Использование особого иммунологического статуса ЦНС для

ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÀß
ÑÒÀÒÜß
Íåâðîëîãè÷åñêèé âåñòíèê — 2007 — Ò. ÕXXIX,
âûï. 1 — Ñ. 119—123
ÓÄÊ: 616.831
À.Â. Êóëèêîâ, Ë.Â. Àðõèïîâà, Ã.Í.Ñìèðíîâà, Ä.À. Êóëèêîâ, Ã.Ò. Ñóõèõ
ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅ ÎÑÎÁÎÃÎ ÈÌÌÓÍÎËÎÃÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÑÒÀÒÓÑÀ ÖÍÑ ÄËß
ÑÎÇÄÀÍÈß ÑÏÎÑÎÁÎÂ ÊÎÌÏÅÍÑÀÖÈÈ ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÛÕ
ÏÀÒÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ÑÎÑÒÎßÍÈÉ
Èíñòèòóò òåîðåòè÷åñêîé è ýêñïåðèìåíòàëüíîé áèîôèçèêè ÐÀÍ, ã. Ïóùèíî
Ðåôåðàò. Èñïîëüçîâàíû ñâîéñòâà îòíîñèòåëüíîé
èììóíîëîãè÷åñêîé ïðèâèëåãèðîâàííîñòè ìîçãà è ïåðåäíåé
êàìåðû ãëàçà äëÿ ðàçðàáîòêè òðàíñïëàíòîëîãè÷åñêèõ
ñïîñîáîâ êîìïåíñàöèè ïàòîëîãè÷åñêèõ ñîñòîÿíèé ó
æèâîòíûõ. Ðàçðàáîòàíû òðàíñïëàíòîëîãè÷åñêèå ñïîñîáû
êîìïåíñàöèè íîðàäðåíåðãè÷åñêîé íåäîñòàòî÷íîñòè,
âîçðàñòíîé è ñòðåññîðíîé äåãåíåðàöèè òèìóñà, äèàáåòà.
Èññëåäîâàíû ôèçèîëîãè÷åñêèå, áèîõèìè÷åñêèå îñîáåííîñòè
ïðîòåêàíèÿ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ ïàòîëîãèé â ïåðèîäå èõ
èíèöèàöèè, òå÷åíèÿ è äîëãîâðåìåííîé êîìïåíñàöèè ñ
ïîìîùüþ òðàíñïëàíòàöèè òêàíåé â ìîçã è ïåðåäíþþ êàìåðó
ãëàçà. Ïîêàçàíî, ÷òî ïîñëå óñïåøíî ïðîâåäåííîé îïåðàöèè
ïðîèñõîäèò ïîëíàÿ èëè ÷àñòè÷íàÿ íîðìàëèçàöèÿ îñíîâíûõ
ôèçèîëîãè÷åñêèõ è áèîõèìè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé.
À.Â. Êóëèêîâ, Ë.Â. Àðõèïîâà, Ã.Í. Ñìèðíîâà,
Ä.À. Êóëèêîâ, Ã.Ò. Ñóõèõ
ŒÇ•Ê ÍÅРÑÈÑÒÅÌÀÑÛÍÛ• ÌÀÕÑÓÑ
ÈÌÌÓÍÎËÎÃÈÊ ÑÒÀÒÓÑÛÍ ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜ
ÏÀÒÎËÎÃÈÊ ÕÀË•ÒÍÅ ÊÎÌÏÅÍÑÀÖÈßË•Œ
ÛÑÓËËÀÐÛÍ ÁÓËÄÛÐÓ ÌÀÊÑÀÒÛÍÄÀ ÊÓËËÀÍÓ
Õàéâàííàðäà ïàòîëîãèê õàë•òíå êîìïåíñàöèÿë•œíå•
òðàíñïëàíòîëîãèê ûñóëëàðûí ýøë•œä• ìè Ÿ•ì êœçíå• àëãû
êàìåðàñûíû• ÷àãûøòûðìà÷à èììóíîëîãèê šñòåíëåê
œçëåêë•ðå ôàéäàëàíûëäû. Áóãàç áèçå, äèàáåòíû•
íîðàäðåíåðãèê ÿêòàí •èòåøñåçëåêëå áóëìàâûí, ÿøüê• êàðàï
Ÿ•ì ñòðåññîð äåãåíåðàöèÿíå êîìïåíñàöèÿë•œíå•
òðàíñïëàíòîëîãèê ûñóëëàðû ýøë•íã•í. Ìèã• Ÿ•ì êœçíå•
àëãû êàìåðàñûíà òóêûìàëàðíû òðàíñïëàíòàöèÿë•œ
ÿðä•ìåíä• ýêñïåðèìåíòàëü ïàòîëîãèÿíå• áàøëàíãû÷, áàðó
Ÿ•ì îçàê âàêûòêà èñ•ïë•íã•í êîìïåíñàöèÿ ÷îðûíäàãû
ôèçèîëîãèê, áèîõèìèê œçåí÷•ëåêë•ðå òèêøåðåëã•í. Ó•ûøëû
ÿñàëãàí îïåðàöèÿä•í ñî• òšï ôèçèàëîãèê Ÿ•ì áèîõèìèê
êœðñ•òêå÷ë•ðíå• òóëûñûí÷à ÿêè šëåø÷• íîðìàëüë•ø• áàðóû
à÷ûêëàíãàí.
