîëíåíà ïðè ôèíàíñîâîé ïîääåðæêå ãðàíòà ÐÔÔÈ 11-03-12141îôè-ì-2011, ãðàíòîâ Ïðåçèäåíòà ÐÔ ïî ïîääåðæêå âåäóùèõ íàó÷íûõ øêîë ÍØ927.2012.3, ÌÊ-4425.2011 è â ðàìêàõ ãîñ. çàäàíèÿ âóçàì íà 2012 ãîä (ïðîåêò
3.5193.2011).
ÑÏÈÑÎÊ ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ
1.
2.
3.
4.
7.
8.
9.
Liu R.H. Am. J. Clin. Nutr. 2003. Vol. 78. P. 517.
Le Marchand L. J. Biomed. Pharmacother. 2002. Vol. 56. P. 296.
Gao C.-M., Takezaki T., Ding J.-H., Li M.-S., Tajima E. J. China Cancer Sci. 1999. Vol. 90. P. 614.
Gabler N.K., Ostrowska E., Sterling S.J., Jones R.B., Tatham B.G., Eagling D.R., Jois M., Dunshea F.R.
J. Sci. Food Agric. 2005. Vol. 85. P. 154.
Yamada K., Naemura A., Sawashita N., Noguchi Y., Yamamoto L. J. Thrombosis Res. 2004.
Vol. 114. P. 213.
Jung Y.-S., Kim M.H., Lee S.H., Baik E.J., Park S.W., Moon C.-H. Prostaglandins, Leukotrienes
Essent. Fatty Acids. 2002. Vol. 66. P. 453.
Boots A.W., Haenen G.R.M.M., Bast A. European J. of Pharmacology. 2008. Vol. 585. I. 2—3. P. 325.
Morales M.A., Tortoriello J., Meckes M., Paz D., Lozoya X. Arch. Med. Res. 1994. Vol. 25. I. 1. Ð. 17.
Larson A.J., Symons J.D., Jalili T. Pharmaceuticals. 2010. Vol. 3. P. 237.
14
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012
5.
6.
Èçâëå÷åíèå áèîôëàâîíîèäîâ èç øåëóõè ëóêà â ñðåäå ñóáêðèòè÷åñêîé âîäû
10. Perez-Vizcaino F., Duarte J., Jimenez R., Santos-Buelda C., Osuna A. Pharmacological Reports.
2009. Vol. 61. P. 67.
11. Ãàëêèí À.À., Ëóíèí Â.Â. Æ. Óñïåõè õèìèè. 2005. Ò. 74. ¹ 1. Ñ. 24.
12. ×åðâÿêîâñêèé Å.Ì., Ãèëåï À.À., Âëàñîâà Ò.Ì. Ìîëîäåæü â íàóêå. 2007. Ïðèë. ê æóðí. Âåñ.
Íàö. àêàä. íàâóê Áåëàðóñ³. 2008.  4 ÷. ×. 3: ñåðèÿ õèìè÷åñêèõ íàóê. Ñ. 338.
13. Ëåêàðü À.Â., Áîðèñåíêî Ñ.Í., Ìàêñèìåíêî Å.Â., Áîðèñåíêî Ð.Í., Âåòðîâà Å.Â., Áîðèñåíêî Í.È.,
Ìèíêèí Â.È. ÑÊÔ-ÒÏ. 2008. Ò. 3. ¹ 2. Ñ. 33.
14. Ôèëîíîâà Î.Â., Áîðèñåíêî Ñ.Í., Ìàêñèìåíêî Å.Â., Áîðèñåíêî Ð.Í., Ëåêàðü À.Â., Áîðèñåíêî Í.È., Ìèíêèí Â.È. ÑÊÔ-ÒÏ. 2008. Ò. 3. ¹ 2. C. 37.
15. Davis B.D., Brodbelt J.S. Anal. Chem. 2005. Vol. 77. P. 1883.
16. Olsson M.E., Gustavsson K.-E., Vagen I.M. J. Agric. Food Chem. 2010. Vol. 58. P. 2323.
17. Òèõîìèðîâà Ê.Ñ., Ëåêàðü À.Â., Áîðèñåíêî Ñ.Í., Âåòðîâà Å.Â., Áîðèñåíêî Í.È., Ìèíêèí Â.È.
ÑÊÔ-ÒÏ. 2010. Ò. 5. ¹ 2. Ñ. 21.
EXTRACTION OF THE BIOFLAVONOID MIXTURE FROM ONION
HUSK BY SUBCRITICAL WATER
A. V. Lekar, 2 O.V. Filonova, 2 S.N. Borisenko, 1E.V. Maksimenko,
2
E. V. Vetrova, 1N. I. Borisenko, 2V. I. Minkin
1
1
Eñological and Analytical Center, Southern Federal University, Rostov-on-Don, Russia
Institute of Physical and Organic Chemistry, Southern Federal University, Rostov-on-Don, Russia
2
New method for extraction of bioflavonoids from onion husk using subcritical water
was developed. The method is environmentally friendly and more effective than
traditional extraction methods using of the expensive and toxic organic solvents.
To determine the quantitative and qualitative composition of obtained extracts was
used high-performance liquid chromatography combined with mass-spectrometry.
K e y w o r d s: subcritical water, onion husk, bioflavînoids, quercetin, quercetin glycosides,
isorhamnetin glycosides.
«Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 7. ¹ 4. 2012