A.V. Kulikov, L.V. Arkhipova, G.N. Smirnova,
D.A. Kulikov, G.T. Sukhikh
USE OF SPECIAL IMMUNOLOGIC CNS STATUS FOR
CREATING COMPENSATION OF EXPERIMENTAL
PATHOLOGICAL STATES
For developing transplantation ways of pathological state
compensation in animals qualities of relative immunologic
priviledge of brain and anterior chamber of an eye were used.
Transplantation ways of compensation for nor-adrenergic
insufficiency, age and stress degeneration of thymus, of diabetes
have been developed. There were investigated physiologic and
biochemical peculiarities of experimental pathology proceedings
at the periods of their initiation, course and long-time
compensation with the help of transplantating tissues in brain
and anterior chamber of an eye. It was shown that after a
successive surgery there occurs comlete or partial normalization
of basic physiologic and biochemical indices.
È
çâåñòíî, ÷òî íåêîòîðûå îáëàñòè îðãàíèçìà
ìëåêîïèòàþùèõ îáëàäàþò ñâîéñòâàìè
îòíîñèòåëüíîé èììóíîïðèâèëåãèðîâàííîñòè. Ýòî
ïîçâîëÿåò ïðîâîäèòü ïåðåñàäêó êëåòîê è òêàíåé â
ýòè ó÷àñòêè áåç ïðèìåíåíèÿ èììóíîñóïðåññèâíîé
òåðàïèè èëè ìèíèìèçèðîâàòü åå. Ê èììóíîïðèâèëåãèðîâàííûì çîíàì îòíîñÿò â ïåðâóþ î÷åðåäü
íåêîòîðûå îòäåëû ãîëîâíîãî ìîçãà, ïåðåäíþþ
êàìåðó ãëàçà (ÏÊÃ) è ñåìåííèê, ÷òî ñâÿçàíî ñ
îñîáûì ñòðîåíèåì ãèñòî-ãåìàòè÷åñêèõ áàðüåðîâ
ýòèõ îáëàñòåé, â íîðìå íå ïðîïóñêàþùèõ
èììóíîêîìïåòåíòíûå êëåòêè. Òå æå àêòèâèðîâàííûå èììóííûå êëåòêè, êîòîðûå âñå æå
ïðîíèêàþò â èììóíîïðèâèëåãèðîâàííûå îáëàñòè,
ýëèìèíèðóþòñÿ ïîä äåéñòâèåì Fas-ligand,
ýêñïðåññèðîâàííîãî â ýòèõ ó÷àñòêàõ. Ôóíêöèîíàëüíî àêòèâíûé Fas-L îáíàðóæåí â
ýïèòåëèè è ýíäîòåëèè ðîãîâèöû, ðàäóæíîé
îáîëî÷êå ãëàçà è â ìîçãå, ãäå Fas/Fas-L-ñèñòåìà
ïðîòåêòèðóåò èììóíîëîãè÷åñêóþ ïðèâèëåãèðîâàííîñòü [7, 9, 10, 13, 14]. Èíòåðåñ ê òðàíñïëàíòàöèè òêàíè â ÏÊà è ìîçã ñâÿçàí åùå è ñ òåì, ÷òî
â ýòèõ ñòðóêòóðàõ íåò ëèìôàòè÷åñêîãî ïðîòîêà,
â ðåçóëüòàòå ÷åãî îòñóòñòâóåò àôôåðåíòíîå çâåíî
èììóííîé ðåàêöèè [3]. Êðîìå òîãî, òðàíñïëàíòàòû
íåçðåëîé òêàíè ÖÍÑ èìåþò î÷åíü íèçêèé óðîâåíü
àíòèãåíîâ ãëàâíîãî êîìïëåêñà ãèñòîñîâìåñòèìîñòè [6, 12].
Öåëüþ
íàøèõ
èññëåäîâàíèé
áûëî
èñïîëüçîâàíèå ñâîéñòâà îòíîñèòåëüíîé
èììóíîëîãè÷åñêîé ïðèâèëåãèðîâàííîñòè ìîçãà è
ïåðåäíåé êàìåðû ãëàçà äëÿ ðàçðàáîòêè
òðàíñïëàíòîëîãè÷åñêèõ ñïîñîáîâ êîìïåíñàöèè
ïàòîëîãè÷åñêèõ ñîñòîÿíèé ó æèâîòíûõ.
 ýêñïåðèìåíòàõ èñïîëüçîâàëè êðûñ-ñàìöîâ
Âèñòàð è áåñïîðîäíûõ. Äëÿ îïåðàöèè îòáèðàëè
æèâîòíûõ îäíîãî âîçðàñòà ñ íà÷àëüíîé ìàññîé
200—230 ã. Êðîëèêè-ñàìöû ïîðîäû øèíøèëëà,
èñïîëüçóåìûå â ýêñïåðèìåíòàõ, èìåëè íà÷àëüíóþ
ìàññó 2500—3000 ã, ñàìêè-äîíîðû — áîëåå 4500 ã.
119
À.Â. ÊÓËÈÊÎÂ, Ë.Â. ÀÐÕÈÏÎÂÀ, Ã.Í.ÑÌÈÐÍÎÂÀ, Ä.À. ÊÓËÈÊÎÂ, Ã.Ò. ÑÓÕÈÕ
Уровень норадреналина (нг/г ткани)
Âñåõ æèâîòíûõ âûðàùèâàëè â óñëîâèÿõ âèâàðèÿ
íà ñòàíäàðòíîé äèåòå.
Êðûñ ñ íîðàäðåíåðãè÷åñêîé íåäîñòàòî÷íîñòüþ
ïîëó÷àëè ñ ïîìîùüþ ââåäåíèÿ íîâîðîæäåííûì
êðûñÿòàì â ïåðâûå òðîå ñóòîê ïîäêîæíî íåéðîòîêñèí 6-îêñèäîôàìèí (6-ÎÄÀ, «Sigma», ÑØÀ) â äîçå
100 ìã/êã, ÷òî ïîçâîëÿëî äîñòè÷ü õðîíè÷åñêîå
ñíèæåíèå óðîâíÿ íîðàäðåíàëèíà â ìîçãå.
Æèâîòíûõ 6-ìåñÿ÷íîãî âîçðàñòà ñ äåïðèâàöèåé
íîðàäðåíåðãè÷åñêîé ñèñòåìû îïåðèðîâàëè â
ñòåðèëüíûõ óñëîâèÿõ â ñïåöèàëüíî îáîðóäîâàííîé
îïåðàöèîííîé êîìíàòå. Äëÿ ïåðåñàäêè áðàëè òêàíü
17-äíåâíûõ ýìáðèîíîâ. Òêàíü äëÿ òðàíñïëàíòàöèè
îáúåìîì îêîëî 1 ìì3 èññåêàëè èç îáëàñòè ñèíåãî
ïÿòíà èëè èç çàêëàäêè ãèïïîêàìïà. Ïîñëåäíèé áûë
èñïîëüçîâàí äëÿ êîíòðîëüíûõ îïûòîâ êàê
ñòðóêòóðà, íå ñîäåðæàùàÿ íîðàäðåíåðãè÷åñêèõ
íåéðîíîâ. Âûäåëåííûé ìàòåðèàë ïîìåùàëè â
ðàñòâîð Èãëà. Êðûñàì-ðåöèïèåíòàì ïîä
íåìáóòàëîâûì íàðêîçîì (40 ìã/êã, â/á) ñëåâà íà
÷åðåïå äåëàëè òðåïàíàöèîííîå îòâåðñòèå
äèàìåòðîì 2-3 ìì, öåíòð êîòîðîãî ðàñïîëàãàëñÿ
íàä ôðîíòàëüíîé êîðîé, è îòñàñûâàëè íåáîëüøîé
ó÷àñòîê êîðû. Äàëåå ïåðâîé ãðóïïå æèâîòíûõ
ïîñðåäñòâîì øïðèöà ñî ñòåêëÿííûì íàêîíå÷íèêîì
ââîäèëè ó÷àñòêè òêàíè ãèïïîêàìïà, òðåòüåé
(ëîæíîîïåðèðîâàííûå) — ýêâèâàëåíòíûé ðàñòâîð
Èãëà.
Àëëî- è êñåíîòðàíñïëàíòàöèþ ïîäæåëóäî÷íîé
æåëåçû, òêàíè òèìóñà â ïåðåäíþþ êàìåðó ãëàçà,
áîêîâûå æåëóäî÷êè ìîçãà ïðîâîäèëè ïî
ðàçðàáîòàííûì íàìè ìåòîäàì [9, 10]. Èíèöèàöèþ
äèàáåòà, îïðåäåëåíèå ïîòðåáëåíèÿ âîäû,
êîëè÷åñòâà ãëþêîçû âûïîëíÿëè ïî ñòàíäàðòíûì
ìåòîäèêàì.
Ñòàòèñòè÷åñêóþ
îáðàáîòêó
äàííûõ
ïðîèçâîäèëè ñ èñïîëüçîâàíèåì ïðîãðàììû
Statistica. Äëÿ ïîëó÷åííûõ âåëè÷èí ïîäñ÷èòûâàëè
ñðåäíåêâàäðàòè÷åñêóþ îøèáêó. Ðàçëè÷èÿ ñðåäíèõ
âåëè÷èí ïðèçíàâàëèñü äîñòîâåðíûìè ïðè p<0,05.
Èçâåñòíî, ÷òî ïîñëå ðàííåãî ïîñòíàòàëüíîãî
ââåäåíèÿ ñïåöèôè÷åñêîãî íåéðîòîêñèíà 6-ÎÄÀ
â ìîçãå æèâîòíûõ ïðîèñõîäèò ñíèæåíèå óðîâíÿ
íîðàäðåíàëèíà [11]. Èçó÷àëàñü âîçìîæíîñòü
âîññòàíîâëåíèÿ óðîâíÿ íîðàäðåíàëèíà ìîçãà,
âûçâàííîãî 6-ÎÄÀ, ñ ïîìîùüþ òðàíñïëàíòàöèè â
ìîçã ýìáðèîíàëüíîé òêàíè ñèíåãî ïÿòíà (locus
coeruleus) — îñíîâíîãî èñòî÷íèêà âîñõîäÿùåé
íîðàäðåíåðãè÷åñêîé èííåðâàöèè.
500
450
400
350
300
250
200
150
100
50
0
Интактные
крысы (n=10)
Транспл.
гипокампа (n=3)
p<0,001
Ложнооперир.
животные
(n=3) p<0,001
Транспл.
синего пятна
(n=5) p<0,05
Ðèñ. 1. Ïîêàçàòåëè íîðàäðåíàëèíà â íåîêîðòåêñå êðûñ ðàçëè÷íûõ ãðóïï.
ââîäèëè òêàíü èç îáëàñòè çàêëàäêè ñèíåãî ïÿòíà.
Îäèí òðàíñïëàíòàò ââîäèëè ïîä óãëîì ÷åðåç
áîêîâóþ ñòåíêó ÿìêè â ïàðåíõèìó êîðû
êîíòðëàòåðàëüíîãî ïîëóøàðèÿ, äðóãîé ïîìåùàëè
íà äíî ÿìêè. Âòîðîé ãðóïïå òàêèì æå îáðàçîì
120
Êàê âèäíî èç ðèñ. 1, ó ëîæíîîïåðèðîâàííûõ
êðûñ ñ ïîñòíàòàëüíûì ââåäåíèåì 6-ÎÄÀ
ñîäåðæàíèå íîðàäðåíàëèíà äàæå ÷åðåç 15 ìåñÿöåâ
ïîñëå ââåäåíèÿ íåéðîòîêñèíà ñîñòàâëÿëî ëèøü
15% îò íîðìû. Ó æèâîòíûõ ñ êîíòðîëüíîé
ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅ ÎÑÎÁÎÃÎ ÈÌÌÓÍÎËÎÃÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÑÒÀÒÓÑÀ ÖÍÑ ÄËß ÑÎÇÄÀÍÈß ÑÏÎÑÎÁÎÂ
ÊÎÌÏÅÍÑÀÖÈÈ ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÛÕ ÏÀÒÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ÑÎÑÒÎßÍÈÉ
òðàíñïëàíòàöèåé òêàíè ãèïïîêàìïà â íåîêîðòåêñ
áèîõèìè÷åñêèå ïîêàçàòåëè ïðàêòè÷åñêè íå
îòëè÷àëèñü îò ïîêàçàòåëåé ãðóïïû ëîæíîîïåðèðîâàíííûõ æèâîòíûõ.
Ó æèâîòíûõ ñ òðàíñïëàíòàòàìè òêàíè ñèíåãî
ïÿòíà â íåîêîðòåêñ íàáëþäàëîñü çíà÷èòåëüíîå
ïîâûøåíèå óðîâíÿ íîðàäðåíàëèíà â íåîêîðòåêñå
(äî 60% îò íîðìû) ïî ñðàâíåíèþ ñ òàêîâûìè â
êîíòðîëüíûõ ÍÀ-äåïðèâèðîâàííûõ ãðóïïàõ.
Çíà÷èòåëüíîå ïîâûøåíèå óðîâíÿ íîðàäðåíàëèíà â êîðå ïðè ïåðåñàäêå ýìáðèîíàëüíîé òêàíè
ñèíåãî ïÿòíà â íåîêîðòåêñ ìîæíî îáúÿñíèòü
òðàíñïëàíòàöèè èììóíîêîìïåòåíòíûõ òêàíåé.
Âíà÷àëå áûëà èññëåäîâàíà äèíàìèêà ðåçêîãî
ñíèæåíèÿ êîëè÷åñòâà òèìîöèòîâ â âèëî÷êîâîé
æåëåçå ñ âîçðàñòîì. Èññëåäîâàëîñü êîëè÷åñòâî
òèìîöèòîâ ó 2, 5, 4, 5, 7, 8, 19, 20-ìåñÿ÷íûõ êðûñ.
Ïîêàçàíî, ÷òî êîëè÷åñòâî òèìîöèòîâ ó 20-ìåñÿ÷íûõ æèâîòíûõ ïî ñðàâíåíèþ ñ 2,5-ìåñÿ÷íûìè
óìåíüøèëîñü â 90,6 ðàçà. Íà âîïðîñ, ìîæíî ëè
ïðåäîòâðàòèòü âîçðàñòíóþ èíâîëþöèþ òèìóñà ó
êðûñ ðàçíîãî âîçðàñòà íà áîëåå îòäàëåííûõ ñðîêàõ,
ìû ïîïûòàëèñü îòâåòèòü â ñëåäóþùåé ñåðèè
ýêñïåðèìåíòîâ.
70
7
(*10 )
60
50
40
30
20
10
0
(n=4
5
n=5)
интактный контроль
7
(n=5)
8
(n=6)
возраст (мес)
трансплантация тимуса в ПКÃ
Ðèñ.2. Êîëè÷åñòâî òèìîöèòîâ â âèëî÷êîâîé æåëåçå ó æèâîòíûõ ðàçíîãî âîçðàñòà ÷åðåç 3 ìåñÿöà ïîñëå
òðàíñïëàíòàöèè òêàíè â ÏÊÃ.
ïðèæèâëåíèåì è äëèòåëüíûì ôóíêöèîíèðîâàíèåì
òðàíñïëàíòèðîâàííûõ íîðàäðåíåðãè÷åñêèõ
íåéðîíîâ. Âîçìîæíîñòü ïðîðàñòàíèÿ âîëîêîí îò
ñèíåãî ïÿòíà íà çíà÷èòåëüíîå ðàññòîÿíèå
(äî 12 ìì) áûëà ïîêàçàíà ïðè åãî òðàíñïëàíòàöèè
â äðóãèå îáëàñòè ìîçãà [8]. Âìåñòå ñ òåì
ïðîðàñòàþùèå àêñîíû íå äîñòèãàþò îòäàëåííûõ
(ñòâîëîâûõ) îòäåëîâ ìîçãà, ãäå íîðàäðåíàëèí
îñòàåòñÿ íà òîì æå óðîâíå, ÷òî è ó êîíòðîëüíûõ
ãðóïï æèâîòíûõ.
Ñëåäóþùèìè ýêñïåðèìåíòàëüíûìè ìîäåëÿìè,
ðàçðàáîòàííûìè ñ èñïîëüçîâàíèåì îòíîñèòåëüíîé
èììóíîïðèâèëåãèðîâàííîñòè ïåðåäíåé êàìåðû
ãëàçà, áûëè ñïîñîáû ìîäóëÿöèè âîçðàñòíîé
èíâîëþöèè òèìóñà è êîìïåíñàöèè èììóíîëîãè÷åñêîé íåäîñòàòî÷íîñòè ó êðûñ ñ ïîìîùüþ
Êàê âèäíî èç ðèñ. 2, êîëè÷åñòâî òèìîöèòîâ
÷åðåç 3 ìåñÿöà ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè òèìóñà â ÏÊÃ
êðûñ óâåëè÷èëîñü ïî ñðàâíåíèþ ñ èíòàêòíûì
êîíòðîëåì íà 295% ó 5-ìåñÿ÷íûõ æèâîòíûõ,
íà 225% ó 7-ìåñÿ÷íûõ è íà 272% ó 8-ìåñÿ÷íûõ êðûñ.
Èçâåñòíî, ÷òî ïîëîâûå æåëåçû íàõîäÿòñÿ â
àíòàãîíèñòè÷åñêèõ âçàèìîîòíîøåíèÿõ ñ òèìóñîì.
Èìåííî â ïåðèîäå ïîëîâîãî ñîçðåâàíèÿ íà÷èíàåòñÿ
ðåçêàÿ âîçðàñòíàÿ èíâîëþöèÿ òèìóñà, à
ãîíàäýêòîìèÿ ïðèâîäèò ê ïîâûøåíèþ ó ñòàðûõ
æèâîòíûõ ìàññû è êëåòî÷íîñòè òèìóñà [1, 5],
ò.å. îòñóòñòâèå àíòàãîíèçìà ìåæäó òèìóñíûìè è
ïîëîâûìè ãîðìîíàìè äàåò âîçìîæíîñòü
âèëî÷êîâîé æåëåçå ïðîãðåññèâíî ðàçâèâàòüñÿ.
Ïîýòîìó â ñâîèõ èññëåäîâàíèÿõ ìû áðàëè äëÿ
àëëîòðàíñïëàíòàöèè òèìóñ íåïîëîâîçðåëûõ
121
À.Â. ÊÓËÈÊÎÂ, Ë.Â. ÀÐÕÈÏÎÂÀ, Ã.Í.ÑÌÈÐÍÎÂÀ, Ä.À. ÊÓËÈÊÎÂ, Ã.Ò. ÑÓÕÈÕ
æèâîòíûõ, åùå íå ïîäâåðãøèéñÿ óãíåòàþùåìó
äåéñòâèþ ïîëîâûõ ãîðìîíîâ. Ïðîëèôåðàòèâíûé
ïîòåíöèàë è ñïîñîáíîñòü ê ãîðìîíàëüíîé
ïðîäóêöèè òàêèõ òðàíñïëàíòàòîâ âûøå, ÷åì ó
òðàíñïëàíòàòîâ îò âçðîñëûõ æèâîòíûõ. Åñëè
ó÷åñòü, ÷òî ïåðåñàäêó òêàíè ïðîâîäèëè â
îòíîñèòåëüíî èììóíîïðèâèëåãèðîâàííóþ
ïåðåäíþþ êàìåðó ãëàçà, ãäå îíà ìîãëà
ôóíêöèîíèðîâàòü äëèòåëüíîå âðåìÿ, ñòàíîâèòñÿ
ïîíÿòíî, ïî÷åìó îòíîñèòåëüíî íåáîëüøîé êóñî÷åê
èììóíîêîìïåòåíòíîé òêàíè ïðèîñòàíàâëèâàåò
èíâîëþöèè òèìóñà ó æèâîòíûõ ðàçíûõ âîçðàñòíûõ
ãðóïï.
Ïðè ðàçðàáîòêå ñïîñîáîâ òðàíñïëàíòîëîãè÷åñêîé êîìïåíñàöèè ýêñïåðèìåíòàëüíîãî äèàáåòà
ìû ïðèìåíÿëè øèðîêî ðàñïðîñòðàíåííóþ ìîäåëü
àëëîêñàíîâîãî äèàáåòà. Â ýêñïåðèìåíòàõ ìû
èñïîëüçîâàëè æèâîòíûõ ñ îñòðûì äèàáåòîì, ó
êîòîðûõ êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè
ïðåâûøàëà 20 ììîëü/ë, à â ìî÷å áûëà áîëåå
2000 ìã%.
 ïðîöåññå âûïîëíåíèÿ ðàáîòû áûëî ðàçðàáîòàíî íåñêîëüêî ìîäåëåé òðàíñïëàíòîëîãè÷åñêîé
êîìïåíñàöèè àëëîêñàíîâîãî äèàáåòà. Â äàííîé
ñåðèè èñïîëüçîâàëè àëëî- è êñåíîòðàíñïëàíòàöèþ
ýìáðèîíàëüíîé ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû â
ïåðåäíþþ êàìåðó ãëàçà è áîêîâûå æåëóäî÷êè
ìîçãà êðûñ è êðîëèêîâ.
Òàáëèöà 1
Ðåçóëüòàòû àëëîòðàíñïëàíòàöèè ôåòàëüíîé
ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû â ïåðåäíþþ êàìåðó ãëàçà è
áîêîâûå æåëóäî÷êè ìîçãà æèâîòíûì ñ
ýêñïåðèìåíòàëüíûì äèàáåòîì
Ðåöèïèåíòû
Êðûñû
Âèñòàð
Êðûñû
Âèñòàð
Êðûñû
Âèñòàð*
Êðîëèê
Øèíøèëëà
Äîíîð
Êðûñû
Âèñòàð
Êðûñû
áåñïîðîäí.
Êðûñû
Âèñòàð*
Êðîëèê
Øèíøèëëà
Êîìïåíñàöèÿ äèàáåòà,
øò/%
ïîëíàÿ ÷àñòè÷íàÿ
Âñåãî
153/49
124/40
311/100
15/40,5
15/40,5
37/100
6/60
2/20
10/100
3/30
4/40
10/100
Íàèáîëåå âûñîêèé ïðîöåíò êîìïåíñàöèè
ýêñïåðèìåíòàëüíîãî äèàáåòà áûë ïîëó÷åí, êîãäà â
êà÷åñòâå äîíîðà è ðåöèïèåíòà èñïîëüçîâàëè êðûñ
Âèñòàð (89%). Ïîëíàÿ êîìïåíñàöèÿ (3,8—
8,8 ììîëü/ë) îòìå÷àëàñü ó 153 (49%) îïåðèðîâàííûõ æèâîòíûõ, à ÷àñòè÷íàÿ (8,8—13,8 ììîëü/ë) —
ó 124 (40%). Äëÿ òîãî ÷òîáû óáåäèòüñÿ, ÷òî íåò
áîëüøèõ ðàçëè÷èé ïðè ðàçíûõ âàðèàíòàõ
122
àëëîòðàíñïëàíòàöèè, áûëà ïðîâåäåíà ñåðèÿ
ýêñïåðèìåíòîâ ïî òðàíñïëàíòàöèè ýìáðèîíàëüíîé
ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû áåñïîðîäíûõ êðûñ êðûñàì
Âèñòàð. Êîìïåíñàöèÿ äèàáåòà íàñòóïàëà ó 81%
æèâîòíûõ, ïîëíàÿ — ó 15 (40,5%) îïåðèðîâàííûõ
æèâîòíûõ è ÷àñòè÷íàÿ — òàêæå ó 15 (40,5%).
Òðàíñïëàíòàöèÿ òêàíè â áîêîâûå æåëóäî÷êè
ìîçãà äàëà õîðîøèå ðåçóëüòàòû, ïðè÷åì ÷èñëî
êðûñ ñ ïîëíîé êîìïåíñàöèåé êîëè÷åñòâà ãëþêîçû
â êðîâè âòðîå âûøå, ÷åì ñ ÷àñòè÷íîé, òîãäà êàê â
äðóãèõ âàðèàíòàõ ýòè ïîêàçàòåëè áûëè ïðèìåðíî
ðàâíûìè.
Èñïîëüçîâàíèå êðîëèêîâ äëÿ àëëîòðàíñïëàíòàöèè ýìáðèîíàëüíîé ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû â ÏÊÃ
èìååò ñâîè íåäîñòàòêè è ïðåèìóùåñòâà. Êðîëèêè
òðåáóþò ïîâûøåííîãî ïî ñðàâíåíèþ ñ êðûñàìè
âíèìàíèÿ ïðè óõîäå çà íèìè, îñîáåííî â ïåðèîäå
èíäóêöèè äèàáåòà è ïëîõî ïåðåíîñÿò íàðêîç, çàòî
ÿâëÿþòñÿ èäåàëüíîé ìîäåëüþ äëÿ äèíàìè÷åñêîé
òîíîìåòðèè îïåðèðîâàííûõ ãëàç. Ýòîò òåñò â ñèëó
åãî íåïðèñïîñîáëåííîñòè äëÿ ìåëêèõ ãðûçóíîâ
íåëüçÿ ïðîâåñòè íà êðûñàõ. Ó âñåõ êðîëèêîâ ñ
ïîëíîé èëè ÷àñòè÷íîé êîìïåíñàöèåé
àëëîêñàíîâîãî äèàáåòà ïðîâåëè äèíàìè÷åñêóþ
òîíîìåòðèþ îïåðèðîâàííûõ ãëàç. Ïîâûøåíèå
âíóòðèãëàçíîãî äàâëåíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ òàêîâûì
â ïàðíîì ãëàçó áåç òðàíñïëàíòàòà è ñ âíóòðèãëàçíûì äàâëåíèåì ó êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ
îáíàðóæåíî íå áûëî. Ýòî ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì,
÷òî òðàíñïëàíòàò íå ìåøàåò íîðìàëüíîé
öèðêóëÿöèè ãëàçíîé æèäêîñòè è íå áëîêèðóåò
øëåììîâ êàíàë, ÷åðåç êîòîðûé îíà îòòåêàåò îò
ãëàçà.
 õîäå âûïîëíåíèÿ ðàáîòû èññëåäîâàíî áîëåå
15 ôèçèîëîãè÷åñêèõ è áèîõèìè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé
(ñîäåðæàíèå ãëþêîçû, èíñóëèíà, ñûâîðîòî÷íîé
ÄÍÊ, ïîòðåáëåíèå âîäû, ìàññà òåëà, êîíöåíòðàöèÿ
èíñóëèíà â òðàíñïëàíòàòàõ íà îòäàëåííûõ ñðîêàõ
ïîñëå ïåðåñàäêè è ò.ä). Âñå èññëåäîâàííûå
ïàðàìåòðû â ðåçóëüòàòå òðàíñïëàíòàöèè
ïîëíîñòüþ èëè ÷àñòè÷íî êîìïåíñèðîâàëèñü.
Êðîìå òîãî, àâòîðàìè íà÷àòà ðàáîòà ïî
àóòîòðàíñïëàíòàöèè òêàíè òèìóñà ïðîøåäøåé
äëèòåëüíóþ
êðèîêàíñåðâàöèþ.
Ïåðâûå
ïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû ïîçâîëÿþò íàäåÿòüñÿ,
÷òî ïîäîáíûì îáðàçîì ìîæíî âîññòàíàâëèâàòü
êëåòî÷íîñòü òèìóñà ïðè ñòàðåíèè.
Èñïîëüçîâàíèå ñâîéñòâà îòíîñèòåëüíîé
èììóíîëîãè÷åñêîé ïðèâèëåãèðîâàííîñòè ìîçãà è
ïåðåäíåé êàìåðû ãëàçà ïîçâîëèëî ðàçðàáîòàòü
íîâûå òðàíñïëàíòîëîãè÷åñêèå ìåòîäû êîìïåíñàöèè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ íåéðîíàëüíûõ
ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅ ÎÑÎÁÎÃÎ ÈÌÌÓÍÎËÎÃÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÑÒÀÒÓÑÀ ÖÍÑ ÄËß ÑÎÇÄÀÍÈß ÑÏÎÑÎÁÎÂ
ÊÎÌÏÅÍÑÀÖÈÈ ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÛÕ ÏÀÒÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ÑÎÑÒÎßÍÈÉ
è ýíäîêðèííûõ ïàòîëîãè÷åñêèõ ñîñòîÿíèé.
Ðàçðàáîòàí ñïîñîá âîññòàíîâëåíèÿ óðîâíÿ
íîðàäðåíàëèíà ìîçãà ïðè 6-îêñèäîôàìèíîâîì
ðàçðóøåíèè íîðàäðåíåðãè÷åñêîé ñèñòåìû è
ïîñëåäóþùåé òðàíñïëàíòàöèè â ìîçã
ýìáðèîíàëüíîé òêàíè locus coeruleus — îñíîâíîãî
èñòî÷íèêà âîñõîäÿùåé íîðàäðåíåðãè÷åñêîé
èííåðâàöèè. Ðàçðàáîòàíû ñïîñîáû àëëîòðàíñïëàíòàöèè èììóíîêîìïåòåíòíûõ òêàíåé â
ïåðåäíþþ êàìåðó ãëàçà êðûñ. Ïîêàçàíà
âîçìîæíîñòü íå òîëüêî ïðèîñòàíîâêè âîçðàñòíîé
èíâîëþöèè òèìóñà ó æèâîòíûõ ðàçíûõ âîçðàñòíûõ
ãðóïï, íî è óâåëè÷åíèÿ êîëè÷åñòâà òèìîöèòîâ â
âèëî÷êîâîé æåëåçå íà îòäàëåííûõ ñðîêàõ ïîñëå
òðàíñïëàíòàöèè.
Ðàçðàáîòàíû ñïîñîáû òðàíñïëàíòàöèè
ôåòàëüíîé ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû â ïåðåäíþþ
êàìåðó ãëàçà èëè áîêîâûå æåëóäî÷êè ìîçãà,
ïîçâîëÿþùèå äîáèòüñÿ äîëãîâðåìåííîé ïîëíîé
èëè ÷àñòè÷íîé êîìïåíñàöèè ýêñïåðèìåíòàëüíîãî
äèàáåòà ó æèâîòíûõ.
Ðàáîòà âûïîëíåíà ïðè ôèíàíñîâîé ïîääåðæêå
ïðîãðàììû Ïðåçèäèóìà ÐÀÍ «Ïîääåðæêà
èííîâàöèé» (2005, 2006 ã.), ãðàíòîâ Ìèíèñòåðñòâà
ïðîìûøëåííîñòè ïðàâèòåëüñòâà Ìîñêîâñêîé
îáëàñòè ¹21/06-05, ¹12/03-06.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Áóòåíêî Ã.Ì. // Ïðîáëåìû ñòàðåíèÿ è äîëãîëåòèÿ. —
1998. — Ò.7. — ¹ 3. — Ñ.100—110.
2. Êóëèêîâ À.Â., Íîâîñåëîâà Å.Ã., Êîðûñòîâ Þ.Í. è äð. //
Óñïåõè ãåðîíòîë. — 2005. — Âûï.17. — C.82—86.
3. Ïîëåæàåâ Ë.Â., Àëåêñàíäðîâà Ì.À. Òðàíñïëàíòàöèÿ
òêàíè ìîçãà â íîðìå è ïàòîëîãèè. — Ì., 1986.
4. Ñåìåíîâà Ò.Ï., Áðàãèí À.Ã., Ãðèùåíêî Í.È. è äð. //
Æóðí. âûñø. íåðâí. äåÿò. — 1988. — Ò. 38. — ¹ 5. —
Ñ. 872—881.
5. ßðèëèí À.À., Áåëÿêîâ È.Ì. // Èììóíîëîãèÿ. — 1996. —
¹1. — Ñ.4—10.
6. ßðûãèí Â.Í., Ìàëèíèíà È.Å., Áèáàåâà Ë.Â. // Áþëë.
ýêñïåð. áèîë. ìåä. — 1997. — Ò. 7. — Ñ. 106—108.
7. Bellgrau D., Gold D., Selawry H.P. et al. // Nature. —
1995. — Vol. 377. — P. 630—632.
8. Bjorklund L., Stremberg I. // Exp. Brain Res. — 1997. —
Vol. 113. — P. 13—23.
9. Choi C., Benveniste E.N. // Brain Res. Rev. — 2004. —
Vol. 44. — P. 65—81.
10. Griffit T.S, Brunner T., Fletcher S.M. et al. // Science. —
1995. — Vol. 270. — P.1189—1192.
11. Hart D.N.I., Fabre Y.W. // J. Exp. Med. — 1981. —
Vol.154. — P. 347—361.
12. Kulikov A.V., Korystov Yu.N., Arbuzova M.I. et al. //
Membr. Cell. Biol. — 1998. — Vol.11. — P. 737—742.
13. Qian H., Atherton S. // Curr. Eye Res. — 2003. —
Vol. 26. — P.195—203.
14. Shin D.H., Lee E., Kim H.J. et al. // J. Neuroimmunol. —
2002. — Vol. 123. — P. 50—57.
Ïîñòóïèëà 24.02.07.
○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○
123